成年鼠穹隆海马伞损伤后基底前脑小白蛋白的变化

目的 :探讨痴呆模型鼠基底前脑含小白蛋白 (parvalbumin ,PV)神经元的变化。方法 :切断老年SD大鼠左侧穹窿海马伞 (fimbria fornix ,FF) ,用免疫组化结合图像分析技术 ,观察大鼠基底前脑PV阳性神经元数目及形态学的变化情况。结果 :穹窿海马伞切断 1个月后 ,损伤组损伤侧内侧隔核 (medialseptum ,MS)和斜角带核(verticaldiagonalband ,VDB)的PV阳性神经元大量减少 (P <0 .0 5 ) ,分别减少 5 8.4 %和 36 .8%。细胞形态学参数改变明显 (P <0 .0 1) ,细胞膜受体含量显著减低 (P <0 .0 5 )。结论 :痴呆模型鼠基底前脑含小白蛋白神经元也逆行性溃变。     

银杏叶提取物对切割海马伞大鼠隔区胆碱能神经元的保护作用

目的：研究银杏叶提取物对切割海马伞大鼠隔区胆碱能元的保护作用。方法：实验组和对照组动物在切割海马伞前后分别用银杏叶提取物和蒸馏水灌胃，术后第4周灌注固定，取隔区切片进行Nissl染色及胆碱乙酰转移酶（ChAT)免疫组化染色，显微镜下记数切割海马伞侧内侧隔核和斜角带垂直支ChAT阳性神经元数目。用CMM－301图像分析系统对切割海马伞侧隔区ChAT阳性神经元的面积、周长等指标进行分析处理，用t检验作统计学分析。结果：实验组切割海马伞侧隔区的ChAT阳性神经元数明显多于对照组（P＜0．01），其神经元的胞体面积及周长指标实验组均好于对照组（P均＜0．01）。结论：银杏叶提取物对切割海马伞大鼠的隔区胆碱能神经元具有保护作用。     

大白鼠腹侧海马的传入联系——HRP法

将30%HRP(sigmaⅥ)注入10只大白鼠左侧腹侧海马,其中7只雌性,3只雄性,观察其传入投射.结果在下列核区出现标记神经元.同侧:内侧隔核、斜带核、内嗅皮质、上乳头体核、蓝斑核、中缝背核、正中中缝核、脑桥中缝核、上丘核、前扣带皮质、下丘脑穹窿周核、丘脑连结核.对侧:斜带核、下丘脑穹窿周核、蓝斑核、海马CA_3、CA_4区、前下托、旁下托.其中前扣带皮质、下丘脑穹窿周核未见有报道.     

树基底前脑的胆碱能神经元分布

目的研究树基底前脑的胆碱能神经元的细胞特征、分布特征及比例.方法用细胞免疫组织化学技术.结果树基底前脑的胆碱能神经元分为Ch1～Ch4 4群.Ch1分布于内侧隔核(MS)的外侧和靠中线处,占21.6%,细胞多为卵圆形,胞体直径11～13μn,突起1～2条;Ch2与非胆碱能细胞混杂或呈簇状分布于斜角带核垂直支(VDB),占64 %,胞体以卵圆形为主,直径13～16μm,突起2～3支;Ch3均匀分布于斜角带核水平支(HDB),但内侧部的较密,占51 2%,外侧部的稀疏,仅占21.7%,胞体也多呈卵圆形.直径12～1 6μm,突起多为1条;Ch4均匀分布于Meynenert基底核(NB),占68 1%,胞体深染,形态多样,直径14～17μm突起少.结论树基底前脑的胆碱能神经元的分布与大鼠、猴的基本类似.     

