时间分辨荧光免疫分析用标记试剂——N~1-(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺四乙酸钐钠的研制

时间分辨荧光免疫分析是一种利用镧系元素(多用铕、钐和铽离子)作标记物的免疫分析。镧系元素螯合物在激发光作用下,产生发射光,其激发光与发射光之间有很宽的Stokes位移,发射光谱峰很窄,具有不同的最大发射波长,如铽(Tb3 )、铕(Eu3 )和钐(Sm3 )分别为544、613和643nm;其?..     

时间分辨荧光免疫分析用标记试剂——N1-(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺四乙酸钐钠的研制△

时间分辨荧光免疫分析是一种利用镧系元素(多用铕、钐和铽离子)作标记物的免疫分析.镧系元素螯合物在激发光作用下,产生发射光,其激发光与发射光之间有很宽的Stokes位移,发射光谱峰很窄,具有不同的最大发射波长,如铽(Tb3+)、铕(Eu3+)和钐(Sm3+)分别为544、613和643　nm;其荧光寿命长,最长可达1　ms,比血浆等的本底荧光寿命长几个数量级.将Eu3+、Sm2-和Tb3+分别螯合到多功能螯合剂,如N1(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺-N1,N2,N3,N3-四乙酸(简称异硫氰基苄基DTTA)上,可得到螯合有不同镧系离子的螯合剂.     

人生长激素的时间分辨荧光免疫分析及其诊断试剂研制

 [目的]利用时间分辨荧光免疫分析（time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA）技术,建立人生长激素（human growth hormone,hGH）的快速检测方法并研制其诊断试剂.[方法]采用双抗体夹心法（一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单抗用于Eu^3＋标记）建立hGH-TRFIA.[结果]hGH-TRFIA的线性测量范围为0.1×10^-3 100×10^-3U/L,灵敏度为0.036×10^-3U/L,批内和批间的变异系数分别为5.3%～8.6%和7.6%～12.8%.与促甲状腺激素（TSH）、卵泡生成素（FSH）、人胎盘催乳素（LH）和黄体生成素（HPL）均无交叉反应.将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数（r）为0.957.[结论]hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法,用于临床GH水平的测定.     

时间分辨荧光免疫分析的研究进展及应用

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroinununoassay，TRFM)是一种新型的体外超微量分析技术。它具有高精度、自动化、大样本快速测定(1～2h就能出结果)等技术优点。其在灵敏度和准确性方面明显高于ELISA，特异性又明显高于聚合酶链反应(PCR)。因而，其应用已不再局限于临床诊断，已渗透入生物学研究的各个领域。本文就该技术的研究进展及应用做一简要综述。     

时间分辨荧光免疫分析技术研究

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoassay，TRFIA)是一种全新的国际上公认的最有发展前途的非同位素免疫分析技术。镧系元素(Eu、Tb、Sm、Dy等)螯合物有突出的固有特点：激发最大波长到发射最大波长之间的Stokes位移很大，前者对后者无干扰。激发光谱段较宽，可增加激发能；发射光谱带窄，50％发射谱带宽度不足     

时间分辨荧光免疫分析技术在寄生虫病诊断中的应用

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluomimmunoassay,TRFIA)是一种新型的体外超微量分析技术,被公认为是目前灵敏度最高的分析方法之一,并以其独特的优势近些年迅速发展,已延伸至生物医学、临床医学研究的各个领域.本文就该技术的研究进展及在某些寄生虫病检测诊断中的相关应用作一简要综述.     

时间分辨荧光免疫分析技术及临床应用

标记免疫分析技术的出现使临床生化分析由常量分析向微量分析转变。20世纪80年代出现的时间分辨荧光免疫分析技术,以其独特的优势成为最有发展前途的非放射免疫标记技术。本文主要介绍时间分辨荧光免疫技术基本原理、基础试剂、基本技术以及近年来临床应用。     

HBV-M时间分辨荧光免疫分析方法学评价

目的探讨TRFIA检测HBV-M方法的相关性、精密度、准确性和重复性。方法不同浓度的HBV-M标准血清及已知高浓度倍比稀释后的5项标志物混合血清标本用TRFIA法分别作定量检测。结果HBsAg、HBsAb、HBeAg3项测得的相对荧光强度与含量之间相关关系良好rHBsAg=0.9999,rHBsAb=0.9924,rHBeAg=0.9999,P<0.01,均有非常显著相关性;而HBeAb和HBcAb则相对较差,P>0.05;已知浓度5项标志物混合血清标本理论值和实测值的相关关系良好,r值均达到0.9980以上,P<0.01;结果准确度较好。结论HBV-MTRFIA精密度、重复性良好并具有较高的可靠性。     

