单克隆抗体对人生长激素及其相关蛋白的分析

按结构可将人垂体激素分为蛋白类,糖蛋白类和肽类。蛋白类为单一多肽链,分子量2万左右,包括生长激素(hGH),绒毛膜生长促乳素(hCS)和催乳激素(hPRL)。对这三种激素的氨基酸序列分析表明,它们起源于一个共同远祖序列。hCS和hGH的氨基酸序列80％以上相同,彼此有较强的交叉反应,hCS与hPRL则无共同抗原性。hGH促生长作用     

生长激素基因

生长激素基因与人绒毛膜生长催乳素基因密切相关,由5个同源性程度很高的基因共同组成基因簇,位于人第17号染色体长臂的q22—24带上。其中只有生长激素结构基因(GH—N)能在垂体中表达,表达产物90%为有活性的22kDa hGH,10%为20kDa hGH。GH—N基因的启动子是5′端上游的前289bp,它含有GHF-1因子。反式作用因子、甲状腺素和糖皮质激素的结合位点,它们控制着GH—N基因表达的组织特异性和产量。GH—N基因的缺失导致了单纯性生长激素缺乏症I_A型的发生,这类患者可用Southern印迹法和PCR方法进行检测。     

不同生长激素激发试验诊断垂体性侏儒症的临床价值比较

生长激素(Human growth hormone, hGH)缺乏所致的垂体性侏儒症是儿童矮小的重要原因之一,而通过检测药物性或生理性激发试验后的hGH水平,判断垂体hGH储备功能是诊断hGH分泌是否异常的可靠实验室方法,但目前临床上使用的激发试验方法较多,而且影响hGH基础值和反应值的因素也颇多,各种试验都存在一定的假阳性反应(指GH分泌低下).为此,本文对120例临床疑诊hGH分泌缺乏的身材矮小儿童随机分组分别进行左旋多巴、胰岛素、运动、深睡眠等激发试验,采用放射免疫分析法检测血清hGH,并加以比较,现将结果报道如下.     

生长激素受体与Laron型侏儒症

生长激素受体为介导生长激素作用的关键大分子，近来这方面的研究进展较快。本文概述了它的组织学定位、调节、结构和基因结构以及与Ｌａｒｏｎ型侏儒症的关系。     

遗传性(家族性)生长激素单独缺乏症的基因分析

遗传性(家族性)生长激素单独缺乏症(IGHD)是垂体性侏儒症的原因之一。IGHD根据其遗传方式分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型3种。其中,Ⅰ型属常染色体隐性遗传,它分为ⅠA和ⅠB两型。PhillipsⅢ等(1981年)把纯化的人生长激素的cDNA作     

生长激素受体与Laron型件儒症

生长激素受体为介导生长激素作用的关键大分子，近来方面的研究进展较快，本文概述了它的组织不定位，节约和基因结构以及与Ｌａｒｏｎ型侏儒症的关系。     

人血清生长激素放射免疫分析的临床应用（文献综述）

人血清生长激素(huraan growth hormone，hGH)的放射免疫分析可以直接准确侧定人血清或血浆中生长激素(GH)的浓度，是研究生理情况下垂体GH分泌的一项可靠的方法。在临床上，此项测定对hGH分泌异常的疾病如肢端肥大症、巨人症，垂体性侏儒和垂体功能低下等疾患的早期诊断有重要价值。     

从大肠杆菌中纯化的人体生长激素具有生物活性

人体生长激素(HGH)是一种含有191个氨基酸,分子量约为22,000道尔顿的蛋白质。除了治疗垂体机能减退性侏儒症之外,HGH对于治疗骨折、烧伤和出血性溃疡等都有一定的作用。从前.HGH通常都来源于人体尸体,得到的产品也并非均一性     

人血清生长激素IRMA的临床意义

人生长激素(hGH)对机体生长及发育起着重要作用。尽管正常人血清hGH分泌呈脉冲式,可高至100μg/L,低到RIA不能测出,但是,借助一些激发试验、抑制试验及基础值的测定,也有助于生长激素分泌紊乱的诊断。现行血清hGH大都以多抗建立的RIA测定,与其他激素,如人泌乳素(hPRL)、胎盘泌乳素(hPL)不免有较大的交叉反应,灵敏度也只有0.2μg/L左右。最近,我们以两株高特异性、高亲和力的hGH单克隆抗体建立了血清hGH免疫放射测定法(IRMA),其灵敏度高达10ng/L。本文以本法测定了多种疾病状态和正常人的血清hGH基础值,以进一步考察GH-IRMA测定法的临床应用潜能。     

双抗体夹心ELISA检测人血清生长激素

本文用两株高亲和力,特异性好的hGH单克隆抗体(McAb),建立了高灵敏度的人血清生长激素(GH)ELISA双抗体夹心法。方法灵敏度为0.05～0.1μg/L,批内、批间变异系数分别为6.1％,11.4％。稀释度试验线性关系好(r=0.99),且通过原点。本法与放射免疫分析法(RIA)结果之间相关性好(r=0.92),与其他垂体激素皆无交叉反应。用本法测定了20名正常儿童,18名正常成年人,10例肢端肥大症,8例GH完全缺乏性侏儒症患者血清hGH基础值,说明本法灵敏,方便,能够满足临床要求。     

单克隆抗体亲和层析一步纯化重组人生长激素

单克隆抗体亲和层析技术可用来从体液、组织抽提液、细胞培养液中,特别是从基因工程菌体破碎液等复杂组成物中分离出微量蛋白质和多肽.由于其特异性高,操作简便而迅速,在高价值蛋白质和治疗用多肽的下游处理过程中,作为一种良好的分离纯化工具,有较广泛的适用性.本文运用该技术从人生长激素(hGH)基因工程菌发酵破碎液中一步分离制备高纯度并具有生物活性的重组hGH.     