神经生长因子与神经组织再生和移植

1　神经生长因子与神经组织再生根据现有资料,神经组织的再生有赖于神经生长因子(NGF)的作用。早期认为NGF的作用仅局限于影响交感和感觉神经元的发育与存活,但近年来发现NGF也有明显的中枢性效应,它不但作用于胆碱能神经元,还可以作用于单胺类、肽能神经元,既可维持神经元的生存,又能增加神经递质的合成。实验证明:在成年大鼠双侧伞和穹窿损伤后,单侧注射NGF可使两侧中隔胆碱能神经元免于损伤。短时间给予NGF不足以持久地挽救隔胆碱能神经元,只有当轴突与靶区重新联结时,外源性NGF才能停止注入,这样才能持久挽救隔胆碱能神经元。伞…     

大鼠隔-海马投射纤维损伤对内侧隔核NOS阳性神经元的影响

目的：观察离断成年大鼠一侧隔－海马投射纤维后内侧隔核（ＭＳ）一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）阳性神经元的变化情况。方法：成年ＳＤ大鼠，切断一侧穹窿海马伞（ＦＦ），术后分别存活１、２、 ３、４周，进行 ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法染色。结果：损伤后１周， ＭＳ的ＮＯＳ阳性神经元减少了２１ ２８％，Ｐ＜０．０５；损伤２周减少了３６．０５％，Ｐ＜０．０１；损伤３～４周减少了３７．０１～３９．２９％，Ｐ＜０．０１。结论：受损侧ＭＳ的ＮＯＳ阳性神经元发生了一定程度的演变。     

预防性使用刺五加皂甙对海马伞切割后大鼠学习记忆功能的改善作用

目的 观察预防性使用刺五加皂甙(ASS)对切割海马伞的大鼠学习记忆功能的影响及胆碱能神经元的变化.方法 将27只SD大鼠随机分为ASS预防组、ASS治疗组和对照组,每组9只.在行右侧海马伞切割后,对照组每天腹腔注射生理盐水0.5 mL/100 g,ASS治疗组每天腹腔注射ASS 100 mg/kg(共6周);ASS预防组连续2周每天预先腹腔注射ASS 100 mg/kg后行右侧海马伞切割术,术后继续注射4周.切割海马伞术后第7、8周,分别进行避暗回避试验和跳台试验.术后第9周取大鼠切割海马伞侧隔区切片行还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶-黄递酶(NADPH-d)组织化学染色及胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组织化学染色,分析一氧化氮合成酶(NOS)及ChAT阳性神经元数量、面积和周径.结果 ASS预防组大鼠在避暗回避试验中的探索次数和滞留时间,在跳台试验中的主动回避阳性率及总回避阳性率均优于ASS治疗组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);ASS治疗组大鼠避暗回避试验中的滞留时间明显长于对照组(P＜0.05).ASS预防组大鼠切割侧隔区的NOS和ChAT阳性神经元数量、面积及周径均显著大于治疗组和对照组(P＜0.05);ASS治疗组大鼠切割侧隔区的NOS和ChAT阳性神经元面积和周径均明显大于对照组(P＜0.05).结论 预防性使用ASS对切割海马伞大鼠的认知障碍有一定的改善作用,可能是通过保护基底前脑隔区胆碱能神经元而实现的.     

中药方剂对切割海马伞大鼠学习、记忆的保护作用

目的：研究以党参、黄芪、何首乌、山萸肉等益肾健脑、益气养血为主方的中医药对切割海马伞大鼠学习、记忆力的影响以及对隔区胆碱能神经元的保护作用。方法：实验组和对照组动物切割海马伞前后分别用中药煎剂和自来水灌胃,术后第３、４周行避暗回避试验和跳台试验,最后灌注固定动物,取隔区切片作ＣｈＡＴ免疫组化和ＮＯＳ组化染色,显微镜下记数切割海马伞侧内侧隔核和斜角带垂直支ＣｈＡＴ和ＮＯＳ阳性神经元数,并观察胞体和纤     

谷氨酸和胆碱乙酰化酶免疫反应阳性神经元在猴、猫前庭神经核簇中的分布和比较

用ABC法对猴、猫前庭神经核簇(VN)内谷氨酸和胆碱乙酰化酶免疫反应阳性(Cluir和ChATir)神经元胞体的形态和分布作了观察和比较。发现两种细胞构筑的差异与所在部位的神经联系及功能相关。前庭神经上核(SVN)中央部、前庭神经外侧核(LVN)腹侧部、前庭神经内侧核(MVN)头侧半及y群的Gluir神经元是前庭眼肌反射的第一中继站。LVN的大型Gluir神经元以及前庭神经下核(IVN)尾侧半和MVN内数最占绝对优势的Gluir神经元构成前庭脊髓束的起始核。MVN、IVN尾侧半与SVN周围部的ChATir神经元参与VN的中枢协调机制,并可能作为内源性胆碱能神经元影响VN神经元的紧张性活动。     

