早期原核分裂对于胚胎发育潜能预测的研究

目的通过比较移植早期原核与晚期原核分裂胚胎的临床妊娠率和种植率,探讨早期原核分裂与胚胎发育潜能之间的关系。方法回顾性分析05年11月至07年1月在生殖医学中心行体外受精胚胎移植的妇女240例,通过移植不同时期的原核分裂胚胎将其分为早期原核分裂组（143例）,晚期原核分裂组（47例）和混合组（50例）,比较三组的妊娠率和种植率。结果早期原核分裂组的受精率和早卵裂率分别为80．39％和54．16％,而晚期原核分裂组的受精率和早卵裂率分别为71．01％和8．99％,差异具有统计学意义（P〈0．001）。早裂组的妊娠率（47．55％）高于晚裂组的妊娠率（38．30％）,差异具有统计学意义（P〈0．001）。种植率前者为29．72％,高于后者（22．99％）,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论早期原核分裂有更好的妊娠结局,能够预测胚胎发育潜能,评价早期原核分裂是筛选高质量胚胎的一种简单有效、非侵袭性方法。     

双核细胞的形成及其分裂系谱

采用细胞培养法，连续观察小鼠心肌细胞和人胚肝细胞的分裂系谱，借以了解双核细胞的形成及其分裂能力。在新换培养液后的５天内，对特定的２个正常细胞，２个双核细胞作跟踪观察，共经历４～５代细胞分裂。根据观察及绘成的分裂系谱分析，细胞分裂包括有丝分裂和无丝核分裂两种形式，双核细胞可来自有丝分裂后的细胞融合和无丝核分裂。双核细胞保持有丝分裂能力，可形成双核细胞、多核细胞或正常细胞。双核细胞含有高活性的琥珀酸脱氢酶和碱性磷酸酶，ＰＡＳ阳性物质丰富。     

卵裂期无可移植胚胎患者行囊胚培养后早期囊胚的最佳移植策略

分析卵裂期无可移植胚胎的患者,在第5天新鲜移植Gardner I期,Ⅱ期囊胚的临床结局,探讨最佳的移植策略。     

~(125)碘标记三链形成寡核苷酸对肝癌细胞中病毒复制和细胞生长的抑制作用

目的 探讨~(125)碘(I)标记三链形成寡核苷酸(TFO)与乙型肝炎病毒(HBV)DNA的特异性结合能力及其对肝癌细胞HepG 2.2.15中病毒复制及细胞生长的抑制作用.方法 合成能与HBV前S基因特异结合的TFO,并以~(125)I标记.将HepG 2.2.15细胞分别与~(125)I-TFO实验组(125I-TFO组)、等量TFO对照组(TFO组)、相同放射性活度的钠~(125)碘(Na~(125)I)组和空白对照组共同培养,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞培养液中HBV DNA拷贝量变化,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染后各组细胞的存活率.结果 RT-PCR显示转染48 h后,4组间病毒拷贝数量的差异有统计学意义(P<0.01),~(125)I-TFO组对病毒复制的抑制作用显著强于空白对照组(P<0.01)、~(125)I对照组(P<0.01)和TFO组(P<0.01);TFO组的抑制病毒复制作用显著强于空白对照组(P(0.05).转染24、48、72 h,~(125)I-TFO组对HepG 2.2.15细胞的生长抑制作用显著高于其他3组(P值均<0.01),并随时间的增加~(125)I-TFO对细胞生长的抑制作用呈线性上升趋势.结论 ~(125)I-TF0可有效地抑制肝癌细胞中HBV的复制及肝癌细胞的生长,为今后制备抗HBV、抗HBV相关肝细胞癌的放射性基因治疗药物奠定了基础.     

