6岁以下儿童急性下呼吸道感染的病毒病原及临床研究

目的　了解北京地区 6岁以下儿童中急性下呼吸道感染 (ALRI)患儿的病毒感染状况 ;探讨人类偏肺病毒 (hMPV)感染在儿童ALRI中的作用及所致支气管肺炎的临床特征。方法　 (1)采集 2 0 0 1年 2月至 2 0 0 3年 3月就诊于首都儿科研究所 4 4 6例年龄 1个月至 5岁的ALRI住院患儿的鼻咽分泌物 ,同时应用间接免疫荧光 (IFA)及病毒分离方法进行人类呼吸道合胞病毒 (hRSV)、流感病毒 (甲、乙型 )、副流感病毒 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 )及腺病毒等 7种常见呼吸道病毒的病原检测。 (2 )采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 2 0 0 2年 11月至 2 0 0 3年 3月住我院内科的ALRI患儿中经 7种呼吸道常见病毒病原检测阴性的 2 16份鼻咽洗液 ,进行了hMPV基因检测 ,并分析hMPV感染患儿的临床资料。结果　 (1) 4 4 6例患儿中 7种常见呼吸道病毒总阳性例数为 2 0 9例 (46 86 % ) ,hRSV阳性者最多为 16 3例 (36 5 5 % )。 (2 )在 2 16份上述 7种呼吸道病原检测阴性的标本中 6 9份测到hMPV阳性扩增产物 (31 9% ) ,占同期送检标本的 19 17%。结论　 (1)hRSV是北京地区冬春季节婴幼儿ALRI的主要病原。 (2 )2 0 0 2年 11月至 2 0 0 3年 3月我院ALRI住院患儿中有 19 17%与hMPV感染有关     

儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析

目的了解儿童急性下呼吸道感染病毒病原学特点。方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年9月—2009年9月住院的5480例0～12岁下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行8种病毒检测。结果5480例患儿中,2710例检出至少1种病毒,总检出率49.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)检出最多,为1386例,占51.1%,其余,依次是偏肺病毒(hMPV)513例(18.9%),副流感病毒Ⅲ(PIVⅢ)338例(12.5%),腺病毒(ADV)192例(7.1%);流感病毒A(IFA)128例(4.7%),流感病毒B(IFB)79例(2.9%),副流感病毒Ⅰ(PIVⅠ)41例(1.5%),副流感病毒Ⅱ(PIVⅡ)33例(1.2%)。6个月以下年龄组阳性率最高,为43.5%。RSV、hMPV季节性较明显,主要集中在冬春季节(11月至次年4月)。肺炎、毛细支气管炎、支气管炎(伴喘息)、支气管炎(不伴喘息)和哮喘患儿病毒阳性率分别为47.4%、63.6%、50.5%、30.1%和43.5%。结论病毒是儿童急性下呼吸道感染的主要病原。发病年龄主要在婴幼儿,其中RSV和hMPV最常见。     

苏州地区急性呼吸道感染住院患儿病毒病原学分析

目的：了解苏州地区急性呼吸道感染（ARI）住院患儿的病毒病原学情况。方法：采集1 668例7岁以下ARI住院患儿鼻咽分泌物,直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒（RSV）,流感病毒A,B型（IV A,B）,副流感病毒1,2,3型（PIV 1,2,3）及腺病毒A(ADA)等7种常见呼吸道病毒,用RT-PCR法检测人类偏肺病毒（hMPV）N基因。结果：① 1 668例患儿中,病毒检测阳性597例（35.8%）。单项病毒感染561例（33.6%）,其中7种常见呼吸道病毒检出率为23.1%,以RSV为主（17.6%）,好发于冬春季,主要见于1岁以下婴幼儿;② hMPV阳性率为10.6%,3~5月份为检出高峰期。③ 36例混合感染中,22例为RSV合并hMPV感染,主要见于1岁以下婴幼儿。结论：RSV是该地区ARI的主要病毒病原,RSV感染好发于冬春季,多见于1岁以下婴幼儿,hMPV是3~5月份ARI患儿的主要病毒病原,混合感染多见于1岁以下婴幼儿。［中国当代儿科杂志,2009,11（7）：529-531］     

