β淀粉样肽细胞毒作用研究进展

虽然阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)的发病机制不清 ,但越来越多的研究表明 ,β淀粉样蛋白 (β amyloid ,Aβ)的生成、代谢及其毒性作用在AD的发生、发展过程中起了关键作用。1Aβ的形成和代谢淀粉样前体蛋白 (amyliodprecursorprotein ,APP)是Aβ的前体蛋白 ,异常代谢后形成Aβ ,聚集形成老年斑。APP的基因位于第 2 1号染色体的长臂上 ,有 18个外显子和 17个内含子。该基因通过选择性剪辑产生数种APP的异构体 ,主要有APP770、APP75 1、APP6 95。1.1APP的 3种代谢途径1.1.1通过 3种分泌酶水解　APP是一个跨膜糖蛋白 …     

阿尔茨海默病发病中淀粉样β蛋白的神经毒性作用

目的：学习和掌握淀粉样β蛋白的生物学特征，认识其在阿尔茨海默病的发病中的几种可能作用以及以淀粉样β蛋白为靶点的阿尔茨海默病治疗策略的最新进展研究。资料来源：应用计算机检索“Medline1994-01／2004-01”与淀粉样β蛋白相关文献，检索词为“β-amyloid”，限定文章语言种类为English；同时计算机检索“中国期刊网”1994-01／2004-01与淀粉样蛋白相关文献，检索词为“淀粉样蛋白”，二次检索词为“阿尔茨海默病”，限定文章语言种类为汉语。资料选择：就检索到的400余篇文献进行筛选，选择以阿尔茨海默病为研究对象、以淀粉样β蛋白为主要研究内容的文献60多篇，其中研究内容相似的，以近5年且发表在较权威杂志者优先，排除综述类文献。资料提炼：将筛选到的30篇文献按结构、功能和疾病关系分类：其中2篇与淀粉样β蛋白的结构相关，13篇与淀粉样β蛋白神经毒性相关，15篇与淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病发病中的作用以其为治疗靶点的研究有关。资料综合：32篇文献包括体内实验和体外实验研究，说明了淀粉样β蛋白的神经毒性作用，它可诱导性活氧产生自由基损伤，诱导细胞凋亡，并刺激中枢神经系统发生炎症反应，故大多数学者认为淀粉样β蛋白在脑组织中的沉积可能是阿尔茨海默病发生、发展的中心环节，因此以阻止或减少脑内淀粉样β蛋白的数量为目标的治疗策略，可能直接作用于阿尔茨海默病的病理过程。结论：淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病发病中起关键作用，以淀粉样β蛋白为靶点的阿尔茨海默病防治策略正在被广泛研究和应用。     

淀粉样β蛋白沉淀及其神经毒性与阿尔茨海默病

目的：检索近年来国内外有关淀粉样β蛋白的代谢及其神经毒性机制研究的文献，归纳综述淀粉样β蛋白与阿尔茨海默病之间的关系。 资料来源：应用计算机检索Medline 1995-10／2005-10与淀粉样β蛋白和阿尔茨海默病相关文章，检索词“Amyloid beta protein，Alzheimer’s disease”，并限定文章语言种类为“English”。同时计算机检索CNKI 1995—10／2005—10相关的文章，限定文章语言种类为中文，检索词“β淀粉样蛋白，Alzheimer病”。 资料选择；就检索到的400余篇文献进行筛选，选择以淀粉样β蛋白代谢、毒性作用为主要内容的文献19篇，无论观察对象为动物还是患者全部纳入，其中内容相似的，以近3年且发表在较权威杂志者优先。 资料提炼：将筛选到的19篇文献按淀粉样β蛋白沉淀的形成以及毒性作用分类：其中4篇与淀粉样β蛋白沉淀的形成相关，15篇与淀粉样β蛋白沉淀的毒性作用相关。 资料综合：19篇文献说明了淀粉样β蛋白沉淀的形成与淀粉样β蛋白的生成增多、降解减少有关。淀粉样β蛋白可诱导细胞凋亡、触发氧化应激、介导炎症损伤、影响胆碱能神经系统以及导致Ca^2＋超载等，从而触发阿尔茨海默病。 结论：淀粉样β蛋白通过多种途径和机制触发和诱导了神经元的变性，与阿尔茨海默病的发病之间有着密切的关系。     

