苯那普利对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对糖尿病肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法 单侧肾切除大鼠腹腔注射STZ(65mg/kg)诱发糖尿病模型，每日灌胃给予ACEI苯那普利(10mg/kg)，共12周。采用原位末端标记法检到肾脏细胞凋亡情况，流式细胞术和免疫组化检到肾皮质Fas和Fas-L表达。结果 糖尿病组较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多，Fas和Fas-L的表达亦显著增强，苯那普利治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少，Fas和Fas-L的表达减弱。结论 苯那普利可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡，从而发挥肾脏保护作用。     

血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂（AT1Ra)对糖尿病肾病肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas和Fas-L表达的影响。方法 大鼠腹腔注射STZ诱发糖尿病模型。每日灌胃给予AT1Ra缬沙坦（40mg/kg)，共12周。采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况。流式细胞术检测肾皮质Fas和Fas-L表达。结果 与对照组相比，糖尿病组肾小球，肾小管凋亡细胞数明显增多，Fas和Fas-L的表达增强，缬沙坦治疗组较糖尿病组凋亡，细胞数减少，Fas和Fas-L的表达减弱。结论 缬沙坦可能是通过影响凋亡相关蛋白蛋白Fas和Fas-L的表达从而抑制肾脏细胞过度凋亡来发挥肾脏保护作用的。     

培哚普利对实验性糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨培哚普利对实验性糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组和培哚普利治疗组,另以正常大鼠作为对照组,共观察24周。于24周末检测各组大鼠血糖,血压,24 h尿白蛋白定量,肾重/体重。TUNEL检测小管细胞凋亡。免疫组织化学检测肾组织葡萄糖调节蛋白（glucose-reg-ulated protein-78,GRP78）蛋白的表达。结果糖尿病组和治疗组血糖明显高于正常组,但治疗组和糖尿病组差异无显著性。糖尿病模型组尿白蛋白水平均显著高于正常组,培哚普利治疗组尿白蛋白水平较模型组降低。糖尿病模型大鼠肾脏内TUNEL阳性细胞数、内质网应激相关蛋白GRP78的表达水平均较正常组明显升高。培哚普利能明显减少糖尿病大鼠肾脏内TUNEL阳性细胞数并降低内质网应激相关蛋白的表达。结论血管紧张素转换酶抑制剂可以减少实验性糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡,可能与其减少内质网应激的激活有关。     

血小板衍化生长因子及其受体在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及苯那普利的调节作用

目的 探讨PDGF-B及其β受体在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及苯那普利对它的调节作用。方法 Wistar大鼠随机分为3组:单侧肾切除组、糖尿病组和糖尿病苯那普利治疗组,观察4周后血糖、血清胰岛素、肌酐水平和体重、肾重变化,并测定了血浆和肾皮、髓质ACE活性,应用Northern杂交检测肾皮质PDGF-BmRNA水平,Western杂交检测肾皮质 PDGF-β受体蛋白的表达。结果 苯那普利能明显改善糖尿病大鼠的异常糖代谢并降低血肌酐水平,延缓体重下降,抑制肾重的增加,抑制肾皮质ACE活性达88.8％;Northern杂交表明糖尿病大鼠肾皮质PDGF-BmRNA表达上调达对照组4倍,苯那普利对其不产生明显影响,Western杂交表明糖尿病大鼠的肾皮质PDGF-β受体蛋白明显增高为对照组2.5倍,苯那普利可下调其表达。结论 苯那普利虽对糖尿病大鼠肾皮质PDGF-BmRNA不产生明显影响,但可显著下调其β受体蛋白的表达。     

卡托普利可抑制去窦弓神经大鼠引起的心肌细胞凋亡

目的 研究卡托普利对去窦弓神(SAD)大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响。方法 在去窦弓神经大鼠饲料中给予卡托普利100mg／kg／d，术后16周采用末端标记TUNEL法检测细胞凋亡；采用ABC法检测Bcl-2、Bax、Fas和Fas-L蛋白的表达，并用计算机图像分析教术进行观察和比较。结果 与SAD大鼠相比，卡托普利治疗组大鼠的心肌细胞凋亡明显减少；Bcl-2蛋白表达增加，Bax、Fas、Fas-L蛋白表达减少，Bcl-2／Bax比率增高。结论 卡托普利可减少SAD大鼠的心肌细胞凋亡，并可调节细胞凋亡相关基因的蛋白表达。     

