＋Gz致脑缺血对兔脑组织一氧化氮合成酶分布的影响

为探讨短期内反复发生脑缺血Ｇ－ＬＯＣ中的重要性，将新西兰兔随机分为对照组，＋Ｇｚ暴露后即刻组，１ｈ组和６ｈ组。实验组动物对离心机上暴露至服水平动脉血压降到０ｋｐａ后持续３０ｓ，重复３次，每次间隔３０ｍｉｎ对照组不进行＋Ｇｚ暴露。灌注固定，完整取脑，利用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法，观察一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）阳性神经元在兔脑组织内的分布变化。结果：＋Ｇａ重复暴露后ＮＯＳ阳性神经元在脑内某些部位显著增     

+GZ重复暴露对大鼠脑组织细胞间粘附因子-1基因表达的影响

目的：了解＋Gz重复暴露后大鼠脑组织细胞间粘附因子－1（ICAM－1）基因表达的变化,探讨＋Gz引起脑损伤的分子机制。方法：24只SD大鼠随机分成对照组,＋Gz重复暴露后30min,6h和24h四组,6h和24h四组,每组6只。实验组大鼠在动脉离心机上经历了3次＋10Gz/3min（两次中间间隔30min)作用,对照组大鼠G值为＋1Gz。分别于暴露后30min,6h和24h处死大鼠取脑,提取总RNA,用半定量反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测方法检测＋Gz重复暴露后大鼠脑组织ICAM－1 mNRA表达水平。结果：＋Gz重复暴露后30min,6h和24h大鼠脑组织ICAM－1 mRNA均明显升高,分别是对照组的1,7倍,3．0倍和1．9倍。结论：＋Gz重复暴露可诱导大鼠组织ICAM－1 mRNA的表达,介导了白细胞,脑微血管内皮细胞的粘附增强,在＋Gz所致脑损害的病理过程中起一定作用。     

+Gz重复暴露后兔颈椎间盘BMP表达和影像学改变

目的：探讨＋Gz重复暴露对兔颈椎影像学和椎间盘骨形态发生蛋白（BMP）表达的影响。方法：15只兔随机分为对照组、＋G2暴露1d组、2周组、4周组、6周组。每组3只。＋Gz暴露组兔每天连续5次暴露于＋6Gz、持续45s，中间间歇5min。各组动物均于实验前后颈椎侧位拍片作自身对比，实验结束后气栓法处死并取颈椎做BMP免疫组化分析。结果：X线片显示对照组、＋Gz暴露1d组及2周组兔颈椎无明显变化，而＋Gz暴露4周组和6周组兔颈椎均出现显著退行性改变。对照组、＋Gz暴露1d、2周和4周组兔颈椎间盘未见BMP阳性细胞表达，＋Gz暴露6周组兔颈椎间盘的纤维环中可见少量散在分布的BMP阳性表达的软骨细胞。结论：＋6Gz重复暴露4周和6周可引起兔颈椎发生退行性改变和椎间盘BMP的表达。     

＋Gz重复暴露对大鼠脑组织一氧化氮合成酶基因表达的影响

为了了解＋Gz重复暴露后大鼠脑组织一氧化氮合成酶（NOS）基因表达的变化，探讨＋Gz引起脑损害的分子机制，本文用建立的定量反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测方法检测＋Gz重复暴露后大鼠脑组织内NOS mRNA表达的变化。结果＋Gz重复暴露后30min和6h大鼠脑组织NOS mRNA明显升高，但24h时恢复正常，表明＋Gz重复暴露可刺激大鼠脑组织NOS mRNA的表达，NO可能参与了＋Gz所致脑损害的病理过程，但这种损害是可逆的。     

高+Gz重复暴露对大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察高＋Gz重复暴露后脑组织星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化。方法SD大鼠30只，随机分为对照组和＋10G；暴露组。＋G2暴露组的大鼠暴露于＋10Gz／45S，共暴露5次，中间间隔5min。分别于＋Gz暴露后不同时间灌注取脑，免疫组织化学染色观察脑GFAP的表达情况。结果＋Gz暴露后1d、2d，顶叶皮层、海马GFAP阳性细胞数较对照组均显著增多（P〈0．05），以弱阳性细小型为主；暴露后4d、6d，顶叶皮层、海马GFAP阳性细胞数较对照组进一步增多（P〈0．01），以中等阳性细胞为主，肥大的GFAP增多。结论重复暴露＋10Gz／45s可引起大鼠顶叶皮层、海马GFAP表达显著增加。     

