人γδT细胞、CD3AK细胞、CIK细胞和树突状细胞对已建立胃癌裸鼠的治疗作用

目的 探讨胃癌患者外周血γδT细胞、CD3AK细胞、CIK细胞和树突状细胞(DC)对已建立的胃癌裸鼠的免疫治疗作用.方法 用人胃癌细胞株(SGC-7901)接种BALC/c裸鼠皮下,建立胃癌裸鼠模型.将已建立胃癌的裸鼠随饥分为4组,每组5只,A组:用RPMI-1640培养液治疗作为对照组;B组:DC+CIK细胞治疗组,C组:γδT细胞治疗组;D组:DC+CD3AK细胞+γδT细胞治疗组,治疗组每次治疗同时给予IL-26000单位,肿瘤细胞接种第4天开始治疗,以后每3 d进行一次治疗,共3次,从接种肿瘤细胞后第55天结束实验.结果 裸鼠接种5 × 106胃癌细胞后第4天,存接种部位均有肿瘤形成,直径为2～3 mm,成瘤率为100%.荷瘤小鼠经第一次细胞免疫治疗3 d后B、C、D组肿瘤消退裸鼠分别为1、2、1只,第2次细胞免疫治疗后肿瘤消退的裸鼠的数目分别为2、2、2只,末消退的肿瘤体积均有减少,而对照组肿瘤体积不断增大.在第一次治疗后20 d时测A、B、C、D组平均肿瘤体积分别为87、40、45和38 mm3,各治疗组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).治疗组存活天数较对照组存活天数长,其中C组与D组存活天数比较差异有统计学意义(P<0.01),D组长于C组.结论 用胃癌患者的DC+CIK细胞、γδT细胞、DC+CD3AK细胞+γδT细胞治疗胃癌裸鼠能不同程度消退裸鼠已建立的胃癌和延缓其生长.细胞免疫治疗能延长荷瘤裸鼠生存期,其中 D组免疫治疗后小鼠存活天数大于C组.     

CIK细胞对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的 探讨细胞因子激活的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用.方法 体外分离健康人外周血单个核细胞,干扰素-γ、白细胞介素-2、CD3单抗诱导培养14 d,流式细胞仪测细胞表型,LDH法测定不同效靶比时CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性.12只BALB/c裸鼠分为两组,每组6只.每只裸鼠皮下接种1×106个EC9706细胞,治疗组裸鼠同时每只经尾静脉注入3×107个CIK细胞,每周1次,连续3周,观察两组裸鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤体积变化.成瘤后3周,眼眶取血,流式细胞仪检测人CIK细胞;处死裸鼠,取瘤块称重,计算抑瘤率,观察肿瘤病理特点.结果 CIK细胞中CD3+CD56+细胞占42.50%,CIK细胞表面NKG2D表达率为67.10%.效靶比10:1、20:1、30:1时CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性分别为(28.81±0.47)%、(37.78±0.22)%、(44.31±1.06)%,差异有统计学意义(P<0.01).对照组和CIK细胞治疗组成瘤时间分别为(9.00±1.26)d、(15.67±4.37)d,差异有统计学意义(P<0.01);瘤重分别为(3.24±0.11)g、(2.10±0.10)g,差异有统计学意义(P<0.01),CIK治疗组的抑瘤率为35.19%.HE染色显示CIK细胞治疗组有较多的淋巴细胞浸润和坏死区.结论 CIK细胞对EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,可能成为治疗食管癌的免疫效应细胞.     

凝血酶敏感蛋白-1 对人肝癌细胞株裸鼠种植瘤生长和血管生成作用的研究

目的:研究凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)对人肝癌细胞株HCCLM3裸鼠种植瘤生长和微血管密度(MVD)的作用,并探讨TSP-1作用后碱性成纤维细胞生长因子(bF-GF)表达的变化.方法:建立人肝癌细胞椿HCCLM3的裸鼠模型,治疗组和对照组分别瘤内注射TSP-1和生理盐水.治疗3周后处死动物,测量比较治疗组和对照组肿瘤质量和体积, 免疫组织化学方法研究两组肿瘤组织中bFGF表达和MVD的变化.结果:治疗组人肝癌细胞株HCCLM3裸鼠种植瘤的体积[(0.216±0.058)mm3 vs(0.335±0.075)mm3,P<0.05]和质量[(0.298±0.081)g vs(0.464±0.092)g,P<0.01]均小于对照组.两组bFGF的阳性表达率差异无统计学意义,P<0.05.表达强度治疗组有低于对照组的趋势,但差异无统计学意义,t=26.P=0.05.治疗组的MVD(16.67±4.76)低于对照组(28.17±4.96),P<0.01.结论:TSP-1可抑制人肝癌细胞株HCCLM3的裸鼠种植瘤的生长和血管生成, 这一过程中bFGF可能有一定作用,但尚需要更直接的证据.     

