TGFβ1与Smad4基因在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨TGFβ-Smad信号通路中TGFβ1与Co- Smad(Smad 4)与肝细胞癌的发生、发展的关系.方法 采用免疫组化ABC法及原位杂交法(ISH),检测41例肝细胞癌组织与癌旁组织中TGFβ1、Smad 4蛋白、Smad 4 mRNA的表达,以5例外伤性肝破裂手术切除标本作为正常对照.比较HCC组与时照组及HCC癌旁中TGFβ1与Smad 4蛋白、Smad4 mRNA表达的差异,并进行图像分析.结果 正常对照组中TGFβ1呈阴性表达,Smad 4蛋白、Smad 4 mRNA均呈阳性表达;HCC组织中TGFβ1阳性表达率为78.0%(32/41),癌旁组织中为95.1%(39/41),两者比较差异显著(P<0.05);Smad 4蛋白在HCC组织中阳性表达率为48.8%(20/41),在癌旁组织中为78.0%(32/41),两者比较有显著性差异(P<0.01);Smad 4 m RNA在HCC组织中阳性表达率为51.2%(21/41),在癌旁组织中为73.1%(30/41),两者比较有显著性差异(P<0.05);与正常肝组织比较,HCC组织中Smad 4蛋白和Smad 4 mRNA阳性表达率均显著降低(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ级HCC组织与Ⅲ、Ⅳ级HCC组织Smad 4 m RNA阳性表达存在显著差异(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级阳性表达率较Ⅰ、Ⅱ级降低;Smad 4蛋白的阳性面积百分比、光密度及Smad 4 m RNA的阳性面积百分比癌旁组织均显著高于HCC组织(P均<0.05).HCC组织中Smad 4蛋白、Smad 4 m RNA表达与TGF-β1表达比较均存在显著差异(P<0.05),但均无显著相关性(P>0.05).结论 TGFβ1过表达、Smad4表达缺失可能在肝细胞癌的发生、发展中发挥重要作用.     

肝细胞癌组织Smac蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织中Smac(第二个线粒体Caspase激活因子)的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系.方法:应用免疫组化二步法检测HCC及相应癌旁肝硬化组织各41例、肝血管瘤旁正常对照组织9例中Smac、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;应用TUNEL法检测组织中细胞的凋亡.结果:在41例HCC组织中,Smac阳性数为14例(34.14%),相应癌旁肝硬化组织为23例(56.10%),肝血管瘤旁正常对照组织为7例(77.78%),HCC组织中Smac的阳性率与相应癌旁及正常组织相比差异有统计学意义,x2值分别为3.989和4.115,P值分别为0.046和0.042;HCC组织中Smac蛋白的表达与细胞的凋亡增殖比有相关性,t'=2.26,P＜0.05,而与患者的年龄、组织分化程度等临床病理指标均无相关性,P均＞0.05.结论:Smac的相对低表达或表达缺失在一定程度上打破了HCC组织中细胞凋亡与增殖之间的动态平衡,在HCC的形成过程中起到了重要的作用.     

核因子-κB p65在肝炎相关性肝细胞癌中的表达及意义

目的:探讨核因子 κBp65(p65)、IκB a(inhibitoryκB α)在肝炎相关性肝细胞癌(HCC)中的表达、相互关系及其与临床病理的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测 83例肝炎相关性HCC组织石蜡标本中P65、IkB a蛋白; 应用免疫印迹法、免疫组织化学法检测 34例冰冻肝炎相关性HCC组织、配对癌旁组织、9例正常肝脏组织中P65、IkB a的蛋白,并结合肝癌的临床病理特点进行分析。结果:免疫组织化学结果与免疫印迹结果具有一致性(P>0. 05);P65在癌组织中的阳性率 71. 8% (84 /117)高于癌旁组织 20. 5% (24 /117) (P<0. 01),正常组织不表达;IkB a在癌组织中的阳性表达率 25. 6%,低于癌旁组织 55. 5% (65 /117) (P<0. 05),正常组织无表达;P65在C型肝炎相关性HCC(C HCC)和B、C混合型肝炎相关性HCC(BC HCC)中的阳性表达率 83. 9% ( 26 /31 )、89. 4% (17 /19),分别高于B型肝炎相关性HCC(B HCC) 61. 2% (41 /67) (P<0. 05);同时免疫印迹法证明,P65在HCC组织中阳性率增加、而IkB a表达减少。HCC中P65蛋白阳性与其组织学类型、组织分级、包膜状况、AFP值之间差异均无显著性(P>0. 05),P65蛋白阳性在转移组高于非转移组,有显著差异(P<0. 05),并且P65蛋白阳性与肿块大小有关(P<0. 05)。结论:肝炎相关性HCC中P65被激活,     

肝细胞癌衍生生长因子与肝细胞癌的相关性

目的:研究肝细胞癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)临床病理特征的相关性.方法:收集100例HCC患者术后的癌组织标本和10例正常肝组织标本及其临床病理资料.采用组织芯片技术和免疫组织化学法检测HCC、癌旁以及正常肝组织中的HDGF蛋白表达.结果:HDGF在细胞核和细胞质表达,在HCC组织中阳性率为58%,癌旁组织及正常肝组织中阳性表达率为34%和20%,差异具有统计学意义(P<0.05);HDGF表达与癌组织的分化程度及TNM分期密切相关(P<0.05).结论:HDGF在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织和正常肝组织,HDGF与HCC分化程度和TNM分期相关.     

