孕激素对黑素瘤细胞抑制性配体分子表达影响的体外研究

目的:探讨孕激素对黑素瘤细胞免疫抑制性分子表达影响及可能的信号传导机制.方法:体外培养黑素瘤细胞系A375 及A875,并以不同浓度孕激素、孕激素受体拮抗剂RU486以及Pβ-K/Akt抑制刺LY294002进行诱导.RT-PCR、ELISA或蛋白质印迹法分别检测IL-10、TGF-β1及HLA-G mRNA及蛋白表达以及Pβ-K/Akt 信号途径Akt磷酸化水平.结果:黑素瘤细胞系A375及A875均在mRNA及蛋白水平表达IL-10及TGF-β1.孕激素浓度≥1×107mol/L对2株细胞IL-10表达均有显著上调作用;对TGF-β1表达无明显影响;不能诱导HLA-G表达.Akt抑制刺LY294002可消除孕激素对IL-10表达上调效应.而RU486无拮抗效应.孕激素浓度为1×10-7mol/L时上调A375细胞Akt磷酸化水平.结论:高浓度孕激素可体外上调黑素瘤免疫抑制分子IL-10的表达,并与不依赖经典细胞核受体的PI3-K/Akt途径激活有关.     

PI3K/AKT抑制剂对人肺癌细胞株生长的影响

目的 研究PI3K／Akt特异性抑制剂LY294002对人肺腺癌细胞株（A549）增殖的影响。方法 用免疫细胞化学S-P法检测对照组和LY294002干预组A549细胞p-Akt蛋白的表达，MTT法检测对照组和LY294002干预组（LY294002 5μmol／L，10μmol／L，20μmol／L，40μmol／L）干预24h，48h、72h后A549细胞增殖的抑制率。结果 LY294002以剂量、时间依赖性方式抑制A549细胞的生长，各个LY294002干预组与对照组相比p-Akt蛋白的表达降低，有统计学意义（P〈0．01）。结论 LY294002对人肺腺癌A549细胞有抑制生长的作用。LY294002对p-Akt表达的抑制可能是细胞增殖受抑的重要原因。     

肝癌细胞中PI3K信号通路对VEGF表达的影响

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达调控中的作用.方法: 体外培养高转移性人肝癌细胞株HCCLM3,分为对照组、PI3K特异性抑制剂LY294002浓度5μmol/L组,LY294002浓度10μmol/L及20μmol/L组,处理6小时后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测VEGF mRNA表达的变化.结果: LY294002可使肝癌细胞HCCLM3的VEGF mRNA的表达下降,且这种抑制作用随着LY294002浓度增大而增大(P<0.01),呈现剂量移赖性关系.结论: LY294002可以抑制肝癌细胞株HCCLM3中VEGF的表达,肝癌细胞VEGF的表达调控受PI3K信号通路调控.     

PI3K特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株逆转作用的研究

  目的  研究磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株（A2780/Taxol）多药耐药逆转的影响。  方法  将PI3K特异性抑制剂LY294002处理卵巢癌紫杉醇耐药细胞24 h后, 用CCK-8（Cell Counting Kit-8）法检测细胞的增殖速度、对紫杉醇敏感性的分析; 采用流式细胞技术检测细胞周期和凋亡。应用Western blot检测细胞中P-glycoprotein（P-gp）、Akt和p-Akt蛋白的表达情况。  结果  用LY294002处理A2780/Taxol细胞后细胞增殖速度变慢、对紫杉醇的半数抑制浓度（IC₅₀）降低。实验组和对照组细胞的凋亡率分别是（2.64±0.90）%和（10.98±1.16）%（P < 0.05）。LY294002处理后的G₀/G₁期细胞增加, S期明显减少, 差异有统计学意义（P < 0.05）。LY294002处理后的细胞与对照组相比P-gp和p-Akt的蛋白表达降低。  结论  LY294002能够有效的逆转卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol产生的多药耐药。      