时间分辨荧光免疫分析法定量检测HBsAg的临床意义

目的 :探讨时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)定量检测乙肝表面抗原 (HBsAg)的临床意义。方法 :对 3 5 8份乙肝病毒感染者血清标本采用TRFIA法定量检测HBsAg的含量。结果 :急性乙肝组血清HBsAg的含量为 2 0 . 8± 18 . 5 μg/ml ,慢性乙肝组、肝硬化组、肝癌组HBsAg含量分别为 5 . 3± 8 . 7μg/ml ,4 . 5± 7 . 2 μg/ml ,4 .1± 6 . 3 μg/ml,与急性乙肝组相比较差别显著 (P <0 0 1)。HBeAg(+ )组HBsAg含量为 2 6 .8± 18 . 2 μg/ml ,抗HBe(+ )组HBsAg含量为 3 . 6± 4 . 1μg/ml ,两组比较存在显著差异 (P <0 . 0 1)。结论 :采用TRFIA法定量检测HBsAg能较直观地反映乙肝病毒感染者体内乙肝病毒复制的活跃程度 ,结合乙肝其它血清学指标检查 ,对乙肝的病程监测及药物疗效判断具有一定帮助。     

CA125时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 研制CA125时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立CA125 TRFIA试剂盒。对试剂盒各项指标进行评价。结果 该试剂盒的工作范围为10～600U／ml,分析灵敏度为1．07U／ml，批内、批间的精密度分别为4．5％～8．1％，6．9％～11．5％。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年，37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0～37U／ml。123份血清标本用本试剂盒与国外其他方法的同类试剂盒同时检测，其相关系数为0．939。结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品试剂盒。     

梅毒螺旋体抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂的研制

目的利用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)建立人血清中梅毒螺旋体(TP)抗体的检测试剂,适用于体检、TP感染及相关症状的临床检测。方法采用双抗原夹心法建立梅毒螺旋体抗体TRFIA检测试剂,对试剂的各项指标进行评价。结果本试剂国家参考品检测结果,阴性、阳性参考品符合率均为100.00%,最低检出限L1、L2检为阳性,L4检为阴性,精密性研究批内批间变异系数均符合试剂检定要求。本试剂与人类免疫缺陷病毒阳性、乙型肝炎病毒阳性、丙型肝炎病毒阳性、类风湿因子阳性、抗核抗体阳性等血样均无交叉反应。用本试剂与进口的酶免法试剂同时检测1 070份临床血样,结果显示对照试剂检出阳性标本484例,本试剂检出阳性标本486例,阳性符合率为99.59%,总符合率达99.43%。结论试剂各项指标均达到临床检测要求,试剂准确快速,安全可靠,具有较高的临床应用价值。     

时间分辨荧光免疫分析技术检测梅毒抗体中的应用

目的：探究梅毒螺旋体感染者在血清中的免疫学标志物,实验室应用时间分辨荧光免疫法测定梅毒螺旋体特异性抗体S/CO值与TPPA颗粒凝集法,及梅毒非特异性抗体RPR法结果的灵敏度、吻合程度、特异性。以掌握梅毒检测方法适用性和临床诊断意义。方法：门诊及住院26例就诊患者分别用TRFIA、TPPA、RPR法同时测定含量及滴度,比对检测结果的不同。结果：TRFIA测定大于参考值11例,阳性率12.7%;TPPA阳性11例,阳性率12.5%;RPR阳性9例,阳性率9.5%。结论：时间分辨荧光法与TPPA法联合应用对输血筛查;临床诊断及预后疗效利于血液质量的保证,质量成本也更为经济。     

超敏C-反应蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的:血清超敏C-反应蛋白(CRP)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法的建立. 方法: 采用双抗体夹心法检测血清CRP水平(1株抗CRP的单抗用于包被微孔板,另1株抗CRP的单抗用于Eu3 标记). 结果: TRFIA的线性测量范围为1～1000 mg/L,灵敏度为0.06 mg/L,批内和批间精密度分别为4.0%～7.2%,6.7%～10.8%. 与人IgG和白蛋白未见明显的交叉反应. 109份血清标本用本方法与国外试剂盒同时检测,其相关系数为0.916. 结论: CRP-TRFIA各项指标均达到临床检测要求,可替代国外产品试剂盒,用于临床血清CRP的测定.     

时间分辨荧光免疫分析测定六盘水地区正常人甲状腺相关激素

用放射免疫分析法（RIA）测定甲状腺相关激素的应用已经很广泛，随着生物标记技术的不断进步，免疫分析技术逐步由放射免疫分析技术向非放射免疫技术转变。时间分辨荧光免疫分析技术正是这类非放射免疫技术的一个典型代表，在部份地区正在取代RIA。本院现已采用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）测定甲状腺相关激素，为建立其正常参考值，便于临床诊断。     

实时FQ-PCR与时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎分析

目的：探讨实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）定量检测乙型肝炎病毒（HBV—DNA）与时间分辨荧光免疫分析法对乙型肝炎免疫标志物（HBV—M）检测对乙型肝炎实验室诊断的敏感性。方法：采用两种方法分别对800例本院传染科住院及门诊可疑病人血清标本进行检测。结果：用FQ—PCR检测800例。HBV—DNA阳性例数602,阳性率87．81％,用时间分辨荧光免疫分析法检测800例,HBV—M的阳性例数477,阳性率59．63％,通过χ^2检检,χ^2=2．98,P〈0．05。结论：在乙型肝炎的实验室诊断中,FQ—PCR检测乙型肝炎病毒HBV—DNA更优于时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎免疫标志物HBV—M。