生长激素基因

生长激素基因与人绒毛膜生长催乳素基因密切相关，由５个同源性程度很高的基因共同组成基因簇，位于人第１７号染色体长臂的ｑ２２－２４带上，其中只有生长激素结构基因（ＧＨ－Ｎ）能在垂体中表达，表达产物９０％为有活性的２２ｋＤａ ｈＧＨ，１０％为２０ｋＤａ ｈＧＨ。ＧＨ－Ｎ基因的启动子是５＇端上游的前２８９ｂｐ，它含有ＧＨＦ－１因子。反式作用因子、甲状腺素和糖皮质激素的结合位点，它们控制着ＧＨ－Ｎ基因表达的     

生长激素测定对垂体性侏儒症的诊断价值

垂体性侏儒是小儿矮身材的病因之一，生长激素（ｈＧＨ）测定是垂体性侏儒症的重要诊断手段。正常儿童安静时血清 ｈＧＨ很低（０～ ３ｎｇ／ ｍｌ），因此单次测定血清 ｈＧＨ无助于ｈＧＨ缺乏的诊断，要判断垂体分泌ｈＧＨ是否正常需要采取一定的检测手段。为了了解ｈＧＨ的测定在垂体株儒症中的诊断价值，我们作了如下研究。 资料和方法 一、对象：正常对照组：３０例，生长发育正常的健康儿童，年龄４～１４岁；非生长激素缺乏性矮身材组：３３例，ｈＧＨ分泌正常，身高低于同年龄同性别健康儿童两个标准差，年龄３～１４岁；垂体性侏儒…     

两种不同剂型基因重组人生长激素治疗生长激素缺乏性矮小的临床研究

目的观察基因重组人生长激素（rhGH）水剂与粉剂治疗生长激素缺乏性矮小的效果。方法将36例生长激素缺乏性矮小儿童随机分为A、B两组,分别采用rhGH水剂与粉剂治疗6个月,比较其治疗前后的年生长速率和青春期发育情况,及不良反应的发生率。结果经rhGH治疗,A、B两组生长激素缺乏性矮小儿童的年生长速率均明显的提高,身高年龄的增长明显快于生活年龄和骨龄的增长,A、B两组组间比较无统计学差异（P〉0.05）,没有明显青春期加速的现象。A、B两组胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及其结合蛋白-3（IGFBP-3）含量,与治疗前相比差异有显著性（P〈0.01）;但两组组间比较无统计学差异（P〉0.05）。结论两种剂型rhGH均可显著改善生长激素缺乏性矮小儿童的身高,且青春期、骨龄均不提前。但粉剂治疗费用低于水剂,更易临床推广。     

人生长激素的生物素—新和素放大酶联免疫法的建立

为建立有生物素和亲和素放大系统的人血清生长激素 (hGH)酶联免疫分析法 (BA ELISA) ,以微量的GH抗原免疫BALB/C小鼠 ,利用杂交瘤技术制备出 2 9株分泌抗hGH单克隆抗体 (MCA)的杂交瘤株。选择最佳配对MCA ,利用亲和素与生物素高亲和力的特性 ,建立了血清hGH双位点的BA ELISA法。我们的MCA滴度为 (0 5～ 5 0 0 )× 10 4,亲和常数Ka =(0 13～ 1 40 )× 10 10 L/mol。血清hGH的ELISA的灵敏度为 0 0 4± 0 0 1μg/L ;在血清中分别加入 1,2 5 ,5 μg/L的hGH ,其回收率为 90 7%～ 10 7 6 % (平均为 10 1 2 0 %± 0 0 3 % ) ;hGH含量为 2 8、10 0、2 9 8μg/L的血清批内、批间变异系数分别为 4 9%、3 8%、7 9%和 6 2 %、3 5 %、9 5 % ;用本法测定了正常儿童、生长激素缺乏症 (GHD)患儿和活动性肢端肥大症患者空腹血清hGH水平 ,分别为 1 87± 3 0、0 30± 0 42和 8 71± 6 95 μg/L。上述结果表明 ,本ELISA方法灵敏、特异、稳定、准确 ,能确切反映hGH分泌功能 ,在诸多方面均优于RIA。     