+Gz重复暴露大鼠海马细胞凋亡及相关基因bcl-2和p53表达的观察

目的 探讨细胞凋亡在反复高＋Gz暴露所致脑损伤中的病理作用。方法20只SD大鼠随机分成对照组,＋Gz重复暴露后30min,6h,24h和48h5组,每组4只,对照组大鼠G值为＋1Gz,实验组大鼠在动物离心机上经历了3次＋14Gz/45s(两次间间隔30min)作用,分别于暴露后30min,6h,24h,48h处死大鼠取脑,固定包埋,用原位末端标记法TUNETL检测大鼠海马细胞凋亡及用免疫组化方法检测调亡相关基因bcl-2和p53表达变化,6h组海马CA1区可见部分细胞凋亡和明显的bcl-2,p53表达变化,但在24h组和48h组基本恢复正常。结论 ＋Gz重复暴露可引起大鼠海马细胞凋亡及凋亡相关基因 bcl-2,p53的表达变化,细胞凋亡是反复高Gz暴露致脑操作的机制之一。     

碱性成纤维细胞生长因子和丹参对反复高+GZ暴露大鼠脑组织中bcl-2和p53 mRNA表达的影响

目的 探讨细胞凋亡在反复高＋Gz暴露所致脑损伤中的病理作用以及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)和丹参对反复高＋Gz暴露致脑损伤的防护作用及其机制。方法 20只SD大鼠随机分成5组,对照组大鼠G值为＋1Gz,实验组大鼠在动物离心机上经历了3次＋14G/z45s（两次间间隔30min)作用。bFGF处理组,丹参处理组和生理盐水处理组在＋Gz暴露前后分别给予注射bFGF（100μg/kg),丹参（15g/kg)或生理盐水（2ml)各一次。于暴露后6h处死大鼠取脑,用半守量反转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测大鼠脑组织中bcl-2和p53 mRNA表达以及用原位末端脱氧核苷酸转移酶（TdT)标记法（TUNEL）检测脑内神经元细胞凋亡情况。结果 ＋Gz暴露组可见明显的bcl-2,p53 mRNA表达变化和部分神经细胞凋亡,而bFGF和丹参能阻断bcl-2和p53表达变化和抑制神经细胞的凋亡。结论 ＋Gz重复暴露可引起大鼠脑神经细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和p53的表达变化,细胞凋亡是反复高 Gz暴露致脑损伤的机制之一,而bFGF和丹参对＋Gz暴露所致的脑损伤具有防护作用。     

大鼠在反复高加速度暴露后脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE的表达

为了解反复高正加速度（＋Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和白细胞介素－1β转化酶基因的表达变化，探讨细胞凋亡在反复高＋Gz暴露所致脑损伤中的病理作用，用半定量逆转录聚合酶链反应方法检测反复高＋Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE表达水平，并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中的凋亡细胞。结果bcl-2在＋Gz重复暴露后6h和24h表达明显降低，而bax、p53和ICE在6h和24h表达明显升高，6h组和24h组在大脑皮质、海皮CA1区和纹状体可见部分神经元发生凋亡。表明反复高＋Gz暴露可引起大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE表达变化，细胞凋亡是反复高＋Gz暴露致脑损伤的机制之一。     

G_z重复暴露对大鼠脑组织能量代谢的影响

目的观察＋Gz重复暴露后大鼠脑组织能量代谢的动态变化特点，探讨其在＋Gz致脑损害中的可能作用及新的有效防护措施。方法应用高效液相色谱法，观察＋10Gz持续3min重复暴露三次后32只大鼠脑组织乳酸、乳酸脱氨酶、腺苷酸及嘌呤代谢的动态变化过程。结果＋Gz重复暴露三次后即刻，脑皮层三磷酸腺苷（ATP）含量、能量负荷（EC）及乳酸脱氨酶（LDH）活性较对照组分别降低37．2％（P＜0．05）、265％（P＜0．01）及70．7％（P＜0．01），而二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）及乳酸含量则分别升高105．0％（P＜0．05）、30．6％（P＜0．05）及43．6％（P＜0．01）；暴露后1h，脑皮层ATP、ADP、AMP含量及EC则基本恢复至对照组水平，而乳酸含量及LDH活性则仍未恢复正常，与对照组间仍有非常显著性差异（P＜0.01）；暴露后6h，上述指标则均基本恢复正常。结论＋10Gz持续3min重复暴露三次可引起脑组织能量代谢一过性降低。脑能量代谢降低可能是＋Gz重复暴露后发生脑离子平衡紊乱及脑损害的主要因素。     

