肿瘤逃逸NK细胞攻击的分子机制及逆转作用

通过分析NK细胞活化性受体、抑制性受体以及它们相应的配体,概括了NK细胞的天然肿瘤免疫监视功能和肿瘤细胞逃逸NK细胞杀伤的分子机制,在此基础上提出阻断NK细胞的抑制性信号,激发活化性信号,可以提高NK细胞的杀瘤效应,为肿瘤生物治疗探索新路.     

肿瘤免疫微环境中的NK细胞及免疫治疗

自然杀伤（NK）细胞是一类具有强大抗肿瘤功能的固有淋巴细胞,能够快速识别和杀伤肿瘤细胞,其功能受活化性受体和抑制性受体的多种信号所调控。但是,肿瘤浸润NK细胞的杀伤功能由于免疫抑制性肿瘤微环境而失调,甚至会促进肿瘤细胞的免疫逃逸,导致多种免疫疗法临床治疗的效果不佳。肿瘤细胞上调表达抑制性配体、肿瘤微环境中大量抑炎因子及异常的低氧、低pH等,都诱导肿瘤浸润NK细胞杀伤功能受损。近年来,关于肿瘤微环境与肿瘤浸润NK细胞的研究正处于肿瘤免疫领域的前沿,已经取得了很多临床研究成果。多项研究表明,肿瘤浸润NK细胞通常表现为抑制性受体上调、活化性受体下调和代谢异常等特征,基于此,研究者开发了多种针对性治疗方案,以恢复NK细胞的杀伤能力。本文在阐述NK细胞功能活化和抑制相关机制的基础上,论述了肿瘤浸润NK细胞的特征及其相应的肿瘤免疫治疗方案。     

人类自然杀伤细胞免疫突触的研究进展

NK细胞识别靶细胞时在接触表面形成大量的超分子集落，结构上与神经突触相似，称为NK细胞免疫突触。NK细胞抑制性受体和活化性受体分别与相应的配体结合形成抑制性免疫突触与活化性免疫突触。免疫突触的成熟是一个伴随着大量分子重新组合和隔离分布的动态过程。很多因素可以影响它的形成，其中肌动蛋白聚合抑制剂细胞松弛素C等可以明显抑制早期抑制性突触的形成，活化性突触中脂筏向细胞间接触位点极化能够为大量活化性信号提供一个锚定平台。免疫突触可以促进细胞间的接触、提供细胞间信号传递的平台、参与活化检查节点的形成。进一步对其结构、形成过程、信号整合等进行探讨将为提高NK细胞抗肿瘤和抗病毒治疗效果提供新的策略。     

自然杀伤细胞与肿瘤细胞之间的免疫编辑

自然杀伤细胞(nature killer cell, NK)是机体天然免疫的主要承担者，NK细胞表面表达的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory killer cell immunoglobulinlike receptor，KIR)和活化性受体NKG2D是调节NK细胞杀伤活性的主要受体。NK细胞通过其细胞表面的活化性受体和肿     

异体自然杀伤细胞过继免疫在治疗血液肿瘤中的机制及应用

自然杀伤(NK)细胞是人体天然免疫系统的主要组成部分,其对血液肿瘤细胞的杀伤主要是由其表面抑制性受体和活化性受体所传递的信号共同决定的.近年来,异体半相合NK细胞在造血干细胞移植和过继性细胞免疫治疗方面均显示出对人类血液系统肿瘤的积极治疗作用,为以NK细胞为基础的过继免疫治疗的临床应用提供了可能.     

异体NK细胞过继免疫在治疗血液肿瘤中的机制及应用

 自然杀伤（NK）细胞是人体天然免疫系统的主要组成部分,其对血液肿瘤细胞的杀伤主要是由其表面抑制性受体和活化性受体所传递的信号共同决定。近年来,异体半相合NK细胞在造血干细胞移植和过继性细胞免疫治疗方面均显示出对人类血液系统肿瘤的积极治疗作用,为以NK细胞为基础的过继免疫治疗的临床应用提供了可能。     

凝集素样受体KLRE1抑制NK细胞的细胞毒性

NK细胞识别、杀伤靶细胞有赖于活化或抑制性受体与多种配体间的相互作用.这些受体可分为两类不同的蛋白家族:KLRs和带有免疫球蛋白样结构域的受体,均有抑制性和活化性成员.抑制性受体胞浆尾部含有ITIMs;活化性受体缺乏ITIMs,但在跨膜区有一个正电氨基酸并与含有ITAM的接头分子相关联.SHP-1与磷酸化的ITIMs关联介导抑制NK细胞的细胞毒性.本研究报道了克隆的一个新的NK细胞受体KLRE1.初步的实验结果提示KLRE1能抑制NK细胞的细胞毒性.     

