gyrA和parC基因与粪肠球菌对氟喹诺酮类抗菌药物耐药的关系

目的 探讨粪肠球菌DNA解旋酶和拓扑异构酶Ⅳ基因与氟喹诺酮类抗菌药物的耐药的关系,为临床治疗和新药的开发提出实验依据.方法 用琼脂稀释法检测112株粪肠球菌对4种氟喹诺酮类抗菌药物的体外敏感试验,并选择对氟喹诺酮类抗菌药物耐药的菌株对其gyrA和parC的喹诺酮耐药决定区域基因进行PCR扩增,然后随机选择5株PCR产物...     

莫西沙星的临床应用及安全性

莫西沙星作为第四代喹诺酮类抗菌药的代表药物,与其他喹诺酮类抗菌药相比,在显著增强活性的同时由于改进了分子结构,可以同时作用于拓扑异构酶Ⅱ和拓扑异构酶Ⅳ（parc．gyrA靶位）,不仅保留了对革兰阴性杆菌良好的杀菌作用,而且半衰期更长,进一步加强了对革兰阳性球菌的杀菌作用。它具有在肺组织内浓度高、抗菌作用强、耐药率低、每日只需1次用药、对肝肾功能损伤小等优点,现就其临床应用及安全性综述如下。     

大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药耐药机制的研究近况

喹诺酮类药物是一类化学合成药物,由于其具有较强抗菌活性,临床上已广泛用于各种细菌性感染。随着喹诺酮类药物在临床上越来越广泛的应用,喹诺酮类药物的耐药也逐渐上升。已知细菌对喹诺酮类药物的主要耐药机制为:①靶位基因Ⅱ型拓扑异构酶即DNA回旋酶基因(gyrA和gyrB)和拓扑异构酶Ⅳ基因(parC和parE)突变;②细菌膜通透性的降低和膜上药物主动外排泵的激活;③质粒上qnr基因介导细菌对喹诺酮类耐药。     

gyrA和parC基因与嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类抗菌药物耐药的关系

目的 探讨嗜麦芽窄食单胞菌的DNA解旋酶和拓扑异构酶Ⅳ基因与氟喹诺酮类抗菌药物的耐药关系,为临床治疗和新药开发提供实验依据.方法 用琼脂稀释法检测临床上收集的68株嗜麦芽窄食单胞菌对4种氟喹诺酮类抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),选择氟喹诺酮类抗菌药物耐药的菌株,对其gyrA和parC的喹诺酮决定区域的基因进行PCR扩...     

氟喹诺酮类抗菌药在外科系统感染预防及治疗中的合理应用

自1979年诺氟沙星成功合成并应用于临床至今,氟喹诺酮类抗菌药的合成及临床应用得到了长足进步。氟喹诺酮类抗菌药的主要作用机制为抑制细菌拓扑异构酶,阻碍细菌DNA复制,从而产生快速杀菌作用。其作用具有以下临     

莫昔沙星片治疗呼吸道感染45例疗效观察

莫昔沙星为第四代新型广谱氟喹诺酮类抗菌药物，其在保持第三代氟喹诺酮类对革兰阴性菌有高度敏感性的基础上增强了对革兰阳性球菌、非典型致病原和厌氧菌的抗菌活性，尤其是其他抗菌药耐药的细菌仍有很强的药理活性。国内外对微生物学研究结果表明：     

革兰阴性细菌对喹诺酮耐药机制的研究进展

喹诺酮类药物为广谱全合成抗生素，广泛应用于各种细菌感染性疾病。近年来耐药株呈蔓延趋势，耐药菌谱也日益扩大，严重影响其疗效和临床应用。细菌对喹诺酮类药物的耐药性机制主要是细菌染色体基因突变：①导致药物作用靶位-D-NA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的结构、构象发生变化，使药物不能与酶-DNA复合物稳定结合。②降低细菌膜的通透     

肠球菌耐药机制研究进展

肠球菌耐药机制包括由染色体基因决定的固有耐药、由染色体外的遗传单位如质粒、转座噬菌体、转座因子等携带DNA片段导致的获得性耐药。本文针对肠球菌对氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、糖肽类抗菌药物的耐药机制研究进展分别综述。     

耐药鲍曼不动杆菌氟喹诺酮类耐药基因研究

目的 了解耐药不动杆菌氟喹诺酮类耐药基因的存在状况.方法 GNS-448药敏卡及K-B法测定抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应（PCR）检测靶位DNA回旋酶编码基因（gyrA）与拓扑异构酶Ⅳ编码基因（parC）之氟喹诺酮耐药决定区突变分析,以及可移动遗传元件可介导的喹诺酮类耐药基因[qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac（6’）-Ⅰb-cr].结果 20株不动杆菌对12种常用抗菌药物严重耐药,对左氧氟沙星耐药率85％,亚胺培南90％,美洛培南耐药率达到95％.19株耐药鲍曼不动杆菌均检出gyrA基因氟喹诺酮耐药决定区（QRDR）第83位密码子TCA→TTA有义突变（氨基酸序列Ser→ Leu）;20株不动杆菌中,parC基因均检出存在QRDR区第80位密码子TCG→TTG有义突变（氨基酸序列Ser→Leu）;没有检出耐药鲍曼不动杆菌可移动遗传元件可介导的氟喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac（6’）-Ⅰ b-or.结论 鲍曼不动杆菌氟喹诺酮类药物的耐药机制主要与gyrA和parC基因QRDR区突变相关.     

