脂质体包裹鼠疫菌VW-aEV76paris株家兔免疫血清的体外杀菌作用研究

观察消除了４５ＭＤ质粒的巴黎ＥＶ７６菌株的家兔免疫血清的体外杀菌作用。方法家兔行背部皮下注射免疫；Ｆ１抗体滴度用间接血凝试验标定；体外杀菌试验采用平板活菌计数。     

抗-抗体:不同方法得到的抗-抗体性状的比较

用异质免疫血清或混有亚免疫剂量异质血清的同质免疫血清免疫动物时,在动物血清中出现与特异免疫血清发生补体结合反应的抗-抗体。这与仅能同用作免疫的免疫血清发生反应的抗-抗体独特型特征有所不同。本文目的是通过实验得到的抗-抗体与文献记述方法得到的独特型抗-抗体进行比较。材料和方法用加热S.typhi菌苗和S.newport活菌培养物配合免疫家兔得到抗菌血清,加热菌苗间隔3天接种1次,接种量为2×10~9,共接种6次;活菌培养物间隔5天接种1     

日本血吸虫种、期血清学抗原及其新型检测系统的研究──人“O”型血红细胞与抗日本血吸虫特异性抗体结合物的制备及其应用方法的建立

用日本血吸虫成虫特异性抗原（ｓｊ－ＳＡＡｇ）和虫卵特异性抗原（ｓｊ－ＳＥＡｇ）免疫家兔制备免疫血清，继用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００柱层析法提取家兔免疫血清中抗ｓｊ－ＳＡＡｇ和抗ｓｊ－ＳＥＡｇ的两种特异性多克隆抗体。将人“Ｏ”型血红细胞分别与上述两种抗体结合制备红细胞—抗体结合物（ＲＢＣ－Ａｂｓ），并研究了该结合物的应用方法。初步研究结果表明，实验所用载体以混合纤维素膜最佳，检测３１例急性血吸虫病人阳性率为９６．８％，２０例正常人假阳性率为５％。     

长沙地区成年人人类疱疹病毒6 型( H H V-6) 抗体的调查

人类疱疹病毒６型（Ｈｕｍａｎｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ６，ＨＨＶ６）系１９８６年从２名艾滋病和４名淋巴细胞异常增生患者的细胞中分离出来的新型疱疹病毒［１］。它与单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ１）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ２）、水痘带状疱疹病毒（ＶＺＶ）、ＥＢ病毒及巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）５型人类疱疹病毒（ＨＨＶ５）的单克隆抗体或高价免疫血清作交互免疫试验和交互核酸探针试验，证明ＨＨＶ６的免疫学和分子生物学特性与前述５型疱疹病毒完全不同。ＨＨＶ６与疱疹病毒属的其它成员均在人群中广泛传播，对人体…     

大鼠肺微血管内皮细胞的G蛋白亚型鉴定

本实验拟在体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 (ＲＰＭＶＥＣｓ)的基础上 ,用免疫细胞化学Ｓ Ｐ法和免疫荧光细胞化学间接法检测ＲＰＭＶＥＣｓ膜Ｇ蛋白亚型。1　材料和方法1.1　材料　　ＤＭＥＭ培养干粉 (美国ＧＩＢＩＣＯ公司 ) ;荧光 (ＦＩＴＣ)结合的羊抗兔抗体、兔抗大鼠ＩｇＧ抗体免疫血清 (北京中山公司 ) ;Ｇｓα、Ｇｉα和Ｇｑα兔抗大鼠抗体 (ＩｇＧ) (ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ .Ｉｎｃ)。1.2　检测ＲＰＭＶＥＣｓＧ蛋白亚型方法1.2 .1　免疫细胞化学Ｓ Ｐ法　　ＲＰＭＶＥＣｓ经 4%多聚甲醛固定 ,3 %Ｈ2 Ｏ2 …     

乙型肝炎肝组织中Fas抗原检测

探讨Ｆａｓ抗原在慢性肝炎肝组织中表达，分布与肝组织损伤的关系。方法用抗－Ｆａｓ多克隆抗体，以免疫组织化学技术对７６例乙型肝炎组织中Ｆａｓ抗原进行了检测。结论慢性肝炎肝组织中ＦａｓＲＹＭＮＤＲ Ｒ ＧＥ ＤＰ ＧＮ ＥＦＨ ＸＥＸＫ肝组织损伤程度密切相关。     

