胎儿肝外组织乙型肝炎病毒感染

用敏感的分子杂交方法从2例HBV宫内感染胎儿的肝组织及脾脏、胰腺、肾脏和胎盘等多种肝外组织检测到HBV DHA,证实胚胎期亦存在肝外组织HBV感染。     

死胎脾脏组织中HBcAg检测的临床和病理研究

目的：观察乙型肝炎病毒（HBV）通过产妇传播在胎儿脾脏组织中表达的情况。方法：采集40例乙型肝炎产妇产下的死胎，常规尸检，取脾脏组织，SP法检测HBcAg；回顾分析产妇产前静脉血HBV的检测结果：取百分率行u检验。结果：HBcAg阳性颗粒在死胎脾脏组织的白髓、边缘区、红髓中的淋巴细胞和巨噬细胞质、血窦、血管腔内呈点、灶状分布，脾脏淋巴细胞和巨噬细胞核不着色。HBV呈大三阳的产妇较HBV呈单项阳性、小三阳的产妇分娩的死胎脾脏组织中HBcAg阳性率明显升高，但彼此比较无显著性差异（P＞0．05）。结论：死胎脾脏组织中HBcAg阳性率与产妇HBV静脉中HBV标志无关。脾脏组织中可能存在HBV复制。     

死胎多脏器组织中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸检测分析

目的 :观察死胎多脏器组织中 HBV DNA表达情况 ,探讨通过产妇传播到死胎多脏器组织中的 HBV是否存在复制。方法 :采集 40例乙型肝炎产妇产下的死胎 ,常规尸检 ,取大脑、胸腺、心脏、肺、肝、脾、肾脏、脐带、胎盘组织 ,采用原位分子杂交法 ,检测其中的HBV DNA;回访婴母产前血清血 HBV的检测结果。结果 :死胎多脏器组织中 HBV DNA阳性率在 (胸腺、心脏、肺、脾、肾脏、脐带 )、(肝、胎盘 )、大脑三组间有统计学意义。在产妇HBV呈无复制、低复制、高复制状态下 ,心、肺、肾组织中 HBV DNA阳性率有统计学意义 ;大脑、胸腺、肝、脾、脐带、胎盘组织中 HBV DNA阳性率无统计学意义。结论 :HBV DNA对胎儿组织的嗜好与胎儿脏器种类有关 ;孕妇 HBV血清中 HBV标志与死胎大脑、胸腺、肝、脾、脐带、胎盘中 HBV DNA阳性率无关 ,与死胎心、肺、肾组织中 HBV DNA阳性率有关 ;死胎多脏器组织中存在 HBV复制     

妊娠中晚期重型肝炎对孕妇及胎儿预后影响的研究

目的研究妊娠中晚期重型病毒性肝炎（以下简称重肝）对孕妇及胎儿预后的影响。方法观察引起妊娠中晚期重肝的感染病原体，比较各型各期患者的病死率、存活组和死亡组之间各项指标、并发症发生的差异以及胎儿病死率与HBV感染的关系。结果HBV相关、HEV相关、重叠感染率分别为66．67％、25．93％、29．63％。总病死率为68．52％，急性、亚急性及慢性妊娠中晚期重肝在病死率方面比较差异无显著性（P〉0．05）；中期、晚期妊娠重肝患者病死率比较差异无显著性（P〉0．05）。存活组和死亡组在凝血酶原时间（PT）、血清总胆固醇（TC）及肝脏体积缩小等指标上差异有显著性（p〈0.05）。病死率随着并发症增加而升高。胎儿总病死率48．15％，其中HBV感染相关的病死率占55156％。结论引起妊娠中晚期重肝的病原体以HBV、HEV为主；该组病例的孕产妇及胎儿病死率高；其孕妇转归与PT、TC、肝脏体积大小及并发症相关；胎儿预后可能与HBV感染有关。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理及免疫组化水平的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理及免疫组化水平的关系。方法检测76例慢性乙型肝患者血清及肝组织外周血HBsAg，如BeAg和HBV DNA水平，常规病理和肝组织内的HBsAg，HBcAg。结果外周血中HBeAg阳性的患者中有91．49％HBV DNA阳性，而在如BeAg阴性的患者中，有58．62％的患者HBV DNA阳性，只有慢性乙型肝炎轻度患者的血清HBV DNA水平与其他各组差异有显著性（P〈0．05），而其余各组之间HBV DNA的复制水平均无明显差异，中度以上的血清HBV DNA多呈高水平分布。所有样本肝组织的HBsAg均为阳性，从肝组织不同HBsAg表达强度下，HBcAg表达的趋势来看，HBcAg有随着HBV DNA量的增加而表达增强的趋势。结论患者血清HBV DNA水平的变化可以反映HBV的复制水平而不能反应肝脏损伤程度。同时肝组织内的HBsAg检测更适合于低水平HBV感染的患者。     