氯沙坦抑制内质网特有凋亡途径在糖尿病大鼠肾脏中的保护作用

目的探讨血管紧张素II受体1拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及内质网应激标志蛋白的影响。方法单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病,每日灌胃给予氯沙坦(40mg·kg-1)共8周。应用免疫组织化学检测细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、GRP78和Caspase-12的表达与定位,TUNEL染色检测细胞凋亡部位,流式细胞术检测细胞凋亡程度,并对GRP78、Caspase-12表达水平进行半定量分析,同时观察尿蛋白、BUN、尿肌酐等反映肾功能的相关指标。结果建模8周,糖尿病组大鼠较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,GRP78、Caspase-12表达增强。氯沙坦治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少,GRP78、Caspase-12表达减弱,但尚未降至正常水平。3组间PCNA阳性细胞数无差异。结论氯沙坦部分通过影响内质网应激特有凋亡途径减少肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质TGFβ_1及其受体表达的影响

目的探讨苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质ＴＧＦβ１及其受体表达的影响。方法大鼠随机分单侧肾切除组（Ｃ组）;糖尿病组（Ｄ组）及糖尿病苯那普利治疗组（１０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１,灌胃,ＤＢ组）,观察４ｗｋ后各组血糖、血胰岛素、血肌酐水平及体重、肾重和肾组织蛋白含量的变化,采用荧光分光光度法测定血浆及肾皮质、髓质ＡＣＥ活性。应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测各组肾皮质ＴＧＦβ１,１α（ＩＶ）前胶原及ＦＮｍＲＮＡ表达;Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测各组肾皮质ＴＧＦβ１及细胞膜ＴβＲⅠ蛋白表达。结果苯那普利治疗４ｗｋ后能够明显缓解糖尿病大鼠高血糖、低胰岛素血症、血肌酐水平上升及体重下降、肾脏肥大。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交表明糖尿病大鼠肾皮质ＴＧＦβ１、１α（ＩＶ）前胶原及ＦＮｍＲＮＡ表达分别３．９４、４．２５及１．５０倍,Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交表明肾皮质ＴＧＦβ１及细胞膜ＴβＲⅠ蛋白表达分别上调３．１０、１．００倍,苯那普利治疗４ｗｋ后对它们均有明显抑制作用。另外,尽管糖尿病大鼠血浆ＡＣＥ活性明显下降,肾皮质ＡＣＥ活性却明显增加,苯那普利治疗后对血浆及肾皮质ＡＣＥ活性抑制分别达９２．００％和８８．７０％。结论苯那普利可抑制高血糖状态下肾皮质ＴＧ?     

南瓜多糖对糖尿病大鼠胰岛Fas、Fas-L、Bcl-2及Bax表达的影响

目的观察南瓜多糖(PP)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠胰腺组织中Fas、Fas-L、Bcl-2及Bax表达的影响。方法建立链脲佐菌素性糖尿病模型,PP(150、300、600mg.kg-1)灌胃进行治疗。3wk后检测大鼠空腹血糖值;采用免疫组化的方法探讨PP对链脲佐菌素性糖尿病大鼠Fas和Fas-L蛋白表达的影响;采用RT-PCR的方法观察PP对实验性糖尿病大鼠胰岛凋亡调控基因Bax和Bcl-2表达的影响。结果PP(300、600mg.kg-1)能明显降低STZ诱导的糖尿病大鼠的空腹血糖值;PP(150、300、600mg.kg-1)治疗后大鼠胰腺组织中Fas/Fas-L蛋白的表达率明显低于STZ模型组;PP(150、300、600mg.kg-1)给药3wk后,大鼠Bcl-2基因的表达明显增加,PP(300、600mg.kg-1)治疗后大鼠Bax基因的表达明显下降,Bcl-2与Bax的比值明显增加。结论PP对实验性糖尿病大鼠有降血糖作用,其作用与降低大鼠胰腺组织中Fas、Fas-L蛋白的表达、调节Bcl-2与Bax基因的表达有关。     

