银染端粒重复序列扩增法检测肝癌模拟肝穿组织端粒酶活性的研究

目的：探讨细针穿刺肝活检组织行端粒酶活性检测用于肌细胞癌（HCC）诊断的可行性。方法：HCC共28例，每例HCC肿瘤切除后立即得过且过上肿瘤模拟细针穿刺，应用非放射性同位素银染的端粒重复序列扩增法（TRAP），分别对28例模拟肝穿组织和28例肿瘤切取组织行端粒酶活性检测。结果：模拟肝穿组织与肿瘤切取组织的端粒酶有同等的效果。该结果提示，B超引导下经皮肝穿刺活检行端粒酶活性检测在HCC的诊断，治疗效果评价和预后的判断方面具有一定的应用前景。     

肝细胞癌腹腔镜射频消融治疗前后活检组织端粒酶活性检测对治疗效果评价的意义

目的 :探讨肝细胞癌腹腔镜射频消融(LRFA)治疗前后活检组织端粒酶活性检测对治疗效果评价的价值。 方法 :2001年8月至2004年10月,34例肝细胞癌合并肝硬化患者在全麻下行LRFA治疗。其中男性27例,女性7例,平均年龄49.9±11.7岁。平均肿瘤直径4.0±1.0cm。肿瘤均位于肝脏表面、肝左外叶或临近胆囊等空腔脏器。LRFA治疗前后,分别对瘤体行腹腔镜超声检查及活检,所得微量组织采用ELISA-TRAP法行端粒酶活性检测及病理学检查。 结果 :所有病例均顺利完成LRFA治疗。RFA治疗前,病理学诊断阳性率为100%(34/34),端粒酶活性阳性率为91.2%(31/34);RFA治疗后,病理学检查均未发现肿瘤细胞,端粒酶活性阳性率26.5%(9/34)。术后1个月螺旋CT增强扫描提示肿瘤完全坏死率达100%。随访7～40个月(中位21个月),9例RFA治疗后端粒酶表达阳性的患者中,8例射频治疗部位复发;而25例RFA治疗后端粒酶表达阴性的患者中,2例发现肝内新病灶。 结论 :肝细胞癌合并肝硬化患者LRFA治疗后,活检组织端粒酶活性检测对LRFA治疗效果的评价及预后具有一定的参考价值。     

活检组织端粒酶活性检测评价肝癌合并肝硬化腹腔镜射频消融治疗的疗效

Objective： To explore the role of telomerase activity detected in biopsy samples for evaluating the efficacy of laparoscopic radiofrequency ablation （RFA） therapy in patients with hepatocellular carcinoma （HCC） and liver cirrhosis. Methods： From August 2001 to October 2004, 34 cirrhotic patients with HCC were treated by laparoscopic RFA under general anesthesia. A total of 34 tumors, with a mean maximum tumor diameter of 4.0 ＋ 1.0 cm, were all located on the liver surface or adjacent to the gallbladder. Laparoscopic ultrasound-guided core biopsy for liver lesions was performed before and immediately after RFA therapy. In these biopsy samples, telomerase activity was detected by the ELISA-based telomeric repeat amplification protocol （ELISA-TRAP） assay, and pathological examination was routinely performed. Results： Laparoscopic RFA was successfully performed in all the 34 patients. A complete tumor necrosis was achieved in all patients on the contrast-enhanced helical CT scanning one month after laparoscopic RFA. The positive rates of telomerase activity and histopathologic diagnosis in biopsy samples were 91.2% （31/34） and 100% （34/34） respectively before RFA, and 26.5% （9/34） and 0% respectively after RFA. During a median follow-up period of 35 months （range, 18-51 months）, the rates of local tumor recurrence at the ablation sites in post-RFA telomerase-positive and negative patients were 88.9% （8/9） and 4% （1/25） respectively （P 〈 0.01）, and the rates of distant recurrence within the livers were 0% （0/9） and 12% （3/25） respectively （P 〉 0.05）. Conclusion： For cirrhotic patients with HCC treated by laparoscopic RFA, detection of telomerase activity in biopsy samples may be useful for evaluating the therapeutic efficacy of RFA and predicting postoperative local tumor recurrence.     

