5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡与NF-κB活化及uPA表达的关系

 [摘要] 目的 研究5-氟尿嘧啶（5-Fu）诱导结肠癌细胞HCT116凋亡与核转录因子-κB (NF-κB) 活化以及uPA表达的关系，并观察吡咯烷二硫氨基甲酸盐（PDTC）抑制NF-κB活化对5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡及uPA表达的影响。方法 采用流式细胞仪Annexin Ⅴ-FITC法检测结肠癌细胞HCT116凋亡;采用免疫组织化学方法半定量分析HCT116细胞NF-κB及uPA表达的动态变化。结果 5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时有NF-κB活化，1umol/LPDTC能显著增加5-Fu诱导HCT116细胞凋亡及抑制5-Fu诱导的HCT116细胞NF-κB活化作用(P<0.05), uPA变化与NF-κB一致。结论5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时活化了NF-κB，uPA表达亦随之增强；PDTC在抑制5-Fu诱导的HCT116细胞NF-κB活化的同时增强了5-Fu诱导细胞凋亡的作用，uPA表达也相应下降     

5-氟尿嘧啶诱导结肠癌细胞凋亡与NF-κB活化及uPA表达的关系

目的 研究5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导人结肠癌细胞(HCT116)凋亡与核转录因子-κ B(NF-κ B)活化以及尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)表达的关系,并观察吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)抑制NF-κ B活化对5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡及uPA表达的影响.方法 采用流式细胞仪Annexin V-FITC法检测结肠癌细胞HCT116凋亡;采用免疫组织化学方法半定量分析HCT116细胞NF-κB及uPA表达的动态变化.结果 5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时有NF-кB活化,1μmol/L PDTC能显著增加5-Fu诱导HCT116细胞凋亡及抑制5-Fu诱导的HCT116细胞NF-κB活化作用(P＜0.05),uPA变化与NF-κB一致.结论 5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时活化了NF-κ B,uPA表达亦随之增强;PDTC在抑制5-Fu诱导的HCT16细胞NF-κB活化的同时增强了5-Fu诱导细胞凋亡的作用,uPA表达也相应下降.     

HMGB1在结肠癌中的表达及其对VEGF-C的影响

目的：探讨HMGB1和血管内皮生长因子C（VEGF-C）在人结肠癌组织中的表达及二者之间的关系。方法：应用免疫组织化学染色方法,检测HMGB1和VEGF-C在70例人结肠癌组织中的表达,同时对其与临床病理参数的关系,两者之间的相关性进行统计学分析;以HMGB1作为干预因素,检测不同剂量HMGB1刺激后,结肠癌细胞HCT116中VEGF-CmRNA表达的变化趋势。结果：HMGB1在结肠癌组织中的阳性表达率为72.9%,其中有淋巴结转移的表达率为83.3%,无淋巴结转移的表达率为57.1%,差异有统计学意义。VEGF-C结肠癌组织中的阳性表达率为60%。而且HMGB1表达与VEGF-C表达呈正相关。结肠癌细胞HCT116中VEGF-CmRNA的表达也与HMGB1的作用剂量成量效关系。结论：HMGB1可通过诱导结肠癌组织中VEGF-C的表达,从而促进结肠癌的淋巴结转移。     

家族性圆柱瘤过表达对槲寄生凝集素诱导HCT116细胞凋亡的影响

目的:探讨家族性圆柱瘤(CYLD)过表达对槲寄生凝集素诱导人大肠癌HCT116细胞凋亡的影响.方法:MTT法测定细胞的增殖活力,琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡,流式细胞仪进行细胞周期分析,蛋白质印迹实验和地高辛标记的凝胶电泳阻滞试验(DIG-EMSA)研究细胞凋亡途径.结果:CYLD过表达不影响肠癌HCT116细胞株的生长,但可抑制NF-κB的活性.可增强槲寄生凝集素对HCT116细胞的生长抑制作用,尤其作用12 h后CYLD转染细胞细胞的抑制较HCT116细胞和空质粒转染对照细胞更为明显(P<0.01),但不影响槲寄生凝集素对NF-κB的抑制作用,也不影响槲寄生凝集素对IκBα、Bcl-2和Bax的表达.结论:CYLD过表达可抑制NF-κB的活性,并增强槲寄生凝集素对HCT11 6细胞的生长抑制作用,提示其调控细胞的功能可能取决于NF-κB在细胞中的作用.     

斑蝥酸钠对结肠癌HCT116细胞凋亡及PUMA表达的影响

目的 探讨斑蝥酸钠对结肠癌细胞凋亡及p53上调凋亡控制因子（PUMA）表达的影响。方法 采用不同浓度斑蝥酸钠（0.1、0.25、0.5、1、2 μg／ml）处理结肠癌细胞HCT116 24 h,并设不加药对照组。测量其单层细胞跨膜电阻值（TER）以评价斑蝥酸钠对HCT116细胞凋亡的影响,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测HCT116细胞的PUMA mRNA和蛋白水平变化;HCT116细胞经0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μg／ml 抑制性κB激酶β（IKKβ）质粒转染或10、20、40、80 nmol／L 核因子（NF）-κB抑制剂（BAY 11-7082）处理后,采用Western blotting检测其PUMA蛋白水平。结果 与对照组比较,各浓度斑蝥酸钠处理后HCT116细胞的TER降低,PUMA mRNA和蛋白水平升高,且以上效应呈浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;与未处理的HCT116细胞相比,IKKβ质粒转染后,PUMA蛋白表达增加,而BAY 11-7082可降低斑蝥酸钠对PUMA的上调作用,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 斑蝥酸钠可通过NF-κB通路上调PUMA的表达,进一步诱导结肠癌细胞HCT116的凋亡。     