Bcl-2反义寡核苷酸对裸鼠人肺癌移植瘤抑制作用的研究

目的探讨Bcl-2反义寡核核苷酸(ASODN)对裸鼠人肺癌移植瘤的成瘤能力和生长的抑制作用。方法将经硫代修饰的Bcl-2ASODN导入非小细胞肺癌。NCI-H460细胞内,然后将这种细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。同时采用未经处理的NCI-H460细胞接种于裸鼠背部皮下建立裸鼠人肺癌移植瘤模型,待长出瘤结节直径为≥5mm后,分为Bcl-2ASODN实验组、生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组3组。实验组用15mg/kgASODN两天一次直接瘤内注射,连用3周,测肿瘤大小变化和组织形态学改变。结果Bcl-2ASODN作用后的NCI-H460细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,最大抑瘤率达87.5%(P相似文献   

细胞因子诱导的杀伤细胞对人宫颈癌HeLa-luc细胞荷瘤裸鼠模型的抗肿瘤作用

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)抗肿瘤活性,及其作用机制.方法:人宫颈癌细胞HeLa-luc接种BALB/ C裸鼠建立动物模型.从健康人外周血单个核细胞诱导培养CIK细胞.CIK或PBS经瘤周注射入荷瘤鼠体内.应用活体生物发光成像技术观察肿瘤大小变化.观察肿瘤的体积和重量变化. ELISA法检测荷瘤鼠外周血中IFN-γ水平.HE染色观察肿瘤、肺脏、肝脏及脾脏的病理形态学变化.结果:CIK治疗后实验组(CIK)肿瘤明显比对照组(PBS)体积小,P<0.05.接种HeLa-luc细胞第5、8周的抑瘤率分别为47.18%、64.38%.接种HeLa-luc细胞第8周实验组血清中IFN-γ[(61.92±6.49) ρg/mL]明显高于对照组[(34.30±1.78) ρg/mL],P<0.01.实验组和对照组中,肿瘤组织形态学无明显差别.实验组肺脏、肝脏未见癌结节出现,但均有炎细胞浸润.对照组肺脏出现大量癌结节而肝脏未见癌结节出现.两组脾脏中均可见癌结节.结论:CIK细胞可以明显抑制肿瘤的生长,其机制可能与免疫细胞产生IFN-γ有关.该研究为肿瘤的临床过继免疫治疗提供了理论依据.     

槲皮素对裸鼠人肝癌细胞株SMMC-7721移植瘤生长的抑制作用

目的研究槲皮素对裸鼠人肝癌细胞SMMC-7721移植瘤生长的影响。方法建立SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,通过比较肿瘤体积（TV）、相对肿瘤体积（RTV）和相对肿瘤增殖率[T/C（%）]变化检测槲皮素对肿瘤生长的影响;采用免疫组织化学方法测试槲皮素对移植瘤微血管密度（microvessel density,MVD）的影响。结果槲皮素治疗组不同程度抑制裸鼠移植瘤的生长,腹腔注射给药4周后,TV、RTV和T/C%明显下降,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;槲皮素50 mg/kg处理组MVD值（19.35±2.88）与对照组的MVD值（42.56±4.98）比较明显降低,差异有统计学意义。结论槲皮素可抑制裸鼠人肝癌SMMC-7721移植瘤生长,降低移植瘤MVD,从而抑制肝癌的侵袭转移。     

