实时荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒

目的探讨实时荧光定量PCR（FQ—PCR）技术检测丙型肝炎病毒（HCV）RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常的相关性。方法用FQ—PCR检测115份疑似HCV感染的病人血清HCV—RNA，ELISA法检测抗-HCV，全自动生化分析仪测定ALT。结果以80拷贝／ml血清为标准，115份标本中HCV—RNA阳性率为54．8％（63／115）；抗-HCV阳性率为53．9％（62／115）；ALT异常率为40．9％（47/115）。HCV—RNA载量与抗-HCV（＋）例数呈正相关（r=0．986，P〈0．01）。HCV—RNA载量与ALT异常例数（r=0．94，P〈0．01）、含量（r=0．624，P〈0．01）呈正相关。结论HCV—RNA载量升高，抗-HCV阳性率相应增加，ALT高于正常值（40U／L）的异常率和浓度也增高，均呈正相关。FQ—PCR法可作为临床检测丙型肝炎的确诊方法之一。     

丙型肝炎病毒RNA定量检测与抗-HCV及ALT的关系

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）定量与丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系。方法用荧光定量逆转录聚合酶反应（FQ—RT—PCR）检测239例抗-HCV阳性者的HCVRNA定量，同时检测ALT水平。结果239例中，150例（62．8％）HCV RNA定量高于80拷贝／ml；133例ALT异常，其异常率随HCV RNA定量的升高而增加。ALT异常例数与正常例数差异有统计学意义（P〈0．01），ALT水平与HCVRNA定量无相关性（r=0．524，P〉0．05），而ALT异常率与HCV RNA定量呈正相关（r=0．955，P〈0．05）。结论HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标，结合ALT结果可帮助了解HCV在体内复制状况。     

荧光定量PCR检测丙型肝炎RNA结果分析

目的：分析丙型肝炎病毒RNA[HCV—RNA]与丙型肝炎抗体（抗-HCV）及转氨酶（ALT）之间的关系.方法：荧光定量PCR（FQ—PCR）、酶免化学发光法、全自动生化分析仪分别检测含量与ALT水平之间无明显相关性，但是HCV—RNA阳性率在ALT正常组与异常组之间差异有显著性（P〈0．005）。结论：在丙肝的诊断、治疗中，检测HCV—RNA含量有积极的意义。     

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸含量与丙型肝炎病毒抗体和丙氨酸氨基转移酶的相关性

[目的]探讨丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)含量与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)间的相关性.[方法]采用实时荧光定量PCR检测302例丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量,同时采用ELISA法检测抗-HCV水平,利用全自动生物化学检测仪测定ALT水平.[结果]302例丙型肝炎患者血清标本中,抗-HCV均呈阳性,其中199份标本HCV RNA含量高于检测上限(103 U/mL),2种检测方法的符合率为65.9%.ALT异常率随HCV RNA含量的增高而升高,两者呈显著正相关(r=0.155,P<0.05);而ALT水平变化与HCV RNA含量无相关性(r=0.001,P>0.05).[结论]HCV RNA含量与抗-HCV水平是诊断HCV感染的重要指标,HCV RNA含量结合ALT水平测定可帮助临床了解HCV在体内复制的状况及肝脏损伤情况.     

荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用

目的　观察荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus ,HCV )感染检测中的临床应用情况。方法　用FQ PCR检测 3 15份怀疑HCV感染的临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测抗HCV ,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平 ,了解样本中HCV RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果　 3 15份标本中有 2 2 5份HCV RNA含量高于 80拷贝·ml-1,2 5 0份抗HCV阳性 ,14 5例ALT异常 ,HCV RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性 (r =0 .682 ,P =0 .0 0 2 ) ;HCV RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性 (r =0 .92 3 ,P =0 .0 3 2 )。结论　FQ PCR技术检测HCV RNA特异性强 ,灵敏度高 ,具有良好的临床应用价值。     

荧光定量逆转录聚合酶链反应在HCV感染检测中的应用

目的 了解荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)在丙型肝炎病毒(HCV)感染中的临床应用价值。方法 用FQ-RT-PCR检测63份怀疑HCV感染的临床样本，并同时采用酶联免疫吸附试验(ELIA)检测抗HCV，用全自动生化检测仪测定丙氨酸转氨酶(ALT)水平，了解样本中HCV-RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果 63份样本中有40份HCV-RNA含量高于80拷贝／ml，57份抗HCV阳性，26例ALT异常，经统计分析每两者间具有明显相关性。结论FQ-RT-PCR技术检测HCV-RNA特异性强，灵敏度高，具有良好的应用价值。     

