毛细管气相色谱法测定鱼油中EPA和DHA含量

二十五烯酸 (ＥＰＡ)和二十二碳六烯酸 (ＤＨＡ)是脂肪酸中两种重要的功能物质 ,具有调节血脂、预防心脑血管疾病、抗心律失常、改善视力等功效。ＥＰＡ、ＤＨＡ在人体内的含量很少 ,主要存在于海洋动物中。近来年 ,鱼油因同时含有ＥＰＡ、ＤＨＡ等多种不饱和脂肪酸而成为一种保健佳品。基于此 ,本文拟建立鱼油中ＥＰＡ、ＤＨＡ含量的毛细管气相色谱测定方法 ,获得了满意结果。1　实验部分1.1　仪器与试剂ＳｈｉｍａｄｚｕＧＣ - 9ＡＭ气相色谱仪 (岛津公司 ) ,配火焰离子化检测器 (ＦＩＤ)及Ｃ -Ｒ2Ａ色谱数据处理机 :ＸＨ - 1高纯氢发生器…     

气相色谱法测定保健食品功效成分DHA和EPA

近几年出现了许多以二十二碳六烯酸 (ＤＨＡ)、二十碳五烯酸 (ＥＰＡ)为功效成份的保健食品 ,由于没有国家统一检测标准 ,从而给检测保健食品中的ＤＨＡ、ＥＰＡ等脂肪酸成分带来困难。为此我们参照国内外资料[1,2 ] 于 2 0 0 0年 12月建立了保健食品中的ＤＨＡ、ＥＰＡ检测方法。现以鱼油制品为例对本方法进行介绍。1　实验部分1 1　试剂与仪器1 1 1　试剂　脂肪酸标准品ＥＰＡ、二十碳五烯酸甲酯、ＤＨＡ、二十二碳六烯甲酯系美国ＳＩＧＭＡ公司产品 ,纯度为 99%。其他试剂如正庚烷、甲醇、三氟化硼、氢氧化钾、氯化钠等均为分析纯 ;高效…     

转基因小鼠（Tg）两种髓鞘蛋白（MBP）的T细胞受体（TCR）之间的差异

实验性脑脊髓炎 (ＥＡＥ)动物模型是用于了解人类脱髓鞘病多发性硬化症 (ＭＳ)发病机理重要手段。ＥＡＥ属于中枢神经系统Ｔ细胞介导的自身免疫性疾病。应用髓鞘成分 ,包括鞘碱性蛋白 (ＭＢＰ)、糖脂、髓鞘少树突糖蛋白或某些多肽类物质可诱发ＥＡＥ。ＣＤ4 + Ｔ细胞介导ＥＡＥ的发生 ,转基因小鼠两种Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ) :Ｖα2 3/Ｖβ8 2和Ｖα4 /Ｖβ8 2可分别识别ＭＢＰ的ＮＡｃ 1- 11免疫显性表位。口饲ＭＢＰ可使Ｖα2 3/Ｖβ8 2和Ｖα4 /Ｖβ8 2转基因小鼠 ,免遭ＥＡＥ的侵袭。作者发现这两株Ｔｇ小鼠对ＭＢＰ耐受诱导作用。…     

咸鱼中DHA、EPA含量与酸价及过氧化值的关系

大多海产品中含有较丰富的多价不饱和脂肪酸(ＰＵＦＡ),其中廿二碳六烯酸(ＤＨＡ)、廿碳五烯酸(ＥＰＡ)已被证实对人体和一些生物体具有重要的生理活性和营养功效。但ＰＵＦＡ的化学性质不稳定,分子中的多个不饱和双键极易氧化,产生对人体有害的物质。传统的海产加工品咸鱼,在加工贮存过程中,受空气中氧、温度、水分食盐及鱼体中酶、血红色素等等诸多因素的影响,其脂肪极易酸败〔1〕,ＰＵＦＡ含量就会减少。本文测定了咸鱼脂肪中ＤＨＡ、ＥＰＡ含量及酸价、过氧化值,并探讨了它们之间的关系。材料和方法　(1)材料:咸鱼样品采自广西北海、合…     