阿尔茨海默病发病中淀粉样β蛋白的神经毒性作用

目的:学习和掌握淀粉样β蛋白的生物学特征,认识其在阿尔茨海默病的发病中的几种可能作用以及以淀粉样β蛋白为靶点的阿尔茨海默病治疗策略的最新进展研究。资料来源:应用计算机检索“Medline1994-01/2004-01”与淀粉样β蛋白相关文献,检索词为“β-amyloid”,限定文章语言种类为English;同时计算机检索“中国期刊网”1994-01/2004-01与淀粉样蛋白相关文献,检索词为“淀粉样蛋白”,二次检索词为“阿尔茨海默病”,限定文章语言种类为汉语。资料选择:就检索到的400余篇文献进行筛选,选择以阿尔茨海默病为研究对象、以淀粉样β蛋白为主要研究内容的文献60多篇,其中研究内容相似的,以近5年且发表在较权威杂志者优先,排除综述类文献。资料提炼:将筛选到的30篇文献按结构、功能和疾病关系分类:其中2篇与淀粉样β蛋白的结构相关,13篇与淀粉样β蛋白神经毒性相关,15篇与淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病发病中的作用以其为治疗靶点的研究有关。资料综合:32篇文献包括体内实验和体外实验研究,说明了淀粉样β蛋白的神经毒性作用,它可诱导性活氧产生自由基损伤,诱导细胞凋亡,并刺激中枢神经系统发生炎症反应,故大多数学者认为淀粉样β蛋白在脑组织中的沉积可能是阿尔茨海默病发生、发展的中心环节,因此以阻止或减少脑内淀粉样β蛋白的数量为目标的治疗策略,可能直接作用于阿尔茨海默病的病理过程。结论:淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病发病中起关键作用,以淀粉样β蛋白为靶点的阿尔茨海默病防治策略正在被广泛研究和应用。     

淀粉样β蛋白沉淀及其神经毒性与阿尔茨海默病

目的:检索近年来国内外有关淀粉样β蛋白的代谢及其神经毒性机制研究的文献,归纳综述淀粉样β蛋白与阿尔茨海默病之间的关系。资料来源:应用计算机检索Medline1995-10/2005-10与淀粉样β蛋白和阿尔茨海默病相关文章,检索词“Amyloidbetaprotein,Alzheimer’sdisease”,并限定文章语言种类为“English”。同时计算机检索CNKI1995-10/2005-10相关的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“β淀粉样蛋白,Alzheimer病”。资料选择:就检索到的400余篇文献进行筛选,选择以淀粉样β蛋白代谢、毒性作用为主要内容的文献19篇,无论观察对象为动物还是患者全部纳入,其中内容相似的,以近3年且发表在较权威杂志者优先。资料提炼:将筛选到的19篇文献按淀粉样β蛋白沉淀的形成以及毒性作用分类:其中4篇与淀粉样β蛋白沉淀的形成相关,15篇与淀粉样β蛋白沉淀的毒性作用相关。资料综合:19篇文献说明了淀粉样β蛋白沉淀的形成与淀粉样β蛋白的生成增多、降解减少有关。淀粉样β蛋白可诱导细胞凋亡、触发氧化应激、介导炎症损伤、影响胆碱能神经系统以及导致Ca2 超载等,从而触发阿尔茨海默病。结论:淀粉样β蛋白通过多种途径和机制触发和诱导了神经元的变性,与阿尔茨海默病的发病之间有着密切的关系。     

老年性痴呆中β淀粉样肽的研究进展

老年性痴呆(阿尔茨海默病,Alzheimerdisease,AD)患者脑内老年斑的主要成分为β淀粉样肽(β-AmyloidPeptide,Aβ),其生理功能以及合成和代谢的过程中相关基因和酶的作用近年来的研究有了许多新的进展,揭示了Aβ与AD病的内在联系及其在治疗方面的一些新的方法,抑制毒性Aβ的合成聚集是治疗AD的一个新的突破。     