喹诺酮类抗菌药物的研究进展及临床应用现状

喹诺酮类(qunolones)自1962年美国Sterling-Winthrop研究所Lesher等发现第一个喹诺酮类抗菌药萘啶酸,都具有吡啶酮酸的共同结构,主要的药理作用机制通过抑制DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ,阻断DNA的复制及影响蛋白质的合成而产生抗菌作用[1].这种作用一般对细菌的选择性高,对人的安全性大.由于其独特的抗菌药物的作用机制和较小的临床副作用,而在世界范围内广泛地应用,近十余年来,由于药物研究方法的改进,分子结构的简单,使得喹诺酮类药物的研究取得了突飞猛进的发展.新一代喹诺酮类抗菌药物在临床上的应用及临床疗效的地位替代了头孢菌素的临床地位;特别是其在呼吸专业的独特的临床作用和较少引起的二重感染[2],使得喹诺酮类抗菌药更加引起各国医、药工作者的重视.但药物的二重性及耐药现象是任一抗菌药物存在的共同问题,现就其研究进展、临床应用和不良反应进行简单概述.     

570株铜绿假单胞菌对11种抗菌药物的敏感性及其耐氟喹诺酮机制

目的　了解铜绿假单胞菌的耐药性及其耐氟喹诺酮的机制。方法　Kirby Bauer琼脂扩散法测定 5 70株铜绿假单胞菌对 11种抗菌药物的敏感性 ,琼脂稀释法测定其中 111株对两种氟喹诺酮的最低抑菌浓度 (MIC)。直接序列分析和聚合酶链反应 限制性长度多态性 (PCR RFLP)分析环丙沙星耐药菌株gyrA和parC基因突变。结果　 5 70株铜绿假单胞菌对头孢吡肟、亚胺培南、阿米卡星和头孢他啶的敏感性较高 ,其耐药率分别为 10 9%、11 1%、11 8%、12 5 %。环丙沙星、头孢哌酮 /舒巴坦和哌拉西林的耐药率分别为 2 9 2 %、2 3 5 %和 33 7%。耐环丙沙星和ICU临床分离的菌株对所测试的抗菌药物的耐药率均较高 ,6 0 %以上为多重耐药 (MDR)菌株。 80株耐环丙沙星菌株中 6 6株( 75 % )出现gyrA基因Thr83(ACC)→Ile(ATC)突变 ,5 2株 ( 6 5 % )发生parC基因Ser87(TCG)→Leu(TTG)突变 ,同时存在上述两种突变的有 5 2株 ( 6 5 % ) ,而 31株环丙沙星敏感菌中未发现上述突变。gyrA和parC双基因突变对环丙沙星的MIC显著高于单独gyrA基因突变株和不存在上述突变的菌株 ,P <0 0 5。结论　铜绿假单胞菌的耐药性日趋严重 ,特别是耐环丙沙星和ICU分离株对多种抗菌药物耐药 ;氟喹诺酮类药物作用靶位gyrA和parC的基因突变是临床分离铜绿假单     

777株临床分离肠球菌的分布及耐药性分析

目的了解本院临床肠球菌的菌群分布及耐药情况。方法采用回顾性调查分析方法对我院分离自各类临床标本的777株肠球菌进行统计,并对抗菌药敏试验结果进行分析。结果肠球菌菌株来源以尿液(30.5%)、胆汁(25.5%)、分泌物(17.8%)为主;2007～2010年分离的肠球菌对抗生素的耐药率有逐年增高趋势(P<0.05);屎肠球菌对多种抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌,且在分离的肠球菌构成比有增高趋势。结论屎肠球菌在临床分离的肠球菌中越来越常见,肠球菌的多重耐药严重。     

Emergence of multidrug resistant enterococci at a tertiary care centre

Background

Enterococci have assumed great clinical importance because of their increasing resistance to various antimicrobial agents. Thus, knowledge about the antibiogram of these multidrug resistant isolates is of utmost importance in formulating an effective antibiotic policy to treat these infections and reducing the morbidity and mortality. Aim of this study was to assess the antimicrobial resistance pattern of enterococci and determine the prevalence of multidrug resistance among them.