人生长激素基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学的影响

目的：探讨人生长激素（hGH）基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学和血管新生的影响。方法: 结扎大鼠左冠状动脉前降支制作大鼠心力衰竭模型。2周后将冠脉结扎后存活的30只大鼠随机分为3组,hGH基因修饰的成肌细胞移植组（hGH组）、绿色荧光蛋白(GFP)基因修饰的成肌细胞移植组（GFP组）、注射等体积培养液的对照组。治疗4周后,血流动力学检查各组心功能指标;心肌组织进行HE染色检测心肌梗死面积,Ⅷ因子免疫组织化学检测血管新生。RT-PCR检测bax和bcl〖STBX〗-2〖STBZ〗 mRNA的表达。Western blotting检测各组心肌hGH、血管内皮生长因子（VEGF）、caspase-3蛋白表达情况。结果: （1）与对照组和GFP组相比： hGH组血流动力学指标明显改善,心肌梗死面积缩小。（2）心肌组织Ⅷ因子免疫组织化学检查结果显示： hGH组血管密度显著高于GFP组和对照组。（3）RT-PCR检测结果显示hGH组bax mRNA水平显著低于GFP组和对照组, bcl-2 mRNA水平显著高于GFP组和对照组。（4）Western blotting检测结果显示hGH组大鼠心肌组织有hGH蛋白表达,其余两组心肌组织无hGH蛋白表达。与其它两组相比,hGH组caspase-3蛋白表达降低, VEGF蛋白表达增加。结论: hGH基因修饰的成肌细胞移植可以抑制细胞凋亡,与单独成肌细胞治疗相比可以诱导更大的血管化,更好地缩小心肌梗死面积,并改善心肌梗死大鼠血流动力学。成肌细胞治疗联合hGH基因治疗为心肌梗死后心力衰竭的治疗提供了一个新的途径。     

垂体性侏儒症的基因治疗与进展

对于垂体性侏儒症，目前临床上使用的体外重组人生长激素替代治疗疗效有一定限制。近年来基因治疗垂体性侏儒症的研究已开始并取得了一定成效。本从基因治疗的体外试验、体内试验方法总结了其研究成果及最新进展。     

垂体性侏儒症的基因治疗与进展

对于垂体性侏儒症 ,目前临床上使用的体外重组人生长激素替代治疗疗效有一定限制。近年来基因治疗垂体性侏儒症的研究已开始并取得了一定成效。本文从基因治疗的体外试验、体内试验方法总结了其研究成果及最新进展     

生长激素治疗垂体性侏儒症的疗效观察

本文对17例垂体性侏儒症病儿进行了国产基因重组人生长激素(γ-hGH)疗效观察,治疗前平均年身高增长1.95±1.06cm/a(厘米/年),治疗6个月平均年身高增长11.43±1.62cm/a,经t检验,t=7.02P＜0.01,说明了国产的γ-hGH也有良好的促生长作用,而且治疗前后骨龄增长不明显,治疗前骨龄为4.77±3.4岁,治疗6个月骨龄为5.3±3.3(t=0.081,P＞0.05),全部病儿治疗后食量,体力,睡眠改善,除1例出现注射部位疼痛,1例出现周身水肿外,无异常临床症状,实验室检查仅ALP较用药前有所提高,用药前ALP值为1189.88±9.43,用药后1个月ALP值为150.58±19.79,虽然与用药前比较有所提高,但是经检验(t=1.80,P＞0.05)无显著性差异,经补充VitD和钙剂ALP恢复正常.结果表明国产γ-hGH具有疗效确实,无副作用的优点.     

人生长激素基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死鼠血流动力学的影响

目的:探讨人生长激素(hGH)基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学和血管新生的影响.方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支制作大鼠心力衰竭模型.2周后将冠脉结扎后存活的30只大鼠随机分为3组,hGH基因修饰的成肌细胞移植组(hGH组)、绿色荧光蛋白(GFP)基因修饰的成肌细胞移植组(GFP组)、注射等体积培养液的对照组.治疗4周后,血流动力学检查各组心功能指标;心肌组织进行HE染色检测心肌梗死面积,Ⅷ因子免疫组织化学检测血管新生.RT-PCR检测6似和6cl-2 mRNA的表达.Western blot.ting检测各组心肌hGH、血管内皮生长因子(VEGF)、easpase-3蛋白表达情况.结果:(1)与对照组和GFP组相比:hGH组血流动力学指标明显改善,心肌梗死面积缩小.(2)心肌组织Ⅷ因子免疫组织化学检杏结果显示:hGH组血管密度显著高于GFP组和对照组.(3)RT-PCR检测结果显示hGH组6ax mRNA水平显著低于GFP组和对照组,bcl-2 mRNA水平显著高于GFP组和对照组.(4)Westem blotting检测结果显示hGH组大鼠心肌组织有hGH蛋白表达,其余两组心肌组织无hGH蛋白表达.与其它两组相比,hGH组caspase-3蛋白表达降低.VEGF蛋白表达增加.结论:hGH基因修饰的成肌细胞移植可以抑制细胞凋亡,与单独成肌细胞治疗相比可以诱导更大的血管化,更好地缩小心肌梗死面积,并改善心肌梗死大鼠血流动力学.成肌细胞治疗联合hGH基因治疗为心肌