Fas诱导细胞凋亡与糖尿病心肌病变的研究

目的:探讨Fas诱导细胞凋亡对糖尿病心肌病变的影响,为进一步研究糖尿病发病机制提供实验依据。方法:按体重将动物随机分为正常对照组(10只)和实验组(20只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。1周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L,饮水量>40ml/d,尿糖强阳性(+++~++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学实验观察。利用HPIAS-2000图像分析系统测定Fas在以上两组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:糖尿病对照组心肌细胞胞浆内可见极少量棕黄色颗粒,Fas表达弱;实验组心肌细胞胞浆内可见较多棕黄色颗粒,Fas呈强阳性表达。图像分析结果显示对照组与实验组之间Fas的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05)。结论:糖尿病心肌病变过程中存在心肌细胞凋亡,心肌细胞凋亡可能是导致糖尿病心脏功能障碍的重要原因之一。     

糖尿病大鼠心肌组织中caspase-8表达的研究

目的:研究糖尿病大鼠心肌组织中caspase-8表达与糖尿病发病机制的研究。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液,观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。1周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L,饮水量>40ml/d,尿糖强阳性的大鼠作为糖尿病大鼠。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学实验观察,将实验结果进行统计学分析。结果:正常对照组心肌细胞胞浆内无棕黄色颗粒沉积,Caspase-8表达弱;糖尿病组心肌细胞胞浆内棕黄色颗粒密集,Caspase-8呈阳性表达。图像分析结果显示:正常对照组心肌细胞内Caspase-8表达的平均光密度及阳性面积率分别为0.1157±0.0067、0.1208±0.01966,糖尿病组心肌细胞内Caspase-8表达的平均光密度及阳性面积率分别为0.3738±0.0045、0.3450±0.0241。正常对照组与糖尿病组之间平均光密度及阳性面积率差异有显著性意义(P<0.05)。     

糖尿病大鼠心肌组织中Survivin蛋白表达的影响

目的:研究糖尿病大鼠心肌组织中Survivin蛋白表达与糖尿病发病机制的研究。方法:按体重随机分为正常对照组(10只)和糖尿病组(20只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌(streptozotocin,STZ)溶液,正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液,观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L、饮水量>40 ml/d、尿糖强阳性的大鼠作为糖尿病大鼠,然后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学实验。结果:正常对照组心肌细胞胞浆内无棕黄色颗粒,Survivin蛋白呈阴性表达;糖尿病组心肌细胞胞浆内可见密集分布的棕黄色颗粒,Survivin蛋白表达呈强阳性。图像分析结果显示,正常对照组和糖尿病组平均光密度分别为0.0792±0.0034、0.2985±0.0152,正常对照组和糖尿病组阳性面积率分别为0.1083±0.0127、0.3469±0.0168。正常对照组与糖尿病组之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05)。结论:Survivin蛋白对心肌细胞凋亡起着重要作用。     

糖尿病大鼠心肌组织中bcl-2表达的图像分析

目的:探讨糖尿病大鼠心肌组织中bcl-2的表达及对心肌细胞凋亡的影响。方法:按体重随机分为正常对照组(10只)和实验组(10只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L、饮水量>40ml/d、尿糖强阳性(+++~++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。将糖尿病模型组和对照组大鼠处死,切取心室肌组织,进行组织切片和免疫组织化学实验观察。结果:糖尿病模型组心肌细胞Bcl-2表达的平均光密度及阳性面积率与对照组心肌细胞比较有显著性差异(P<0.01)。结论:糖尿病导致的心肌病与心肌细胞凋亡等有关。     

锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌结构变化的影响保护作用

目的:探讨锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌结构的影响。方法:按体重随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液,观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。1周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L,饮水量>40ml/d,尿糖强阳性(+++~++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn和VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学的实验观察。结果:糖尿病对照组心肌细胞Bcl-2表达弱;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞Bcl-2呈弱表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞Bcl-2呈强阳性表达。图像分析结果显示,糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病对照组与糖尿病补锌组、糖尿病补VE组之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>0 05)。结论:Zn和VE联合使用对糖尿病大鼠心肌细胞有保护作用。     

锌和维生素E对糖尿病大鼠抗凋亡基因Caspase-3表达的意义

目的:探讨锌和维生素E对糖尿病大鼠抗凋亡基因Caspase-3表达的意义。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptozotocin,STZ),60mg/kg一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织Caspase-3的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定Caspase-3在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组心肌细胞内Caspase-3表达较弱,糖尿病对照组心肌细胞内Caspase-3表达较高;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内Caspase-3表达较弱;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内Caspase-3表达弱。图像分析结果显示:糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间Caspase-3的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病补Zn+VE组与正常组之间Caspase-3的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>0 05)。结论:Zn和VE联合使用可减低糖尿病导致大鼠心肌细胞凋亡的作用,对心肌细胞起了重要的保护作用。     

锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX-2表达的影响

目的:研究锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX-2表达的影响,以此探讨锌和维生素E对糖尿病心肌细胞保护作用的机制。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L,饮水量>40ml/d,尿糖强阳性(+++~++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为:糖尿病对照组、糖尿病补锌组、糖尿病补VE组和糖尿病补Zn和VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学的实验,观察各组心肌组织中COX-2的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定COX-2在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组心肌细胞内COX-2呈阴性表达,糖尿病对照组心肌细胞内COX-2呈阳性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内COX-2呈弱阳性表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内COX-2呈阴性表达。图像分析结果显示,糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间COX-2的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病补Zn+VE组与正常组之间COX-2的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>0 05)。结论:Zn和VE联合使用可降低糖尿病大鼠心肌组织中COX-2的活性,对糖尿病大鼠心肌细胞起了重要的保护作用。     

锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用

目的:探讨锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用及对糖尿病大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptozotocin,STZ),60mg/kg一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只实验组大鼠按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织Smac的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定Smac在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组心肌细胞内Smac呈阴性表达,糖尿病对照组心肌细胞内Smac呈阳性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内Smac呈弱阳性表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内Smac呈阴性表达。图像分析结果显示:糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间Smac的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病补Zn+VE组与正常组之间Smac的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>005)。结论:Zn和VE联合使用可减低糖尿病导致大鼠心肌细胞凋亡的作用。     

锌和维生素E对工型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用

目的：探讨锌和维生素E对I型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用及对糖尿病大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法：按体重将大鼠随机分为正常对照组（10只）和实验组（40只）,实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素（streptozotocin,STZ）,60mg／k一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只实验组大鼠按血糖值参考体重分为4组：糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn＋VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织Smac的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定Smac在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：正常对照组心肌细胞内Smac呈阴性表达,糖尿病对照组心肌细胞内Smac呈阳性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内Smac呈弱阳性表达;糖尿病补Zn＋VE组心肌细胞内Smac呈阴性表达。图像分析结果显示：糖尿病补Zn＋VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间Smac的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义（P〈0．05）;糖尿病补Zn＋VE组与正常组之间Smac的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义（P〉O05）。结论：Zn和VE联合使用可减低糖尿病导致大鼠心肌细胞凋亡的作用。     

锌和维生素E对糖尿病大鼠抗凋亡基因survivin表达的统计分析

目的:探讨锌和维生素E对糖尿病大鼠抗凋亡基因survivin表达的作用及统计分析。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptozotocin,STZ),60mg/kg一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织survivin的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定survivin在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组心肌细胞内survivin呈高表达,糖尿病对照组心肌细胞内survivin呈低表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内survivin呈较低表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内survivin呈高表达。图像分析结果显示,糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间survivin的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病补Zn+VE组与正常组之间survivin的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>0 05)。结论:Zn和VE联合使用可减低糖尿病导致大鼠心肌细胞凋亡的作用。     

锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌核转录因子NF-κB65表达的作用。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptozotocin,STZ),60mg/kg一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织NF-κB65的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定NF-κB65在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组心肌细胞内NF-κB65呈阴性表达,糖尿病对照组心肌细胞内NF-κB65呈阳性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内NF-κB65呈弱阳性表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内NF-κB65呈阴性表达。图像分析结果显示:糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间NF-κB65的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病补Zn+VE组与正常组之间NF-κB65的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>0 05)。结论:Zn和VE联合使用可对糖尿病导致大鼠心肌细胞的凋亡具有重要的保护作用。     

当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤后促凋亡蛋白Bim的表达

目的:观察当归注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞内FAK的表达及临床的意义。方法:将35只SD大鼠随机分成四组(n=10):正常对照组(n=5);假手术组(n=10);缺血再灌注组(n=10);当归治疗组(n=10),建立在体心肌缺血再灌注动物模型。实验完毕后,将各组动物心肌组织做免疫组织化学染色;观察各组动物心肌细胞内Bim表达的变化。利用HPIAS-2000图像分析系统测定FAK在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组:心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,Bim表达呈阴性;假手术组:心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,Bim表达呈阴性;缺血再灌注损伤组:心肌细胞内可见大量的棕黄色颗粒沉积,Bim表达呈阳性;当归治疗组:心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,Bim表达呈阴性。图像分析结果显示:正常对照组、当归治疗组、假手术组与缺血再灌注损伤组之间Bim表达的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.01);正常对照组与假手术组之间、当归治疗组与假手术组之间FAK表达的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>005)。结论:当归注射液对大鼠缺血再灌注损伤导致心肌细胞的凋亡有重要的保护作用。     