老年痴呆发病机制的研究:APP17肽对β-淀粉样肽导致神经元毒性作用的影响

背景老年斑是老年性痴呆(Alzheimer's Disease,AD)的主要病理特征之一,以β-淀粉样肽(β-Amyloid,Aβ)沉积为核心,Aβ的神经元毒性定位于Aβ25-35.Aβ前体蛋白(β-amyloid protein precursor,APP)中319-335肽段即APP17肽(APP17-mer peptide),具有神经营养和神经保护作用.目的通过观察APP17肽对Aβ引起神经毒性作用的影响,进一步证实此肽的神经营养作用,并为阐明AD的发病机制和临床治疗提供理论依据.设计标准对照实验研究.地点和材料本研究的地点为首都医科大学宣武医院神经生化研究室.SY5Y细胞株由瑞典卡罗琳斯卡研究所赠送,APP17肽和Aβ25-35由本室用固相法合成,高效液相纯化.方法固相法合成APP17肽、Aβ25-35,高效液相纯化,以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型,分为正常对照组、Aβ25-35 10μmol/L损伤组和Aβ25-35 10μmol/L加APP17肽10 μmol/L保护组.以细胞计数、噻唑蓝代谢率、乳酸脱氢酶漏出率、细胞轴突长度、胞体面积和细胞内游离钙离子(Ca2+)浓度为观察指标.结果与正常对照组相比,Aβ25-35损伤组轴突长度(35.74±16.25)和胞体面积(495.92±87.68)均缩小,细胞计数接种后第6天[(8.39±1.31)×107 L-1]减少,噻唑蓝代谢率降低,乳酸脱氢酶漏出率升高,细胞内游离钙离子浓度升高,而加入APP17肽保护后,可使上述指标恢复或接近正常. 结论APP17肽具有神经营养和神经保护作用,可减轻Aβ引起的神经元损伤.     

复智散对淀粉样β蛋白25—35神经细胞毒性效应的影响及其机制

背景：淀粉样β蛋白是老年斑的核心成分，其毒性片段淀粉样β蛋白25—35近年广泛用于实验研究中。已往研究表明自制中药复智散可促进培养神经细胞存活，可能具备治疗阿尔茨海默病的效用。目的：研究复智散对抗淀粉样β蛋白25-35对培养神经细胞的毒性作用及其发挥这一作用的可能途径。设计：以细胞为研究对象，重复测量设计：单位：一所大学医院的神经内科和一所大学医院的脑老化重点实验室。材料：实验于2002—06／2003—04在宣武医院北京脑老化重点实验室完成。人多巴胺能神经母细胞瘤株SH—SY5Y细胞。淀粉样β蛋白25—35片段。中药复智散文火煎制，留取上清冷冻抽干配成浓度为0．5g／mL的贮存液备用。抗体：cAMP应答元件结合蛋白、β淋巴细胞白血病-2基因产物中的Bcl—2、细胞色素C由宣武医院北京脑老化研究实验室制备。方法：用不同剂量的淀粉样β蛋白25—35单独或与复智散共同孵育SH—SY5Y细胞，与空白对照组相比，测定在不同孵育条件下培养神经细胞的噻唑蓝代谢率。利用Western-blot法测定复智散单独孵育、淀粉样β蛋白25—35单独孵育及两者共同孵育条件下与空白对照相比蛋白质表达的变化。主要观察指标：各实验组与空白对照组相比的噻唑蓝代谢率。与神经细胞存活及死亡相关蛋白cAMP应答元件结合蛋白，Bcl-2及细胞色素C的表达水平。结果：复智散单独孵育可使SH—SY5Y细胞存活率增加11．4％，与淀粉样β蛋白25—35共同孵育时培养神经细胞存活率较淀粉样β蛋白25—35单独孵育明显提高。淀粉样β蛋白25—35损伤组cAMP应答元件结合蛋白和Bcl-2表达减少，复智散组这两种蛋白质表达增加。淀粉样β蛋白25—35损伤组胞浆内细胞色素C表达增加，复智散孵育下该蛋白质表达水平下降。结论：复智散有促进培养神经细胞存活作用，在淀粉样β蛋白25-35损伤条件下该种保护作用依旧存在。复智散可能通过影响细胞存活／死亡相关蛋白质的表达发挥这一效应。     