鱼源性脂肪酸DHA和DPA与急性冠脉事件的风险

背景　营养在冠心病 (ＣＨＤ)的进展中起到了重要的作用。格陵兰岛爱斯基摩人ＣＨＤ的低患病率归结于他们饮食中特殊含量的脂肪酸。多吃鱼类食品或鱼源性脂肪酸在循环中或组织中含量高与ＣＨＤ的低风险在一些研究中 (而不是所有的 )相联系。以前的观察提示 ,摄入人体中的汞含量高可能增加心肌梗塞风险和加速动脉粥样硬化进程。鱼类汞含量高能抵消脂肪酸的保护性代谢影响。此研究的目的是考察血浆脂肪酸ｎ 3终末产物ＤＨＡ (一种六碳不饱和脂肪酸 )、ＤＰＡ (一种五碳不饱和脂肪酸 )、ＥＰＡ(二十碳不饱和脂肪酸 )和东芬兰岛中年男性急性冠脉…     

气相色谱法测定DHA、EPA

气相色谱法测定ＤＨＡ、ＥＰＡ朱晓琳沈小婉李光１任佳１（江苏省卫生防疫站，南京２１０００９）１南京市卫生防疫站二十六碳烯酸（ＤＨＡ）和二十五碳烯酸（ＥＰＡ）是多烯烃类化合物，一般以深海鱼体内含量较高。据报道ＤＨＡ对脑的生长发育有促进作用，特别对青少年开...     

基因多态性与接触多环芳烃的生物标志物

职业接触以苯并 [ａ]芘 (Ｂ[ａ]Ｐ)为代表的多环芳香烃类化合物 (ＰＡＨ)与肿瘤死亡率增加有关联。Ｂ[ａ]Ｐ在体内经各种代谢酶作用生成活化产物苯并 [ａ]芘环氧二醇 (ＢＰＤＥ) ,后者与ＤＮＡ或血清蛋白形成共价加合物 ,可作为接触ＰＡＨ的生物标志物。本研究探讨ＢＰＤＥ血清白蛋白加合物 (ＢＰＤＥ ＳＡ)在Ｂ[ａ]Ｐ接触者与对照组的差别是否与各种酶基因多态性的关联。研究对象为接触ＰＡＨ的 1 2 4名男性工人 ,不接触ＰＡＨ的 31名男性为对照组。调查问卷收集个体资料 ,包括累积吸烟量等。酸水解血清白蛋白 (ＳＡ)后用气相色谱 负离子…     

不同渗透压溶液对小鼠附睾精子大头发生率的比较

从以往的生殖毒理实验中发现 ,在精子所有畸型种类中 ,大头型精子的发生率占有较高的比例。我们考虑大头型精子是否因在实验过程中 ,精子在体外受到一定浓度的氯化钠溶液影响的结果。为此 ,我们作了以下实验。材料与方法　 ( 1)动物选择与分组 :选用鼠龄 6～ 8周 ( 3 9～ 4 0ｇ)昆明健康小白鼠 (由中山医大动物实验研究所提供 )。将小鼠分高渗液组 ,等渗液组、低渗液组、ＨＥＰＥＳ液组 ,各组 10只小鼠。 ( 2 )试剂 :氯化钠、柠檬酸钠、ＨＥＰＥＳ、伊红。 ( 3 )制片过程 :脱椎方法处死小鼠 ,取双侧附睾头 ,附睾尾分别放入盛1ｍｌ等渗液、1…     

环氧乙烷四氢呋喃共聚醚对雄性小鼠生殖毒作用的研究

实验研究了环氧乙烷四氧呋喃共聚醚（ＰＴＥ）对雄性小鼠的生殖毒作用。结果表明：６５ｍｇ／ｋｇ剂量组，ＬＤＨ总活力及ＬＤＨ－Ｘ、ＳＤＨ、γ－ＧＴ活性、ＭＤＡ含量、血清睾丸酮水平均未见明显改变。剂量增加至１３０ｍｇ／ｋｇ时，在停止染毒后２４小时，仅ＬＤＨ－Ｘ的活性增高（Ｐ＜０．０５），剂量为２６０ｍｇ／ｋｇ组停止染毒后２４小时，ＬＤＨ－Ｘ活性增高（Ｐ＜０．０５），但ＳＤＨ活性降低（Ｐ＜０．０５），２周２     

