细胞凋亡检测技术及其应用

细胞凋亡(apoptosis)的概念,自1972年由Kerr提出后便引起众多学者的关注,但由于检测技术的限制,这种细胞现象只停留于形态描述上,缺乏定性、定量和定位的依据。因此,对它在生理、病理方面意义的进一步认识,受到了很大的限制〔1～5〕。80年代末,随着分子生物学、细胞生物学等学科理论和技术的发展,凋亡检测技术也有了很大的发展,特别是1993年Wijsman提出凋亡细胞DNA片断末端原位标记技术后,使细胞凋亡的原位检测成为可能〔11〕。由此,促进了对细胞凋亡本质的深入揭示,也促进了凋亡理论在生物医学各领域的广泛应用。1　细胞凋亡检测技术的依…     

动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡相关因素研究进展

<正>细胞凋亡是不同于细胞坏死的一种死亡形式,是受基因控制的细胞主动性“自杀”过程.它的主要特征是,内源性核酸内切酶被激活,导致DNA在核小体间断裂,同时发生了基因的转录和蛋白质合成.射线、化学药物等刺激因素都可激发细胞凋亡.细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统成熟以及维持正常组织和器官的细胞数目恒定与生长平衡,乃至机体衰老诸方面均起着重要作用.而动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)中也发现了细胞凋亡,且以血管平滑肌细胞(Vascular SmoothMuscle Cell.VSMC)和巨噬细胞为主,血管壁中膜层的平滑肌细胞(Smooth Muscle Cell.SMC)向内膜迁移及过度增殖是AS和再狭窄共同的病理特征.增殖了的VSMC,有些摄取脂质,转变为泡沫细胞,有些合成胶原等细胞外间质,参与AS损伤向脂质损伤、纤维斑块的转变.阻止或减弱平滑肌细胞过度增殖一直是人们设法解决的难题.近年来,随着有关细胞凋亡的研究在基础和临床领域的广泛展开,也促进了As中细胞凋亡的研究.同时,使得对As病理发展有了新认识.As     

细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡是细胞生命的基本特征之一,在动脉粥样硬化的发生和发展过程中起了重要作用。内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞在动脉粥样硬化的发病过程中均存在凋亡现象,氧自由基、某些生长因子、一氧化氮、内毒素及氧化低密度脂蛋白等可诱导细胞凋亡,这为认识和探讨动脉粥样硬化发生机理及防治提供了理论基础。     

细胞凋亡

70年代初．病理学家Kerr等在结扎了门静脉的大鼠肝组织切片中．经光镜、电镜观察．发现一忡和坏死完全不同的细胞死亡方式．Kerr就将细胞的这种死亡方式命名为调七（APOPTOSIS），以和坏死相区别．[1]此后．有关凋亡的研究曾长期被忽视．直至90年代初才逐渐受到人们的重视．并由此而形成了新的研究热点。1细胞凋亡的概念和形态特点细胞死亡是细胞生命周期的重要组成部分。机体内细胞数目是细胞增殖和细胞死亡动态平衡的结果．细胞死亡可分为细胞坏死和细胞调亡两类．细胞坏死是由于某些外界因素，如局部贫血、缺氧、高温、化学损伤等有…     

肝纤维化及其药物治疗的研究现状

肝纤维化是多种慢性肝脏疾病发展至肝硬化的必经阶段。是肝脏受到慢性损伤时 ,肝脏细胞外基质分泌与降解失衡 ,从而在肝细胞间隙可逆性沉积的结果。在西方国家 ,酒精性肝损害是造成肝纤维化的主要原因 ,而在东南亚和我国则以肝炎病毒尤其是乙型肝炎病毒的持续感染引起为主[1] 。近年来对肝纤维化发病机制的研究有了长足进展 ,中西药治疗肝纤维化取得了许多可喜成就。1　 肝纤维化形成的几个重要方面肝纤维化都是以病毒性肝炎、血吸虫病 ,化学毒性物质等因素引起的肝脏损伤为起点 ,继之有肝细胞坏死、炎症激活肝脏内Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞、内皮…     

CD3AK与LAK细胞体外培养增殖及细胞毒活性的比较

我院 1993～ 1998年应用 CD3AK细胞、L AK细胞治疗癌症过程中 ,在细胞培养期间进行了两种细胞增殖力及杀伤力的比较。近年来对于 L AK细胞的抗肿瘤作用及临床已有广泛深入的研究。对 CD3AK也有了初步探讨。但对两种效应细胞的体外增殖及抗肿瘤作用同时进行比较则未见报道。本文对 CD3AK、L AK细胞的体外扩增、杀伤作用进行了比较 ,以期为选择合适的抗癌效应细胞用于临床治疗提供依据。1　资料与方法1.1　资料　均为住院癌症患者 ,不能应用常规手术及放、化疗 ,输用 CD3AK及 L AK细胞各 78例。1.2　主要试剂及细胞株　 Anip- 937…     

