应用含A蛋白的葡萄球菌(SpA)快速鉴定钩端螺旋体菌株群(型)别的实验研究

葡萄球菌细胞壁A蛋白(SpA)具有与人及多种哺乳动物IgG分子Fc段结合而Fab段仍保持抗原抗体反应的特性。国外从70年代初开始将SpA作为一种新的免疫试剂应用于多种细菌和病毒的鉴定,国内开展SpA的研究较迟。晚近,张颖悟等报告,用自选的葡萄球菌Z_5株作肠道病原菌和钩端螺旋体(简称钩体)的鉴定,并用1800株作脑膜炎球菌的群别鉴定,效果满意,可以代替传统的试验方法。鉴于钩体菌型复杂和来源的多样性,张氏等作钩体协同凝集试验(简称CA)时,标本数较少,菌型和来源亦较单一,故我们作了进一步研究。兹将实验情况和应用结果报告如下。     

金黄色葡萄球菌A蛋白的提取及其影响因素的初步探讨

众所周知,金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)的产量及活性与所用的菌株及提取方法有关。为了选择一株SPA含量高的菌株及SPA得率高的提取方法,曾对四株葡萄球菌及三种方法进行了比较试验,得出以下初步结果: 一、用热提取法对国际标准株CowanⅠ麦丹4972株、No1800株及Z_5株的SPA进行提取及活性鉴定,经比较证明CowanⅠ株和     

抗IgG血清的新制备法——IgG-SpA菌体免疫法的研究

金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphyloc-occal protein A,SpA)已广泛应用于微生物学、免疫学及细胞表面结构的研究。为了改进制备第二抗体的方法,我们设想葡萄球菌吸附血清中IgG后,可能并不改变IgGFC 段的免疫原性,试以血清中IgG致敏SpA菌体的结合物     

特异性抗体标记葡萄球菌№.1800株在脑膜炎球菌分群上的研究

用14群脑膜炎球菌分群血清标记自选的No.1800株制成SpA分群试剂。将在斜面或平板上生长的各群脑膜炎球菌用SpA试剂作协同凝集反应,其结果与平行的分群血清玻片凝集反应完全一致。SpA分群试剂对非相关的细菌均不出现交叉反应。方法简便并可节约分群血清。本试验还证实了自选的No.1800株具有替代国外标准株Cowan Ⅰ的应用价值。     

特异性抗体标记葡萄球菌Z_5株在钩端螺旋体快速定群上的研究

用自选的金黄色葡萄球菌Z_5株,以13群14型钩体免疫血清的适当稀释液标记后,作成10％(v/v)的SpA菌分群试剂,在玻片上与待试的钩体培养液作协同凝集反应,可在15分钟内用肉眼作出群的判断。用由黑线姬鼠分离出的21株钩体培养物作定群试验的结果与显凝试验完全一致,是一简易快速,便于普及的方法。本试验进一步证明了Z_5株是可以替代标准株Cowan Ⅰ,用于开展SpA在免疫学和血清学方面研究的。     

金黄色葡萄球菌蛋白A的纯化

葡萄球菌蛋白 A(简称 SpA)是大多数金黄色葡萄球菌所具有的细胞壁成份,它能与人及多种哺乳动物血清 IgG 的 Fo 片段发生非特异性结合。为进一步研究 SpA 的结构和生物学特性,必须获得纯化的 SpA。纯化方法有用酸沉淀和电泳或用柱层析、凝胶过滤等,但都较繁复,产率不高。Hjelm 等(1972)用溶葡萄球菌素(Lysostaphin)消化细菌后再经 IgG 柱的亲和层析以纯化 SpA,产率高,但溶葡萄球菌素来源困难,价格昂贵。我们利用现有实验条件对这一方法作些改良,获得产率较高的纯化 SpA。     