增强NK细胞肿瘤杀伤活性的研究进展

调节其他免疫细胞的功能,是机体天然免疫的主要承担者,也是获得性免疫的核心调节细胞,故NK细胞在抗肿瘤免疫中的地位越来越受到重视,随之增强NK细胞肿瘤杀伤活性的研究也逐步深入.可以通过细胞因子、单抗及多功能抗体介导NK细胞活化,通过调节抑制性信号和活化性信号传递加强NK细胞活性,通过免疫药物刺激及基因修饰提高NK细胞功能等多种途径增强NK细胞的肿瘤杀伤作用.结论:研究增强NK细胞杀伤活性的方法,将促进NK细胞在肿瘤免疫治疗中的应用.     

自然杀伤细胞在白血病治疗中的作用

 人类自然杀伤（NK）细胞具有天然的和淋巴细胞因子活化的细胞毒活性,其功能受其表达的抑制性受体和活化性受体转导的负性和活化信号之间平衡机制调节。MHC分子能够保护正常细胞免受NK细胞介导的溶解, NK细胞能够参与抗白血病免疫反应,利用其来加强移植物抗白血病（GVL）效应,降低移植相关死亡率,能够使更多的白血病患者得以生存。     

NK细胞识别的新模式——压力诱导模式

T、B细胞通过TCR和BCR介导抗原识别模式,巨噬细胞通过模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)介导病原体相关的分子模式(pathogen associated molecular pattern, PAMP)或凋亡细胞相关的分子模式(apoptotic cell associated molecular pattern, ACAMP),比TCR,BCR和PRR更为复杂的是NK细胞的受体,迄今为止,已发现有数十种之多,分属抑制性受体和活化性受体两大类.各大类又包括数个家族,体现了NK细胞受体的多样性,介导了NK细胞的不同识别模式,分别传递不同的活化信号和抑制信号[1-2].     

γ干扰素对人NK细胞识别功能的负调节作用

目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)对人NK细胞识别功能的负调节作用。方法 用MTT法测定人NK细胞系(NK92,NKL)的细胞毒活性及细胞增殖能力;用RT-PCR检测NK细胞受体(NKG2D、NKG2A／B、KIR2DLI、KIR2DSI)及NKG2D的识别配体主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关分子A(MICA)的表达。结果 NK细胞系(NK92、NKL)对MICA表达阳性的肿瘤细胞杀伤活性明显高于对MICA表达阴性者;IFN-γ 1000U／ml以上可明显抑制NK细胞对MICA表达阳性肿瘤细胞的细胞毒活性,并轻度抑制NK细胞的增殖,而对MICA表达阴性肿瘤细胞的杀伤活性无明显抑制作用;IFN-γ可抑制NK细胞系活化受体NKG2D的表达,增强抑制性受体NKG2A／B和KIR2DLI的表达。结论 IFN-γ可能通过下调NK细胞活化受体的表达,上调抑制性受体的表达,使NK识别的信号平衡向抑制性方向倾斜,从而对NK细胞功能发挥负调节作用,这种作用可能是NK细胞自我调节功能的表现。     

肺癌患者外周血NKG2A和NKG2D表达及其临床意义的研究

目的:通过研究肺癌患者外周血中自然杀伤细胞(NK)表面抑制性受体NKG2A和活化性受体NKG2D表达,分析探讨NKG2A与NKG2D表达失衡与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测101例肺癌患者(肺癌组)和81例健康对照者(对照组)外周血中NK细胞含量及其表面受体NKG2A、NKG2D表达情况,分析...     

肾癌浸润NK细胞活化性受体表达及临床意义

目的:研究肾癌及癌旁组织中NK细胞表面活化性受体NKp44、NKp46表达情况,探讨活化性受体在肾癌发生发展中的临床意义.方法:流式细胞术及免疫组织化学法检测28例肾癌及癌旁组织中NK细胞含量及活化性受体NKp44、NKp46的表达,并结合临床相关因素进行统计学分析.结果:肾癌组织浸润的NK细胞含量明显高于癌旁组织(P＜0.05).肾癌与癌旁组织中活化性受体NKp44表达差异性明显.肾癌病理分级越高NK细胞含量越低,活化性受体NKp44表达也降低.而肾癌与癌旁组织中活化性受体NKp46的表达无统计学意义.结论:肾癌组织中有大量NK细胞浸润,NK细胞活化性受体NKp44表达很低,且NK细胞的含量及活化性受体NKp44的表达是与病理分级相关的.肾癌的发病可能与NK细胞减低及活化性受体NKp44表达降低有关.     