阿尔茨海默病患者β淀粉样肽40人单链抗体在大肠杆菌的表达和纯化

目的：重组表达并纯化抗β淀粉样肽40的人单链抗体，为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料。方法：实验于2004-08／2005-03在核医学实验室完成。自制人单链抗体基因。将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗p淀粉样肽40人单链抗体基因，克隆到pET22b（&;#177;）质粒，转化BL21-gold大肠杆菌，经0．5mmol／L异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导表达抗β淀粉样肽40的人单链抗体。采用Ni^2&;#177;-NTA-树脂柱亲和纯化尿素变性的包涵体内表达产物，经柱上复性，含咪唑缓冲液洗脱获得人单链抗体。应用Western blot和酶联免疫吸附实验鉴定纯化的抗β淀粉样肽40的人单链抗体。用Branford法测定纯化抗体的浓度。结果：①抗β淀粉样肽40人单链抗体基因长度约为750bp，重组表达产物相对分子质量33000.②经过一次亲和柱纯化，从细菌包涵体中纯化出高纯度的抗β淀粉样肽40人单链抗体。③酶联免疫吸附实验分析表明纯化单链抗体和β淀粉样肽40结合的A595nm。高于对照，差异显著（0．59&;#177;0．06，0．12&;#177;0．02，P〈0．05），表明从包涵体中纯化出来β淀粉样肽40人单链抗体保持了结合抗原的免疫活性。纯化β淀粉样肽40人单链抗体浓度为96mg／L。结论：抗β淀粉样肽40的人单链抗体在大肠杆菌系统得以重组表达，利用亲和层析成功获得高纯度的重组单链抗体。     

淀粉样β蛋白变性与阿尔茨海默病：发病机制与病理现状

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)的发病机制极为复杂，分子生物学研究发现有4种基因突变与该病有关，它们是：淀粉样β前体蛋白(amyloid beta-protein precursor，APP)基因，早老1基因，早老2基因和载脂蛋白E基因，而AD的病理学改变以脑内聚集大量的老年斑及神经纤维缠结(NFT)为其主要特征，这两者之间有无关系目前还不是十分清楚，但多数学者认为APP基因突变及淀粉样β蛋白在脑组织中的大量沉积是AD病理机制的核心所在。     

复智散对淀粉样β蛋白25-35神经细胞毒性效应的影响及其机制

.背景淀粉样β蛋白是老年斑的核心成分,其毒性片段淀粉样β蛋白25-35近年广泛用于实验研究中.已往研究表明自制中药复智散可促进培养神经细胞存活,可能具备治疗阿尔茨海默病的效用.目的研究复智散对抗淀粉样β蛋白25-35对培养神经细胞的毒性作用及其发挥这一作用的可能途径.设计以细胞为研究对象,重复测量设计.单位一所大学医院的神经内科和一所大学医院的脑老化重点实验室.材料实验于2002-06/2003-04在宣武医院北京脑老化重点实验室完成.人多巴胺能神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞.淀粉样β蛋白25-35片段.中药复智散文火煎制,留取上清冷冻抽干配成浓度为0.5 g/mL的贮存液备用.抗体cAMP应答元件结合蛋白、B淋巴细胞白血病-2基因产物中的Bcl-2、细胞色素C由宣武医院北京脑老化研究实验室制备.方法用不同剂量的淀粉样β蛋白25-35单独或与复智散共同孵育SH-SY5Y细胞,与空白对照组相比,测定在不同孵育条件下培养神经细胞的噻唑蓝代谢率.利用Western-blot法测定复智散单独孵育、淀粉样β蛋白25-35单独孵育及两者共同孵育条件下与空白对照相比蛋白质表达的变化.主要观察指标各实验组与空白对照组相比的噻唑蓝代谢率.与神经细胞存活及死亡相关蛋白cAMP应答元件结合蛋白,Bcl-2及细胞色素C的表达水平.结果复智散单独孵育可使SH-SY5Y细胞存活率增加11.4%,与淀粉样β蛋白25-35共同孵育时培养神经细胞存活率较淀粉样β蛋白25-35单独孵育明显提高.淀粉样β蛋白25-35损伤组cAMP应答元件结合蛋白和Bcl-2表达减少,复智散组这两种蛋白质表达增加.淀粉样β蛋白25-35损伤组胞浆内细胞色素C表达增加,复智散孵育下该蛋白质表达水平下降.结论复智散有促进培养神经细胞存活作用,在淀粉样β蛋白25-35损伤条件下该种保护作用依旧存在.复智散可能通过影响细胞存活/死亡相关蛋白质的表达发挥这一效应.     