制备抗新城鸡瘟病毒（NDV）抗体的一种简便、快速、高效方法

本文以新城鸡瘟病毒（Ｎｅｗ－ｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＮＤＶ）为抗原，无需佐剂协同，一次性免疫家兔，仅在一周内就制备了高效价达１：１２８０的抗ＮＤＶ抗体，从而简化了传统制备抗ＮＤＶ抗体的方法。     

兔中性粒细胞抗菌肽提取物杀白色念珠菌活性观察

作者用柠檬酸抽提法,从家兔腹腔中性粒细胞溶酶体中提出低分子阳离子肽类物质。体外杀菌试验证明该提出物对白色念球菌有明显杀菌作用,其杀菌机理有待探讨。     

ENA多肽抗体测定在进行性系统性硬皮病诊断中的应用

我们选择临床确诊的进行性系统性硬化症患者 (Ｐｓｓ)的血清 ,用免疫印迹法测定可提取核抗原(ＥＮＡ)多肽抗体 ,以探讨ＥＮＡ在进行性系统性硬皮病中的诊断价值。1　材料和方法1.1　标本来源临床按Ｍａｓｉ诊断标准确诊的系统性硬化病(Ｐｓｓ) 95例 ,其中弥散型 51例 ,局限型 4 4例。健康对照组 50例。取空腹静脉血分离血清备用。1.2　ＥＮＡ多肽抗体测定选用德国欧蒙试验制品有限公司生产的免疫印迹试剂盒 ,并严格按要求操作。2　结果和讨论结果表明健康对照组和疾病对照组ＥＮＡ多肽抗体均阴性。Ｐｓｓ组ＥＮＡ多肽抗体谱中 ,仅见Ｖ1ＲＮ…     

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达

目的;研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴａ,转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞,３７℃振荡培养４ｈ使发生转座,于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞,将转染上清再次感染ｓｆ细胞,以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析,检测重组蛋白。结果：序     

In vitro studies of group E streptococci in swine leukocytes. I. Phagocytic and bactericidal properties of polymorphonuclear leukocytes from swine

Serum from both immune and nonimmune ten-week-old swine contained factors which promoted phagocytosis of group E Streptococci (GES). The factors in nonimmune serum, which were heat labile at 70 degrees C for ten minutes, were less efficient than the factors present in immune serum.Bactericidal activity of the polymorphonuclear (PMN) leukocytes against GES was observed with serum from both immune and nonimmune ten-week-old swine, as well as with serum from normal sows and piglets. However, the bactericidal activity of PMN leukocytes in serum from either normal sows or immune ten-week-old swine was greater than the bactericidal activity of PMN leukocytes in either piglet serum or serum from nonimmune ten-week-old swine. When the serum was either heated to 70 degrees C for ten minutes or treated with 2-mercaptoethanol, bactericidal activity of PMN leukocytes against GES was only observed in the presence of immune serum.     

治疗森林脑炎用人免疫血清制备

目的：监测森林脑炎病毒感染人体后不同时间血清抗森林脑炎抗体水平和抗森林脑炎抗体血清体外保存（-50℃）时间,进行治疗森林脑炎用人免疫血清的制备。方法：应用间接免疫荧光抗体技术检测血清抗森林脑炎病毒抗体（IgG）滴度,确定人体感染森脑病毒后产生高滴度抗体时间和血清抗体体外保存时间。结果：人体感染森脑病毒2～3个月时血清抗森林脑炎病毒抗体（IgG）滴度最高、感染6个月抗体水平开始下降;血清体外保存6个月抗体水平保持不变,9个月后开始下降,24个月均无抗体。血清抗体滴度越高体外保存时间越长。结论：可以采集森林脑炎病毒感染后2～3个月已知高滴度抗体人群的血液,制备成治疗用免疫血清,分装冰冻（-50℃）保存。在次年森脑高发期及时用于临床病人的治疗,这将提高治疗效果,对减少该病的死亡率和致残率具有重要意义。     

人血清中青霉素抗体的酶联免疫吸附测定

目的: 建立检测青霉素抗体的ELISA法,并探讨其临床意义。方法: 以氨苄西林用SPDP法与兔血清白蛋白交联,用此交联物为包被抗原,HRP-抗人IgG为酶标抗体,建立检测青霉素抗体的ELISA法,并对部分临床标本进行青霉素抗体检测。结果: 建立的方法其批内、批间变异系数分别为6.8%、8.4%。氨苄西林-兔白蛋白交联物免疫家兔获得兔抗氨苄西林的抗体,以此抗体作阻断试验,抑制HRP-抗人IgG的显色。临床标本检测结果表明,不同疾病患者青霉素抗体的阳性率不同。结论: ELISA可用于临床对青霉素抗体的检测,具有较好的特异性、敏感性和重复性。     