SAT花环形成试验检测人外周血T淋巴细胞的初步探讨

本文报告以猪抗人胚胸腺细胞球蛋白(AHTG)致敏人外周血T细胞后,用含SpA的葡萄球菌体(Cowan Ⅰ株)作用,使菌体结合于致敏T细胞周围,形成花环,即SAT(S:SpA,A:AHTG,T:T细胞)花环试验,是检测T淋巴细胞的一种新的试验方法。探讨了有关试验方法的建立及其影响因素;并用此法对96例健康献血员进行检验,其外周血中T细胞百分率为76.72％,符合正常人外周血T细胞百分率;同时设不合SpA的Z_(12)株、正常猪血清及非特异性IgG(抗AFP血清)3个     

含A蛋白金黄色葡萄球菌在抗原抗体反应中的一些试验方法

金黄色葡萄球菌A蛋白能够与人及其他一些哺乳动物血清中IgG的Fc段结合。利用这一特性,近些年来在国外将它作为一种免疫学试剂,已应用于免疫学和血清学的研究中,并取得了广泛的进展。在国内过去由于缺少Cowan Ⅰ标准株,故未见到有关实验报道。本文根据所见到的国外资料并结合我们自己的实践,对含A蛋白金黄色葡萄球菌在抗原抗体反应中的一些基本方法作了概括介绍。     

人和羊IgG对噬菌体展示细菌免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库的体外进化筛选

目的 使用人和羊不同物种IgG来诱导噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同的Fc段构像是否具有特异的结合优势,同时探索其优势结合序列的组合特点.方法 通过PCR获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的A、B、D、E和链球菌(C和G群)蛋白G (SpG)的B2、B3各单结构域片段,构建...     

羊抗人lgG抗体的IgG—SpA菌体免疫法

免疫学技术的飞跃发展,对第二抗体需要日趋增加,由于用常规法制备第二抗体操作复杂,本室等曾报道了免抗人、免抗小鼠IgG抗体制备的IgG—SpA菌体免疫法。本文报道用人血清致敏SpA菌体作为免疫原,免疫山羊制备抗人IgG抗体获得满意结果,现报道如下。材料一、菌株:含A蛋白葡萄球菌系本室自选的NO:1800株。二、人血清:健康人脐带血清由附属医     

特异性抗体标记葡萄球菌Z_5株协同凝集反应在肠道病原菌鉴定上的研究

将各肠道病原菌诊断血清标记在自选的金黄色葡萄球菌Z_5株上,以协同凝集反应的方法对标准菌种和新分离的地方株肠道病原菌,进行血清学鉴定和福氏痢疾杆菌的分型试验,所得结果与平行的诊断血清玻片凝集反应完全一致。这一新的方法,具有高度特异性和良好的敏感性,是适合于医院检验和防疫部门流行病学调查,作为常规方法中的血清学鉴定使用的简便而经济的方法。同时进一步证实了Z_5株是可以试用于SpA在免疫学和血清学研究上的良好菌种。     

葡萄球菌蛋白A在病毒学诊断中的应用

<正> 葡萄球菌蛋白A(SPA)是金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白成份,具有与人及多种哺乳动物血清中IgG类抗体Fc段结合的特性。国外自七十年代起对SPA广泛开展了研究;国内自1979年由张颖悟引进标准株以来也进行了大量研究。近年国内外学者应用SPA作为一种新的免疫学试剂,建立了许多敏感、特异、快速而简便的检测方法,本文仅就SPA在病毒学诊断中的应用综述如下。一、SPA主要性质 SPA分子是高度稳定的单一多肽链,分子量为42000。从N端开始有4个高度同源性片段,每个片段都具有与IgG Fc段结合的特性。SPA具有多结合片段的特性使SPA碘化     

应用酶联A蛋白测定肝吸虫病抗体

A蛋白(Staphylococcal protein A,简称SPA)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁的一种成分,属天然蛋白质,能与人及多种哺乳动物血清中IgG的Fc段结合。1979年国外开始用辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase HRP)标记SPA用于酶联免疫吸附试验(E     

用放射免疫法测定血小板表面相关IgG的临床应用

近年来,国外在检测血小板表面相关IgG(PAIgG)的技术方面有很大进展,采用的方法很多。我们利用葡萄球菌蛋白A能和IgG结合的特性,应用~(125)Ⅰ标记葡萄球菌蛋白A(简称~(125)Ⅰ-SPA)的方法检测血小板表面相关IgG,并观察了正常人59例和各种疾     