细针穿刺肿瘤组织端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义

目的：探讨细针穿刺乳腺肿瘤组织端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义。方法：用PCR-ELISA法检测79例术前乳腺肿瘤穿刺活检标本和大体标本的端粒酶活性并与病理诊断进行对照。结果：乳腺癌65例，穿刺组织端粒酶阳性57例，阳性率为87．7％；大体组织端粒酶阳性54例，阳性率83．1％；淋巴结有转移者端粒酶活性高于无淋巴结转移者；乳腺良性疾病14例，端粒酶阳性2例，阳性率14．3％。结论：术前乳腺肿瘤穿刺组织端粒酶活性检测有利于乳腺肿瘤的早期诊断及鉴别诊断，可以间接了解乳腺癌的进展程度。     

细针及枪式针肝穿刺活检84例

总结84例甲胎蛋白阴性的肝脏肿块患者经皮肝穿刺活检的体会,其中有46例行细针吸取活检,38例行弹枪式针活检.     

细针穿刺肿瘤组织端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义

目的 :探讨细针穿刺乳腺肿瘤组织端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义。方法 :用PCR ELISA法检测79例术前乳腺肿瘤穿刺活检标本和大体标本的端粒酶活性并与病理诊断进行对照。结果 :乳腺癌 65例 ,穿刺组织端粒酶阳性 5 7例 ,阳性率为 87 7% ;大体组织端粒酶阳性 5 4例 ,阳性率83 1% ;淋巴结有转移者端粒酶活性高于无淋巴结转移者 ;乳腺良性疾病 14例 ,端粒酶阳性 2例 ,阳性率 14 3 %。结论 :术前乳腺肿瘤穿刺组织端粒酶活性检测有利于乳腺肿瘤的早期诊断及鉴别诊断 ,可以间接了解乳腺癌的进展程度     

喉癌及癌前病变组织端粒酶活性检测

目的 探讨喉鳞状细胞癌及喉癌前病变组织的端粒酶活性表达及其在喉癌发生中的作用。方法 采用多聚酶链反应－酶联免疫吸附法（PCR－ELISA）对47例喉鳞状细胞癌组织、22例喉癌前病变组织、20例喉炎性息肉组织的端粒酶活性进行定量检测。结果 47例喉鳞癌组织中39例端粒酶呈阳性（83％）,而20例喉炎性息肉组织端粒酶均为阴性,两组具有显著性差异（P＜0．001）。22例喉癌前病变组织中有15例端粒酶表达阳性（68．2％）。结论 端粒酶在喉癌组织中有较高的表达,可作为喉癌的肿瘤标志物。在喉癌前病变组织中也有低水平的端粒酶活性表达,喉癌前病变组织端粒酶活性检测将有助于喉癌的早期发现和早期治疗。     

胸腹腔液端粒酶活性检测的临床意义

目的:通过对39例胸腹水和腹腔液标本及12例胃肠癌端粒酶活性的检测,结合脱落细胞学检查,探讨端粒酶活性检测在胸腹水和腹腔液良恶性判别中的临床应用价值。方法:采用PCR-TRAP技术检测端粒酶活性,同时进行常规脱落细胞学检查。结果:39例胸腹水及腹腔液标本中端粒酶阳性10例,占25.6%,端粒酶活性与脱落细胞检查符合率为87.2%(34/39),两种检查方法具有一致性(χ2=12.54,P<0.005)。端粒酶检查胸腹腔液的敏感性为85.7%(6/7),特异性为87.5%(28/32)。12例胃肠癌端粒酶活性均为阳性,腹腔液的端粒酶活性与原发灶浸润深度及淋巴结转移有关(u=2.38,P<0.05)。结论:端粒酶检测与脱落细胞检查联合应用有助于提高诊断的敏感性及确诊率。     