肝癌细胞中P13K信号通路对VEGF表达的影响

目的：研究磷脂酰肌醇3-激酶（P13K）信号通路在肝癌细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达调控中的作用。方法：体外培养高转移性人肝癌细胞株HCCLM3,分为对照组、P13K特异性抑制剂LY294002浓度5μmol／L组,LY294002浓度10μmol／L及20μmol／L组,处理6小时后,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测VEGF mRNA表达的变化。结果：LY294002可使肝癌细胞HCCLM3的VEGFmRNA的表达下降,且这种抑制作用随着LY294002浓度增大而增大（P〈0．01）,呈现剂量移赖性关系。结论：LY294002可以抑制肝癌细胞株HCCLM3中VEGF的表达,肝癌细胞VEGF的表达调控受P13K信号通路调控。     

PI-3K/Akt抑制剂LY294002对卵巢癌细胞A2780/Taxol多药耐药性的逆转作用

背景与目的:磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)可抑制细胞凋亡,对PI-3K抑制剂的研究可以更好地了解PI-3K的促癌机制,为多种癌症如卵巢癌、乳腺癌等的基因治疗提供线索。本研究目的在于探讨PI-3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对卵巢癌耐紫杉醇细胞株A2780/Taxol多药耐药的逆转作用。方法:用LY294002处理A2780/Taxol细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞对紫杉醇的药物敏感性,RT-PCR检测MDR1mRNA的表达,Western blot方法分析LY294002作用前后磷酸化Akt及P-gp蛋白的表达。结果:10和50μmol/L LY294002干预A2780/Taxol细胞24h后,A2780/Taxol细胞凋亡率分别为(8.84±1.65)%和(20.78±2.47)%,显著高于未干预细胞的凋亡率(1.25±0.78)%(P<0.05);A2780/Taxol细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),相对逆转效率最高可达(78.08±0.37)%;MDR-1mRNA、磷酸化Akt及P-gp蛋白均明显降低。结论:PI-3K/Akt信号通路的激活与卵巢癌细胞多药耐药的产生有关,PI-3K/Akt抑制剂LY294002可逆转卵巢癌细胞A2780/Taxol的多药耐药。     

阻断PI3K/Akt信号通路对低氧微环境中BCSCs微球体细胞增殖的影响

目的:探讨LY294002特异性阻断磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路对低氧条件下乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)微球体细胞增殖的影响。方法:通过无血清悬浮培养技术从人乳腺癌MCF-7细胞中筛选BCSCs微球体,应用免疫荧光染色检测BCSCs相关标志物CD44及CD133的表达,MTT法检测不同浓度LY294002处理后BCSCs微球体细胞的增殖情况,RT-PCR法检测BCSCs微球体细胞中缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)mRNA的表达,蛋白质印迹法检测BCSCs微球体细胞中HIF-2α、PI3K和磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白的表达。结果:筛选获得的微球体细胞高表达BCSCs相关标志物CD44和CD133。LY294002能有效抑制低氧条件下BCSCs微球体细胞的增殖,抑制效应在药物作用后72～96h最为明显(P<0.05)。与低氧组比较,低氧+LY294002组微球体细胞中HIF-2αmRNA及PI3K、p-Akt和HIF-2α蛋白表达水平均明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LY294002通过特异性阻断PI3K/Akt信号通路而有效抑制低氧条件下BCSCs微球体细胞的体外增殖能力。     

贝母素乙通过调控PI3K/Akt信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的：探究贝母素乙（Peiminine）对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响及其可能作用机制。方法：采用不同浓度贝母素乙或联合PI3K抑制剂LY294002干预MCF-7细胞,MTT法检测细胞增殖能力;Hoechst33258染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测细胞中PI3K(p110α)、Akt、p-Akt(ser473)、Bad、Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3以及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)等蛋白表达水平。结果：贝母素乙可呈时间-浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞出现凋亡形态改变,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,上调细胞中Bad、Bax、cleaved-Caspase-3及胞浆中Cyt C蛋白表达水平,下调PI3K(p110α)、p-Akt、Bcl-2和线粒体中Cyt C蛋白表达水平,而Akt蛋白表达水平无显著变化。然而,联合LY294002干预可增强贝母素乙对MCF-7细胞凋亡的促进作用。结论：贝母素乙可诱导乳腺癌MCF-7细胞凋...     