2006-2007年苏州地区儿童呼吸道人类偏肺病毒感染的流行和临床特征

目的 了解苏州地区儿童人类偏肺病毒(hMPV)呼吸道感染的流行情况及临床特征.方法 收集2006年1月-2007年12月我院呼吸科4702例急性呼吸道感染住院患儿的呼吸道分泌物,用逆转录-聚合酶链反应法检测hMPV N基因,随机挑选部分阳性PCR扩增产物进行核苷酸测定并将所测序列在GenBank中进行比较分析.结果 4702例标本中,检测到376份RT-PCR阳性扩增产物,阳性率为8%;2006,2007年hMPV检测阳性率分别为8.4%、7.6%.hMPV检测阳性率分别在1、2、3月和11、12月呈现高峰,hMPV感染患儿的平均年龄为22.56个月,376例hMPV感染患儿中临床诊断为上呼吸道感染12例(3.2%);喉炎8例(2.1%);毛细支气管炎102例(27.1%);肺炎210例(55.9%);哮喘急性发作44例(11.7%).20份hMPV N基因部分核苷酸片断与GenBank中hMPVN基因序列同源性为99%～100%.结论 (1)苏州地区部分儿童的呼吸道感染与hMPV有关.(2)全年均存在hMPV感染,流行高峰在冬春季.(3)hMPV感染的临床特征无特异性.     

儿童呼吸道人类偏肺病毒呼吸道合胞病毒和流感病毒感染的临床特征比较

目的 了解人类偏肺病毒(hMPV)在苏州地区儿童呼吸道感粢中的感染情况;比较hMPV、呼吸道合胞病毒(RSV)和流感病毒(Inf)引起呼吸道感染的临床特征.方法 选取2005年11月至2006年10月苏州大学附属儿童医院呼吸科1932例急性呼吸道感染住院患儿.采用无茵负压吸引法采集新鲜痰液.直接免疫荧光法检测RSV,腺病毒,Inf A、B型,副流感病毒1、2、3型等7种常见呼吸道病毒;同时用逆转录.聚合酶链反应法(RTPCR)检测hMPV N基因,随机挑选部分阳性PCR扩增产物进行核苷酸测定并将所测序列进行比较分析.结果 1932例标本中hMPV阳性例数为128例(6.6%),其中hMPV合并其他呼吸道病毒感染5例(3.9%);hMPV检测阳性率在冬季呈现高峰;hMPV感染患儿的平均年龄为22.17月龄,较RSV和Inf感染患儿大;hMPV感染者临床特征与RSV和Inf感染相似,喘息在RSV和hMPV感染患儿中更为多见,发热则更多见于hMPV和Inf感染患儿.RSV感染后所致的首要疾病是毛细支气管炎,hMPV和Inf感染后所致的首要疾病是肺炎.单纯hMPV与hMPV合并其他呼吸道病毒感染临床表现差异无统计学意义(P＞0.05).结论 苏州地区部分儿童的呼吸道感染与hMPV有关;hMPV感染临床特征无特异性;hMPV在合并其他呼吸道病毒感染时并不加重病情.     

重庆地区冬季小儿下呼吸道感染病毒病原学研究

目的了解重庆地区冬季小儿急性下呼吸道感染(ALRI)中病毒病原学构成,探讨其鼻咽分泌物病毒抗原与血清ELISA病毒抗体检测对ALRI的临床诊断价值。方法对2813例ALRI住院患儿中875例取鼻咽分泌物标本免疫荧光检测7种呼吸道病毒抗原(RSV、ADV、IA、IB、PIV1、PIV2、PIV3),1938例用ELISA方法检测3种病毒(RSV、ADV、CMV)血清IgM或IgG抗体。结果875例病毒抗原检测阳性358份(40.91%),其中RSV阳性318份(36.34%),PIV3阳性32份(3.66%),ADV为6份(0.69%),IA为2份(0.23%),IB、PIV1、PIV2均为0份;1938例血清ELISA病毒抗体检测阳性824份(42.52%),RSV_IgM阳性139份(7.17%),ADV_IgM阳性82份(4.23%),CMV_IgM阳性289份(14.91%),CMV_IgG阳性679份(35.04%)。结论重庆地区冬季小儿ALRI中病毒感染率高,抗原与抗体阳性检出率分别为40.91%与42.52%,抗原检测显示RSV感染居第1位。病毒抗原免疫荧光检测与临床诊断符合率高,对临床病原诊断更有意义。     