Tru-Cut穿刺活检联合细针针吸活检在胰腺癌术中病理诊断中的应用

目的 探讨Tru-Cut穿刺活检(TCB)联合细针针吸活检(FNA)在胰腺癌术中病理诊断中的应用价值.方法 对22例术前诊断为胰腺癌的患者,术中进行肿物的TCB联合FNA,进行前瞻性研究.结果 22例患者中,TCB联合FNA诊断胰腺癌19例,3例既未见癌组织,亦未发现癌细胞.其中1例术中肝结节活检证实为肝转移,结合临床考虑胰腺癌肝转移;1例诊为自身免疫性胰腺炎;1例随访9个月,肿物无变化,诊为慢性胰腺炎.TCB诊断准确率为90.9%,FNA诊断准确率为86.4%,TCB联合FNA诊断准确率为95.5%.术后无胰瘘、出血等并发症发生.结论 TCB联合FNA的方法提高了胰腺癌术中诊断的准确率,是一种安全有效的诊断方法.     

原发骨肿瘤端粒酶活性的检测及临床意义

目的：探讨端粒酶在原发骨肿瘤组织中的活性表达及临床意义。方法：采用TRAP-ELISA法对21例骨肉瘤、11例骨巨细胞瘤、9例软骨肉瘤、3例骨恶性纤维组织细胞瘤、1例脊索瘤、11例骨软骨瘤、5例骨样骨瘤、4例非骨化性纤维瘤、6例孤立性骨囊肿及7例正常骨组织进行端粒酶活性检测。结果：45例原发恶性骨肿瘤中有38例显示端粒酶活性,阳性率为84.4%,26例良性病变组织中只有2例骨软骨瘤具端粒酶活性,7例正常组织端粒酶表达均为阴性。结论：恶性骨肿瘤组织中端粒酶活性明显高于良性病变和正常组织,有可能成为恶性骨肿瘤的一种潜在性生化标志物和鉴别诊断的指标。     

应用端粒重复序列扩增法检测原发性肝癌组织端粒酶活性的研究

目的：检测原发性肝癌及癌旁组织端粒酶活性并探讨端粒酶活性在原发性肝癌中的临床意义。方法：应用端粒重复序列扩增法（TRAP）检测36例原发性肝癌及癌旁组织和3例正常肝组织端粒酶活性。结果：36例原发性肝癌组织有29例（80.6%）阳性。而36例癌旁组织只有4例（11.1%）阳性。3例正常肝组织均阴性。4例癌旁组织端粒酶阳性的患者均于术后半年内复发。结论：原发性肝癌癌旁组织端粒酶活性可望成为预测原发性肝癌术后复发的重要指标,对患者术后治疗方案的选择以及术后随访观察具有一定的指导意义。     

Surgical Significance of Telomerase Activity in Noncancerous Liver Tissue from Patients with Hepatocellular Carcinoma

Telomerase activity has been detected in tissue from noncancerous liver of patients with chronic liver disease, but its functional significance remains to be elucidated. We therefore evaluated the telomerase activity in surgically obtained noncancerous liver tissue from 20 hepatocellular carcinoma (HCC) patients. Two samples of noncancerous liver tissue were obtained from each patient: one from the parenchyma adjacent to the HCC nodules of the resected specimen; the other from the parenchyma distant from the HCC nodules of the remnant liver. Telomerase activity was assayed by a non-radioisotope quantitative system based on "TRAP-eze.'Five samples from the noncancerous liver tissue adjacent to the HCC nodules (25.0%) were telomerase-positive; all such cases showed high-grade malignant potential, such as intrahepatic metastasis and/or portal vascular invasion and infiltration of the fibrous capsule in the corresponding HCC nodules, and telomerase positivity showed neither a relationship with the histological activity index scores nor a correlation with liver function. Interestingly, no telomerase activity was detected in any of the 20 samples obtained from the parenchyma of the remnant liver. These results indicate that telomerase in noncancerous liver tissue is associated not with the hepatic condition accompanying HCC, but with the biological characteristics of the tumor itself, and may derive from infiltrating cancer cells. Determination of telomerase status may aid in designing more effective surgical procedures.     