阿尔茨海默病患者空腹血糖、真胰岛素、C肽及β淀粉样蛋白的水平

目的探讨阿尔茨海默病（AD）患者胰岛素及β淀粉样蛋白（Aβ）的异常代谢。方法随机选取70名正常人（对照组）、55例AD患者,检验其空腹血糖、真胰岛素、C肽、Aβ40、Aβ42水平。将AD患者按痴呆轻、中重度分组后与对照组进行比较。结果对照组比较,AD患者各组空腹血糖无显著性差异（P〉0.05）,中重度组真胰岛素和C肽升高（P〈0.05）,中重度组Aβ40升高（P〈0.05）,轻度组Aβ42明显升高（P〈0.01）。结论AD患者体内存在胰岛素及β淀粉样蛋白代谢异常,其特征与痴呆的严重程度有关。     

中药当归主要活性成分阿魏酸钠抑制淀粉样β蛋白激活炎症因子的量剂反应

目的：观察中药当归提取的主要活性成分阿魏酸钠对淀粉样β蛋白激活的小鼠腹腔巨噬细胞α肿瘤坏死因子、诱导型一氧化氮合酶和一氧化氮水平的影响。方法：实验于2004-03／10在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成。选择8～10周龄的小鼠36只，随机分为6组，每组6只。正常对照组：巨噬细胞接种24h后用培养基继续培养。淀粉样β蛋白组：巨噬细胞接种24h后在培养基中加入经老化处理的终浓度为10μmol/L的淀粉样β蛋白。淀粉样β蛋白＋10，100，500μmol／L，1mmol／L阿魏酸钠组：在加入淀粉样β蛋白的同时加入10，100，500μmol/L，lmmol／L的阿魏酸钠共同孵育。培养48h后采用酶联免疫吸附法、免疫组织化学方法和Griess反应分别检测肿瘤坏死因子α分泌量、诱导型一氧化氮合酶表达和一氧化氮的生成量。结果：36只小鼠均进入结果分析。①巨噬细胞的肿瘤坏死因子α分泌量：淀粉样β蛋白组明显高于正常对照组[（28154&;#177;14．85），（1755&;#177;4．84）ng／L，（P〈0．01）]。淀粉样β蛋白＋10，100，500μmol／L，1mmol／L阿魏酸钠组可以不同程度地减少由淀粉样β蛋白诱导产生的肿瘤坏死因子α的分泌量[（238．05&;#177;6．21）．（186．90&;#177;7．44），（117．55&;#177;8.08），（71．77&;#177;10．50）ng/L，P〈0．011，且有明显剂量依赖关系（P〈0．05）。②巨噬细胞的一氧化氮生成量：淀粉样口蛋白组明显高于正常对照组[（85.04&;#177;6．16），（26．10&;#177;3．25）μmol／L，（P〈0．01）]，淀粉样β蛋白＋10，100，500μmol／L，1mmol/L阿魏酸钠组可以不同程度地减少由淀粉样β蛋白诱导产生的一氧化氮的量[（69.80&;#177;4.96），（54.52&;#177;345），（43.88&;#177;4.04），（33．83&;#177;3．13）μmol／L，P〈0．011，且有明显剂量依赖关系（P〈0．05）。⑧诱导型一氧化氮合酶的表达：正常对照组只有零星细胞染色阳性；而淀粉样β蛋白组多数细胞胞浆被染成黄褐色。各剂量组的阿魏酸钠可以不同程度地抑制由淀粉样β蛋白激活巨噬细胞造成的诱导型一氧化氮合酶的表达，该抑制作用呈明显剂量依赖性。结论：①淀粉样β蛋白能激活巨噬细胞，使其分泌大量的肿瘤细胞坏死因子α和一氧化氮，诱导型一氧化氮合酶表达也相应增加。②阿魏酸钠通过其抗炎作用呈明显剂量依赖性抑制淀粉样β蛋白对巨噬细胞的激活作用，从而使巨噬细胞生成肿瘤细胞坏死因子α、诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮水平降低。     