当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤后PTEN的表达及统计分析

目的：探讨当归注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞PTEN的表达及统计学意义。方法：将35只SD大鼠随机分成4组（n=10）：正常对照组（n=5）;假手术组（n=10）;缺血再灌注组（n=10）;当归治疗组（n=10）,建立在体心肌缺血再灌注动物模型。实验完毕后,将各组动物心肌组织做免疫组织化学染色;观察各组动物心肌细胞内PTEN表达的变化。利用HPIAS-2000图像分析系统测定PTEN在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：正常对照组：心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,PTEN表达呈阴性;假手术组：心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,PTEN表达呈阴性;缺血再灌注损伤组：心肌细胞内可见大量的棕黄色颗粒沉积,PTEN表达呈阳性;当归治疗组：心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,PTEN表达呈阴性。图像分析结果显示：正常对照组、当归治疗组、假手术组与缺血再灌注损伤组之间PTEN表达的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义（P〈0.01）;正常对照组与假手术组之间、当归治疗组与假手术组之间PTEN表达的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义（P〉0.05）。结论：当归注射液对大鼠缺血再灌注损伤导致心肌细胞的凋亡有重要的保护作用。     

锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌Livin表达的影响

目的：探讨锌（Zn）和维生素E（VE）对糖尿病大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法：按体重将大鼠随机分为正常对照组（10只）和实验组（40只）,实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素（streptozotocin,STZ）,60mg／kg一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只按血糖值参考体重分为4组：糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn＋VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织Livin的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定Livin在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：正常对照组心肌细胞内Livin呈阳性表达,糖尿病对照组心肌细胞内Livin呈阴性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内Livin呈强阳性表达;糖尿病补Zn＋VE组心肌细胞内Livin呈弱阳性表达。图像分析结果显示：糖尿病补Zn＋VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间Livin的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义（P〈0．05）;糖尿病补Zn＋VE组与正常组之间Livin的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义（P〉0.05）。结论：Zn和VE联合使用可对糖尿病大鼠心肌细胞具有重要的保护作用。     

实验性2型糖尿病大鼠心肌细胞Bax蛋白表达与细胞色素C的关系

目的探讨2型糖尿病人鼠心肌细胞凋亡的机制。方法测定链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bax蛋白表达与细胞色素C(CytC)含量。结果模型组心肌细胞Bax蛋白表达和胞浆CytC含量显著高于对照组;模型组线粒体CytC含量显著低于对照组。结论实验性2型糖尿病大鼠心肌病变与Bax蛋白及CytC诱导的细胞凋亡有关。     

丹参多酚酸盐对糖尿病心肌病保护作用及可能机制

目的探讨丹参多酚酸盐对糖尿病心肌病保护作用及其可能机制。方法40只健康雄性wistar大鼠随机分成4组,正常对照组（Normal control,NC）、糖尿病对照组（Diabetic control group,DC）、丹参多酚酸盐高剂量（15mg·kg^-1）治疗组（High-dose treatment group,HT）及低剂量（5mg·kg^-1）治疗组（Low-dose treatment group,LT）,每组10只,其中3组（DC、HT、LT）大鼠给予腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型。建模后第7天开始给予治疗组丹参多酚酸盐腹腔注射,NC及DC组大鼠给予相同体积生理盐水注射。给药8周后超声多普勒检测大鼠心功能,转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL法）检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌细胞Bcl-2、Caspase-3表达。结果与NC组比较,DC组凋亡心肌细胞数增多（P〈0．05）,Bcl-2表达减弱（P〈0．05）,Caspase-3表达增强（P〈0．05）;与DC组比较,治疗组凋亡细胞数减少（P〈0．05）,Bcl-2表达增强（P〈0．05）,Caspase-3表达减弱（P〈0．05）;应用丹参多酚酸盐治疗后,可有效改善心功能,HT组较LT组作用更加明显,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论糖尿病组大鼠心功能明显下降,丹参多酚酸盐通过增强Bcl-2表达,抑制Caspase-3表达,阻遏心肌细胞凋亡,改善心功能,高剂量丹参多酚酸盐的作用更加明显。     

5-HT_(2B)受体阻断剂对去甲肾上腺素诱导的肥厚心肌组织中心肌细胞凋亡的影响

目的观察5-HT2B受体阻断剂对去甲肾上腺素(NE)诱导的肥厚心肌组织中心肌细胞凋亡的影响。方法雄性SD大鼠24只,随机分为3组,每组8只,分别为对照组,肥厚组、实验组。采用腹腔注射NE(1.5 mg/kg,2次/d,28 d)的方法建立心肌肥厚动物模型,自第15天起实验组腹腔注射SB204741(5-HT2B受体阻断剂)2 mg/kg,2次/d,连续注射14 d。对照组腹腔注射相同体积的生理盐水2次/d,28 d。采用TUNEL法检测各组心肌组织中心肌细胞的凋亡情况,Western blot方法分析Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。结果对照组的心肌组织中几乎看不到凋亡的心肌细胞,肥厚组心肌组织中凋亡心肌细胞数量显著增多,同时Bcl-2/Bax表达比例显著降低,Caspase-3的表达显著升高;与肥厚组相比,实验组心肌组织中凋亡心肌细胞的数量显著减少,Bcl-2/Bax表达比例显著升高,Caspase-3的表达显著降低。结论应用5-HT2B受体阻断剂不仅可减轻NE诱导的心肌肥厚的程度,还可通过上调Bcl-2/Bax表达比率、降低Caspase-3的活性抑制心肌细胞的凋亡。     