食管癌相关基因4(ECRG4)在肝细胞肝癌组织中表达及临床意义

目的 分析ECRG4基因在肝细胞肝癌组织(HCC)中的表达与甲基化情况,并探讨其临床意义.方法 分别采用免疫组化法、MSP-PCR两种方法,检测50例肝癌组织、对应癌旁组织及31例正常肝组织中的ECRG4蛋白的表达和ECRG4启动子区甲基化情况,并探讨两者之间的相关性.结果 ECRG4蛋白在肝癌组织、癌旁肝组织中表达水平显著低于正常肝组织(P<0.05),在肝癌组织中表达水平显著低于癌旁肝组织(P<0.05);且ECRG4肝癌组织的甲基化检出率明显高于癌旁肝组织及正常肝组织(P<0.05).ECRG4蛋白低表达率与ECRG4甲基化检出率明显相关(P均<0.05).结论 ECRG4在HCC组织中表达下调与其启动子区高甲基化存在明显的关联性,在肝癌的发生中发挥重要作用.     

肝细胞癌中OY-TES-1基因mRNA的表达

 目的：检测OY-TES-1基因mRNA在肝细胞癌(HCC)中的表达水平。方法:建立实时定量PCR方法,检测56例HCC及37例配对癌旁组织中目的基因OY-TES-1及看家基因HPRT的表达,OY-TES -1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示,应用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析。结果:（1）经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为73.21%（41/56）,癌旁组织阳性率为 64.86%（24/37）,有17对HCC及配对癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织中 的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的 癌旁组织（P＜0.05）,但与HCC患者的年龄、性别等临床资料无关。结论:OY-TES-1 mRNA在HCC中有较高的表达频率,其表达水平高于对应的癌旁组织,它有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原。OY-TES-1蛋白在HCC及癌旁组织中的表达及相关意义尚值得做进一步的研究。     

食管鳞癌组织垂体瘤转化基因表达及其临床意义的研究

目的:探讨食管鳞癌组织中垂体瘤转化基因(PTTG)mRNA及其蛋白的表达?与肿瘤临床病理特征的关系.方法:采用RT-PCR技术检测30例食管鳞癌及相应的30例癌旁组织中PTTG mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测标本中PTTG蛋白的表达.结果:在食管鳞癌组织中PTTGmRNA的阳性表达率(93.3%)及平均表达水平(0.69±0.06)显著高于相应的癌旁正常组织(70.0%和0.32±0.06),两组比较差异有统计学意义,P<0.01.PTTG蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达(83.3%,25/30)明显高于在癌旁组织中的阳性表达(20.0%,6/30),P<0.01;并与淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关.结论:PTTG基因异常表达可对食管鳞癌的发生和发展起重要作用,可能为食管鳞癌的早期诊断和基因治疗提供新的靶点.     

MMP-2 mRNA及蛋白的表达在原发性 肝细胞癌组织中的意义

 目的 探讨原发性肝细胞癌（HCC）组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和MMP-2蛋白的表达,及其与临床病理参数之间的关系。方法 应用RT-PCR技术、免疫组织化学Maxvison^TM法,分别检测47例HCC组织及其癌旁组织、20例正常肝组织中MMP-2 mRNA和MMP-2蛋白的表达情况。结果（1）MMP-2 mRNA和MMP-2蛋白在肝癌中的表达分别为70.2%（33/47）和63.8％（30/47）,均高于癌旁组织12.7％（6/47）和正常组织10％（2/20）, 差异有统计学意义(P＜0.01), 癌旁组织和正常组织中MMP-2的表达差异无统计学意义(P>0.05);MMP-2mRNA和MMP2蛋白在肝癌中表达的两种检测方法差异无统计学意义(P>0.05);（2）癌组织中MMP-2的表达在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期组中的阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期组(P＜0.05),血管内有肿瘤栓组MMP 2阳性率明显高于无瘤栓组(P＜0.05）,有转移组的阳性率高于无转移组(P＜0.05）。结论 MMP-2的表达与HCC的TNM分期、血管内有无瘤栓和转移密切相关,可作为判断HCC侵袭性的评估指标之一。     

TC21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义

目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。