HMGB1对U937细胞VEGF-C/D表达影响的研究

目的:探讨HMGB1对单核巨噬细胞U937 VEGF-C/D表达的影响及其在淋巴管生成中的作用.方法:以HMGB1作为干预因素,剂量效应组分别用含0、0.1、1、10、20、50和100 mg/L HMGB1的培养液与单核巨噬细胞U937共培养8 h,以RT-PCR检测U937中VEGF-C mRNA表达的变化.时间效应组以含HMGB1的培养液分别培养U937细胞0、2、4、8、12和24 h ,以RT-PCR和Western blot检测细胞中VEGF-C/D mRNA和蛋白的变化.结果:HMGB1可有效诱导U937细胞中VEGF-C/D的表达.U937中VEGF-C mRNA的表达与HMGB1剂量成量效关系.对VEGF-C/D的诱导作用分别在12和4 h时达到峰值.结论:HMGB1可诱导单核巨噬细胞U937中淋巴管生成因子VEGF-C/D的表达.     

结肠癌中COX-2对VEGF-C表达的影响

目的:探讨COX-2和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在人结肠癌组织中的表达及二者之间的关系.方法:首先选择56例结肠癌标本,应用免疫组织化学染色方法,检测COX-2和VEGF-C在人结肠癌组织中的表达,对两者之间的相关性进行统计学分析;其次以COX-2诱导剂PMA及特异抑制剂塞来昔布作为干预因素,检测单独PMA孵育和PMA+塞来昔布联合孵育后,结肠癌细胞HCT116中VEGF-C mRNA及蛋白表达的变化.结果:COX-2在结肠癌组织中的阳性表达率为78.6%,VEGF-C结肠癌组织中的阳性表达率为65.9%.COX-2阳性的结肠癌组织中VEGF-C的阳性率高于COX-2阴性组中VEGF-C阳性率(P＜0.05),而且COX-2表达与VEGF-C表达呈正相关.结肠癌细胞HCT116中当使用COX-2表达诱导剂PMA后,VEGF-C的表达也相应升高;而加入COX-2的特异抑制剂后,该效应也相应被削弱.结论:COX-2可通过诱导结肠癌组织中VEGF-C的表达促进结肠癌的淋巴结转移.     

高迁移率族蛋白B1激活NF-κB/αvβ3而增加A549细胞迁移与侵袭能力

背景与目的:高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在多种肿瘤中高表达,在肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。本研究旨在探讨HMGB1促进肺癌A549细胞侵袭的分子机制。方法:肺癌A549细胞经HMGB1,NF-κB抑制剂6-amino-4-quinazoline(QNZ)或Bortezomib(Bort)处理后,划痕实验和Transwell小室体外侵袭实验检测肿瘤细胞的迁移及侵袭能力;NF-κB荧光素酶报告基因实验检测NF-κB活性;Real-time RT-PCR和Western blot检测A549细胞NF-κB和整合素αvβ3表达。结果:HMGB1能增强A549细胞迁移和侵袭能力,增加NF-κBp65蛋白的表达,同时增强A549细胞NF-κB活性,Real-time RT-PCR和Western blot检测结果发现HMGB1上调肿瘤细胞αvβ3表达。NF-κB抑制剂QNZ或Bort消除HMGB1促进A549细胞迁移及侵袭,增强NF-κB表达和活性以及αvβ3表达的效应。结论:HMGB1通过激活A549细胞NF-κB上调αvβ3表达促进A549细胞迁移与侵袭行为。     

抑制NF-κB通路增强蟾蜍灵诱导的HL-60细胞凋亡

目的:观察蟾蜍灵对HL-60细胞活力和凋亡的影响,对NF-κB通路的作用,探讨NF-κB通路在蟾蜍灵诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用.方法:锥虫蓝染色检测细胞活力;流式细胞仪技术检测细胞凋亡和周期分布;采用Western Blot技术检测IKK的磷酸化.结果:蟾蜍灵以时间和剂量依赖性方式诱导HL-60细胞凋亡.24,48和72h抑制细胞活力的IC50浓度分别为26.3,7.8和2.0nmol/L.对照组HL-60细胞有pIKK表达,蟾蜍灵可诱导IKK的快速活化.NF-κB通路的特异性抑制剂Bay 11-7082增强蟾蜍灵的凋亡诱导作用.结论:蟾蜍灵可诱导HL-60细胞凋亡,促进IKK活化与NF-κB通路调节相关,而且与NF-κB通路抑制剂有协同作用.     

HMGB1对U937细胞VEGF-C／D表达影响的研究

目的：探讨HMGB1对单核巨噬细胞U937VEGF-C／D表达的影响及其在淋巴管生成中的作用。方法：以HMGB1作为干预因素，剂量效应组分别用含0、0．1、1、10、20、50和100mg／LHMGB1的培养液与单核巨噬细胞U937共培养8h，以RT-PCR检测U937中VEGF-CmRNA表达的变化。时间效应组以含HMGB1的培养液分别培养U937细胞0、2、4、8、12和24h，以RT-PCR和Westernblot检测细胞中VEGF-C／DmRNA和蛋白的变化。结果：HMGB1可有效诱导U937细胞中VEGF-C／D的表达。U937中VEGF-CmRNA的表达与HMGB1剂量成量效关系。对VEGF-C／D的诱导作用分别在12和4h时达到峰值。结论：HMGB1可诱导单核巨噬细胞U937中淋巴管生成因子VEGF-C／D的表达。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。