内皮抑素抑制裸鼠肺癌生长转移的实验研究

背景与目的:内皮抑素(endostatin,ES)可以有效抑制血管发生.系统给予ES可引起多种肿瘤异种移植模型生长减缓.本实验通过建立裸鼠肺癌胸腔移植模型,观察ES对裸鼠肺癌生长和转移的抑制作用.方法:将大细胞肺癌H460细胞接种于裸鼠左侧胸腔,并随机分成内皮抑素组(ES组)和对照组.ES组和对照组裸鼠自接种肿瘤的当天开始,每天分别给予ES 20mg/kg和等体积PBS皮下注射,共20 d.每日称量动物体重,记录动物生存时间,处死后称瘤重,测定动物血液中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2, MMP2)的表达.结果:裸鼠肺癌胸腔内接种成瘤率为100%,并出现远处转移.对照组移植瘤重量(1.54±0.14)g明显高于ES组(0.9±0.3)g,差异有显著性(t=-3.163,P=0.005),且第1天和第21天体重差值(1.9±2.8)g与ES组(-0.8±2.8)g比较,差异有显著性(t=-2.156,P=0.045).而ES组的MMP2表达明显低于对照组.结论:ES可抑制肺肿瘤生长和转移,其作用机制之一与抑制MMP2的表达活性有关.裸鼠肺癌胸腔移植模型更容易形成肺癌转移模型,是研究肺癌生长和转移的理想模型.     

RNA干扰Bcl-2基因表达对人胆管癌细胞及胆囊癌细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制

目的:探讨Bcl-2基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体干扰Bcl-2基因表达对人胆管癌细胞QBC939、胆囊癌细胞GBC-SD裸鼠体内移植瘤生长的抑制作用.方法:分别制作人胆管癌细胞QBC939、胆囊癌细胞GBC-SD细胞株移植瘤模型,随机分为3组,pSilencerTM-EGFP sh515组(实验组)、pSilencerTM-EGFP shCon组(空载体阴性对照组)和对照组.实验组用Bcl-2基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体多点注射于移植瘤周围,空载体阴性对照组用空载体多点注射于移植瘤周围,对照组不作处理,观察其生长情况,计算肿瘤生长体积、生长率.6周后,处死裸鼠,剥离瘤体组织进行称重,并采用免疫组化检测Bcl-2蛋白的表达.结果:成功建立裸鼠人胆管癌细胞QBC939,胆囊癌GBC-SD细胞的动物模型.胆管癌细胞实验组、空载体阴性对照组、对照组瘤体平均体积(mm3)分别为:801.776±59.6,1383.980±78.2,1490.235±89.0.瘤体平均瘤体重量(g)为:0.90±0.11,1.49±0.31,1.63±0.22.平均生长率为:20.558%,35.587%,38.211%.人胆囊癌细胞实验组、空载体阴性对照组、对照组瘤体平均体积(mm3)分别为:729.736±66.6,1493.162±98.9,1548.668±101.0.瘤体平均瘤体重量(g)为:0.82±0.10,1.68±0.21,1.90±0.25.平均生长率为:18.711%,38.286%,39.709%.两组实验组分别和空载体阴性对照组、对照组比较有统计学意义(P<0.05),空载体阴性对照组和对照组比较无统计学意义(P>0.05).结论:针对Bcl-2基因siRNA真核表达载体通过局部多点注射于移植瘤周围可以有效降低Bcl-2基因的表达,该基因沉默后肿瘤细胞增殖受到抑制,体内瘤体生长减慢.     

人外周血γδT细胞选择性增殖及其体内抗肿瘤的特性研究

观察人外周血γδＴ细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应。方法用ＭＥＰ和ＩＬ┐２共刺激培养方法,扩增人外周血γδＴ细胞,与人肠癌细胞系（ＬｏＶｏ）细胞混合接种于裸鼠体皮下。结果经共刺激培养１０天后,细胞总数可增加１００～３００倍,γδＴ细胞的比率上升到７０％以上。给裸鼠接种１×１０６ＬｏＶｏ细胞１个月后,不接种γδＴ细胞的对照组裸鼠皮下瘤块重量为０．４ｇ～０．９ｇ,瘤块病理切片显示有明显肿瘤细胞堆积;而同时接种１×１０７γδＴ细胞的实验组裸鼠瘤块重量仅为０～０．００５ｇ,瘤块病理切片显示其中除肿瘤细胞外,还伴有增生性淋巴细胞。结论人外周血γδＴ细胞能有效地抑制人肠癌细胞ＬｏＶｏ在裸鼠体内的生长。     

Bcl-2反义寡核苷酸对裸鼠人肺癌移植瘤抑制作用的研究(英文)