HBV-DNA的含量与宫内感染的关联性

目的：探讨孕妇血清中HBV—DNA含量与胎儿宫内感染及造成宫内感染的相关因素．方法：用ELISA方法筛选HBsAg阳性孕妇228例,并用定量PCR技术检测HBsAg阳性孕妇血清以及脐血中HBV—DNA．新生儿根据有无HBV感染分为胎儿感染组及非感染组（对照组）,调查宫内感染的相关因素,结果：HBsAg,HBeAg、抗HBc阳性孕妇的新生儿脐血HBV—DNA捡出率21％（14／68）;HBsAg．抗HBe,抗HBc阳性者为1．7％（2／117）;HBsAg和HBeAg双阳性者为20％（3／15）;HBsAg和抗HBc阳性者为11％（2／19）;HBsAg单一抗原阳性者脐血中未捡出HBV—DNA．胎儿总感染率为9,2％（21／228）．胎儿宫内感染率随孕妇血清中HBV—DNA含量增加而升高,宫内感染的危险性越大．胎儿感染组与非感染组在多种临床相关因素中先兆早产孕妇胎儿感染者多于非感染组（P〈0．05）．结论：孕妇不同的感染状态影响宫内HBV感染率,HBeAg与HBV—DNA高滴度是胎儿宫内感染的高危因素．孕妇出现先兆早产使胎儿的感染率增加．     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠肝脏TNFRⅠ与TNFRⅡ表达的影响

目的：观察解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠肝脏TNFRⅠ与TNFRⅡ表达的影响,探讨其拮抗肝衰竭的作用机制。方法：采用D-氨基半乳糖联合内毒素腹腔注射法构建小鼠急性肝衰竭动物模型,并分别予解毒化瘀颗粒、乳果糖、安宫牛黄丸干预治疗,HE染色观察肝脏病理改变,TUNEL法检查肝细胞凋亡率,免疫组化检测小鼠肝脏TNFRⅠ与TNFRII的表达。结果：解毒化瘀颗粒干预组肝组织凋亡、坏死程度轻于模型对照组,免疫组化检测的肝脏TNFRⅠ表达量少于模型对照组（P〈0．05）,TNFRII表达多于模型对照组（P〈0．05）。结论：解毒化瘀颗粒可通过下调肝组织TNFRⅠ的表达、上调TNFRⅡ的表达途径抑制肝细胞凋亡,延缓肝脏坏死的进展。     

HBeAg阳性母亲流产胎儿肝及肝外脏器HBV标志的检测

应用免疫金银染色法和原位核酸杂交技术同步检测9例HBsAg和HBeAg均阳性母亲流产胎儿的肝、胸腺、脾、胰中的HBsAg、HBcAg和HBV-DNA.结果,在肝(5例)、胸腺(1例)、脾(3例)、胰(2例)中测出HBsAg及HBV-DNA.其中2例胎肝细胞并呈HBcAg阳性,但在胸腺、脾、胰中未检出HBcAg.HBsAg分布主要为胞浆型,也见有膜型;HBV-DNA及HBcAg主要分布于胞浆内,偶见于核内.此种分布特点,提示HBV处于复制相.在肝脏中,HBsAg、HBcAg及HBV-DNA除见于胞浆外,还见于造血灶中造血细胞内.上述结果表明,HBV已感染胎儿肝脏、胸腺、脾脏、胰腺以及肝内造血细胞.     