氨基胍对糖尿病大鼠非酶糖化和细胞凋亡的影响

目的观察氨基胍对2型糖尿病大鼠肾脏晚期糖基化终末产物（AGEs）和细胞凋亡的影响。方法利用高糖高脂饮食及注射小剂量的链脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组、氨基胍组,并设对照组,分别于16周观察大鼠肾脏形态结构、肾脏凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达和肾皮质AGEs含量。结果电镜下见糖尿病组肾脏小管上皮细胞呈典型的凋亡改变,氨基胍组细胞凋亡明显减轻。免疫组化显示,糖尿病组肾小管上皮细胞中Bcl-2、Bax表达较对照组增多,氨基胍组Bcl-2蛋白表达较糖尿病组增多,Bax蛋白表达减少。氨基胍组大鼠肾皮质AGEs含量较糖尿病组明显减少。结论氨基胍可通过降低糖尿病肾皮质AGEs含量调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,抑制肾脏细胞凋亡。     

去窦弓神经大鼠心肌细胞凋亡及其相关基因蛋白表达的时程

目的:研究去窦弓神经（SAD）大鼠心肌细胞凋亡及其相关基因蛋白表达的时程。方法:10周龄SD大鼠行SAD术或假手术（Sham）,术后4、8、16和32周对SAD及相应Sham组大鼠的心肌连续切片,采用末端标记TUNEL法检测细胞凋亡;采用ABC法检测Bcl-2、Bax、Fas和Fas-L蛋白的表达,并用计算机图像分析技术进行观察和比较。结果:与Sham组相比,SAD大鼠心肌细胞凋亡率增加,Bcl-2表达减少,Bax、Fas、Fas-L表达增高,Bcl-2/Bax比率降低。结论:心肌细胞凋亡及其相关基因表达失调可能参与SAD大鼠的心肌重构,且具有一定的时间窗。     

贝那普利和螺内酯联合治疗糖尿病肾病的临床研究

目的:比较血管紧张素转换酶抑制剂(ACEIs)贝那普利和醛固酮受体阻滞剂螺内酯单独及联合治疗糖尿病肾病的疗效。方法:40例糖尿病肾病病人随机分为两组:联合治疗组20例,用贝那普利10 mg/d联合螺内酯20 mg/d治疗;贝那普利组20例,单用贝那普利10 mg/d。比较两组治疗前、治疗后1个月、治疗后3个月尿蛋白、血清肌酐、血钾变化。结果:治疗1个月后两组病人尿蛋白水平均明显下降,3个月后联合治疗组尿蛋白水平进一步下降,贝那普利组尿蛋白水平回升。两组病人的血清肌酐、血钾治疗前后均无明显变化。结论:糖尿病肾病病人长期应用ACEIs药物可出现尿蛋白定量水平反跳,该现象可能与醛固酮逃逸有关,联合服用醛固酮受体拮抗剂可改善该现象。     

异丙肾上腺素对大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的　研究异丙肾上腺素(isoprenaline, Iso)诱导大鼠急性心肌缺血与心肌细胞凋亡相关基因表达的关系。方法　sc大剂量Iso建立大鼠急性心肌缺血模型。RT-PCR法检测凋亡相关基因Fas,CPP32,Bcl-2和Bax在心肌的表达。并用同样方法,观察苦豆碱(aloperine, Alo, 20 mg.kg^-1)和普萘洛尔(propranolol, Prop, 2 mg.kg^-1)对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响。结果　急性心肌缺血模型大鼠心肌的Fas,CPP32和Bcl-2基因表达显著增加,Bax变化不明显;Alo和Prop能降低缺血心肌中Fas和CPP32基因的表达,增加Bcl-2基因的表达,且Prop对Bax表达有下调作用。结论　sc大剂量Iso可诱导大鼠心肌细胞凋亡相关基因异常表达;Alo和Prop对该模型大鼠心肌相应基因的异常表达亦有影响。     