肿瘤生物学治疗的研究进展

肿瘤的发病一直呈上升趋势，美国NCI权威机构公布，美国从1973～1992年的20年间癌症的死亡率从16％增长到23％。我国恶性肿瘤的病死率，在这20年中也增长了11．6％。专家预测，由于人口老龄化、吸烟、生活方式城市化及工业化进程等多种原因，在今后的二三十年内肿瘤的发病及死亡率将继续呈上升趋势。并提出了今后肿瘤治疗的新观念，建议多学科综合治疗，认为在传统手术、化疗、     

细胞凋亡在增殖性肾小球疾病中的作用

增殖性肾小球疾病的初始病变为肾小球内细胞数量异常增多,而细胞数目的稳态是通过细胞增殖与细胞凋亡的影响的平衡维持的。既往在细胞增殖方面作了大量研究,近年研究发现细胞凋亡在增殖性肾小球疾病中也有重要作用。因此,研究细胞凋亡在增殖性肾小球疾病的发生、进展及恢复中的作用,对进一步揭示增殖性肾小球疾病的发病机制和转归均有重要意义,并为其治疗提供了新的思路。     

肝卵圆细胞与慢性肝病

肝卵圆细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｏｖａｌｃｅｌｌ,ＨＯＣ)是在慢性肝病患者的肝脏中出现的一种具有多分化潜能的原始细胞 ,可分化为过渡细胞、小肝细胞和成熟肝细胞 ,也可向胆管细胞分化[1 ,2 ] 。ＨＯＣ直接参与了肝组织的再生和修复 ,与肝癌的发生有密切的关系。下面就ＨＯＣ与慢性肝病的关系 ,综述如下。1　肝卵圆细胞的特征1944年Ｏｐｉｅ在致癌物饲养的诱癌大鼠的肝脏中发现了ＨＯＣ并首先描述 ,将这种细胞核呈卵圆形、细胞体积较小的细胞称为卵圆细胞。随后许多学者在诱癌大鼠动物模型上对ＨＯＣ进行了大量研究。然而 ,人体肝脏是否存在…     

《医学生物学》过渡到《医学细胞生物学》的一点尝试

当前随着教育模式 ,教学体制改革的深入 ,全国许多医学院校都相继开设了《医学细胞生物学》课程 ,以取代过去开设《医学生物学》,如何将《医学生物学》这门课程渐过渡到《医学细胞生物学》,我们通过一年的实践都有一些尝试 ,使学生在有限的时间内获得较多的新知识 ,可作为其它院校借鉴 ,为进一步上好这门课打下了一定基础     

肾细胞癌的影像分析

本文报告35例肾细胞癌,均做了CT平扫和增强扫描,并经手术、病理证实.本文详细描述了肾细胞癌的CT表现,并总结肾细胞癌的诊断依据,指出CT在肾细胞癌分析中所起的作用及鉴别诊断的要点.     

118例急性白血病骨髓中网状细胞数的观察

<正> 近年来我们观察了118例急性白血病(简称急白)骨髓中网状细胞数量及在各类型急性白血病中的差异,探讨对急性白血病分型上的价值。现将结果报告如下。材料和方法 118例骨髓涂片均采自我院初诊未经治疗成年急白患者。经瑞氏染色的骨髓片作细胞形态学观察,结合细胞化学染色,按全国白血病分类分型标准进行分型,并进行网状细胞数观察,在涂片体尾交界细胞分布均匀部位计数1000个有核细胞,且同时计数网状细胞数作为网状细胞检出率(‰)。结果 118例急白骨髓中网状细胞数结果见附表。     

大肠腺瘤细胞原代培养方法的改进

目的　对大肠腺瘤细胞原代培养的方法作进一步的改进。方法　在取材、培养条件和细胞纯化等方面对腺瘤细胞原代培养的方法作了进一步的优化和改进。结果　 32枚息肉 ,2 6枚培养成功 ,6枚失败。培养时间为 5～ 2 3天 ,可长满瓶壁的 5 0 %～ 95 %。光镜形态学、免疫组化法和电镜鉴定培养细胞为上皮来源。结论　改进后的大肠腺瘤细胞原代培养法基本克服了细胞培养中的细菌及成纤维细胞的污染问题 ,增加了可获得的细胞数 ,优于改进前的原代培养方法     

新型白血病骨髓基质细胞黏附介导耐药模型构建的探索性研究

目的以急性淋巴细胞白血病（ALL）患者骨髓基质细胞（BMSC）构建白血病细胞黏附介导耐药（CAM—DR）模型,从一新的角度探讨CAM—DR在白血病细胞耐药中的作用。方法采用人淋巴细胞白血病Jurkat细胞株与经^60Co射线照射后的ALL骨髓基质细胞贴壁层共培养构建CAM—DR模型,应用扫描电镜从形态及结构对该模型进行鉴定;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）和流式细胞仪分别测定柔红霉素（DNR）对Jurkat细胞的细胞毒作用、DNR在Jurkat细胞中的储积浓度及分布。结果扫描电镜结果显示CAM—DR模型中Jurkat细胞通过伪足黏附于骨髓基质细胞层,或移行到骨髓基质细胞层下,并可见Jurkat细胞呈巢状龛于骨髓基质细胞“网眼”中。流式细胞结果显示该模型并未影响DNR在Jurkat细胞中的蓄积及药物的分布,但显著抑制了Jurkat细胞对DNR的反应性。结论成功构建了以白血病BMSC为基础的CAM—DR模型,为进一步研究白血病细胞耐药机制奠定了理论和实验基础。     