摩托车尾气颗粒对人肝、肺细胞CYP1A1的诱导作用

摩托车尾气颗粒 (ＭＥＰ)含多环芳烃类物质 (ＰＡＨｓ)。这类物质在体内通过细胞色素Ｐ45 0 (ＣＹＰ)代谢活化。已有研究发现ＭＥＰ的有机浸出液诱导大鼠ＣＹＰ酶系活性增强。本研究用体外实验探讨ＭＥＰ对人ＣＹＰ1Ａ1的诱导作用。首先 ,用 0 5 μｍ石英纤维滤膜收集ＭＥＰ。用气相色谱 质谱 (ＧＣ ＭＳ)分析其有机溶剂 (二氯甲烷∶己烷 =1∶1 )浸出液化学成分。取人肝癌细胞株ＨｅｐＧ2和肺癌细胞株ＮＣＩ Ｈ32 2分别进行细胞培养 ,加入ＭＥＰ浸出液 (溶于ＤＭＳＯ中 ,终浓度小于 0 1 % )。收集细胞 ,离心 ,制备微粒体蛋白和细胞液。用…     

ω-3多烯脂肪酸在鸡蛋蛋黄中的积累研究

目的：研究ω－３多烯脂肪酸对鸡蛋蛋黄中ＥＰＡ、ＤＨＡ含量的影响。方法：以含鱼油１％～８％的饲料饲喂商用蛋鸡９周。结果：气相色谱分析测试结果显示,在１～４周内,鸡蛋蛋黄中ＥＰＡ含量有明显下降,而ＤＨＡ含量则上升１～４倍,其中尤以添加８％的鱼油组最为显著。在５～９周内,蛋黄中ＥＰＡ含量在较低浓度范围内波动,而ＤＨＡ则仍呈上升趋势。     

ELISA一步法与二步法及放免法对HBsAg检测结果分析

目前基层实验室检测ＨＢｓＡｇ大多都采用ＥＬＩＳＡ一步法 ,与二步法和放免法相比 ,虽然快速简便 ,但也有弊端 ,如高滴度ＨＢｓＡｇ阳性标本表现假阴性结果〔1,2〕。为了解实验中是否存在着这种现象 ,做了以下观察。材料与方法　 (1)用固相放免法检测ＨＢｓＡｇ强阳性 (Ｐ/Ｎ值 >30 )的血清 2 6 0份 ,ＨＢｓＡｇ弱阳性 (Ｐ/Ｎ值 <10 )的血清 2 0份。 (2 )上述标本用ＥＬＩＳＡ一步法和二步法作ＨＢｓＡｇ检测 ,结果根据其显色反应肉眼判断 : ～ 为强阳性 , ～ 为弱阳性 ,—为阴性。试剂由北京福瑞试剂有限公司提供。ＥＬＩＳ…     

应用CASIOfx-4500PA计算器计算LC_(50)的方法

研究杀虫药剂的毒杀作用、防治效果都需要做毒力测定。用普通计算器计算ＬＣ50 繁琐且易出错。利用ＣＡＳＩＯｆｘ 4 50 0ＰＡ计算器的多重语句功能 ,将计算公式编制程序输入计算器后 ,可长期反复使用。1计算程序Ｆｉｌｅｎａｍｅ(文件名称 ) :ＬＣ 50Ｌ1Ｄ =0 :Ｅ =0 :Ｈ =0 :Ｇ =0 :Ｉ =0Ｌ2ＬｂＩ 0Ｌ3 {Ｃ ,Ｎ ,Ｙ ,Ｗ }Ｌ4Ｘ =Ｌｏｇ(Ｃ)Ｌ5Ｄ =Ｎ Ｗ Ｄ :Ｅ =Ｎ Ｗ Ｘ Ｅ :Ｇ =Ｎ Ｗ Ｘ2 Ｇ :Ｈ =Ｎ Ｗ Ｙ Ｈ :Ｉ =Ｎ Ｗ Ｘ Ｙ ＩＬ6Ｊ=Ｅ/Ｄ :Ｋ =Ｈ/Ｄ :Ｍ =Ｈ -Ｊ Ｈ :Ｐ =Ｇ -Ｊ ＤＬ7Ｂ =Ｍ /ＰＬ8Ａ =Ｋ -Ｂ …     

吃鱼是否能降低冠心病危险

已知营养因素在冠心病 (ＣＨＤ)的发生过程中具有重要作用。据认为格陵兰爱斯基摩人的低ＣＨＤ发生率是由于他们的鱼 (含有某种独特的脂肪酸 )摄入量较高。但有关鱼摄入量与ＣＨＤ呈负相关关系的可信性的证据相互矛盾。发现高汞摄入与ＣＨＤ危险增加有关。那么 ,高汞摄入是否会削弱鱼体内脂肪酸的潜在保护作用呢 ?近期一项研究深入探讨了血清ｎ 3系脂肪酸二十二碳五烯酸 (ＤＰＡ)、二十二碳六烯酸 (ＤＨＡ)、二十碳五烯酸 (ＥＰＡ)与急性冠状动脉疾病危险之间的关系 ,并验证了发汞含量对这一关系的影响。资料来源于芬兰库奥皮奥缺血性心脏病…     