软肝宁煎剂对肝纤维化大鼠防治作用的实验研究

目的观察软肝宁煎剂防治肝纤维化的作用并探讨其作用机制。方法采用CCl4复合因素诱导Wistar大鼠建立肝纤维化模型,设正常对照组、肝纤维化模型组、软肝宁煎剂预防组和软肝宁煎剂治疗组。实验结束后分别测定各组大鼠的肝脏指数和肝功能：ALT、AST,肝纤维化指标,透明质酸（HA）,并作肝组织病理学检测及肝组织中转化生长因子（TGF—β1）免疫组化染色。结果1．软肝宁煎剂预防组、治疗组与模型组肝纤维化大鼠组织学比较有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）;2．在肝脏指数方面：预防组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）,而治疗组无明显差异;3．软肝宁煎剂能明显降低大鼠血清中ALT、AST和大鼠肝脏组织中HA的含量,与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）;4．软肝宁煎剂预防组和治疗组与模型组比较,明显抑制了TGF—β1的表达。结论软肝宁煎剂可通过保护肝细胞,减轻肝细胞损伤,促进ECM的降解,减少细胞因子TGF—β1的产生及释放来防治大鼠肝纤维化的发生和发展。     

HBeAg阴性和阳性慢性乙型肝炎病人肝脏组织学变化

目的比较HBeAg阴性和阳性慢性乙型肝炎病人肝脏组织学变化情况。方法对266例行肝活检的慢性乙型肝炎病人行免疫组化检测肝组织HBsAg、HBcAg的变化;采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清前S1蛋白、HBV—DNA、HBsAg等的变化。按肝组织炎症、纤维化程度分组,比较HBeAg阳性和阴性的分布,并比较肝组织中HBsAg、HBcAg在HBeAg阳性和阴性组的阳性率。结果HBeAg阳性和阴性组肝组织炎症程度分布比较差异有显著性（Uc=2．716,P〈0．01）。HBeAg阳性和阴性组肝组织纤维化程度分布比较差异无显著性（Uc=1．493,P〉0．05）。HBeAg阳性组血清前S。蛋白、HBV—DNA及肝组织中的HBsAg、HBcAg的阳性率明显高于HBeAg阴性组,差异有极显著性（χ^2=8．47～41．29,P〈0．01）。结论HBeAg阳性组肝组织炎症程度高于阴性组。HBeAg阳性组血清前s。蛋白、HBV—DNA及肝组织中的HBsAg、HBcAg等病毒复制指标的阳性率明显高于HBeAg阴性组。     

HBsAg、HBcAg的免疫荧光检测在HBV—GN诊断中的应用

目的观察乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV—GN）患者肾脏组织中HBsAg、HBcAg的表达情况。方法以50例HBV—GN患者为研究对象,另随机选择20例非乙型肝炎病毒相关性肾炎（NHBV—GN）患者作为对照组,用间接免疫荧光法检测肾穿刺活检组织HBsAg、HBcAg的表达。结果HBV—GN患者肾组织中可检测HBsAg、HBcAg阳性颗粒,阳性率分别70％（35／50）,24％（12／50）;20例（NHBV—GN）患者肾脏组织HBsAg、HBcAg均未检出。与HBV—GN差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HBsA趴HBcAg免疫荧光标记是诊断HBV—GN的重要指标,HBV在肾组织内存在感染及复制,其在乙型肝炎病毒相关性肾炎的发病机制中具有重要作用。     