大肠癌及癌旁组织中端粒酶活性的检测及临床意义

目的：建立测定端粒酶活性的ＰＣＲ－ＴＲＡＰ方法并探讨其在大肠癌诊断中的意义。方法：应用端粒酶活性的ＰＣＲ－ＴＲＡＰ方法,对４０例大肠癌及其癌旁组织进行了检测。结果：４０例大肠癌组织中有３７例端粒酶活性呈阳性,阳性检出率为９１．７５％,癌旁组织中有２例阳性,阳性检出率为５．００％,两者相比差异有极显著性（Ｐ〈０．００１）;４０例大肠癌均为腺细胞癌,其中１１例伴随淋巴结转移的标本中１０例检测出活性,而     

食管癌刷检、活检和手术标本端粒酶活性检测的比较

目的 探讨端粒酶在食管癌发生、发展过程中的变化;刷检细胞能否取代组织标本进行端粒酶活性检测。方法 应用TRAP-PCR-ELISA定量法对150例食管癌,130例慢性食管炎,10例食管不典型增生的内镜活检标本和刷检标本及30例手术切除的癌组织及癌旁组织进行端粒酶活性检测并进行比较。结果 食管癌组织中端粒酶活性水平及阳性率明显高于食管炎和癌旁组织。食管不典型增生组织端粒酶活性水平及阳性率亦明显增高,且随着食管不典型增生程度的加重而不断升高,但食管癌与不典型增生组织之间端粒酶活性及阳性率无显著性差异。食管癌手术标本、活检标本、刷检细胞标本中端粒酶的阳性检出率以刷检细胞标本为高,但无显著性差异。结论 端粒酶的重新活化发生在食管癌的早期阶段,并且与恶性发展有明显关系,端粒酶的检测可以应用于食管早期癌的诊断。食管刷检细胞完全可以取代组织标本进行端粒酶活性检测,这为大规模普查食管癌工作提供了1种简便方法。     

卵巢癌端粒酶活性研究及其临床意义

 目的　探讨端粒酶活性与卵巢癌发生发展的关系。方法　用改进的银染 - TRAP(端粒重复序列扩增 )法检测 33例卵巢癌组织及 1 0例 ;正常卵巢组织的端粒酶活性。结果　 33例卵巢癌组织端粒酶活性强阳性 1 8例 ;弱阳性 1 0例 ;1 0例正常卵巢组织 ,1例弱阳性其余全部阴性。结论　卵巢癌组织端粒酶活性检测阳性率高 ,与年龄、病理分类、组织分级等无明显关系 ,提示有可能成为卵巢癌临床诊断及预后指标之一。     

尿脱落细胞端粒酶活性检测在膀胱癌早期诊断中的价值

目的 探讨膀胱癌早期诊断的新的无创性检查方法。方法 应用端粒酶活性ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ法和细胞学方法对５３例膀胱癌、２６例良性膀胱疾病和１７例正常人尿脱落细胞进行检测,并对２种方法检测的阳性率以及病理检查结果进行比较。结果 ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ法检测膀胱癌患者尿脱落细胞端粒酶活性的总阳性率（６４．２％）明显高于尿细胞学检查的总阳性率（３９．６％）;在早期、低给别膀胱癌（Ｔ１、Ｇ１）中,端粒酶活性阳性率     

贲门癌组织中端粒酶活性表达及其临床意义

目的 探讨端粒酶活性检测作为贲门癌1种新的临床诊断的生物学标志物的可行性。方法 应用PCR—ELISA法测定30例贲门癌、癌旁、残端组织和10例正常黏膜中的端粒酶活性。结果 30例贲门癌组织中28例端粒酶阳性，阳性主为93．3％，高于癌旁(66．7％)和残端组织(13．3％)端粒酶活性；而正常黏膜均为阴性。结论 端粒酶表达具有很高的肿瘤特异性，对贲门癌的临床诊断有较好的临床应用价值。     

应用银染端粒重复序列扩增法检测人肝癌细胞系端粒酶活性的研究

观察人肝癌细胞的端粒酶活性。应用非放射同位素银染的端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ），检测６株人肝癌细胞株（ＢＥＬ－７４０２，ＨｅｐＧ２，ＱＧＹ－７７０１，ＱＧＹ－７７０３，ＳＭＭＣ－７７２１，ＰＬＣ／ＰＲＦ／５）的端粒酶活性，同时检测ＲＮａｓｅ处理的阴性标本。６株人肝癌细胞的端粒酶均为阳性。人肝癌细胞系的端粒酶常呈阳性