2003-2007年重庆地区急性下呼吸道感染患儿病毒监测情况

目的 分析重庆地区急性下呼吸道感染(ALRI)患儿2003-2007年病毒病原学构成及变化情况,探讨鼻咽分泌物(NPS)病毒抗原检测与血清病毒抗体检测对ALRI患儿病原学诊断的价值.方法 2003年4月-2007年10月从2 529例ALRI住院患儿吸取了 NPS标本,采刚免疫荧光法检测7种常见的呼吸道病毒抗原:呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、A型流感病毒(IA)、B型流感病毒(IB)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、PIV2、PIV3),采用EIJSA方法检测55 887例ADV病毒血清IgM抗体,其中45 159例采用同样方法检测了 RSV病毒血清IgM抗体.结果 2 529例呼吸道病毒抗原检测阳性778份(30.76%).其中RSV阳性668份(85.86%),PIV3阳性75份(9.64%),IA阳性20份(2.57%).ADV阳性15份(1.93%),PIV1阳性仪1份(0.13%),且与RSV协同阳性.病毒血清RSV-IgM检测各年阳性率为0.9%～15.2%,ADV-IgM检测各年阳性率为0.6%～10.6%.RSV感染主要在冬春季节好发.结论 重庆地区ALRI中病毒感染仍然是小儿ALBI的最常见病原,且仍以BSV感染居首,有明显季节性,以冬春季节为著.2007年1-10月均能检测到RSV病原,阳性率在2月可达50%,提示2007年可能是RSV流行的高峰年.而PIV3、IA、ADV及PIV1感染率较低,IB及PIV2近5 a来均未发现.ILSV病毒抗原免疫荧光检测既快速又准确,与临床诊断较符合,优于抗体检测.实用儿科临床杂志,2009,24(10):768-770     

重庆地区0～6岁儿童人类偏肺病毒感染状况调查

目的检测重庆地区0～6岁儿童人类偏肺病毒(hMPV)特异性IgG抗体,了解其感染状况。方法由于hMPV与呼吸道合胞病毒(RSV)同属副黏病毒科,需首先明确hMPV与RSV有否交叉抗原。故采用RSV抗原吸附血清标本中可能存在的RSV抗体,用酶联免疫吸附(ELISA)法比较未经吸附和已吸附RSV抗体的血清与RSV或hMPV感染细胞裂解液的反应情况;制备抗hMPV兔血清,用免疫印迹法检测该血清与hMPV和RSV反应性,进一步排除RSV和hMPV间存在交叉抗原的可能性。然后用hMPV感染的Vero-E6细胞裂解液为抗原,用ELISA法检测重庆医大附属儿童医院的325份0～6岁不同年龄非呼吸道感染患儿和正常儿童的血清标本中hMPVIgG抗体。结果经RSV抗原吸附的血清与RSV抗原反应性明显降低,同一血清与hMPV的反应性却无明显改变;免疫印迹法证实,用hMPV抗原免疫家兔获得的抗hMPV抗血清仅与hMPV抗原反应,而不与RSV抗原反应,提示RSV与hMPV间并无交叉抗原性。用ELISA法检测不同年龄组儿童血清中hMPVIgG抗体阳性率分别为0～5月龄74·5%,6～11月龄64·0%,12～23月龄、24～35月龄、3～6岁组分别为72·7%、90·3%、93·1%。在各年龄组中RSV与hMPV阳性率非常相近。结论hMPV是重庆地区0～6岁儿童常见的呼吸道病原,既往感染率与RSV相似,至6岁时儿童几乎均经历过hMPV感染。     

北京地区2005年12月～2006年4月下呼吸道感染住院患儿病毒病原检测分析

目的探讨病毒病原在北京地区下呼吸道感染住院患儿中感染特点,为儿童急性下呼吸道感染的诊断和治疗提供参考。方法连续采集2005年12月～2006年4月北京儿童医院因急性下呼吸道感染住院患儿的鼻咽分泌物。采用间接免疫荧光法检测7种呼吸道病毒抗原,包括呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒(IV)A、B型、副流感病毒(PIV)1、2、3型及腺病毒(ADV)。结果共935例患儿采集了鼻咽分泌物标本。男597例,女338例;年龄1d～6岁,平均7.5个月。935例标本中检出阳性516例(55.2%)。RSV是各年龄组下呼吸道感染的主要病毒病原,所占比例随年龄增加而下降;IV和PIV所占病例随年龄增加而增加,ADV只在3岁以下儿童病例中检出,所占比例为0.6%～6.2%。结论病毒病原是2005年12月～2006年4月北京地区引起儿童下呼吸道感染的主要病原,以RSV为主,其次是IV和PIV。     