胰岛素样生长因子Ⅱ及其受体在肝组织中的表达意义

目的：研究胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF－Ⅱ）及其受体（IGFR）在不同肝组织中的表达及与肝癌病理学分级及乙肝病毒感染的关系。方法：采用免疫组织化学方法，检测10正常肝标本，28例肝血管瘤标本、13例肝硬化标本和42例原发性肝癌中的IGF－Ⅱ及IGFR的表达水平，分析其阳性率及与乙型肝炎病毒（HBV）感染和Edmondson分级的关系。结论：正常肝、肝硬化、肝血管瘤和肝癌中IGF－Ⅱ阳性率分别为10％，76．9％，46．4％，76．2％，IGFR阳性率分别为20％，92．3％，64．2％，61．9％，与正常肝组织相比，各阳性率有显著性差异（P＜0．05），对于肝癌而言，IGF－Ⅱ及IGFR的表达在HBV阳性与阴性之间有显著差异（P＜0．05）；在Edmondson分级Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ-Ⅳ之间有显著差异（P＜0．05）。结论：IGF－Ⅱ和IGFR的表达可能参与了肝硬化及肝脏肿瘤的发生。在肝癌中，其表达与HBV感染及肝癌Edmondson分级亦有一定关系。     

轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中HBcAg及TGF-β1的表达及临床意义

目的了解转化生长因子-β1（TGF-β1）和HBcAg在轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达情况。方法采用免疫组化法（S-P）检测10例对照肝组织、90例轻度慢性乙型肝炎患者肝组织TGF-β1、HBcAg的表达。结果90例轻度慢性乙型肝炎患者肝组织TGF-β1随肝脏纤维化加重而表达增加,其差异具有显著性（P〈0．05）,正常肝组织组TGF-β1无表达;轻度慢性乙型肝炎患者肝组织HBcAg阳性率为81．11％,HBcAg是更可靠的HBV复制指标。结论TGF-β1、HBcAg的表达在轻度慢性乙型肝炎患者肝组织肝纤维化的形成和发展中起重要作用。TGF-β1、HBcAg的表达与早期临床诊断及治疗和判断预后密切相关。     

慢性乙肝患者肝纤维化乙肝病毒复制水平的检测

目的探讨慢性乙肝患者肝组织纤维化与乙型肝炎病毒复制水平之间的关系。方法按HBV—DNA检测,分为阴性组94例、阳性组86例,采用核酸扩增荧光定量（FQ—PCR）检测HBV—DNA,放射免疫分析（RIA）检测肝纤维化标志物肝胆酸（CG）、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原肽（PCⅢ）、四型胶原（Ⅳ—C）和层黏连蛋白（LN）。结果慢性乙肝患者HBV—DNA复制水平增高,血清肝纤维化标志物含量亦增高（P〈0．05,P〈0．01）。结论慢性乙肝患者乙型肝炎病毒复制水平增高可促使肝组织纤维化,抗病毒治疗、清除和控制病毒复制对阻止肝组织纤维化有益。     

LC-MS/MS研究紫杉醇自组装前体脂质体在大鼠体内的组织分布及靶向性

目的：对自制紫杉醇自组装前体脂质体（PSAP）在大鼠体内的组织分布进行研究，并与市售紫杉醇注射液（Taxol）的组织分布特征进行了比较。方法：SD大鼠以5mg／kg的剂量尾静脉注射PSAP及Taxol，建立LC—MS／MS方法，于给药后不同时间测定组织中的紫杉醇药物浓度，对两种制剂的大鼠体内组织分布特征和靶向性进行评价。结果：PSAP与Taxol组相比，肝、脾、卵巢、子宫中的药物分布明显高于Taxol组（P〈0．05），在以上各组织中的相对摄取率（re）大于1；肺、肾中的分布与Taxol组无明显差异（P〉0．05），而在心脏中的分布明显低于Taxol组（P〈0．05）。结论：紫杉醇自组装前体脂质体与市售注射液相比，大鼠体内配置发生明显变化，特别是提高紫杉醇在肝、脾、卵巢、子宫的药物分布同时降低心脏的分布，对于临床更好地治疗肝脾部、卵巢、子宫癌症和降低心脏毒性具有现实意义。     