高压液相色谱纯化肾综合征出血热病毒血凝素及其性状分析

用吐温８０－乙醚（ＴＥ）法、蔗糖－丙酮（ＳＡ）法、丙酮－乙醚（ＡＥ）法分别从肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）感染的Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞培养和乳小白鼠脑组织中制备病毒血凝素（ＨＡＮ），定量对比证明其制备效果，结果无明显差异。粗制ＨＡＮ经高压液相色谱（ＥＰＬＣ）纯化，有４个洗脱峰，血凝活性物质存在于峰１。纯化ＨＡＮ在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中呈单一区带，分子量５６．６ＫＤ，ＨＡＮ相对含量７９．６％。纯化ＨＡＮ在蔗糖密度梯度液中有一条１．１５～１．１６ｇ／ｃｍ３的沉淀，粗制ＨＡＮ有３条沉淀。电镜观察纯化ＨＡＮ中为大小相等的球状颗粒。粗制ＨＡＮ的高密度沉淀中可见到病样颗粒。对几种常用消毒剂、氧化剂、去垢剂对ＨＡＮ的灭活作用做了实验对比观察。     

苯并（a）芘代谢产物诱发BALB／3T3细胞程序外DNA合成的研究

为了解苯并（ａ）芘（ＢａＰ）代谢产物对哺乳动物细胞ＤＮＡ的损伤作用，本实验采用单标记和双标记法，分别检测４种苯并（ａ）芘代谢产物（ａｎｔｉ－ＢＰＤＥ，ｓｙｎ－ＢＰＤＥ，３－ＯＨ－ＢＰ和９－ＯＨ－ＢＰ）对ＢＡＬＢ／３Ｔ３细胞ＤＮＡ合成和程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）的影响。结果表明：ａｎｔｉ－ＢＰＤＥ、ｓｙｎ－ＢＰＤＥ、Ｅ－ＯＨ－ＢＰ和９－ＯＨ－ＢＰ均在不同程度上使ＢＡＬＢ／３Ｔ３细胞ＤＮＡ合成增加；但     

E-选择素和最迟激活抗原-4介导造血液细胞粘附于骨髓内皮细胞

ＣＤ34+造血祖细胞 (ＨＰＧｓ)粘附到窦状隙内皮细胞在ＣＤ34+ＨＰＣｓ移植到骨髓细胞 (ＢＭ )寄居发挥一个关键作用。作者研究了从人类ＢＭ或外周血细胞(ＰＢ)获得的纯化ＣＤ34+ＨＰＣｓ相互反应时的各种粘附分子的作用。结果是 :ＰＢＣＤ34+细胞粘附到人ＢＭ内皮细胞 (ＨＢＭＥＣｓ)仅发生于用白介素 (ＩＬ) - 1预刺激内皮细胞之后。在加入佛波酯 -肉豆寇乙酸酯(ＰＭＡ)后 ,明显地增强此种粘附。ＰＢＣＤ34+细胞粘附于ＩＬ - β预先兴奋的ＨＢＭＥＣｓ可被抗Ｅ -选择素单抗 (ｍＡｂｓ)和ＰＢＣＤ34细胞神经酰胺酶处理所阻断。Ｅ-选择素介…     

多种肿瘤标记物用于甲状腺癌的诊断

多种肿瘤标记物用甲状腺癌测定的资料尚不多见，我们选择三种分布较广的肿瘤标记物ＣＥＡ、Ｆｅ－Ｐ、ＬＤＨ．Ｒ对１１０甲状腺癌患者进行联合连续测定，测定ＣＥＡ、Ｆｅ－Ｐ用ＥＬＩＳＡ法，ＬＤＨ．Ｒ用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，结果其阳性率ＣＥＡ５５．４％，Ｆｅ－Ｐ５０９％，ＬＤＨ．Ｒ４６．３％，综合阳性率８０８９％，ＬＤＨ中３４％患者血清电泳图谱中出现一条异常区带（ＬＤＨ－Ｘ），经有效治疗，ＣＥＡ、Ｆｅ－Ｐ下降，ＬＤＨ．Ｒ回升。本实验经ＣＥＡ、Ｆｅ－Ｐ、ＬＤＨ．Ｒ联合测定，提高其检测率，能提示预后，可作为β２微球蛋白甲状腺癌血清学协同的诊断，提高其诊断率     