温州地区急性下呼吸道感染衣原体抗原检测的意义

目的检测及分析温州地区儿童急性下呼吸道感染性疾病中衣原体感染情况。方法本院2003年11月-2006年6月因急性下呼吸道感染而住院的儿童共708例,采用直接免疫荧光法检测其鼻咽部分泌物中的衣原体抗原,比较不同性别、年龄组、临床疾病诊断及月份间的阳性检出率,分析检测结果。结果检测出衣原体抗原阳性52例（7.3%）。阳性检出率男性[6.9%（37/535例）]与女性[8.7%（15/173例）]比较无显著性差异（χ^2=0.59 P〉0.05）;不同年龄组间阳性检出率以0.5-1.0岁组最高,1-3岁组最低;毛细支气管炎、肺炎、支气管炎患儿阳性检出率分别为4.3%、8.6%、6.5%;各月份阳性检出率以8月份最高,2月份和7月份最低。不同临床疾病诊断、年龄组及月份间的阳性检出率差异均无显著性（Pa〉0.05）。结论温州地区衣原体感染呈散发,无明显的集中流行特点,在引起儿童急性下呼吸道感染性疾病中占一定的比例。     

重庆地区急性下呼吸道感染住院患儿人偏肺病毒感染的流行病学研究

目的了解重庆地区急性下呼吸道感染(ALRTI)住院患儿人偏肺病毒(hMPV)感染的流行病学特点和临床特征。方法收集2006年4月至2008年3月重庆医科大学附属儿童医院呼吸科病房每周一、三、五因ALRTI住院患儿住院当日白天的鼻咽吸取物(NPA),采用荧光定量PCR方法检测hMPV基因组RNA,阳性标本采用传统PCR方法扩增F基因,进一步确定是否存在hMPV感染,扩增G基因用于遗传进化分析。同时采用传统PCR方法检测呼吸道合胞病毒(RSV)和冠状病毒NL-63(HCoV-NL63),直接免疫荧光法(DFA)检测流感病毒A、B亚型,副流感病毒1、2、3型和腺病毒。分析hMPV感染的流行病学特点和临床特征。结果研究期间共收集878份标本,占同期ALRTI入院病例的13.9%(878/6296例)。hMPV阳性227/878例(25.9%)。男∶女为1.9∶1。hMPV阳性227例中,6个月119例(52.4%),～2岁72例(31.7%),～6岁34例(15.0%),6岁2例(0.9%)。hMPV流行特点为全年散发,好发季节为冬春季。hMPV阳性率2006年4月至2007年3月为18.5%(72/390例),2007年4月至2008年3月为31.8%(155/488例)。227例hMPV阳性患儿临床诊断以肺炎(148例,65.2%)和毛细支气管炎(65例,28.6%)为主。hMPV可与常见呼吸道病毒协同感染,其中与RSV协同感染率最高(41.9%,95/227例)。遗传进化分析显示,研究期间重庆地区hMPVA和B基因型均流行,以A2亚型为优势株。结论 hMPV是重庆地区ALRTI住院患儿重要的呼吸道病毒病原之一,以6个月婴儿为主要感染人群。     

Outbreak of human metapneumovirus infection in norwegian children

INTRODUCTION: Human metapneumovirus (hMPV) was recently discovered in children with acute respiratory tract infection. We have studied the occurrence of hMPV and report clinical findings of 50 hMPV-infected children who were hospitalized during an outbreak in Norway. METHODS AND POPULATION: During 5 months from November 15, 2002 to April 14, 2003 we collected nasopharyngeal aspirate specimens from 236 children admitted because of respiratory tract infection (RTI). Samples were analyzed for influenza virus A/B, parainfluenza viruses 1, 2 and 3 and respiratory syncytial virus by direct immunofluorescence assays and cell culture. Rhinovirus, adenovirus and hMPV were identified by polymerase chain reaction. RESULTS: Human metapneumovirus was identified in 50 of 236 children (21%). Most (41 of 50) hMPV-infected children were hospitalized between November 15 and January 15, and during these 2 months hMPV was the most common isolate (41 of 72 isolates; 57%). Respiratory syncytial virus was identified in 36 children (15%), among whom 34 were admitted after the hMPV outbreak.The median age of hMPV-infected children was 12 months (range, 1 to 115 months), and one-half of the children had an underlying chronic disease. The most common symptoms were fever (86%), cough (90%), dyspnea (80%), wheezing (56%), rhinorrhea (44%), anorexia (48%) and vomiting (36%). Eight (16%) had an upper respiratory tract infection (rhinopharyngitis, n = 6; laryngitis, n = 2), 24 (48%) had bronchiolitis and 17 (34%) had pneumonia. Two-thirds with a lower RTI also had signs of upper RTI. Fourteen (28%) children needed supplemental oxygen, 1 was treated with continuous positive airway pressure and 2 were ventilated mechanically. CONCLUSION: Human metapneumovirus was the most common virus isolate during the winter season 2002 to 2003 in children hospitalized for respiratory tract infection. Upper respiratory tract infections and mild to severe bronchiolitis were most common, but a relatively high proportion of hospitalized children developed severe pneumonia.     