Methods

This cross sectional study was carried out from August 2011 to February 2014, in which 200 non-repetitive clinical isolates of enterococci were included. Antimicrobial susceptibility testing was done by disc diffusion method. Minimum inhibitory concentration (MIC) of gentamicin, streptomycin, vancomycin, teicoplanin and linezolid was determined by E-test method.

Results

The prevalence of multidrug resistance among enterococcal isolates was found to be 63%. Varying levels of resistance was seen to various antibiotics. Most of the isolates were resistant to penicillin (95%), ampicillin (95%) and cotrimoxazole (90%). High level aminoglycoside resistance (HLAR) and glycopeptide resistance was seen in 39% and 14% isolates respectively. Only 4 isolates (2%) were found to be resistant to linezolid.

Conclusion

The prevalence of multidrug resistance among enterococci was found to be 63%, the resistance being more common in Enterococcus faecium as compared to Enterococcus faecalis. The study highlights the emergence and increased prevalence of multidrug resistant enterococci which pose a serious therapeutic challenge.     

Enterococcal urinary tract infections: eight years experience at a regional hospital in Trinidad, West Indies

Objective　To investigate the prevalence of significant enterococcal isolates from urine and determine what factors are associated with the increased prevalence, with particular reference to antibiotic susceptibilities. Methods　Retrospective analysis over an 8-year period of hospital laboratory records of urinary isolates of enterococci was done. Species were identified via colony morphology, growth in 6.5% sodium chloride and their ability to hydrolyze esculin in the presence of 40% bile salts. Susceptibility testing via the disc diffusion technique with 9 commonly used antibiotics was also done as defined by the National Committee for Clinical Laboratory Standards. Results　From 39?881 urine specimens, 9116 (22.9%) were culture positive. Of this 9116, 1001 (11.0%) were enterococci, the 4th most common urinary isolate. E. coli was the most common (36.2%). Most enterococci were from pediatric patients (28.4%) and the urology unit (24.5%). All enterococci were fully sensitive to ampicillin and augmentin (amoxicillin-clavulanic acid). Sensitivity to gentamicin decreased significantly from 79% in 1990 to 58% in 1997 (P&lt;0.005). Sensitivity to the cephalosporins and nitrofuratoin were relatively stable, but sensitivity to nalidixic acid varied. No resistance to vancomycin was detected during the study, and no cases of bacteremia complicated bacteriuria were seen. Conclusion　Isolation of enterococci was relatively stable during the 8-year period, and all isolates were fully sensitive to the older β-lactams, ampicillin, cefaclor and augmentin, but displayed varying degrees of multi-resistance to other commonly used urinary agents such as nalidixic acid and co-trimoxazole (trimethoprim-sulfamethoxazole). Because of the emergence of multi-resistant enterococci in many countries, and the high cost of drugs in our society, it is imperative that vigilance be maintained in monitoring enterococcal infections in hospitals.     

甘氨环素类药物替加环素的研究进展

由于导致严重感染的多药耐药菌发生率上升，临床迫切需要寻求新型抗菌药物，尤其需要能够有效克服现有耐药机制的全新药物。替加环素为新型抗菌甘氨环素类药物，即米诺环素的衍生物，能够克服与四环素类绝大部分相关的耐药机制。体外试验显示替加环素尽管对铜绿假单胞菌无效，对变形杆菌属的作用较差，但对耐万古霉素肠球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐青霉素肺炎链球菌和其他多药耐药革兰阴性菌均具有良好活性。Ⅲ期临床试验已就替加环素治疗由多药耐药菌引起危及生命的感染的作用进行了研究，其抗菌谱新颖广阔，具有良好的临床应用前景。     

临床感染标本中常见革兰氏阳性球菌的分离及其耐药性分析

目的 :分析临床感染标本中常见革兰氏阳性球菌的分离及其耐药性 ,指导临床合理用药。方法 :采用美国NCCL S药敏试验纸片扩散法 ,检测 2 0 0 0年 8月至 2 0 0 2年 8月临床感染标本中分离的革兰氏阳性球菌的耐药性。结果 :两年中分离的革兰氏阳性球菌以葡萄球菌和肠球菌为主 ,其检出率分别为 5 3.6 %和 33.6 %。葡萄球菌除对万古霉素都敏感外 ,对苯唑西林耐药的葡萄球菌的耐药率明显高于对苯唑西林敏感的葡萄球菌。分离出 2 5 .2 %的肠球菌氨基糖甙类高耐株 (HL AR)和 1.8%的耐万古霉素肠球菌 (VRE)。结论 :合理使用抗生素对延缓细菌耐药性的产生及多重耐药菌株的传播与流行是非常重要的     