NK细胞在肿瘤过继性免疫治疗中的临床应用与研究进展

目的 自然杀伤(natural killer,NK)细胞是固有免疫细胞,是机体抗肿瘤的第一道防线.NK细胞无需预先致敏即可杀伤肿瘤细胞,具有良好的安全性和抗肿瘤作用.NK细胞作为抗肿瘤过继免疫细胞治疗制剂在世界范围内广泛应用.本文总结NK细胞在肿瘤过继性免疫治疗中的临床应用与研究进展.方法 应用PubMed、Elsevier、Springer、Wiley Online Library和CNKI文献检索系统,以“NK细胞,NK细胞与肿瘤生物治疗,NK细胞与肿瘤过继性免疫治疗”为关键词,检索1964-06-2015-12的有关文献.纳入标准:1)与NK细胞生物学相关的文献;2)与NK细胞体外扩增相关的文献;3)与NK细胞过继治疗血液性肿瘤及实体瘤的Ⅰ期及Ⅱ期临床研究相关的文献;4)与未来NK细胞临床应用研究方向相关的文献.根据纳入标准分析文献81篇.结果 NK细胞对肿瘤的杀伤活性主要取决于细胞表面活化性受体和抑制性受体间的动态平衡.目前,广泛认为基于NK细胞的过继性免疫治疗是具有良好潜力的肿瘤治疗方案.能否在GMP水平体外激活、扩增获得大量的NK细胞对肿瘤的过继治疗至关重要.用于体外扩增的NK细胞的来源包括外周血、脐带血以及干细胞.用于刺激NK细胞扩增的方法也不尽相同,包括可溶性细胞因子、抗体以及其他分子等.目前,自体或同种异体NK细过继疗法在血液或实体肿瘤治疗中广泛应用,但国外更倾向于应用同种异体NK细胞过继治疗.结论 NK细胞在肿瘤的过继性免疫治疗中具有重要临床意义和应用潜力,同时也面临诸多技术难题有待突破.     

乳腺癌患者外周血NKG2A、NKG2D检测的临床意义

背景与目的:机体自身免疫功能与肿瘤的发生、发展有密切的关系.自然杀伤(natural killer,NK)细胞在天然免疫和获得性免疫中均发挥重要作用.目前已发现多种NK细胞表面受体,根据功能可分为抑制性受体和活化性受体二大类.抑制性受体NKG2A和活化性受体NKG2D对NK细胞的杀瘤功能发挥着相反的调节作用,在发生肿瘤的情况下,二者是如何表达以及与肿瘤免疫逃逸的关系尚不明确.本研究旨在探讨乳腺癌与乳腺良性疾病患者外周血NK细胞表面受体NKG2A与NKG2D的平衡状态,分析宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系.方法:应用流式细胞术对37例乳腺癌患者和30例乳腺良性疾病患者血样标本行NKG2A、NKG2D检测,同时检测患者细胞免疫功能.结果:乳腺癌患者与乳腺良性疾病患者相比,NKG2A明显上调,NKG2D表达降低;CD3+、CD4+、CD56+细胞百分比更低(p＜0.05).在乳腺癌患者中,细胞免疫功能低下组及腋淋巴结转移数≥4枚组中,NKG2D表达更低(P＜0.05).Ⅲ+Ⅳ期及C-erbB2高表达乳腺癌患者,NKG2A表达更高(P＜0.05).NKG2A、NKG2D表达率在乳腺癌不同病理类型及组织学分级之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:外周血NKG2A、NKG2D的测定对于了解肿瘤患者机体免疫功能的状态、估计病情及判断预后具有一定的临床价值.     

自然杀伤细胞受体研究新进展

自然杀伤(NK)细胞受体是NK细胞功能发挥的分子基础,NK细胞抑制性和激活性受体的分子结构及其特异性配体是目前研究的热点。现综述该领域的研究进展。     

自然杀伤细胞受体研究新进展

自然杀伤（NK）细胞受体是NK细胞功能发挥的分子基础,NK细胞抑制性和激活性受体的分子结构及其特异性配体是目前研究的热点。现综述该领域的研究进展。     

杀伤细胞免疫环蛋白样受体与肿瘤免疫治疗

杀伤细胞的免疫环蛋白样受体（Killer cell immunoglobulin-like receptor, KIR）基因定位于人类19号染色体上，编码激活性受体和抑制性受体，表达于NK细胞和部分T细胞亚群表面，其有重要的生物学意义。近年来关于杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）的研究，为异基因造血干细胞移植等肿瘤免疫治疗模式提供了新的理论基础和研究方向。全文对杀伤细胞免疫球蛋白样受体在血液肿瘤及实体瘤免疫治疗方面的进展作一综述。     

基于NK细胞的肿瘤免疫治疗研究进展

NK细胞发育分化研究取得较大进展,除骨髓、外周血和脾脏外,胸腺、肝脏、淋巴结等器官中NK细胞前体细胞(NK precursors,NKPs)的分化及其迁移特性引起极大关注.人类CD56brightNK细胞易于在次级淋巴组织及非淋巴组织中聚集,而CD56dimNK细胞则能够趋化招募至外周炎症部位.NK细胞活化受体包括细胞因子受体、膜整合素分子、天然细胞毒受体、免疫球蛋白样杀伤受体,以及新发现的许多识别分子.在肿瘤的发生发展过程中,NK细胞既可以通过"内识别"方式直接识别恶性转化的癌细胞并被活化,也可以在辅助细胞(单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞)的作用下被活化.DC细胞可以触发NK细胞的活化,其中IL-15R-IL-15的反式信号转导极其重要.NK细胞的肿瘤生物治疗取得了较大进展, 其中基于NK细胞天然免疫识别的肿瘤生物治疗有很多新的途径.     

K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果

目的：评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。 方法：采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取）联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果：对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至（93±3）%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从（33±5.6）%上升至（65±12）%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从（86±4）%提高至（96±2）%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至（90.0±8.0）%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。 结论： K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。