Clinical findings and unusual epidemiologic characteristics of human metapneumovirus infections in children in the region of Basel, Switzerland

Human metapneumovirus (hMPV) worldwide causes respiratory tract infections with features similar to those of RSV infection. We describe features of hMPV infections in children and compare some of the characteristics with those of RSV infections. From October 2004 to February 2006, 75 patients, 34 hospitalized and 41 outpatients, were diagnosed with hMPV infections by multiplex PCR applied to nasopharyngeal specimens. While hMPV was found rarely in the early phase of the study, a significant increase occurred in the second winter of the study period. Patients with hMPV infections were older than those with RSV infection; clinical characteristics were similar as was the rate of serious disease among hospitalized patients (intensive care treatment: 18% versus 8%). In conclusion, hMPV leads to endemic and epidemic respiratory disease with features similar to those of RSV and should be considered in the differential diagnosis of upper and lower respiratory tract disease.     

重庆地区急性呼吸道感染患儿鼻咽吸取物标本中人偏肺病毒的分离研究

目的分离新近发现的儿童呼吸道病毒病原——人偏肺病毒（hMPV）,并分析其感染的临床表现。方法选取重庆医科大学儿童医院2004年12月至2005年7月因呼吸道感染住院的患儿,无菌采集鼻咽吸取物。离心后细胞沉淀用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A／B、副流感病毒1、2、3型等常见呼吸道病毒病原。上清接种于Veto-E6和LLC-MK2细胞,进行hMPV分离,出现细胞病变者,扩增hMPV N、F基因,F基因扩增产物序列递交GenBank。收集并分析hMPV感染患儿的临床资料。结果收集的86份鼻咽吸取物中,有6份接种Veto-E6和LLC-MK2细胞后出现细胞病变,且用RT-PCR成功扩增出hMPV N、F基因片段,证实hMPV分离成功。在6例阳性标本中,2例收集于冬季,2例春季,2例夏季。6位患儿年龄都小于2岁,诊断为支气管肺炎（2／6）、毛细支气管炎（2／6）、婴幼儿哮喘（1／6）和上呼吸道感染（1／6）。副流感病毒3和腺病毒可为协同感染病毒病原。结论首次在中国内地成功分离获得6株hMPV,从活病毒水平证实hMPV是导致中国儿童下呼吸道感染的病毒病原,hMPV感染的临床表现与呼吸道合胞病毒感染相似。采用病毒分离技术,hMPV在呼吸道感染患儿中的检出率约为7％（6／86）。     

Human metapneumovirus infections cause similar symptoms and clinical severity as respiratory syncytial virus infections

Human metapneumovirus (hMPV) is a recently discovered pathogen in respiratory tract infection. The published literature suggests milder illness severity in hMPV compared with respiratory syncytial virus (RSV) infection. In two consecutive seasons, 637 nasopharyngeal aspirates from pediatric patients were tested by hMPV polymerase chain reaction, and risk factors and clinical and laboratory items were analyzed. The hMPV patients were compared with hMPV-negative but RSV-positive patients by matched pair analysis. HMPV was detected in 17.9% of all samples. In total, 88 hMPV-infected patients with complete datasets were considered. More than half of all hMPV patients were older than 12 months, 45.5% had at least one risk factor for a severe course of viral respiratory tract infection, and 27.3% were born prematurely, 15.9% with a birth weight <1,500 g. At least one other virus was also detected in 39 patients (44.3%; RSV in 29.5%). Coinfection did not result in greater severity of illness. On matched pair analysis (hMPV-positive/RSV-negative vs. hMPV-negative/RSV-positive), the epidemiological and clinical features of hMPV infection were similar to those of RSV infection, as in the hMPV group higher proportions of patients with hypoxemia on admission (33% vs. 21%) and of intensive care treatment (20.8% vs. 10.4%) were observed. More hMPV patients showed lobar infiltrates in radiological chest examination. In 60% of all hMPV infections, the attending physicians prescribed antimicrobial chemotherapy. We conclude that in hospitalized children, hMPV infection is as serious as RSV infection and therefore deserves the same attention. Virologic diagnosis from respiratory secretions is mandatory because clinical, laboratory, and radiological signs cannot sufficiently discriminate between viral and bacterial respiratory tract infection in infants and children.The first two authors contributed equally to this work.