Survivin基因和半胱氨酸酶蛋白激活剂在结肠癌中的表达及临床意义

目的观察Survivin基因和半胱氨酸酶蛋白激活剂(Smac)在结肠癌中的表达情况及临床意义。方法利用免疫组织化学方法分别检测60例结肠癌组织、46例癌旁组织和40例正常结肠黏膜组织中Survivin基因和Smac蛋白的表达情况。结果结肠癌组织中Survivin的阳性率均高于癌旁组织和正常结肠黏膜组织(均P<0.05),Smac阳性率均低于癌旁组织和正常结肠黏膜组织(均P<0.05)。结肠癌组织中,Survivin表达与组织学分型无关(P>0.05),与肿瘤细胞分化程度低、淋巴结转移和Dukes分期中C和D期均有关(均P<0.05)。Smac表达与组织学分型无关(P>0.05),肿瘤细胞分化程度低、淋巴结转移和Dukes分期中C和D期均有关(均P<0.05)。结论Survivin和Smac在结肠癌的发生和侵袭转移过程中有着重大作用。     

Alpha B-crystallin基因在结肠癌组织中的表达及其意义

 目的 探讨alpha B-crystallin 基因在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理的相关性。 方法 采用RT-PCR方法检测64例结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin 基因的表达,计算其阳性率;并用Western blot方法检测结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin蛋白的表达变化。 结果 alpha B-crystallin mRNA在结肠癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),在发生浆膜外转移者的表达阳性率明显高于浆膜内者(P<0.05),在较大肿瘤者中的表达阳性率明显高于较小肿瘤者,在有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。alpha B-crystallin蛋白在结肠癌组织中表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01)。 结论 alpha B-crystallin基因的高表达可能与结肠癌的发生及侵袭转移有关。     

结肠癌组织中miR-802和RAB23的表达水平及临床意义

目的:检测微小RNA-802(miR-802)和RAB23在结肠癌组织中的表达水平,探究其临床意义。方法:以本院2014年3月至2015年4月收治的结肠癌患者84例为研究对象,所有患者经诊断后行结肠癌根治术,术中取患者癌组织及癌旁正常组织。实时荧光定量PCR检测miR-802和RAB23 mRNA表达水平,免疫组化分析RAB蛋白表达水平。结果:miR-802在结肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织,RAB23表达水平显著高于癌旁正常组织（P<0.05）;结肠癌组织中RAB23蛋白表达阳性率显著高于癌旁正常组织（P<0.05）;相关性分析表明结肠癌组织中miR-802表达水平与RAB23 mRNA表达水平呈负相关（P<0.05）;miR-802和RAB23表达水平与患者肿瘤大小和淋巴转移情况有关（P<0.05）;结肠癌患者中miR-802低表达者、RAB23阳性表达者生存率分别显著低于miR-802高表达者、RAB23阴性表达者（P<0.05）;COX分析显示miR-802和RAB23表达水平是影响结肠患者不良预后的独立危险因素（P<0.05）。结论:miR-802在结肠癌患者癌组织中表达水平显著降低,RAB23表达水平显著升高,与结肠癌患者预后有关,可为结肠癌患者预后判断提供参考。     

Rab25蛋白在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨Rab25蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化SP法检测56例结肠癌组织和对应癌旁组织中Rab25蛋白的表达情况,分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系.结果:56例结肠癌组织中Rab25蛋白阳性表达率73.2%(41/56),癌旁组织中Rab25蛋白阳性表达率28.6%(16/56).在癌组织与癌旁组织之间,Rab25蛋白的表达存在显著性差异(P<0.05).Rab25表达与结肠癌的组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切有关,差异有统计学意义(P<0.05).结论:Rab25在结肠癌组织中存在显著高表达,提示Rab25的异常高表达在结肠癌的发生发展中起重要作用.     