一起食物中毒的金黄色葡萄球菌肠毒素检测

目的 对一起食物中毒样品进行致病菌检测,准确分析食物中毒原因,为食物中毒的处理提供依据.方法 依据《食品卫生微生物学检验》国家标准GB4789.10-2010、GB 14938-94《食物中毒诊断标准及技术处理总则》和WS/T80-1996《葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则》方法对采集的12份食物中毒样品进行病原菌金黄色葡萄球菌检测;应用荧光定量PCR法对检出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素检测.结果 在12份样品中检出5株金黄色葡萄球菌,分别来自患者呕吐物4份,砧板棉拭子1份,全部检出A型肠毒素,未检出其他病原菌.金黄色葡萄球菌总检出率为41.7％.结论 金黄色葡萄球菌A型肠毒素是此次食物中毒的病原体.实时荧光PCR快速检测方法适用于金黄色葡萄球菌肠毒素的基因分型.     

A蛋白在免疫细胞化学中的应用——检查病人血清自身抗体IgG(ANA、PCA)的免疫细胞化学方法

A蛋白(Protein A简称SPA)产生于金黄色葡萄球菌细胞壁,它能和数种哺乳类IgG的Fc段高度特异性亲和,是藉助于两个结合点与IgG相结合。由于A蛋白能     

SPA痢疾杆菌分型试剂在实际应用上的价值

金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。     

新型四环素药物Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药16S rRNA基因突变位点分析

目的:研究Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药菌株的核糖体30S亚基16S rRNA基因和核糖体蛋白变异特点,阐明金黄色葡萄球菌Eravacycline耐药机制。方法:选择3株金黄色葡萄球菌株,采用Eravacycline不同压力浓度下逐渐诱导Eravacycline耐药金黄色葡萄球菌耐药菌株,挑取诱导菌株单克隆,采用琼脂平板稀释法测定母株及诱导系列的Tigecycline和Eravacycline的MIC值;通过PCR扩增其5个拷贝的16S rRNA基因(RR1-RR5)和30S核糖体蛋白基因,将诱导的Eravacycline耐药株扩增产物测序后与母株序列比较,获得该基因片段突变位点。结果:经过体外Eravacycline不同浓度梯度多步诱导共挑取6株Eravacycline耐药菌株,这些菌株的Tigecycline和Eravacycline的MIC值范围分别为8～16μg/mL和32～64μg/mL。16S rRNA基因PCR测序分析提示该基因的主要突变位点分别为RR1(T170G)、RR2(A1124G,G77A)、RR3(C810T)、RR4(G185A,G1036A),30S亚基核糖体蛋白S3蛋白没有突变,30S亚基核糖体蛋白S10基因多个位点突变。结论:金黄色葡萄球菌Eravacycline诱导耐药后可导致Tigecycline和Eravacycline的交叉耐药及16S rRNA基因和30S亚基核糖体蛋白S10位点突变。     

链球菌G蛋白——一种新型、广谱的免疫检测剂

某些链球菌菌株的细胞壁中含有一种能与免疫球蛋白G(immunoglobulin,IgG)结合的蛋白质成分,称为IgG Fc段受体或链球菌G蛋白(streptococcal protein G)。近年来,此种蛋白质已被成功分离、纯化,并应用于免疫学研究。与经典的葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)相比,链球菌G蛋白(以下简称SPG)更易与IgG发生反应,亲和力强,结合谱广,已受到密切的关注。目前,国内尚未见有关SPG研究的综述文章及实验报道。现将国外SPG研究的新进展介绍如下。     

我国用协同凝集试验快速诊断副霍乱菌的实验研究进展

葡萄球菌A蛋白(SPA)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分,具有与人及多种哺乳动物血清IgG分子Fc段结合的特性,因此可用其进行多种免疫学试验。由于用SPA所建立的各种实验方法,具有敏感、特异、简便、经济和应用广泛等优点,现已成为医学和生物学领域中许多学科研究中常用的新技术。