Wnt／β-catenin信号转导通路与卵巢癌的相关研究

目的研究Wnt／β-catenin信号通路的枢纽分子β-连环素（β-catenin）及其下游靶基因c—Myc在卵巢癌中的表达。方法应用免疫组化S-P法检测60例卵巢癌、24例卵巢上皮良性肿瘤以及26例正常卵巢上皮组织中β-catenin和c-Myc的表达情况。结果β-catenin在卵巢癌组织的异位表达与正常卵巢组织相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;β-catenin与卵巢癌的组织学分型以及分化程度具有相关性（P〈0．05）;c-Myc在卵巢上皮癌中表达分别与卵巢上皮良性肿瘤和正常卵巢上皮组织组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;c—Myc与卵巢癌分化程度相关（P〈0．05）;在卵巢癌组织中,β-catenin的异位表达与c—Myc的表达具有相关性（P〈0．05）。结论Wntβ-catenin信号通路可能是卵巢癌的发生途径。     

神经垂体多肽激素在人胎儿胸腺组织的表达

目的：探讨神经垂体激素在人胎儿胸腺组织的表达。方法：用放射测定药盒测定人胎儿胸腺组织匀浆提取物中精氨酸升压素（ＡＶＰ）催产素（ＯＴ）的含量。同时用免疫组化方法检测胎儿胸腺组织冷冻切片和石蜡切片中的ＡＶＰ和ＯＴ的表达。结果：人胎儿胸腺组织提取液中ＡＶＰ（１２例）和ＯＴ（１３例）的含量分别为４７．６４±４５．１４和８３．５５±５５．８９。     

HBsAg阳性母亲的胎儿肝内HBVDNA整合研究

自1985年以来,国内先后有多篇文章报告了HBV官内感染的研究,即在胎儿肝脏提取物和心脏血清中检出HBV标志,为HBV宫内感染提供了理论依据。本文以39例流产胎儿的肝脏为研究材料,提取肝组织DNA,经EcoRI,BamHI限制酶消化,Southern转移DNA后与HBV各类型片断探针杂交,研究HBsAg阳性母亲胎儿肝脏中HBVDNA的存在状态。     

蝉拟青霉减轻环磷酰胺所致免疫抑制效应的实验研究

目的：探讨蝉拟青霉对正常及免疫抑制大鼠的免疫调节作用。方法：各组大鼠连续皮下注射相应药物26d后，测定脾脏和胸腺的重量及其系数；用生化方法测定血清，肝，脾，肾胸腺组织细胞中酸性磷酸酶（ACP）和乳酸脱氢酶（LDH）的活力；在电子显微镜下观察脾脏巨噬细胞（Mφ）的形态结构。结果：蝉拟青霉使正常大鼠脾重（脾系数）显增加（P＜0．001或P＜0．01），抑制环磷酰胺所致免疫抑制大鼠的免疫器官（脾脏，胸腺）萎缩（P＜0．05或P＜0．01）；使正常大鼠肾组织中ACP活力，胸腺组织内LDH活力明显升高（P＜0．05），并能阻遏环磷胺的致免疫抑制大鼠肝，脾，肾，胸腺细胞内ACP，LDH活力的降低（P＜0．05）或P＜0．01或P＜0．001）；电镜观察发现，单以便肝霉使正常大鼠脾Mφ体积增大，胞质内溶酶体增多，细胞表面可见粗而短的突起。结论：蝉拟青霉对机体具有免疫激活活性，并能拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用。     

阿片样肽在人胎儿胸腺组织的表达

目的：探讨阿片样肽在人胎儿胸腺及其上皮细胞的表达。方法：用放射免疫测定药盒测定人胎儿胸腺组织匀浆提取物中（β－ＥＰ）和亮氨酸脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）,同时用免疫组化方法检测胎儿胸腺组织冷冻切片和石虹切片中的β－ＥＰ和Ｌ－ＥＮＫ的表达。结果：人胎儿胸腺组织提取液中β－ＥＰ（１２例）和Ｌ－ＥＮＫ（１１例）的含量（ｐｇ／１００湿重组织）分别为５５０．８９±１９５．１１和１０２８．４４±６３２．７８。。比较胎