目的探讨 Bcl-2反义寡核核苷酸(ASODN)对裸鼠人肺癌移植瘤的成瘤能力和生长的抑制作用。方法将经硫代修饰的 Bcl-2 ASODN 导入非小细胞肺癌 NCI-H460细胞内,然后将这种细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。同时采用未经处理的 NCI-H460细胞接种于裸鼠背部皮下建立裸鼠人肺癌移植瘤模型,待长出瘤结节直径为≥5mm 后,分为 Bcl-2 ASODN 实验组、生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组3组。实验组用15mg/kg ASODN 两天一次直接瘤内注射,连用3周,测肿瘤大小变化和组织形态学改变。结果 Bcl-2 ASODN 作用后的 NCI-H460细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,最大抑瘤率达87.5%(P<0.01)。Bcl-2 ASODN 处理的NCI-H460细胞在裸鼠皮下成瘤的平均时间延长为12.6天(P<0.01)。在治疗 NCI-H460细胞裸鼠移植瘤过程中,生理盐水对照组和无义对照组的瘤块体积进行性增大,而 Bcl-2 ASODN 组的瘤块生长很缓慢,治疗组和两个对照组瘤重相比均有显著性差异(P<0.05)。治疗后第30天剥离瘤块,两个治疗组分别与两个对照组瘤重相比均有显著性差异(P<0.01)。Bcl-2 ASODN 治疗组裸鼠肺癌细胞移植瘤的生长受到明显抑制,抑瘤率为71.0%。瘤块病理学检查可见,Bcl-2 ASODN 治疗组瘤块内有大片的变性坏死灶,结缔组织增生,炎性细胞浸润;而两个对照组瘤体内癌细胞呈弥漫性密集分布。结论 Bcl-2反寡义核苷酸能降低肺癌细胞的成瘤能力,抑制移植瘤生长。     

PI-88抑制人食管癌TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤血管新生及其机制

目的:探讨通过Matrigel与肿瘤细胞混合接种的方法构建裸鼠人食管癌Matrigel移植瘤模型的可能性,进一步研究抗肿瘤制剂PI-88对于人食管癌Matrigel移植瘤生长及血管新生的影响。方法:将食管鳞癌细胞株TE-13悬液与Matrigel胶混合,接种8只裸鼠,构建人食管癌TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤模型,将其随机分为PI-88治疗组和对照组。治疗组按照20 mg/kg剂量皮下注射PI-88,1次/d(PI-88配成1 mg/ml溶液);对照组按照20 ml/kg注射生理盐水,1次/d,均连续给药2周。第2、6、10、14天记录裸鼠肿瘤体积,第15天进行增强CT扫描观察肿瘤区域显影情况。免疫组化染色观察肿瘤组织中乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果:8只裸鼠均在接种当天形成移植瘤,成功构建TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤模型。PI-88治疗第14天时,治疗组肿瘤体积明显小于对照组[(70.25±6.85)vs(143.13±17.18)mm3,P<0.05]。治疗第15天时,治疗组肿瘤区域CT值明显低于对照组(15.18±0.91vs 19.23±2.03,P<0.05)。治疗组肿瘤组织内HPSE与VEGF表达阳性细胞数显著低于对照组[HPSE:(28.70±6.39)vs(87.55±22.03)个,t=11.472,P<0.01;VEGF:(47.10±8.18)vs(94.40±14.47)个,t=12.727,P<0.01]。结论:Matrigel胶混合食管癌细胞接种裸鼠制备移植瘤方法可行,PI-88能够抑制人食管癌TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤生长及血管新生,其作用机制可能与PI-88抑制移植瘤组织中HPSE和VEGF表达有关。     