慢性酒精中毒大鼠学习记忆及内侧隔核胆碱能神经元的变化

目的 研究酒精致大鼠学习记忆障碍与基底前脑内侧隔核胆碱能神经元变化的关系。方法 将24只雄性Wister大鼠随机均分成对照组和酒精中毒组．酒精中毒组大鼠隔日胃内注入含酒精（2．5g／kg）的蒸馏水2ml共90d，对照组则注入不舍酒精的蒸馏水2ml。然后采用Morris水迷宫扣免疫组织化学技术，分析大鼠基底前脑内侧隔核胆碱能神经元、海马星形胶质细胞数的变化扣学习记忆能力的关系。结果酒精中毒组大鼠Morris水迷宫潜伏期明显延长，基底前脑内侧隔核胆碱能神经元数目明显减少．海马星形胶质细胞数目反应性增生。结论 酒精致大鼠学习记忆能力障碍与基底前脑内侧隔核胆碱能神经元减少有关。     

多烯磷脂酰胆碱联合水飞蓟宾治疗酒精性肝病58例

目的观察多烯磷脂酰胆碱联合水飞蓟宾治疗酒精性肝病的临床效果。方法将确诊的58例患者随机分为两组,联合治疗组28例,多烯磷脂酰胆碱联合水飞蓟宾加基础治疗;对照组30例基础治疗,疗程4周。观察两组治疗前后,肝功能、凝血酶原时间变化情况。结果治疗组肝功能、凝血酶原时间明显改善,且与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论多烯磷脂酰胆碱联合水飞蓟宾治疗酒精性肝病临床效果较好。     

一种脑胆碱乙酰基转移酶活性测定法

对测定胆碱乙酰基转移酶的Ｆｏｎｎｕｍ法稍加改进，并严格控制操作条件。应用改进的方法测定了大鼠脑胆碱乙酰基转移酶活性，结果更准确。     

Morphologic Relationship between the Pontine Micturition Center and the Sympathetic Center in the Spinal Cord of the Rat

To study whether the sympathetic nerves coordinate with the parasympathetic nerves during micturition in the rat. We used antegrade neural tracing with biotinylated dextran amine (BDA) injected into the pontine micturition center (PMC) to label the terminals in the L6-S1 cord，Preganglionic parasympathetic neurons (PPNs) in the L6-S1 segment were labelled by retrograde transport of Fluorogold (FG) from the major pelvic ganglion (MPG). We detected retrograde neurons in L6-S1 using retrograde transport of horseradish peroxidase (HRP) from the intermediolateral cell column (IML) of the L1-L2 segment where sympathetic preganglionic neurons (SPNs) are located, lmmunohistochemical methods showed that PPNs were identified to he choline acetyltransferase-immunoreactive (ChAT-IR). HRP-labelled neurons were not ChAT-IR and located dorsal to PPNs. BDA labelled terminals were located mainly in the bilateral IML of L6-S1, some of which had synaptic contact with the HRP-labelled neurons. In addition, there were some wheat germ agglutinin-horseradish peroxidase (WGA-HRP) labelled terminals in the ipsilateral IML of the L1-L2 segment after WGA-HRP was microinjected into SPN. We conclude that PMC may control the preganglionic neurons of sympathetic nerves through the interneurons located dorsal to PPNs.     