当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤后FAK表达的研究

目的：观察当归注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞内FAK的表达及临床的意义。方法：将35只SD大鼠随机分成4组（n=10）：正常对照组（n=5）;假手术组（n=10）;缺血再灌注组（n=10）;当归治疗组（n=10）,建立在体心肌缺血再灌注动物模型。实验完毕后,将各组动物心肌组织做免疫组织化学染色;观察各组动物心肌细胞内粘着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）表达的变化。利用HPIAS-2000图像分析系统测定FAK在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：正常对照组：心肌细胞内可见大量的棕黄色颗粒沉积,FAK表达呈阳性;假手术组：心肌细胞内可见一些棕黄色颗粒,FAK表达呈阳性;缺廊再灌注损伤组：心肌细胞内可见少量和未见棕黄色颗粒,FAK表达呈阴性;当归治疗组：心肌细胞内可见密集分布的棕黄色颗粒,FAK表达呈阳性。图像分析结果显示：正常对照组、当归治疗组、假手术组与缺血再灌注损伤组之间FAK表达的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义（P〈0．01）;正常对照组与假手术组之间、当归治疗组与假手术组之间FAK表达的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义（P〉0.05）。结论：当归注射液对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞有重要的保护作用。     

DL-炔丙基甘氨酸对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能和凋亡相关蛋白的影响

目的:探讨硫化氢(H2S)合成酶抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PAG)对其2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞功能和凋亡相关蛋白的影响.方法:采用高糖高脂饮食喂养和腹腔注射小剂量STZ的方法建立大鼠T2DM模型,将成模大鼠按随机数字表法随机分为糖尿病组(DM组),糖尿病+DL-炔丙基甘氨酸组(DM+ PAG组),另设正常对照组,各15只.每日固定时间腹腔注射受试制剂,DM+ PAG组给予PAG[50 mg/(kg· d)],对照组和DM组给予相同体积的生理盐水,连续给药2周.投药结束后,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(FIns)水平,胰腺组织中H2S水平,免疫组化法检测分析胰腺组织胰岛素、Caspase-3、Bax和Bcl-2的表达情况,并计算胰腺组织相对β细胞数量和平均β细胞面积.结果:与对照组相比,DM组大鼠血浆FIns降低,FBG升高,胰腺组织H2S浓度水平升高;胰腺组织胰岛素阳性颗粒减少,Caspase-3、Bax表达增强,Bcl-2的表达减弱,Bc1-2/pax比值降低;相对β细胞数量和平均β细胞面积均明显减小;经PAG处理后,大鼠血浆FIns明显升高,FBG降低,胰腺组织H2S浓度明显降低;胰腺组织胰岛素阳性颗粒明显增多,Caspase-3、Bax表达减弱,Bcl-2的表达增强,Bc1-2/Bax比值升高;相对β细胞数量和平均β细胞面积增加.结论:内源性H2S通过调节胰岛β细胞凋亡相关蛋白表达,促进胰岛β细胞的凋亡,减少2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的相对数量,从而减少胰岛素的分泌;而PAG能减少胰岛β细胞凋亡,增加2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的相对数量,增加胰岛素的分泌,达到控制血糖的目的.     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肺组织凋亡及相关因子的影响及其机制

目的 观察2型糖尿病大鼠肺组织细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9的表达变化及罗格列酮的干预作用.方法 8周龄SD大鼠高热量饮食1月后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ 30mg/kg),成模后分别于12、24周将动物处死,采用光镜、原位末端标记法检测肺组织细胞凋亡及用免疫组织化学(immunohistochemistry)方法检测各组肺组织Caspase-3、Caspase-9表达水平.结果 糖尿病大鼠肺组织凋亡细胞数明显增多,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著上调 ,但无统计学意义.罗格列酮干预组凋亡率降低(P＜0.01),升高的Caspase-3、Caspase-9蛋白表达下调,但与糖尿病未治疗组均无统计学差异(P＞0.05).结论 肺组织细胞凋亡在糖尿病大鼠肺损害病程中起一定作用,罗格列酮可抑制肺组织细胞凋亡,可能对糖尿病肺有保护作用.