慢性丙型肝炎患者血清HCV RNA、脂联素水平与AST/ALT比值的相关性

目的探讨慢性丙型肝炎患者血清HCV RNA、脂联素水平与AST/ALT比值的关系,评价HCV RNA、脂联素和AST/ALT比值水平在判断丙肝患者预后方面的价值。方法采用荧光PCR试剂盒测定HCV RNA,ELISA法检测脂联素,全自动生化分析仪检测AST和ALT。结果与正常对照组相比,慢性HCV患者组血清HCV RNA和AST/ALT比值水平明显增高（P〈0.05）,而脂联素水平则降低（P〈0.05）;HCV RNA病毒含量与AST/ALT比值呈正相关（r=0.535,P〈0.01）,HCV RNA病毒含量与脂联素水平呈负相关（r=-0.483,P〈0.05）,AST/ALT比值与脂联素水平呈负相关（r=-0.426,P〈0.05）。结论联合检测血清HCV RNA、脂联素水平和AST/ALT比值的水平,对慢性丙型肝炎的疗效观察及预后估计有重要的临床价值。     

慢性HCV感染患者RNA、ALT、AST水平以及细胞因子之间的关系

目的：研究慢性HCV感染患者HCV RNA水平，ALT、AST以及外周血单个核细胞（PBMCs）体外细胞因子分泌之间的关系。方法：体外培养慢性HCV感染患者PBMCs72小时后，ELISA检测培养上清细胞因子（IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF—α）含量，荧光定量PCR检测患者血清HCV RNA含量。结果：RNA阳性患者ALT、AST水平明显高于阴性患者，但阳性患者之间，ALT、AST水平无显著差异。不论RNA滴度高低，细胞因子分泌水平均无差异。相关性分析表明IFN-γ与ALT、AST有一定相关性（r=-0．8178，P=0．02；r=0．7517．P=0．04）。结论：血清HCV RNA水平与肝损伤有关，INF-γ在抗HCV免疫应答的同时可能对肝脏也造成了一定损伤。     

丙型肝炎病毒的检测方法相关性分析及临床应用

目的　研究丙型肝炎病毒核酸HCVRNA载量与抗-HCV以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法　用FQ -PCR法检测82份抗-HCV阳性的血清,同时用不同生产厂家的试剂检测抗-HCV及ALT含量。结果　82份抗-HCV阳性的血清中HCVRNA的阳性率为62 .19% ;5 1份HCVRNA阳性的血清中ALT异常率为5 4.90 % ,且ALT异常率随HCVRNA载量升高而升高,两者呈正相关性(r =0 .916,P <0 .0 0 1)。结论　HCVRNA、抗-HCV和ALT三者联合检测,对HCV感染者的筛选、药物治疗的评价有较高的临床应用价值。     

献血者血清抗-HCV阳性与ALT活性的关系

目的 分析献血者血清抗-HCV抗体及丙型肝炎病毒核酸（HCVRNA）含量与ALT的关系。方法 采用ELISA法检测抗-HCV抗体。阳性标本用荧光PCR试剂盒测定HCVRNA，分析ALT活性与HCVRNA水平的关系。结果 83份抗-HCV抗体阳性标本经PCR检测后有37份标本含HCVRNA，HCVRNA拷贝量与ALT活性呈正相关，且标本的HCVRNA含量越多，ALT活性也越高（P〈0．01）。结论 献血者中筛查ALT并结合PCR技术，能减少HCV经血传播的危险。     

丙型肝炎患者HCV RNA与转氨酶的关系

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸（HCVRNA）与天冬氨酸转移酶（AST）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）之间的关系。方法对119例（自2008年1月～2009年5月）来自湖南省人民医院住院和门诊丙型肝炎患者进行HCVRNA、抗-HCV及AST、ALT检测。采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测标本中的HCVRNA,同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定AST、ALT水平。分析分别在HCVRNA大于临界值组和HCVRNA小于临界值组的病人血清中转氨酶与其的关系。结果本研究的119例标本中有116例抗-HCV均为阳性,其中HCVRNA高于上限值（≥1000copies/mL）87例,二都有很好的相关性;共有70例存在ALT异常,73例存在AST异常,ALT、AST水平与HCVRNA含量对数值无显著相关性,但ALT、AST阳性率与HCVRNA大于临界值有一定的吻合关系。结论HCVRNA是反映HCV复制的可靠指标。结合AST、ALT结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的损伤情况。RT-PCR法检测HCVRNA具有非常好的临床应用价值。     