胆碱与帕瑞昔布钠的协同镇痛作用及其机制

目的探讨胆碱和帕瑞昔布钠在镇痛中的相互作用并对其机制进行初步研究。方法醋酸扭体模型：将150 只雄性昆 明小鼠随机分为4 组：（1）对照组（S）（n=10）：尾静脉注射0.9%的生理盐水0.2 mL/20 g;（2）胆碱组（C）（n=50）：50 只小鼠设立 5 个剂量即3、6、12、24、48 mg/kg;（3）特耐组（P）（n=50）：50 只小鼠设立5 个剂量即1.5、3、6、12、24 mg/kg;（4）联合用药组（C+ P）（n=40）：40 只小鼠设立4 个剂量,分别为两药ED50的1/2、1/4、1/8、1/16,进而可求出两药合用时的ED50。所有药物均在造 模前经尾静脉给予。胆碱给药时间为造模前2 h,帕瑞昔布钠为30 min。研究生理盐水对照组（S）、ED50胆碱组（C）、ED50帕 瑞昔布钠组（P）、以及1/2ED50胆碱和帕瑞昔布钠组[1/2（C+P）]对醋酸扭体模型小鼠血中细胞因子和炎症介质的影响。药物 预处理时间同上,在腹腔给予醋酸后10 min 立即实施摘眼球采血。所采血液采用ELISA 试剂盒检测IL-1、TNF-α、PGE2、 NF-kB、I-kB 的含量。结果（1）醋酸扭体模型中,胆碱和帕瑞昔布钠单独经尾静脉给药后所得的ED50,胆碱8.64 mg/kg,帕 瑞昔布钠6.33 mg/kg;二者联合用药时胆碱为2.13 mg/kg,帕瑞昔布钠为1.56 mg/kg;（2）在等辐射图见胆碱与帕瑞昔布钠合 用时的ED50实测值落在理论值的下方,两点作t 检验的P<0.05。联合用药指数CI<0.9;（3）与S 组比较,C组、P 组、1/2（C+P） 组中IL-1、TNF-α的含量均降低（P<0.05）,且1/2（C+P）组比C组及P 组分别单独使用降低更加明显（P<0.05）;P 组以及1/2 （C+P）组中PGE2 含量较对照组均有降低（P<0.05）,1/2（C+P）组与C 组相比PGE2 含量下降更多（P<0.05）;与S 组相比, NF-kB 的含量在C组、P 组、1/2（C+P）组中均降低（P<0.05）,I-kB 的含量在1/2（C+P）组及C组中出现有统计学意义的降低, NF-kB、I-kB 在1/2（C+P）组中较P组有更明显降低（P<0.05）。结论胆碱与帕瑞昔布钠具有协同镇痛作用,二者的相互作用 可能与体内NF-kB的表达有关     

长期大量饮酒对大鼠阴茎组织胆碱乙酰转移酶的影响

目的 探讨长期大量饮酒对大鼠阴茎组织胆碱乙酰转移酶的影响.方法 将30只雄性大鼠随机分为对照组、20%酒精剂量组和40%酒精剂量组.分别以生理盐水、20%和40%食用酒精各2mL给大鼠灌胃,每日1次.3个月后,观察各组大鼠性行为和药物诱发阴茎勃起的变化;用化学发光法测定各组大鼠血清睾酮的含量;用免疫组化法测定阴茎平滑肌中胆碱乙酰转移酶(CAT)的含量.结果 与对照组相比,20%酒精剂量组大鼠药物诱发阴茎勃起实验没有受到酒精影响(P＜0.05),但除射精潜伏期外,酒精抑制了该组大鼠的性行为(P＜0.05),而40%酒精剂量组大鼠的性行为表现和药物诱发阴茎勃起实验均受到抑制(P＜0.05).实验组大鼠血清睾酮含量减少(P＜0.05),40%酒精剂量组大鼠阴茎组织中CAT活性也降低(P＜0.05).结论 大鼠长期大量饮酒后性功能障碍,其机制与血浆睾酮含量降低,阴茎组织中胆碱乙酰转移酶活性降低有关.     

Differential acetylcholine and choline concentrations in the cerebrospinal fluid of patients with Alzheimer’s disease and vascular dementia

Background An important aspect of Alzheimer’s disease (AD) is loss or impairment of cholinergic neurons. It is controversial whether there is a similar cholinergic impairment and cerebral deficit of acetylcholine (ACh) in the case of vascular dementia (VD). The purpose of this study was to explore the levels of ACh and choline (Ch) in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with AD and VD, and their possible relationship with cognitive impairment.Methods Twenty-two AD patients, twenty-two VD patients, and twenty normal controls were recruited and scored with a Mini-Mental State Examination (MMSE). CSF concentrations of ACh and Ch were measured using high-performance liquid chromatography with an electrochemical detector (HPLC-ECD) and the results were then compared to cognitive status.Results ACh concentrations in CSF of AD patients ［(10.7±5.1） nmol/L］ and VD patients ［(16.8±7.4） nmol/L］ were both significantly lower than in controls ［(34.5±9.0） nmol/L, t=10.67, P&lt;0.001; t=6.91, P&lt;0.001］. Both results correlated positively with MMSE scores (rs=0.88 and rs=0.85, respectively, P&lt;0.01). The CSF concentration of Ch was significantly higher in VD patients ［(887.4±187.4） nmol/L］ compared to AD patients ［(627.6±145.1） nmol/L, t=6.4, P&lt;0.001］ and controls ［(716.0±159.4） nmol/L, t=4.2, P=0.002］. CSF Ch concentration showed no difference between AD patients and normal controls, nor did it correlate with MMSE score in any of the three groups. Conclusions The positive correlation between ACh deficit and cognitive impairment suggests that ACh is an important neurotransmitter for memory. The similar decrease in ACh concentration in AD and VD patients may imply a similar pathogenesis for the process of cognitive impairment involved in these two disorders. The elevated CSF levels of Ch in VD patients compared to AD patients may be useful diagnostically. Cholinesterase inhibitors may be helpful not only for AD patients, but also for VD patients.     

糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶表达与认知功能的相关性

目的：观察糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）mRNA和蛋白表达及其与认知功能的关系,探讨糖尿病脑病的发病机制.方法：38只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（C组）和糖尿病组（D组）,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型.建模成功后11wk用Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力;RT-PCR,原位杂交法检测ChATmRNA表达;免疫组化,WesternBlot法检测ChAT蛋白表达.结果：D组大鼠学习和记忆能力明显减退,其逃避潜伏期时间延长;C组40.90±10.90与D组77.56±27.86相比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）.穿越目标区域次数C组（3.93±0.44）次与D组（1.37±0.85）次相比较明显减少（P〈0.05）;中心区域停留时间百分率C组（5.41±0.97）%与D组（2.20±1.28）%相比较明显下降（P〈0.05）.海马ChATmRNA和ChAT蛋白表达C组0.48±0.03,0.55±0.02与D组0.37±0.01,0.33±0.01相比较均明显降低（P〈0.05）.结论：糖尿病大鼠海马ChATmRNA和蛋白低水平表达可能是糖尿病脑病的发病机制之一.     

猴脑纹状体胆碱乙酰转移酶cDNA克隆及测序

目的:克隆猴胆碱乙酰转移酶(ChAT)cDNA,并将猴ChAT cDNA测序结果与猪、大鼠、小鼠、原鸡以及人的ChAT cDNA序列相比较。方法:以改良的酸苯酚方法提取成年日本猴脑纹状体总RNA。以RNA为模板经逆转录获得cDNA第一链,设计基因特异性引物扩增cDNA链上不同片段。经序列分析仪获取ChATcDNA完整序列。结果:在猪、大鼠、小鼠、原鸡中作为起始密码的ATG密码子的位置在猴ChAT cDNA中由ACA所取代,而猪、大鼠、小鼠、原鸡及人类cDNA中终止密码子TGA的位置在猴ChATcDNA中则由TAA取代。猴ChAT序列与人类、猪、小鼠、大鼠以及原鸡ChAT序列的相似程度分别为96.36%,87.96%,85.47%,84.88%和71.84%。氨基酸序列显示,ChAT中乙酰辅酶A结合区域和两个可能的钙/钙调蛋白激酶的磷酸化位点在猴ChAT中未发生改变。结论:猴ChAT cDNA与人ChAT序列最相似,与重要功能基团作用相关的氨基酸序列在猴ChAT中具有保守性。     

自发性2型糖尿病小鼠脑组织胆碱能神经递质系统的研究

目的探讨糖尿病脑病的发病机制。方法应用一种自发性2型糖尿病动物模型,研究其发病早期行为学和脑组织形态学的变化,以及胆碱能神经递质及其受体与糖尿病脑病的关系。结果糖尿病小鼠发病早期出现认知功能障碍和脑组织形态学改变;糖尿病小鼠发病6周时,脑皮质和海马组织的胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)活性与正常对照组比较无明显改变(P>0.05)。发病12周时皮质组织的ChAT活性较正常对照组降低了39%(P<0.05),海马组织下降了36%(P<0.05);糖尿病动物模型KK-Ay小鼠发病6周和12周时皮质和海马组织的胆碱毒蕈碱受体(M受体)结合于3H-QNB的活性与正常对照比较差异均无统计学意义(P>0.05);结论胆碱能神经递质传递异常在糖尿病脑病发病机制中发挥重要作用。