高糖对小鼠囊胚细胞凋亡调控蛋白Fas表达的影响

目的:探讨高浓度葡萄糖对小鼠囊胚发育及凋亡调控蛋白Fas表达的影响。方法:通过促超排卵,获取妊娠3.5 d小鼠囊胚,随机分成空白对照组、低糖组和高糖组,分别培养在含0、7.5、28.0 mmol/L葡萄糖的M199培养基中,24 h后吸出囊胚。SP法检测囊胚组织Fas蛋白的表达水平。结果:空白组中囊胚细胞胞浆可见少量浅棕黄色颗粒,低糖组无着色,高糖组棕黄色颗粒较多;Fas表达分别呈弱阳性、阴性、强阳性;高糖组Fas表达水平较空白组和低糖组均高(P<0.01)。结论:高浓度葡萄糖可诱导凋亡蛋白Fas表达,致囊胚细胞数目减少而影响囊胚正常发育和着床。     

冠心病早期预测

冠心病又称冠状动脉粥样硬化性心脏病,是指冠状动脉粥样硬化导致管腔狭窄或堵塞从而引起心肌缺血或梗死的心脏病,因此又称为冠状动脉性心脏病或缺血性心脏病。冠心病在临床上分为慢性稳定性冠心病和急性冠状动脉综合征（ACS）。慢性稳定性冠心病的病理生理机制主要是由于冠状动脉发生严重粥样硬化性狭窄导致心肌缺血,临床表现为一定运动量下诱发心绞痛;而ACS则是由于冠状动脉发生急性狭窄或闭塞所致的临床综合征,包括心源性猝死、急性心肌梗死、不稳定性心绞痛,其中急性心肌梗死又分为ST段抬高型急性心肌梗死和非ST段抬高型急性心肌梗死2类。ACS的病理生理机制更复杂,主要是在有或无严重冠状动脉狭窄或梗阻病变的基础上,由于斑块破裂继发血栓形成堵塞血管所致。临床上部分患者冠状动脉并无严重狭窄,发病前亦无明显症状,但也可以突发ACS,例如近一半急性心肌梗死患者既往无任何冠心病史而突发。     

复苏周期单囊胚移植的影响因素分析

目的研究玻璃化复苏囊胚移植后的妊娠结局与冷冻前囊胚质量、发育速度的相关性,探讨单囊胚移植的可能性。方法回顾分析105例复苏周期单囊胚移植患者的临床资料,观察发育速度、囊胚质量、内细胞团(ICM)/滋养外胚层(TE)评分对妊娠结局的影响。结果第5、6天囊胚间复苏后存活率、移植后妊娠率的差异均无统计学意义(98.0%,54.5%vs 97.0%,52.5%)。优质囊胚移植后妊娠率(44/70,62.9%)显著高于非优质囊胚(12/35,34.3%)。ICM评分为A、B级的囊胚移植后妊娠率差异无统计学意义(70.6%vs 58.0%),但均显著高于C级胚胎(21.1%)。TE评分越低,妊娠率有下降趋势但差异无统计学意义。结论复苏周期单囊胚移植妊娠率与囊胚质量有关,与囊胚发育速度无关。ICM评分而非TE评分与妊娠结果显著相关。复苏周期单个优质囊胚移植后妊娠率高,提示单囊胚移植可行。     

细胞的"逆分裂"现象

在人体组织细胞的体外培养中,采用自行设计组建的计算机显微缩时电影系统(computer Time-lapse Microcinematography),反复记录到细胞分裂后的再融合现象.这种细胞由分裂随即又发生融合的过程,可能是一种特殊的"自然融合"(natural fusion),或是细胞的一种"逆分裂"(contra-division)现象.     

受精第3天胚胎卵裂速度和囊胚发育潜能的关系

目的 探讨受精第3天胚胎卵裂速度是否可以预测囊胚发育潜能及辅助生殖临床结局.方法 回顾性分析2016年1月1日至2018年12月31日于我中心行体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗的150例不孕症患者的临床资料及所有366枚新鲜囊胚移植的胚胎数据.根据受精第3天卵裂球的细胞数目将胚胎分为...     