+Gz重复暴露大鼠脑cDNA消减文库的构建

目的：应用抑制性消减杂交技术构建 Gz重复暴露大鼠脑和正常大鼠脑差异表达的cDNA消减文库，为筛选 Gz暴露大鼠脑差异表达基因，探讨 Gz引起脑损伤的分子机制奠定基础。方法：Wister大鼠随机分成对照组和 Gz重复暴露组，对照组大鼠G值为 1Gz，实验组大鼠在动物离心机上经历了3次 10Gz/min（两次间间隔30min）作用，于暴露后6h处死取脑。分别从 Gz重复暴露组和对照组大鼠脑中提取poly(A) RNA，依次合成单链及双链cDNA，用RsaI酶切成大小不等的片段。将 Gz重复暴露组cDNA分为两组，分别与两种不同的接头连接，再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR，将PCR产物与T/A载体连接构建 Gz暴露大鼠脑cDNA消减文库。结果：成功构建具有高消减效率的 Gz暴露大鼠脑cDNA消减文库，非特异性cDNA片段被有效地消减，特异表达的cDNA得到富集。结论： Gz暴露大鼠脑cDNA消减文库的建立为进一步筛选、克隆 Gz重复暴露大鼠脑差异表达基因奠定了基础。     

+Gz重复暴露对大鼠脑组织c-fos、c-jun和神经生长因子基因表达的影响

为了解＋Ｇｚ重复暴露后大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ和神经生长因子基因表达的变化,探讨它们在＋ＧＫ致脑损伤中的作用和意义,用半定量反转录聚合酶链反应检测方法检测＋Ｇｚ重复暴露后大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ和ＮＧＦ ｍＲＮＡ表达水平。     

＋Gz重复暴露对大鼠脑组织热休克蛋白70基因表达的影响

目的探讨＋Ｇｚ重复暴露后大鼠脑组织热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）基因表达的变化及其在＋Ｇｚ所致脑损伤中的作用。方法用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测＋Ｇｚ重复暴露大鼠脑组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达水平。结果＋Ｇｚ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ大鼠脑组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ均有升高,分别是对照组的１．７倍和２．６倍,２４ｈ恢复正常。结论＋Ｇｚ重复暴露可诱导大鼠脑组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的表达     

+Gz诱导热休克蛋白表达及其对+Gz致脑损伤保护作用的研究

目的：探讨不同 Gz重复暴露后，大鼠不同脑区HSP70表达强度和时程的变化规律，及其与正加速度致脑损伤的相关性。方法：将雄性SD大鼠随机分为对照组、 2Gz、 4Gz、 6Gz和 10Gz暴露组。分别在暴露后6h，10h，1d，2d，4d和6d处死取脑，观察HSP70和HSP70mRNA在鼠脑不同部位的表达以及脑神经元形态学的变化。结果：低G值（ 2Gz）下，HSP70表达强度弱，持续时间短，但范围较广；高G值（ 10Gz）下，表达仅局限在下丘脑部位，呈中等强度反应；中等强度G值（ 4Gz和 6Gz）下，表达范围广，持续时间长。各组表达峰值均在暴露后1d左右，但暴露1次组2d后强度明显减弱，而暴露3-5次组在2d后仍然维持较高水平。不同 Gz暴露后HSP70mRNA的表达在分布上与蛋白表达无明显变化，但其表达高峰提前（10h），持续时间缩短。直接 10Gz/5min暴露后，在皮层、海马、丘脑等部位均可见到变性的神经元。而经过 4Gz/3min3次和5次预暴露再作 10Gz/5min暴露组，变性神经元的数目在顶叶皮层、梨状皮层、海马和丘脑下部等部位明显减少。结论： 4Gz和 6Gz诱导的HSP70表达比 2Gz和 10Gz诱导的HSP70表达强，持续时间也长。 4Gz/5min反复暴露3次和5次，再暴露于 10Gz/5min，其神经元损伤程度明显轻于 10Gz/5min单次暴露。     

+Gz重复暴露大鼠脑组织中IL-1β和TNF-α mRNA表达变化

目的 了解反复高＋Ｇｚ暴露后大鼠脑组织中ＩＬ－１β和ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达变化。方法 ２０只ＳＤ大鼠随机分成对照组、＋Ｇｚ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ、２４ｈ和４８ｈ五组,每组４只,对照组大鼠Ｇ值为＋１Ｇｚ,实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１４Ｇｚ／４５ｓ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０Ｇｚ,实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１４Ｇｚ／４５ｓ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用,分别于暴     