手性霉素联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂对人卵巢癌细胞的抑制作用

目的:研究手性霉素(Manumycin)联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂(LY294002)对人卵巢癌细胞株的抑制作用,为临床治疗中晚期妇科肿瘤提供实验资料.方法:Manumycin和LY294002分别及联合在不同药物浓度下作用于人卵巢癌细胞株HO8910PM和OVCAR-3,用MTT法评价其抑癌效果.结果:Manumycin单独使用,对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为70.3μM/L和59.8μM/L;LY294002单独使用,对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为76.7 μM/L和26.5 μM/L;Manumycin与LY294002联用(固定LY294002浓度),对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为68.5 μM/L和32.9 μM/L,LY294002与Manumycin联用(固定Manumycin浓度),对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为65.0 μM/L和13.6 μM/L.结论:Manumycin和LY294002对人卵巢癌细胞株均有抑制作用,与单独用药相比,二者联用有显著增效作用.     

PI3K/Akt途径在朊蛋白介导胃癌耐药中的作用研究

目的:探讨PI3K/Akt途径在朊蛋白(PrPc)介导胃癌耐药中的作用.方法:脂质体基因转染法建立高表达PrPc的胃癌细胞亚系.Western印迹检测转染细胞中Akt蛋白的表达.噻唑蓝(MTT) 比色法测定单独或联用PI3K抑制剂LY294002时转染细胞对化疗药物的敏感性.流式细胞仪检测单独或联用LY294002时转染细胞内阿霉素蓄积和潴留.结果:将PrPc正义载体pcDNA-PrP转入SGC7901,成功建立PrPc高表达胃癌细胞亚系并命名为PS;空载体转染细胞命名为BS.Western-Blot显示磷酸化Akt在PS中的表达较BS及SGC7901增高,而三者的总Akt则无差别.未经LY294002处理时,在阿霉素或长春新碱的作用下,PS的存活率分别为91.4%±3.4%和89.4%±3.8%,较BS(79.2%±4.3%和75.9%±2.1%)明显增高(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量分别为4.4±0.3和4.2±0.4,明显低于BS(8.2±0.5和8.0±0.3)(均 );当联合LY294002处理后,PS在两种药物作用下的存活率均随着LY294002浓度的增加逐渐降低,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量逐渐增高,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ).结论:PrPc介导的胃癌耐药与PI3K/ Akt途径活性密切相关,抑制PI3K/ Akt途径活性可逆转PrPc介导的胃癌耐药.     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

裘法祖教授生平

Prof.Fazu Qiu,member of the Chinese Communist Party,surgery professor of Tongji Hospital,departed in Tongji Hospital,Wuhan,China,at fourteen to nine a.m,June 14,2008,after a disease.He turns 94 this year.He was the senior academician of the Academia Sinica,the illustrious medical scientist of China,and the Honorary Director of Tongji Medical College,as well as Huazhong University of Science & Technology.     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

Dermatomycosis in Dogs

During the routine examination of dogs for cutaneous lesions, 205 dogs were screened for fungi other than dermatophytes. Twenty-two dogs (10.8%) revealed the presence of non-dermatophytic fungi suspicious for representing the etiologic agents of the skin lesions. The fungi isolated were Alternaria sp. (2.9%), Penicillium sp. (2.4%), Aspergillus fumigatus (2.0%), Mucor sp. (1.5%), Cladosporium sp. (1.5%) and Fusarium sp. (0.5%). No dermatophyte was isolated in association with these fungi. The incidence of these infections was found to be greater in warm and humid climate.     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.