沉默SIAH2基因抑制人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤生长实验研究

目的 本研究前期实验发现,靶向SIAH2的shRNA载体能显著抑制HepG2细胞SIAH2 mRNA和蛋白的表达,并抑制细胞体外增殖.本研究从体内水平验证靶向SIAH2的干扰载体对人肝癌细胞HepG2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 转染pGenesil-SIAH2的HepG2细胞作为实验组,命名为HepG2-SIAH2;转染空载体pGenesil-1的HepG2细胞作为阴性对照组,命名为HepG2-neo;未转染任何质粒的HepG2细胞作为空白对照组,通过G418筛选出稳定转染细胞株.将15只裸鼠随机分为3组,接种肿瘤细胞后观察裸鼠成瘤情况.4周后测量肿瘤的体积和瘤体质量,绘制移植瘤生长曲线,并用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测移植瘤中SIAH2的表达情况.结果 稳定转染pGenesil-SIAH2的细胞株构建成功,3组裸鼠接种癌细胞后均有肿瘤形成.与空白对照组和阴性对照组相比,实验组肿瘤生长速度明显减慢,实验组平均瘤体积(261.57±41.141)mm3,明显低于阴性对照组(494.35±93.236) mm3(P=0.015)和空白对照组(418.3±28.576 5)mm3(P=0.012),差异有统计学意义;实验组平均瘤体质量为(0.162±0.02)g,明显低于阴性对照组(0.358±0.12)g(P=0.032)和空白对照组(0.322±0.24)g(P=0.028).实验组瘤体内SIAH2 mRNA相对表达量为0.83±0.35,明显低于阴性对照组2.35±0.96(P=0.003)和空白对照组2.57±0.41(P=0.006),差异有统计学意义.实验组瘤体内SIAH2蛋白表达量为0.72±0.02,明显低于阴性对照组2.61±0.67(P=0.004)和空白对照组2.49±0.91(P=0.007),差异有统计学意义.结论 靶向SIAH2的shRNA干扰载体能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,SIAH2有可能成为肝癌基因治疗新的分子靶.     

三氧化二砷抑制人结肠癌裸鼠肝转移的药效 动力学

 目的　研究三氧化二砷(As2O3 ) 对人结肠癌裸鼠肝转移的抑制作用。方法　BALB/ C2nu/ nu 裸 鼠经脾脏接种人结肠腺癌LS2174 T 细胞建立结肠癌裸鼠肝转移模型,于10 min (早期) 、10 天(中期) 、20 天(晚期) 经尾静脉注射As2O3 ,对照组注射生理盐水。观察各组裸鼠体重变化、肝转移结节的数目、大 小、瘤重以及肝脏肿瘤替代率和荷瘤鼠的生存时间。结果　与对照组相比,早期及中期治疗组裸鼠肝转 移结节的数目、大小、瘤重以及肝脏肿瘤替代率和荷瘤鼠的生存时间差异均有统计学意义( P < 0. 05) ,晚 期治疗组差异无统计学意义( P > 0. 05) 。结论　三氧化二砷对人结肠癌裸鼠肝转移有明显的抑制作用, 早期效果优于中晚期。     

人乳腺癌裸鼠移植瘤MTD间歇期给予CTX节律化疗的实验观察

目的:研究最大耐受剂量(MTD)化疗间歇期给予节律低剂量CTX对人乳腺癌裸鼠移植瘤的作用.方法:建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为小剂量节律(LDM)组、最大耐受剂量(MTD)组、最大耐受剂量联合节律(MTD+LDM)组和生理盐水对照组,治疗21 d为1个周期.测量瘤体积、裸鼠体质量及外周血白细胞计数.处死裸鼠后测量瘤质量,应用免疫组化方法检测瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:各治疗组均抑制了肿瘤生长;联合组瘤质量及21d时肿瘤体积与其他各组相比均显著降低,P＜0.05.联合组抑瘤率为69.15％,与对照组及MTD组相比,联合组和LDM组肿瘤组织的VEGF水平及MVD值显著降低,P＜0.05;与LDM组和对照组相比,联合组和MTD组肿瘤组织PCNA表达水平均显著降低,P＜0.05.各治疗组裸鼠体质量及白细胞计数差异无统计学意义,P＞0.05.结论:最大耐受剂量间歇期给予节律低剂量CTX通过同时抑制肿瘤细胞增殖活性和肿瘤血管生成,在未增加毒副反应的前提下抑瘤效果更好,为可行有效的方案.     