早期胚胎死亡中FS的变化及与HCG的相关研究

目的:探讨早期胚胎死亡中卵泡休止素(FS)的变化及与HCG有无相关性。方法:应用酶联免疫法对早期胚胎兄亡孕妇、正常早期妊娠孕妇血清FS进行测定,用放免法对上述两组妊娠天数为42～43天的孕妇进行HCG测定。结果:早期胚胎死亡孕妇组血清FS水平明显低于正常早期妊娠孕妇组(P<0.01),早期胚胎死亡孕妇组血清HCG水平明显低于正常早期妊娠孕妇(P<0.01).FS与HCG的变化在早期胚胎死亡中均呈正相关。结论:血清FS水平的变化参与了早期妊娠的维持,FS减少引起早期胚胎死亡原因之一。     

体外受精-胚胎移植治疗不孕症的临床研究

目的 :应用体外受精 -胚胎移植 (IVF ET)技术治疗不孕症 ,探讨胚胎培养系统和不孕妇女年龄对治疗效果的影响。方法 :2 0 8对不育夫妇 ,女方采用控制性超排卵 ,阴道B超引导穿刺取卵 ,丈夫精液采用梯度离心法分离精子 ,体外受精 ,胚胎移植 ;比较不同培养系统和年龄对治疗效果的影响。结果 :2 2 0个治疗周期共获卵 2 0 97个 ,周期获卵数为 9.5 3± 5 .61个 ,受精率 72 .2 1% ,卵裂率 94.40 % ,优良胚胎率为 67.43 % ,96周期临床妊娠 ,临床妊娠率为 43 .64 % ,双胎率为 3 6.46% ,流产率为 13 .5 4%。结论 :IVF -ET技术是治疗不孕症的有效方法。通过改进培养系统 ,能够改善胚胎质量 ,提高IVF治疗的成功率 ;妇女年龄超过 3 5岁IVF治疗的成功率明显降低。     

两种硫辛酸对映体对胚胎体外发育的影响

目的：探讨(R)-硫辛酸和(S)-硫辛酸对胚胎体外发育的影响。方法解冻复苏卵裂期胚胎,分别在含不同浓度(R)-硫辛酸和(S)-硫辛酸的GⅡ培养基微滴中培养,观察各组的桑胚率、致密化率、囊胚率和优质囊胚率。结果硫辛酸可提高胚胎体外发育率,(R)-硫辛酸浓度10×10-9 mol/m3组桑胚率、致密化率、囊胚率和优质囊胚率分别达到了59.2%,55.1%,49.0%和54.2%,均高于其他浓度组（P<0.01）。(R)-硫辛酸浓度10×10-9 mol/m3组的桑胚率、致密化率和优质胚胎率均高于(S)-硫辛酸10×10-9 mol/m3组（P<0.05）。结论硫辛酸对胚胎体外发育具有促进作用,特别是对桑胚率和囊胚率具有显著的影响。(R)-硫辛酸10×10-9 mol/m3组的效果最好。     

体外受精时程和胚胎培养方式对小鼠早期胚胎发育潜能的影响

目的 探讨体外受精时程、培养基体积以及单胚胎或多胚胎培养对小鼠早期胚胎发育潜能的影响。方法 根据体外受精时间长短的不同，将受精时程分为2组，一组精子和卵子共孵育的时间为2h（A组），另一组精子和卵子共孵育的时间为18h（B组）；根据培养基体积及培养胚胎数目的不同，将胚胎培养方式分为6组：100μl培养基＋1枚胚胎（组1），100μl培养基＋3枚胚胎（组2），50μl培养基＋1枚胚胎（组3），50μl培养基＋3枚胚胎（组4），20μl培养基＋1枚胚胎（组5），20μl培养基＋3枚胚胎（组6）。结果 ①A组的优质胚胎率和囊胚形成率均明显高于B组（P〈0.05）；②组6的优质胚胎率和囊胚形成率显著高于组1、组2和组3（P〈0.01），组4的囊胚形成率明显高于组1和组2（P〈0.05），组5的囊胚形成率明显高于组1、组2和组3（分别为P〈0.01，P〈0.05）。结论 缩短受精时间、减少培养基体积以及多胚胎群体培养有利于小鼠早期胚胎的发育。     