补充硒和维生素E对大鼠心肌腺苷酸含量及抗氧化损伤的研究

研究低硒（Ｓｅ）低维生素Ｅ（ＶＥ）膳食及补充Ｓｅ和ＶＥ后对大鼠心肌腺苷酸含量和氧化损伤的关系。方法：采用高效液相和生化方法分别测定心肌腺苷酸和ＭＤＡ含量、ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ活性。结果：与补充Ｓｅ和／或ＶＥ饮食大鼠相比,低Ｓｅ低ＶＥ饮食大鼠心肌ＡＭＰ、ＡＤＰ含量无明显差异,而ＡＴＰ含量明显降低,ＭＤＡ含量增加,ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ活性降低,表明Ｓｅ和ＶＥ影响ＡＴＰ含量与其抗氧化作用有关,而其中以联合补充Ｓｅ和ＶＥ效果最佳。结论：Ｓｅ和ＶＥ缺乏可使心肌呈现明显的氧化损伤,补充Ｓｅ和ＶＥ有助于抗氧化损伤,使ＡＴＰ生成增加。     

邻苯二甲酸二（２ 乙基己基）酯对小鼠肾脏损害及氧化应激机制的研究

摘要：目的　研究邻苯二甲酸二（２ 乙基己基） 酯（ＤＥＨＰ） 的肾脏毒性及氧化应激损伤作用机制;探讨
相关影响因素。方法　建立小鼠ＤＥＨＰ肾损伤模型：选择昆明４ 周龄小鼠６０ 只,体重（２０±２）ｇ,雌雄
各半,随机分为６ 组, 每组１０ 只。Ｏ 组为空白对照组,Ａ 组给予ＤＥＨＰ７５０ ｍｇ／ｋｇ,Ｂ 组给予ＤＥＨＰ
１５００ｍｇ／ｋｇ ,Ｃ 组给予３０００ ｍｇ／ｋｇＤＥＨＰ＋１０％ 维生素Ｃ,Ｄ 组给予ＤＥＨＰ３０００ ｍｇ／ｋｇ,Ｅ 组给予
３０００ｍｇ／ｋｇＤＥＨＰ＋０．５％ 尼古丁;经食饵和饮水连续自然给食染毒,于染毒第４周末处死。测量小鼠肾
脏和体质量的变化,检测不同ＤＥＨＰ染毒剂量组小鼠的血液、肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）、过氧
化氢（Ｈ２Ｏ２）,丙二醛（ＭＤＡ）等变化。将实验数据进行单因素方差分析（ＡＮＯＶＡ）。结果　随着ＤＥＨＰ
染毒剂量的增加,小鼠体质量逐渐降低（犘＜０．０５）,高剂量组肾脏脏器系数呈现增加趋势。ＤＥＨＰ 高剂量
组ＨＥ 染色可见肾脏组织出现以明显充血和水肿为主的损伤,尼古丁干扰组最为严重。维生素Ｃ 呈现良好
的肾脏保护作用。氧化应激相关物质的改变：血液中的ＧＰＸ 活性由对照组的（４７１．３２±１２０．２４ ）Ｕ／ｍｌ降
低至Ｅ 组的（２０８．７５±５２．９２）Ｕ／ｍｌ （犘＜０．０５）,且有剂量 反应关系;肾脏中ＧＰＸ 活性降低（犘＜０．０５）,
同时肾组织中Ｈ２Ｏ２ 含量由（４０７．７４±３２８．８３）ｍｍｏｌ／ｍｇ蛋白增加到（１６７４．９８±３７６．０７）ｍｍｏｌ／ｍｇ蛋白
（犘＜０．０５）,血液中Ｈ２Ｏ２ 含量也随着ＤＥＨＰ 的剂量增加而增加（犘＜０．０５）;肾组织中ＭＤＡ 含量增加（犘
＜０．０５）;同时维生素Ｃ 的保护作用和尼古丁的协同作用也有体现。结论　ＤＥＨＰ 具有小鼠肾脏毒性,其
作用机制可能与氧化应激有关,抗氧化剂维生素Ｃ 对ＤＥＨＰ所致肾脏损伤具有抑制作用。
关键词：邻苯二甲酸二（２ 乙基己基）酯（ＤＥＨＰ）;肾脏毒性;氧化应激
中图分类号：Ｒ１２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０１ ０００８ ０５