β-淀粉样蛋白所致神经细胞凋亡在阿尔茨海默病中的作用

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种渐进性神经系统的退行性疾病,主要特征是患者智力、记忆力、感觉定向的不可逆的退化,是老年痴呆的最常见原因,迄今尚无有效的治疗方法。我国人口基数大,随着生活水平的提高,人均寿命的增加,人口老龄化加速,今后将有可能面临着严重的AD所导致的社会问题。     

阿尔茨海默病与血管性痴呆血浆和脑脊液β淀粉样蛋白肽比较研究

目的探讨β淀粉样蛋白肽Aβ1-40和Aβ1-42水平在阿尔茨海默病（AD）与血管性痴呆（VD）鉴别诊断中的作用及与认知功能损害的关系。比较AD患者血浆和脑脊液中Aβ1-40与Aβ1-42含量的异同。方法收集AD、VD患者各20例,分别测定血浆Aβ1-40、Aβ1-42含量并进行比较。其中10例AD患者同时检测血浆及脑脊液Aβ1-40、Aβ1-42含量并进行比较。采用简明精神状态量表（MMSE）评定认知功能损害。结果 （1）AD组血浆Aβ1-40含量（69.56±14.15）pg/ml,VD组血浆Aβ1-40含量（78.34±17.24）pg/ml,二者差异无统计学意义（P〉0.05）;AD组血浆Aβ1-42含量（17.61±12.70）pg/ml,VD组血浆Aβ1-42含量（20.23±9.57）pg/ml,二者比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。AD组血浆Aβ1-40是Aβ1-42的（5.21±2.64）倍,VD组血浆Aβ1-40是Aβ1-42的（4.56±1.81）倍,两组Aβ1-40/Aβ1-42比值差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）AD组脑脊液Aβ1-40、Aβ1-42含量显著高于血浆,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。（3）相关性分析显示,AD、VD组血浆Aβ1-40、Aβ1-42含量与认知功能损害、性别、文化程度、病程均无显著相关性（P〉0.05）,AD组Aβ1-40含量与年龄呈显著正相关（r=0.724,P=0.000）,VD组Aβ1-42含量与年龄呈显著负相关（r=-0.606,P=0.005）,与Aβ1-40之间有显著正相关性（r=0.567,P=0.009）。结论外周血中Aβ1-40和Aβ1-42水平不能作为临床诊断AD及与VD鉴别的敏感性和特异性指标,血浆中Aβ1-40的检测灵敏度比Aβ1-42更高。血浆Aβ1-40和Aβ1-42水平与AD、VD发病年龄呈显著相关。     

β淀粉样肽与阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是痴呆中最常见的类型。β淀粉蛋白(Aβ)被认为是导致该疾病的主要毒性物质,但具体是Aβ纤维丝还是寡聚体存在着争论。本综述以淀粉样蛋白级联假说为线索,阐述不同状态的Aβ的神经毒性以及它们之间的联系,对以Aβ为靶点的AD治疗有重要意义。     

淀粉样β蛋白变性与阿尔茨海默病:发病机制与病理现状

阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)的发病机制极为复杂,分子生物学研究发现有4种基因突变与该病有关,它们是:淀粉样β前体蛋白(amyloidbeta-proteinprecursor,APP)基因,早老1基因,早老2基因和载脂蛋白E基因,而AD的病理学改变以脑内聚集大量的老年斑及神经纤维缠结(NFT)为其主要特征,这两者之间有无关系目前还不是十分清楚,但多数学者认为APP基因突变及淀粉样β蛋白在脑组织中的大量沉积是AD病理机制的核心所在。     