湖北地区肠球菌耐药性观察

目的：分析临床分离肠球菌对抗菌药物的耐药性。方法：对湖北地区11所医院1998年10月～1999年9月临床分离肠球菌进行K-B药敏试验,用WHONET-4软件完成数据分析。结果：254株肠球菌中,粪肠球菌183株(72．0％),屎肠球菌38株(14．9％);肠球菌主要来自中段尿,其次为伤口、呼吸道、穿刺引流液。庆大霉素高耐株、链霉素高耐株分离率分别为47．3％和56．0％,耐万古霉素肠球菌分离率5．3％。粪肠球菌对庆大霉素、氯霉素、四环素、红霉素、克林霉素的耐药率均大于60％,屎肠球菌对β-内酰胺类相对耐药,对庆大霉素、四环素、红霉素、环丙沙星的耐药率为51．6％～92．3％。结论：肠球菌耐药尤其多重耐药严重。     

肠球菌GyrA基因突变和多重耐药泵与氟喹诺酮耐药性关系研究

目的探究肠球菌GyrA基因突变和多重耐药泵与氟喹诺酮类药物耐药性的关系。方法全部试验菌株使用VITEK 2-Compact仪器和GPI卡进行鉴定。通过PCR和单链构象多态性(SSCP)法检测对左氧氟沙星(Levo)与环丙沙星(Cip)耐药的30株粪肠球菌和10株屎肠球菌GyrA基因有无碱基发生突变,并通过基因测序确定其突变类型。检测了30株粪肠球菌在M-H琼脂中加入终浓度为20μg/mL利血平后Cip MIC值的改变。结果 PCR-SSCP分析结果表明40株对Levo和Cip同时耐药肠球菌均扩增出GyrA基因,其中有24株粪肠球菌和4株屎肠球菌的单链泳动带与粪肠球菌ATCC 29212和敏感菌株的单链泳动带相比较出现异常。其中粪肠球菌在第87位上有密码子改变:GAA变为GGA;屎肠球菌在第83位有密码子改变:AGT变为TAT,这些突变均可引起氨基酸的改变。在M-H琼脂中加入利血平可以提高部分粪肠球菌对环丙沙星的敏感性。结论用PCR-SSCP法检测40株肠球菌的GyrA基因并通过测序分析,显示有70%(28株)肠球菌碱基发生了突变,说明GyrA基因喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)突变是肠球菌对氟喹诺酮类药物耐药的重要原因,此外还有药物泵出等耐药机制的存在。     

北京地区和其他地区临床分离的肠球菌耐药性比较分析

目的 探讨和分析肠球菌的耐药表型,为临床合理用药提供客观依据。方法 采集北京4家综合性医院和全国53家三级甲等医院1997～2001年分离的不重复的7316株肠球菌,按照NCCLS推荐的方法和判断标准进行纸片扩散法药敏试验,并用WHONET5专用软件进行分析。结果 北京和其地区临床分离的肠球菌中,粪肠球菌、屎肠球菌分别占80．7％、17．1％和79．4％、15．2％;居前5位分离出肠球菌的临床标本依次为尿液33．7％和28．4％;痰液22．9％和16．3％;脓性分泌物9．8％和14．6％;血液4．4％和5．0％;胆汁3．0％和4．5％。北京和其他地区粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁、氨苄西林、高浓度庆大霉素的耐药率分别为2．0％、5．1％;1．4％、3．7％;17．7％、24％;47．4％、49．2％。屎肠球菌对万古霉素、替考拉宁、氨苄西林、高浓度庆大霉素的耐药率分别为1．5％、2．1％;2．6％、3．1％;64．2％、68．5％;64．9％、62．3％。耐万古霉素肠球菌占3．2％。结论 临床分离的肠球菌株以粪肠球菌为主;屎肠球菌对多种抗菌药物较粪肠球菌具有更强的耐药性;肠球菌对万古霉素、替考拉宁的耐药率最低。     

227株肠球菌细菌耐药性分析

目的了解肠球菌在临床标本中的分布及对常用的抗菌药物的耐药现状,指导临床合理用药。方法对临床标本中分离出的细菌进行系统检验,采用纸片法对分离鉴定后的肠球菌进行药物敏感性试验。结果肠球菌可在临床常见的多种标本中检出,粪肠球菌(44.1%)与屎肠球菌(37.9%)常见,其他肠球菌(18%)少见。对常用抗菌药物的耐药性,粪肠球菌和屎肠球菌之间的差异无统计学意义。万古霉素是敏感性最高的抗生素。青霉素、氨苄西林和呋喃妥因对粪肠球菌具有较好的抗菌活性。屎肠球菌对除糖肽类抗生素以外的所有临床常用抗菌药物显示高水平耐药。结论临床医生应关注临床常见病原菌的耐药性研究,动态监测肠球菌的耐药状况对指导临床治疗具有重要意义。