HCV及其与HBV重叠感染患者血清HCVRNA检测的临床意义

目的探讨HCV及其与HBV重叠感染患者血清HCV RNA检测的临床意义。方法收集我院HCV感染及其与HBV重叠患者血清标本共179例,分为慢性丙型肝炎组（n=101）、肝硬化组（n=45）和肝癌组（n=33）。采用ELISA法检测血清抗HCV,用荧光定量PCR检测HCV RNA;对重叠感染HCV和HBV的31例患者同时检测HBVDNA。结果 179例患者抗HCV的总阳性率为97.8%,高于HCV RNA的阳性率（69.8%）（P〈0.01）。肝硬化组和肝癌组HCV RNA的阳性率分别为82.2%和84.8%,高于慢性丙型肝炎组阳性率64.4%（P〈0.05）。HCV与HBV重叠感染组的HCV RNA的阳性率为48.4%,低于单纯HCV感染组的HCV RNA阳性率（71.6%）（P〈0.05）。HCV与HBV重叠感染患者的HBV DNA阳性率为35.5%,也显著低于单纯HBV感染患者阳性率（76.7%）（P〈0.01）。HCVRNA阳性组ALT异常率（60.8%）高于HCV RNA阴性组（35.2%）（P〈0.05）。结论对HCV感染相关的不同疾病患者联合检测抗HCV、HCV RNA和ALT,对于HCV和HBV重叠感染者同时检测HBV DNA,有利于疾病的明确诊断、病情观察及预后判断。     

HCV RNA含量与肝脏组织病理学损伤之间的关系

目的:探讨丙型肝炎病毒感染者血清HCV RNA含量和ALT浓度与肝脏组织病理学损伤之间的关系.方法:应用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测681例HCV感染患者血清HCV RNA,电化学发光分析技术检测HBsAg,ELISA检测抗HAV IgM、抗HCV IgG和抗HEV IgM,Bayer全自动生化分析仪检测ALT浓度.H-E染色,光学显微镜观察组织病理损伤程度.结果:681例血清标本中,HCV RNA和抗HCV抗体均阳性和均阴性者分别是150例和420例,HCV抗体阴性而HCV RNA阳性40例,HCV RNA阴性而HCV抗体阳性71例.在排除了甲型、乙型和戊型肝炎病毒感染后,190例HCVRNA阳性患者中,36例患者在HCV RNA检测前后7 d内,曾进行过肝脏组织病理学检测,轻度、中度和重度肝脏病理学损伤患者血清中,HCV RNA浓度及ALT浓度相差均不显著.结论:血清学标志物和病毒核酸都是监测HCV感染的重要指标.HCV RNA浓度、血清ALT浓度与肝脏病理损伤相关性不显著,HCV RNA水平不能反映肝脏病理损伤程度.     

116例血清中HCV RNA定量检测与抗-HCV结果对比分析

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和HCVRNA定量检测阳性结果对丙型肝炎诊断治疗的临床意义。方法采用第三代ELISA夹心法检测抗-HCV，荧光定量PCR法检测HCVRNA检测116例血清抗-HCV或HCVRNA阳性标本。结果在116例标本中，抗-HCV( )／HCVRNA( )双阳性者83例，抗-HCV( )／HCVRNA(-)者12例，抗-HCV(-)／HCVRNA( )者21例)。两者阳性符合率为71．6％(83／116)。在HCVRNA定量阳性结果中，则有104例为HCV感染，其中抗-HCV的阳性检出率为80．0％(83／104)。随着血清HCVRNA滴度的增高，抗-HCV的阳性率也增加，两者变化趋势一致。结论抗-HCV检测，HCVRNA荧光定量PCR法检测均有一定的局限性，同时应用抗-HCV和HCVRNA检测对临床上完善HCV诊断、评价抗病毒疗效更为准确。     

126例丙型肝炎病者临床病毒血清学分析

分析126例丙型肝炎病者的临床资料,丙型肝炎病毒血清抗体(抗-HCV)滴度及丙型肝炎核酸(HCV-RNA)。发现有明确输血(浆)史者103例,该病史中发现输血后2个月内有肝损者87例占84.4％。抗-HCV检出率为91.3％,其中急性病者检出率82.6％,慢性者95.8％。抗-HCV强阳性者(OD>1.0),HCV-RNA的检出率48.1％,明显高过OD<1.0的低阳性者。抗-HCV阴性者中有18·18％(2/11)检出HCV-RNA。另外,HCV-RNA的检出与谷-丙转氨酶(ALT)水平有一定关系,有肝损者比ALT正常者HCV-RNA检出率明显高。提示HCV-RNA的检出与活动性肝病有关系。     

急慢性丙型肝炎患者ALT、抗-HCV与HCVRNA关系的分析

对 4 0例丙型肝炎患者的血清 AL T、抗 - HCV及 HCVRNA进行了检测。结果显示 :在急慢性丙型肝炎中 ,抗 - HCV阳性率分别为 83.3%、93.8% ,HCVRNA阳性率分别为 50 %、6 8.8% ,有 4例抗 - HCV阴性急性患者 HCVRNA阳性。抗 - HCV阳性者中有 51.4 % HCVRNA阳性。HCVRNA的检出在 AL T异常情况下较正常明显高 (P<0 .0 5)。提示 HCVRNA早期诊断意义较抗 - HCV大 ,抗 - HCV在一定程度上能反映 HCVRNA的情况 ,而 AL T高低亦可间接反映 HCV的复制状态。     