不同剂量塞来昔布对人肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用及机制研究

目的:研究不同剂量COX-2抑制剂对人肺癌裸鼠移植瘤生长、survivin表达和微血管生成的影响.方法:将人肺癌A549细胞接种于裸鼠背部皮下建立移植瘤模型,然后随机分为4组:对照组、塞来昔布低剂量(25 mg·kg-1·d-1 )组、塞来昔布中剂量(50 mg·kg-1 ·d-1 )组、塞来昔布高剂量(100 mg·kg-1·d-1 )组.每周测量肿瘤体积,给药42 d后牺牲裸鼠,切取移植瘤组织,检测COX-2、 survivin 、VEGF表达和微血管密度(microvessel density,MVD).结果:塞来昔布低剂量组、中剂量组和高剂量组的抑瘤率分别为34.60%、49.40%和59.71%,与对照组比较,塞来昔布各治疗组肿瘤生长缓慢,差异有统计学意义( P <0.05).免疫组织化学染色和RT-PCR结果分析显示:与对照组比较,塞来昔布各治疗组COX-2 、survivin的表达水平均明显降低( P <0.05),并且抑制程度呈明显的药物剂量依赖性.低剂量塞来昔布可明显抑制VEGF mRNA表达和肺癌移植瘤微血管生成,其抑制作用并未随用药剂量的增加而增强.结论:不同剂量的塞来昔布均能明显抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长和survivin的表达,其抑制作用呈明显的用药剂量依赖性,survivin可能参与了塞来昔布抑制肺癌生成的过程.低剂量塞来昔布可抑制人肺癌裸鼠移植瘤微血管生成,可能对防止肿瘤转移起到重要作用.     

重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体与吉西他滨联合对人非小细胞肺癌细胞株NCI-H460的体内外抑制作用

目的 观察重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rmhTRAIL)与吉两他滨(GEM)联合应用对人非小细胞肺癌细胞株NCI-H460在体内外的抑制作用.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法,检测系列浓度的rmhTRAIL和GEM单独或联合应用时对人肺癌NCI-H460细胞生长的抑制作用.将NCI-H460细胞裸鼠移植瘤模型分为6组:对照组(腹腔注射生理盐水)、rmhTRAIL组、GEM组、rmhTRAIL+GEM组、GEM+顺铂(DDP)组和rmhTRAIL+GEM+DDP组,分别给药.每3～4 d测量1次裸鼠移植瘤大小,用药后21 d,处死裸鼠,剥取肿瘤称重.结果 rmhTRAIL和GEM单独或联合应用时对NCI-H460细胞的生长抑制作用呈剂量依赖性,且系列浓度的rmhTRAIL和GEM的联合具有协同抑制作用.rmhTRAIL组、rmhTRAIL+GEM组、GEM+DDP组和rmhTRAIL+GEM+DDP组的相对肿瘤体积分别为4.75±3.04、2.53±1.25、4.52±2.87和1.69±0.97,均显著低于对照组(8.82±5.62,均P＜0.05);肿瘤重量分别为(2.23±0.29)g、(1.12±0.77)g、(2.51±0.87)g和(0.60±0.18)g,均显著低于对照组[(4.71±0.97)g,均P＜0.01].rmhTRAIL+GEM组的相对肿瘤体积和肿瘤苇量均显著低于rmhTRAIL组和GEM组(P＜0.05和P＜0.01).rmhTRAIL+GEM+DDP组的相对肿瘤体积和肿瘤重量均显著低于rmhTRAIL组和GEM+DDP组(P＜0.05和P＜0.01).结论 在体内外实验中,rmhTRAIL与吉西他滨联合对人肺癌细胞株NCI-H460的生长均显示出协同抑制作用.     

重组人血管内皮抑制素治疗人乳腺癌裸鼠模型的实验研究

目的 探讨重组人血管内皮抑制素注射液(恩度,YH-16)对人乳腺癌细胞株MCF-7裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 建立人乳腺癌裸鼠模型,随机分成4组,每组10只,接种人乳腺癌细胞悬液,瘤体达1.0 cm3时,于种植部位皮下注射药物:阴性对照组生理盐水0.2 mg/kg体重,阳性对照组顺铂(DDP)1 ms/ks体重,YH-16组YH-16 20 ms/kg体重,DDP联合YH-16组为DDP1 mg/kg体重和YH-16 20 ms/ks体重,隔日一次,20 d后颈椎脱位处死裸鼠,检测裸鼠体重、肿瘤体积、抑瘤率、血管内皮生长因子(VEGF)、癌细胞凋亡率、肺转移率.结果 DDP联合YH-16组、阳性对照组、YH-16单药组、阴性对照组肿瘤体积分别为(0.686±0.229)、(1.258±0.101)、(1.888±0.215)、(3.366±0.284)cm3;抑瘤率分别为92.1%、57.3%、36.5%、0;肺转移率分别为0、10%、20%、90%;癌细胞凋亡率分别为31.6%±2.7%、28.1%±2.7%、19.4%±2.9%、15.7%±3.2%;RT-PCR检测VEGF表达,吸光度(A)比值均数分别为0.530±0.164、0.759±0.210、1.063±0.295、1.268±0.145,Western blot检测结果为0.260±0.0820、0.348±0.085、0.461±0.099、0.556±0.113,以上各组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 YH-16对人乳腺癌裸鼠肿瘤生长及远处转移均有抑制作用,不良反应小;YH-16联合DDP有协同增效作用.     