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒ORF65抗体的制备及其特异性检测

目的：制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化,在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共4次。末次免疫后1周取兔血清,ELISA法检测兔免疫血清抗体IgG抗体水平。进一步采用免疫荧光、Western blot检测制备的抗血清中与ORF65结合的特异性。结果家兔在全程免疫后产生了高效价的特异性抗体,最高滴度达1∶12800。免疫荧光检测显示,与未经佛波酯（TPA）刺激的BCBL‐1细胞相比,兔抗血清主要结合于BCBL‐1细胞胞质,与ORF65蛋白在细胞内表达位置一致。Western blot结果显示在21 kD处有特异性蛋白条带,其大小与预期的ORF65蛋白大小相符,同时经T PA刺激的BCBL‐1细胞中ORF65蛋白表达量高于对照组,与ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。结论用ORF65衣壳蛋白抗原肽段免疫家兔,可成功制备高效价的特异性抗血清,该抗体可与KSHV病毒ORF65蛋白特异性结合。     

海藻酸钠包覆的降钙素脂质体的制备和体内外黏附性质

制备海藻酸钠包覆的脂质体,并对其黏膜黏附性质进行研究。采用薄膜水化法制备了包封率为(86.2±2.3)%的带正电荷的降钙素脂质体,并用不同黏度的海藻酸钠对脂质体进行包覆,包覆后的脂质体实现了电荷反转。通过黏蛋白-颗粒结合法、组织匀浆法和激光共聚焦显微镜法分别对海藻酸钠包覆脂质体的体内外黏附性质进行研究,黏蛋白-颗粒结合法研究结果表明：海藻酸钠可以与黏蛋白颗粒结合使其电位发生变化,组织匀浆法研究结果表明：海藻酸钠包覆脂质体能够增加肠道中荧光标记物的含量,并且随着海藻酸钠黏度的增加,肠道中荧光标记物的含量增大。激光共聚焦显微镜法研究表明：高黏度的海藻酸钠包覆脂质体与未包覆脂质体相比表现出了更强的荧光强度,海藻酸钠包覆脂质体与未包覆脂质体相比具有良好的黏膜黏附特性,且这一特性随着海藻酸钠黏度的增加而增大。     

兔防御素对耐药绿脓杆菌的抗菌活性及机制研究

目的　探讨兔中性粒细胞防御素对绿脓杆菌耐药株的抗菌活性及其作用机制。方法　用柠檬酸抽提法 ,从家兔中性粒细胞溶酶体中提出防御素粗制品 ,经酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳 (AU- PAGE)分离纯化。体外采用微量琼脂糖扩散实验 ,观察兔中性粒细胞防御素 NP2 对绿脓杆菌 ATCC2 785 3及其多重耐药株的抗菌活性 ,透射电镜观察防御素作用后绿脓杆菌各株超微结构的变化。结果　采用柠檬酸抽提法和酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳成功地分离纯化出兔中性粒细胞防御素 NP2 。 NP2 对绿脓杆菌 ATCC2 785 3及其多重耐药株有明显的抗菌活性 ,抗菌活性随防御素浓度升高而增强。透射电镜观察显示 ,防御素作用后的菌株细胞膜不连续 ,胞内成分固缩 ,伴空泡形成 ,胞间有大量漏出物。结论　家兔中性粒细胞防御素 NP2 对绿脓杆菌多重耐药株具有杀菌活性。透射电镜观察结果提示了防御素对靶细胞膜损伤的杀菌机理     

Avidity and bactericidal activity of antibody elicited by different Haemophilus influenzae type b conjugate vaccines. The Vaccine Study Group.