c-erbB-2蛋白在人结肠癌组织中的表达及其与临床病理关系

目的 探讨人结肠癌组织中c-erbB-2蛋白的表达及其与临床病理的关系.方法 采用免疫组织化学SABC法研究80例人结肠癌组织标本、30例癌旁黏膜组织、30 例正常结肠黏膜上皮中c-erbB-2基因的表达.结果 癌组织c-erbB-2 阳性表达率明显高于癌旁组织和正常组织( 62.5%、26.7%、6.7%,P<0.05).c-erbB-2阳性表达率在Dukes C和D期和有淋巴结转移者明显高于Dukes A和B期和无淋巴结转移者(81.8% vs 48.9%,P=0.003).结论 c-erbB-2 在结肠癌组织中的表达有较高的特异性,c-erbB-2基因在分期晚和有淋巴结转移者中表达较高,提示可以作为结肠癌的诊断或预后指标.     

肝癌及相关组织中NET-1基因与蛋白的表达

背景与目的:NET-1是最近发现的肿瘤相关基因,它在肝癌中的表达目前尚未见报道。本研究在胚胎肝、成人肝、肝癌及相应的癌旁组织中筛检和比较NET-1基因和蛋白表达,以探讨NET-1基因在肝癌表达的特征。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3例胚胎肝、4例成人肝、4例验证肝癌组织和28例肝癌与相应癌旁组织中NET-1mRNA的表达,由四星图像分析系统软件检测NET-1基因mRNA的光密度。用基因生物工程方法制备NET-1多克隆抗体,并用激光共聚焦显微镜观察免疫荧光细胞化学检测培养的人肝癌细胞系SMMC-7721中NET-1抗体的表达,免疫组化法检测28例肝癌与癌旁组织中NET-1蛋白的表达。结果:(1)正常成人和胎儿肝组织中NET-1基因mRNA不表达,4例验证肝癌组织中NET-1基因mRNA均呈阳性表达;肝癌与癌旁组织中NET-1基因mRNA高表达,阳性率均为85.71%(24/28)。肝癌组织中NET-1mRNA的平均光密度显著高于癌旁组织(0.64与0.47,P<0.05)。(2)经激光共聚焦显微镜观察SMMC-7721细胞中NET-1抗体的表达定位于胞浆。(3)免疫组化检测NET-1多克隆抗体在同组肝癌和癌旁组织中NET-1蛋白检出率分别为96.43%(27/28)和71.43%(20/28),两者差异具有显著性意义(P<0.05)。(4)RT-PCR方法和免疫组化方法检测肝癌和癌旁组织中NET-1基因mRNA表达与蛋白表达两者之间阳性率无显著性差异,并呈显著性正相关(癌中r=0.48,癌旁r=0.40,均P<0.05)。结论:NET-1基因表达可能是肝癌发生的早期分子事件,该基因在肝癌诊断中可能有一定的参考价值。     

结肠癌组织中癌症高表达蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌组织中癌症高表达蛋白(Hec1)的表达与肿瘤浸润、转移及预后的关系.方法:采用免疫组化SP法检测20例正常结肠组织、40例癌旁组织及癌组织中Hec1的表达,用蛋白印迹法检测上述组织中Hec1蛋白的表达.结果:在正常结肠组织、癌旁组织及癌组织中,Hec1蛋白的阳性表达率分别为0、20.0%和67.5%,各组织中Hec1蛋白的表达差异均有统计学意义,P<0.05.Hec1蛋白的表达与结肠癌的临床病理分期、侵袭转移显著相关,在发生淋巴道转移及低分化的肿瘤组织中,Hec1蛋白高表达.蛋白印迹法结果表明,在正常结肠组织、癌旁组织及癌组织中,Hec1蛋白的平均表达量的分别为0、0.13±0.02、0.87±0.15,差异有统计学意义,P<0.05.结论:Hec1蛋白的过度表达可能在结肠癌的发生和发展中起重要作用,联合应用Hec1蛋白阳性表达率与其临床病理学分级,有助于正确判断患者的预后.     