树突状细胞诱导的LAK细胞对肺癌的生长抑制作用

目的　研究肺癌细胞裂解物负载的树突状细胞 (DC)诱导的淋巴因子激活杀伤细胞 (LAK )对肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法　肺腺癌患者手术切除标本接种裸鼠皮下建立肺腺癌移植瘤模型 ,同时将手术切除标本用反复冻融的方法制备肿瘤细胞裂解物 ;同一患者外周血分离得到的单个核细胞中 ,贴壁的细胞加入DC生长因子 (DCGF)培养得DC ,未贴壁的细胞加入rhIL 2培养得LAK细胞。用肿瘤细胞裂解物负载自体DC ,诱导LAK细胞生成DC LAK细胞 ,注射荷瘤裸鼠腋下以观察DC LAK细胞对肺癌移植瘤的生长抑制作用。结果　用肺癌手术标本能成功建立裸鼠移植瘤模型。DC LAK组、LAK组、DC组和生理盐水对照组肿瘤瘤重平均值分别为 0 .47、1.0 5、1.3 0和 1.5 8g ,DC LAK组、LAK组和DC组肿瘤生长抑制率分别为 70 .3 %、3 3 .5 %和 17.9% ,DC LAK细胞具有抑制裸鼠肺癌移植瘤生长的作用而且强于LAK细胞 (P <0 .0 5 )。结论　通过荷瘤裸鼠体内抗瘤实验证实了DC LAK细胞的抗肺癌作用明显高于LAK细胞 ,提示DC LAK细胞治疗是更为有效的抗肺癌生物治疗方法 ,为DC疫苗用于肺癌的临床治疗提供依据     

肺癌患者外周血γδT细胞的检测及意义

 目的　探讨肺癌患者群体的γδT细胞的功能状态。方法　应用流式细胞术检测124例手术前肺癌患者（肺癌组）和56名健康职工（健康对照组）外周血γδT细胞。结果　γδT细胞健康对照组为（6.54±2.90）%,患者组为（3.76±2.81）%（t＝3.568,P＜0.001）。肺癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于健康人（P＝0.000 ）;肺癌组织学分类、T 分期、N分期、M分期、临床分期、大体分型、病变部位各组与健康对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;肺癌患者中不同年龄、性别各组患者外周血中γδT细胞比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　γδT细胞减少对肺癌的发生有重要影响。     

人结肠癌主动特异性免疫治疗的初步研究

目的:探讨自体肿瘤疫苗的作用机制及临床意义。方法:50例进展期结肠癌病人术后,以自体肿瘤细胞疫苗辅助主动免疫治疗。术后第4周开始免疫接种(共4次,每次间隔7~10天);接种前3天及第4次接种后1周,采集外周血。采集血清监测血清IFN-γ、IL-10水平;用PPD及自体肿瘤抗原做皮肤迟发型过敏试验(DTH),48小时后测量红斑、硬结大小(mm);对DTH反应部位皮肤活检,用免疫组化染色,了解局部免疫活性细胞浸润;临床随访。结果:自体肿瘤细胞疫苗治疗后:血清IFN-γ水平升高,由(6.01±2.30)pg/ml升至(12.98±4.65)pg/ml;而IL-10水平由(19.80±10.15)pg/ml降至(8.92±4.60)pg/ml,差异有非常显著性(P<0.05);治疗前后病人对自体肿瘤抗原的特异性DTH反应明显增强(P<0.01);DTH反应部位,CD8 T细胞、CD4 T细胞及DC细胞浸润明显增多;病人耐受性良好,无溃疡等严重副作用发生;随访结果显示:术后辅助自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗,可延长结肠癌病人的无瘤生存时间,降低复发率及死亡率。结论:自体肿瘤疫苗可激发病人特异性细胞介导的免疫反应;可改善肿瘤病人的抗瘤免疫反应;自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗,对于杀灭残留癌细胞、抗转移及复发有重要作用。