OBJECTIVE--Antibody avidity is a measure of the functional affinity of serum antibody to bind to antigen. In this study, we compared the avidity of antibodies elicited by vaccination with three Haemophilus influenzae type b (Hib) conjugate vaccines and investigated the relationship between antibody avidity and the ability of antibody to activate complement-mediated bactericidal activity. DESIGN--A convenience sample of 171 postvaccination serum samples with more than 0.5 microgram/mL of anticapsular antibody, the minimum concentration required for measurement of avidity. The serum samples were obtained from infants participating in immunogenicity trials with Hib capsular polysaccharide (PRP) conjugated to meningococcal outer membrane protein complex (PRP-OMPC) or to tetanus toxoid (PRP-T), or PRP oligomers conjugated to a nontoxic mutant diphtheria toxin, CRM197 (Oligo-CRM). PATIENTS--Healthy infants recruited in private practices. PRIMARY OUTCOME MEASURES--Avidity of vaccine-induced serum anticapsular antibody and serum bactericidal titers. RESULTS--In infants vaccinated at 2, 4, and 6 months of age, Oligo-CRM evoked antibody of higher avidity than PRP-OMPC (P less than .001). The mean avidity of antibody elicited by PRP-T was intermediate, being lower than Oligo-CRM (P less than .02) but higher than PRP-OMPC (P = .001). Also, after one dose, 18-month-old infants given Oligo-CRM had higher avidity antibodies compared with those given PRP-OMPC (P less than .001). Half of the infants in both age groups who were given Oligo-CRM developed antibody avidity of 2.50 nM-1 or greater, whereas more than two thirds of the infants given PRP-OMPC had avidity values of 1.25 nM-1 or less. Antibodies with avidity of 1.25 nM-1 or less were, on average, 6.6-fold less active in assays of complement-mediated bactericidal activity than antibodies with avidity of 2.50 nM-1 or greater (P less than .001). CONCLUSIONS--Oligo-CRM and PRP-T conjugate vaccines elicit higher avidity antibody than PRP-OMPC, and high-avidity antibody is more potent than low-avidity antibody in serum bactericidal assays. Consideration should be given to including measurement of antibody avidity in assessment of new vaccines since avidity may affect the ability of serum antibody to confer protection against disease.     

EB病毒膜蛋白家兔免疫血清的制备及其特性研究

目的：制备高效价EB病毒膜蛋白抗体,并对其效价及其与EBV结合的特异性进行鉴定。方法：将B95-8细胞培养至3×10^5/mL时,超声破碎,纯化获得EB病毒膜蛋白抗原;EB病毒膜蛋白抗原经弗氏佐剂乳化,在家兔背部皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共3次,并分别于免疫前和每次免疫后1周取兔血清,检测兔免疫血清抗体IgG;进一步采用Western blot检测制备的血清抗体与EBV结合的特异性,同时采用ELISA法检测兔血清抗体水平及各周抗体滴度的变化趋势。结果：所有家兔在全程免疫后都产生了高效价膜蛋白的特异性抗体,最高滴度达1：6400。结论：用B95-8细胞制备的EB病毒膜蛋白抗原免疫家兔,可成功制备高效价的特异性血清抗体,为EB病毒膜蛋白抗原的免疫学检测奠定了基础。     

CD34抗体包被支架植入预防兔动脉支架内狭窄的研究

目的探讨CD34抗体包被支架植入预防兔动脉支架内狭窄的效果。方法经颈动脉人路建立兔髂动脉损伤模型，损伤后即刻于右侧植入普通支架，左侧植入抗体支架。45d取样6只，观察CD34抗体包被支架的效果、支架内最狭窄处管腔的百分率及CD34抗体包被支架内新生内膜面积的百分率。结果荧光显微镜下观察结果显示，抗体包被均匀密集。实验组支架内最狭窄处管腔的百分率为（16．13±3．93）％，明显低于对照组[（47．03土11．89）％]（P〈0．05）。实验组CD34抗体包被支架内新生内膜面积的百分率为（49．64土6．40）％，明显低于对照组[（66．83±6．00）％]（P〈0．05）。结论CD34抗体包被支架能够有效减轻受损动脉支架内狭窄的发生。     

赤丹丸与其组方药材的体外抑菌试验

目的：研究赤丹丸及其组方药材的体外抑菌作用。方法：采用液体培养基2倍稀释法测定赤丹丸及其组方药材的水提取物和乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌的体外最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：赤丹丸及其组方药材的水提取物和醇提取物对白色念珠菌的抑菌作用明显弱于对其它3种菌的作用（P〈0．05），其中药材的水提取物体外抑制白色念珠菌作用相对较强（P〈0．05）；各种提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的抑菌作用也各有差异。药材水提取物对铜绿假单胞菌、白色念珠菌的抑菌作用最强（P〈0．05）；赤丹丸醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌作用最强（P〈0．05）。结论：赤丹丸及其组方药材的水提取物与醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均具有体外抑菌作用。