BRF2 基因在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测TFIIB相关因子2(TFIIB-related factor 2,BRF2)基因在人食管鳞状细胞组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达,分析BRF2在食管鳞状细胞癌发生、发展及预后中的意义。方法:选取2007年1月至2008年1月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的食管鳞状细胞患者74例,应用RT-PCR和免疫组化方法检测食管鳞状细胞组织、癌旁组织和正常食管组织中BRF2 mRNA和蛋白表达水平。结果:食管鳞状细胞癌及其癌旁组织中BRF2 mRNA表达水平明显高于正常食管组织。食管鳞状细胞组织、癌旁组织和正常食管组织中BRF2蛋白表达阳性率分别为54.5%、32.5%和7.5%,癌组织、癌旁组织中BRF2蛋白的阳性率均显著高于正常食管组织(P<0.05)。随着食管鳞状细胞分化程度升高,BRF2蛋白阳性率显著下降,Ⅲ期和Ⅳ期食管鳞状细胞组织中BRF2蛋白阳性率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(72.7%,73.3%vs 35.7%,34.8%,P<0.05),且生存3年以下的食管鳞状细胞癌患者BRF2表达明显高于3年以上者(69.2%vs 38.2%,P<0.05),吸烟患者预后BRF2蛋白阳性率明显高于非吸烟患者(61.1%vs 30.4%,P<0.05)。结论:食管鳞状细胞癌组织高表达BRF2蛋白,BRF2 mRNA和蛋白与患者不良预后相关,可能作为食管鳞状细胞预后判断的参考指标之一。     

应用蛋白质组学方法筛选结肠癌相关蛋白质

目的通过比较结肠癌组织与癌旁正常肠组织的差异表达蛋白谱,以期发现结肠癌癌变相关蛋白。方法将结肠癌组织与癌旁正常结肠组织蛋白进行双向凝胶电泳,选择在癌组织中高表达的50个点进行MALDI-TOF质谱分析和生物信息学分析。Western Blot和免疫组化方法验证蛋白的差异表达。结果建立了结肠癌及正常肠组织的双向凝胶电泳图谱,其中癌旁正常结肠组织和结肠癌组织电泳图谱中平均蛋白质点数分别为860±45和980±28;癌旁正常结肠组织和结肠癌组在IEF方向上的平均偏差分别为(0.487±0.11)mm和(0.654±0.11)mm,在SDS-PAGE方向上的平均偏差分别为(0.944±0.12)mm和(1.20±0.22)mm,结肠癌与癌旁正常结肠组织的差异表达蛋白质点数为72.00±12.34。选择在癌组织中高表达的50个点进行质谱分析和生物信息学查询,鉴定了其中有意义的25个点,包括谷胱苷肽S转移酶、肝脂肪酸结合蛋白、热休克蛋白27等。免疫组化方法检测结肠癌组织芯片中GST和HSP27的表达,结果显示,GST在结肠癌中表达的阳性率为73.7%,在正常肠黏膜中表达的阳性率为28.6%,差异有显著性(P<0.01);HSP27在结肠癌中表达的阳性率为73.7%,在正常肠黏膜中表达的阳性率为21.4%,差异有显著性(P<0.01)。结论蛋白质组学方法较好地显示结肠癌组织和癌旁正常组织的差异表达蛋白;其中在结肠癌组织中高表达蛋白HSP27和GST可能作为结肠癌诊断标志物。     

Livin转录变体在结肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨凋亡蛋白抑制因子Livin 2种转录变体(Livin α和Livin β)在结肠癌中的表达及其临床意义.方法:采用以SYBR Green Ⅰ为染料的实时荧光定量-PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR),分析24例结肠癌组织中Livin α和Livin β2种转录变体的表达情况,并以癌旁正常组织和良性病变组织作为对照.结果:结肠癌组织中Livin α的表达阳性率为75%(18/24),明显高于癌旁正常组织的16.7%(4/24)和良性病变组的11.1%(1/9);Livin β的阳性率为83.3%(20/24),癌旁正常组织为16.7%(4/24),良性病变组为11.1%(1/9);Livin α和Livin β的表达率与患者的性别、癌症转移无相关性(P>0.05),与结肠癌Dukes病理分期也无明显相关性,但Livin α与结肠癌分化程度呈正相关(P<0.05).结论:凋亡蛋白抑制因子Livin 2种转录变体在结肠癌组织中高表达,且Livin α与结肠癌分化程度密切相关.