＋Gz重复暴露对大鼠脑组织c—fos、c—jun和神经生长因子基因表达的影响

目的：为了解＋ ＧＺ 重复暴露后大鼠脑组织ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ 和神经生长因子（ＮＧＦ） 基因表达的变化,探讨它们在＋ ＧＺ 所致脑损伤中的作用和意义。方法：用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 检测方法检测＋ ＧＺ 重复暴露后大鼠脑组织ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ 和ＮＧＦ ｍ ＲＮＡ 表达水平。结果：ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 在＋ ＧＺ 重复暴露后３０ ｍｉｎ ｍ ＲＮＡ 表达明显升高,６ｈ 和２４ｈ 降至正常;ＮＧＦ 在３０ ｍｉｎ 和６ ｈ 表达均明显升高,２４ ｈ 恢复正常。结论：表明＋ ＧＺ 重复暴露可诱导大鼠脑组织ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ 和ＮＧＦ ｍ ＲＮＡ 的表达,提示它们的表达增加可能在＋ ＧＺ 所致脑损伤中起病理或保护作用。     

Effect of repeated +Gz exposures on energy metabolism and some ion contents in brain tissues of rats

BACKGROUND: It has been demonstrated that during +Gz exposure cerebral blood flow is significantly reduced, resulting in brain ischemia. In pilots, such conditions could recur several times during centrifuge training and combat maneuvers and could possibly cause reversible change in brain energy metabolism. HYPOTHESIS: In rats there is an association between +10 Gz exposure and the decreased brain metabolism, as indicated by decreased adenosine triphosphate (ATP) and ATPase activity, and increased adenosine diphosphate (ADP) and lactate, etc. The aim of the present study was to examine the time course and recovery of brain energy metabolism, lactate, ATPase activity, Na+, K+, Ca2+ and water contents after three +10 Gz exposures in rats. METHODS: There were 64 male Sprague-Dawley rats that were restrained and placed on an animal centrifuge. They were divided into groups of 16. Control rats were exposed to +1 Gz and experimental rats were exposed to +10 Gz three times each for 3 min at 30-min intervals. After being euthanized, rat brains were removed 0 h, 1 h, or 6 h after the last centrifuge run. Brain samples were analyzed for energy metabolism, lactate, Na+-K+-ATPase activity, water and electrolytes contents. RESULTS: The cortical ATP content, Na+-K+-ATPase and lactate dehydrogenase (LDH) activities decreased significantly, whereas the cortical ADP, adenosine monophosphate (AMP) and lactate contents increased significantly 0 h after three +10 Gz exposures, as compared with those of control. The ATP, ADP, and AMP contents returned to their control levels 1 h after the +10 Gz exposures, however, lactate content, Na+-K+-ATPase and LDH activities delayed recovery 6 h after +10 Gz exposures. The cortical K+ content increased significantly 0 h and 1 h after +10 Gz exposures, and returned to the control level 6 h after +Gz exposures. Na+ and water contents increased significantly 1 h and 6 h after the +10 Gz exposures. There was no significant change in Ca2+ content after +Gz exposures. CONCLUSIONS: Three +10 Gz (3 min each) exposures were associated with transient depression of brain metabolism as indicated by a decrease in ATP, Na+-K+-ATPase activity, and an accumulation of lactate, and disturbance of ion homeostasis. It is suggested that a causal relationship might exist between repeated high +Gz exposures and brain metabolism.     

+Gz暴露对大鼠大脑皮层HSP70蛋白表达的影响

目的：观察＋Gz暴露对大鼠大脑皮层HSP70蛋白表达水平的影响，探讨＋Gz暴露致脑损伤的机理。方法：100只SD大鼠随机分为对照组，＋2Gz暴露组，＋6Gz暴露组，＋10Gz暴露组，各组在G暴露后的6h、1、2．4、6d处死，免疫组织化学方法观察大鼠脑皮层HSP70蛋白表达情况，并对结果进行统计分析。结果：3个＋Gz暴露组的HSP70蛋白表达水平均显著高于对照组；不同G值之间的比较表明，＋6Gz组HSP70蛋白表达水平最高，＋10Gz组最低。结论：＋Gz暴露对大鼠大脑皮层HSP70蛋白表达水平有显著影响。