细胞毒性T淋巴细胞活性的检测及应用

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性的测定是了解机体细胞免疫功能的重要方法,在表位鉴定、疫苗效果评价、预测移植排斥反应等研究中广泛应用,因此有效地检测其功能非常重要,本文综合叙述了主流的检测方法及其各自应用。     

细胞粘附与肿瘤多细胞耐药

肿瘤细胞的耐药现象是影响化疗疗效和患者预后的重要因素之一。为克服肿瘤耐药 ,多年来人们对肿瘤的耐药机制进行了大量研究 ,并在细胞乃至分子水平有了诸多进展 ,其中包括某些耐药基因 (ＭＤＲ)和细胞表面蛋白 (Ｐ 糖蛋白和多药耐药相关蛋白 )介导的多药耐药[1] 。然而针对这些耐药机制所设计的治疗方法 ,尽管在体外研究中效果显著 ,但在临床上却难以奏效 ,特别是对实体瘤的治疗更是令人失望。　　究其原因 ,一种可能的解释是这些研究工作 ,象大多数的临床前研究工作一样 ,其结果均有赖于体外二维单层培养的肿瘤细胞。这种广为使用的单层培…     

胰岛细胞移植进展

近年来,随着在供体胰腺的获取与处理、胰岛的分离与纯化、新型免疫抑制剂的应用等领域不断取得突破,胰岛细胞移植已经公认为是一种治疗1型糖尿病安全有效的治疗方法。胰岛细胞移植治疗的理想目标在于获得比目前治疗方案更符合生理的代谢控制,便患者摆脱对胰岛素的依赖,并保持移植物长期有功能存活和改善患者的生活质量。然而,大量的临床试验表明目前的胰岛移植治疗糖尿病方案仍然存在较多难题,距离临床推广应用仍需时日。本文简要介绍了胰岛细胞移植的历史,并对胰岛分离技术、移植程序、免疫抑制剂的应用、异种胰岛细胞移植、干细胞移植、基因技术在胰岛细胞移植中的应用、羊膜上皮细胞移植、胰岛细胞移植所面临的挑战及将来发展方向等方面作了简要综述。     

糖尿病动物模型视网膜组织极早期的病理改变

随着糖尿病患病率的增加,糖尿病及其并发症所带来的健康威胁正日益加重。人们对糖尿病及其并发症研究也在不断地深入。目前很多动物研究发现在糖尿病的初发阶段视网膜组织就已存在轻微的病理改变,如周细胞减少、神经节细胞减少等,并且这些病理改变与高血糖密切相关。现就糖尿病早期视网膜病理改变进行综述。     

辛伐他汀抑制PDGF-BB诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖及对细胞表型转换的影响

目的 探讨辛伐他汀对血小板源生长因子(PDGF-BB)诱导增殖的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)抑制细胞表型转换及其可能的信号调节机制.方法 以体外培养SD大鼠PASMC为研究对象,PDGF-BB进行诱导,辛伐他汀及RhoA/Rho激酶抑制剂Y-27632进行干预,流式细胞术检测PASMC的增殖,荧光定量RT-PCR 检测各组PASMC α-SM-actin mRNA的表达及Western blot 检测各组PASMC α-SM-actin、SM22α和RhoA蛋白的表达.结果 辛伐他汀及Y-2763在抑制PDGF-BB诱导的PASMC增殖的同时,促进了主要收缩表型蛋白α-SM-actin mRNA 的表达,促进α-SM-actin 、SM22α这两种收缩表型蛋白表达,同步地相应抑制了RhoA蛋白表达.结论 辛伐他汀在抑制PDGF-BB介导的PASMC增殖的同时,也抑制了PASMC细胞表型的转换,而且该作用可能通过抑制RhoA/Rho激酶信号通路实现.     

CBRH7919细胞的某些生物特性观察及应用

为进行肝癌治疗的动物试验 ,我们引进了ＣＢＲＨ7919大鼠肝癌细胞系[1] ,在培养扩增细胞的过程中 ,对该细胞系的某些生物特性进行了观察 ,取得了一些初步观察结果 ,并在实际工作中加以应用。1　材料和方法1.1　细胞培养[2 ]ＣＢＲＨ7919细胞系从中国科学院细胞生物研究所引进 ,培养液为 10 %小牛血清ＰＰＭＩ- 1640培养基(另加入 2 5ｍｍｏｌ/ＬＨｅｐｅｓ、2ｍｍｏｌ/Ｌ谷氨酰胺、0 .0 1ｍｏｌ/Ｌ二硫基乙醇、2 5ｍｍｏｌ/ＬＮａＨＣＯ3、10 0 μ/ｍｌＰＧ、10 0 μｇ/ｍｌＳＭ) (ＣＭ培养基 )。细胞培养液加在 6孔培养板或培养瓶中 ,在Ｃ…