沂蒙山区3年32例阿尔茨海默病患者淀粉样β蛋白及其前体基因表达量的相关性分析

背景：淀粉样β蛋白沉积是引致阿尔茨海默病的重要原因，淀粉样β蛋白前体基因过度表达或某部分发生突变，可能与阿尔茨海默病的发生有关。目的：观察沂蒙山区阿尔茨海默病与淀粉样β蛋白及其前体基因的关系。设计：病例-对照分析。单位：临沂市人民医院神经内科。对象：选择临沂医专附属临沂市人民医院神经内科2001-01／2003-12住院阿尔茨海默病患者32例，以性别、年龄相当的非颅脑损伤的外科手术老年人30例为对照组（简易精神状态量表评分〉27分）。方法：应用ELISA法检测脑脊液淀粉样β蛋白水平，应用荧光定量聚合酶链反应技术检测淀粉样β蛋白前体基因表达量。结果：62例全部进入结果分析。①阿尔茨海默病组脑脊液淀粉样β蛋白水平明显高于对照组[（13．63&;#177;9．34），（6．75&;#177;5．37）μg／L，t=3．354,P〈0．01]。②阿尔茨海默病组脑脊液淀粉样B蛋白前体表达量明显高于对照组[（1624&;#177;298），（1275&;#177;269）拷贝／μL。t=4．42，P〈0．01]。③阿尔茨海默病组淀粉样β蛋白水平与淀粉样β蛋白前体基因表达量呈正相关（r=0．44，P〈0．01）。结论：沂蒙山区阿尔茨海默病患者脑脊液中淀粉样β蛋白及其前体基因表达增高，且淀粉样β蛋白水平越高，其前体基因表达越高。痴呆程度越重。提示阿尔茨海默病与淀粉样β蛋白、淀粉样β蛋白前体密切相关。但淀粉样β蛋白前体表达量在阿尔茨海默病诊断中不具特异性。     

阿尔茨海默病患者β淀粉样肽40人单链抗体在大肠杆菌的表达和纯化

目的:重组表达并纯化抗β淀粉样肽40的人单链抗体,为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料。方法:实验于2004-08/2005-03在核医学实验室完成。自制人单链抗体基因。将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗β淀粉样肽40人单链抗体基因,克隆到pET22b( )质粒,转化BL21-gold大肠杆菌,经0.5mmol/L异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导表达抗β淀粉样肽40的人单链抗体。采用Ni2 -NTA-树脂柱亲和纯化尿素变性的包涵体内表达产物,经柱上复性,含咪唑缓冲液洗脱获得人单链抗体。应用Westernblot和酶联免疫吸附实验鉴定纯化的抗β淀粉样肽40的人单链抗体。用Branford法测定纯化抗体的浓度。结果:①抗β淀粉样肽40人单链抗体基因长度约为750bp,重组表达产物相对分子质量33000。②经过一次亲和柱纯化,从细菌包涵体中纯化出高纯度的抗β淀粉样肽40人单链抗体。③酶联免疫吸附实验分析表明纯化单链抗体和β淀粉样肽40结合的A595nm高于对照,差异显著(0.59±0.06,0.12±0.02,P<0.05),表明从包涵体中纯化出来β淀粉样肽40人单链抗体保持了结合抗原的免疫活性。纯化β淀粉样肽40人单链抗体浓度为96mg/L。结论:抗β淀粉样肽40的人单链抗体在大肠杆菌系统得以重组表达,利用亲和层析成功获得高纯度的重组单链抗体。     

老年性痴呆中β淀粉样肽的研究进展

老年性痴呆(阿尔茨海默病，Alzheimer disease，AD)患者脑内老年斑的主要成分为B淀粉样肽(β-Amyloid Peptide，Aβ)，其生理功能以及合成和代谢的过程中相关基因和酶的作用近年来的研究有了许多新的进展，揭示了Aβ与AD病的内在联系及其在治疗方面的一些新的方法，抑制毒性Aβ的合成聚集是治疗AD的一个新的突破。