HCV与HBV共感染影响血清HBV核酸与表面抗原水平

分析和评估HCV与HBV共感染对HBV临床指征的影响。采集152例有静脉吸毒史HBV感染者血浆,其中HBV/HCV共感染组52例,HBV单感染组100例。检测分析包括ALT和AST、HBV表面抗原(HBsAg)、e抗原、e抗体、HBV DNA及anti-HCV IgG与HCV RNA。结果显示,两组样本的ALT和AST水平无显著差异(P=0.097, P=0.184);HBV/HCV共感染组HBsAg水平显著低于HBV单感染组HBsAg水平(P=0.020);共感染组HBV DNA阳性率显著低于HBV单感染组HBV DNA阳性率(P=0.004),且共感染组中HBV DNA载量也显著低于HBV单感染组HBV DNA载量(P=0.031)。进一步分析发现:在HBV单感染患者中的HBV DNA和HBsAg具有良好的正相关关系(r=0.752, P<0.001),但在HBV/HCV共感染患者中相关性减弱(r=0.387, P=0.042)。本研究显示HCV共感染可能与HBV存在竞争关系,从而影响HBV病毒复制水平及表面抗原分泌。     

慢性肝病中HBV／HCV双重感染的血清学调查及意义

采用酶免疫法检测１０４例慢性肝病和１６４例献血员丙型肝炎抗体（抗－ＨＣＶ），阳性率分别为１８．３％（１９／１０４）、１．８％（３／１６４）；慢性肝病中ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染１３例。ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染组（Ｂ组）与单纯丙型肝炎组（Ａ组）谷丙转氨酶（ＡＬＴ）差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。与单纯慢性乙型肝炎组（Ｃ组）ＡＬＴ差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；３组间血清总胆红素差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。本文结果表明：ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染可加重肝脏损害，多数病例未见ＨＢＶ与ＨＣＶ干扰现象；正常人群也存在丙型肝炎隐性感染。     

河北省赵县某农村单采血浆还输血细胞献血员丙型肝炎病毒感染的追踪调查

目的　调查我国输血后丙型肝炎病毒 (HCV)感染的自然史及其影响预后的因素。方法　河北省赵县某农村单采血浆还输血细胞献血员 (简称献浆员 ) ,于 1993年 8月经现场调查及血清学检测被诊断为HCV感染者 172例 ,未进行任何抗病毒治疗 ,2 0 0 2年 7月对其HCV感染 9年后的转归以及影响转归的因素进行调查分析。结果　在 172例HCV感染者中 ,9年后 2例死于晚期肝病 ,4例死于脑出血 ,1例意外死亡 ,9年后实际追踪到 14 2例 ,失访率为 13 9% (2 3/ 16 5 ) ,肝病的病死率为 1 2 % (2 / 172 )。该组HCV感染者的慢性化率为 91 5 % (130 / 14 2 ) ,自然阴转率为 8 4 % (12 /14 2 )。在持续性HCV感染者中 ,经B型超声检查提示 ,肝硬化率为 3 1% (4/ 130 ) ;重度肝炎占 6 9%(9/ 130 ) ;中度肝炎 36 2 % (47/ 130 ) ;轻度 5 3 1% (6 9/ 130 ) ;另有 10 0 % (13/ 130 )诊断为脂肪肝。HCVRNA阳性组的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、和γ谷氨酸转肽酶的平均水平显著高于阴性组 (P <0 0 0 1)。HCV/HBV混合感染者肝硬化进程显著快于单独HCV感染 (P <0 0 5 )。结论　输血后HCV感染者的慢性化率远远高于乙型肝炎病毒 (HBV)感染者 ,HCV/HBV混合感染者较单一感染者预后差。     

丙型肝炎病毒RNA与血清标志物的关系

目的 :探讨血清HCVRNA含量与丙氨酸氨基转氨酶 (ALT)、HCV抗体的关系。方法 :采用荧光定量 聚合酶链反应 (FQ PCR)检测 75例HCV抗体复检阳性无偿献血者、9例丙型肝炎患者的HCVRNA含量 ,并与HCV抗体、ALT的检测结果比较。结果 :75例献血者中 ,HCV抗体 (+ )、ALT(-)组HCVRNA阳性率高于HCV抗体 (+ )、ALT(-)组。在 9例丙型肝炎患者中 ,ALT与HCVRNA含量呈正相关 ,且相关性显著 (r =0 72 ,P <0 0 5 )。结论 :在HCV感染的人群中 ,ALT的高低可间接反应HCV在体内的状态 ,这对安全输血和诊断有重要意义