葡萄糖在小鼠胚胎2-细胞晚期诱导活性氧增多抑制胚胎体外发育

目的:测定葡萄糖培养早期胚胎体外发育各阶段的活性氧(ROS)水平,探讨葡萄糖对小鼠早期胚胎体外发育产生阻滞作用的机制。方法:通过在改良的CZB (m-CZB) 培养液中添加不同浓度（分别为0、5、10、15、20、25、30 mmol/L）的葡萄糖培养小鼠早期胚胎,根据其体外发育的不同阶段,用分子探针氢化乙啶(hydroethidine,HE)和紫外分光光度法分别检测小鼠胚胎内、外ROS含量。结果:葡萄糖浓度达到15 mmol/L时囊胚发育率开始出现明显下降(P<0.05),相同浓度培养的小鼠胚胎在2-细胞晚期阶段胚胎内部超氧阴离子(O2-·)和培养液中过氧化氢(H2O2)含量均明显升高(P<0.05),而发育其他阶段胚胎内部的O2-·与对照组(0 mmol/L葡萄糖组)比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:高浓度葡萄糖可能在2-细胞晚期阶段诱导ROS增多,致使小鼠早期胚胎体外发育受阻。     

p38丝裂原活化蛋白激酶特异性抑制剂对小鼠早胚发育及植入的影响

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）特异性抑制剂SB203580对小鼠早胚发育及植入的影响。方法①采用体外胚胎培养技术,将孕2?d小鼠早胚随机分组,接种到添加不同浓度抑制剂的培养液内进行培养,以观察p38MAPK特异性抑制剂对早胚发育的影响;②体内宫腔注射：取孕4?d小鼠,由子宫角注射不同浓度的SB203580,于孕8?d检查胚胎植入数,同时取子宫,观察内膜的组织学变化。结果①添加抑制剂组的早胚不能发育为胚泡,停滞在8～16细胞阶段。但去除抑制剂后继续培养,幼胚仍能发育到胚泡阶段;②注射SB203580组的小鼠,胚胎植入数明显少于对照组（P＜0.01）。镜下可见,其胚胎组织呈退化坏死状态,胚胎周围蜕膜细胞呈明显的空泡样变性,蜕膜及胚胎中均见大量血细胞浸润。结论①p38MAPK在小鼠植入前胚胎发育过程中起作用;②p38MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制在体小鼠胚泡植入及植入后胚胎和蜕膜细胞的发育。     

基于机器学习算法的重症缺血性脑卒中早期死亡预测效果评价

目的 评价支持向量机(SVM)、随机森林(RF)、极限梯度提升(XGBoost)3种机器学习算法与Logistic回归在重症缺血性脑卒中30天死亡结局的预测效果。方法 使用2008年至2019年MIMIC-IV数据库中符合纳排标准的2358例重症缺血性脑卒中患者资料,分别用SVM、随机森林、XGBoost3种机器学习算法与Logistic回归结合合成少数类过采样(SMOTE)技术建立早期死亡预测模型,并使用通过受试者工作特征曲线下面积(AUC)、准确度、F1-score、布里尔分数等指标评价预测效果。结果 SVM、随机森林、XGBoost与Logistic回归模型在原始类不平衡数据死亡预测中AUC值分别为0.78、0.81、0.84、0.83。应用SMOTE合成数据集后,SVM、随机森林、XGBoost与Logistic回归模型的AUC值分别为0.72、0.84、0.83、0.83。除SVM 外,机器学习算法与Logistic回归之间有相似的预测能力,但准确率、布里尔分数等优于Logistic回归,综合分类性能更优。结论 机器学习算法在重症缺血性脑卒中早期死亡预测中性能较传统方法更优,在解决重症患者预后预测研究问题中具有优势。     

体外受精-胚胎移植治疗中卵子和胚胎质量对生化妊娠周期的影响

目的探讨体外受精-胚胎移植治疗中卵子和胚胎质量对生化妊娠周期的影响。方法选取2016年6月～2018年6月,我院接受体外受精-胚胎移植治疗中的82例生化妊娠周期作为观察组,并在同期内选择单胚胎种植单胎足月妊娠患者的329例周期作为对照组,对两组的卵子质量及胚胎质量进行观察。结果研究组的获卵个数(10.1±1.0)个、成熟MⅡ期卵子数(7.6±1.0)个、正常形态卵子率(45.12%)低于对照组,研究组的颗粒异常率(10.98%)、极体异常率(17.07%)、卵周隙异常率(19.51%)及SER率(6.09%)均高于对照组(P0.05);研究组的优质胚胎数低于对照组(2.90±0.50)个(P0.05)。结论在体外受精-胚胎移植治疗中,卵子质量降低,不仅将影响胚胎质量,且将引发生化妊娠,提高卵子及胚胎质量将降低生化妊娠发生率。