氯沙坦抑制转录因子GADDl53/CHOP的激活在糖尿病大鼠肾脏中的保护作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及转录因子GADDl53/CHOP表达的影响。方法单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病,每日灌胃给予氯沙坦(40 mg.kg-1)共8周。应用免疫组织化学检测细胞增殖核抗原(Proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)、GRP78和转录因子GADDl53/CHOP的表达与定位,TUNEL染色检测细胞凋亡部位,流式细胞术检测细胞凋亡程度,并对GRP78、GADDl53/CHOP表达水平进行半定量分析,同时观察尿蛋白、BUN、Scr、Ucr等反应肾功能的相关指标。结果建模8周,糖尿病组大鼠较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,GRP78、GADDl53/CHOP表达增强。氯沙坦治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少,GRP78表达减弱,明显抑制GADDl53/CHOP的表达。3组间PCNA阳性细胞数无差异。结论氯沙坦部分通过影响内质网应激中GADDl53/CHOP凋亡途径减少肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

牛膝多糖对糖尿病大鼠肾组织细胞凋亡的影响

目的探讨牛膝多糖(ABPS)对糖尿病大鼠肾组织保护作用及其作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、ABPS300、200、100mg·kg-1·d-1组。8周后,苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理变化,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察Bcl-2、Fas基因的表达。结果与模型组比较,ABPS组肾组织形态明显改善,肾组织细胞凋亡明显减少,Bcl-2表达上调,Fas表达降低。结论 ABPS对糖尿病大鼠肾组织有明显保护作用,其机制可能与抑制肾组织细胞凋亡及上调Bcl-2,降低Fas基因表达有关。     

β淀粉样肽前体蛋白N端肽段对糖尿病鼠脑凋亡相关改变的作用

目的　研究糖尿病小鼠海马内凋亡相关蛋白表达的变化及神经元是否凋亡。同时,观察β淀粉样肽前体蛋白N端 17肽(APP17肽)的作用。方法　用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型,并用APP17肽治疗。4wk后 ,行鼠脑冰冻切片,做Fas、Fas L、NF κB、早老素 1 (PS 1 )、α 共核蛋白 (α Syn)免疫组织化学染色,并检测神经元是否凋亡。结果　正常小鼠海马内有少量的Fas、Fas L、PS 1及α Syn阳性染色神经元,但糖尿病小鼠海马内Fas、Fas L、PS 1及α Syn阳性染色神经元数目比正常小鼠明显增加。正常小鼠海马表达NF κB的阳性神经元数目多,糖尿病小鼠海马内NF κB的阳性染色神经元数目比正常小鼠明显减少。用APP17肽保护后糖尿病小鼠上述各种蛋白质的表达恢复到接近正常小鼠的水平。在 3组小鼠海马切片中均未发现凋亡神经元。结论　糖尿病小鼠海马神经元发生了凋亡相关改变,但未发生明显凋亡现象。APP17肽可改善糖尿病小鼠海马内凋亡相关蛋白的表达,使神经元处于正常状态。     

鲨肝活性肽对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨鲨肝活性肽(sHSS)对对乙酰氨基酚(AAP)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法用AAP(200 mg·kg^-1,ip)诱导小鼠急性肝损伤,用改良赖氏法测血清ALT和AST,通过光镜和电镜观察肝细胞显微和亚显微结构的变化,用流式细胞仪分析肝细胞凋亡,同时用RT-PCR方法分析Fas mRNA表达水平。结果sHSS 3.0和1.5 mg·kg^-1可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST的水平;改善模型鼠肝组织细胞坏死及炎症反应;高剂量sHSS(3 mg·kg^-1)对肝线粒体具有保护作用,下调Fas mRNA的表达水平,并具有抗凋亡作用。结论sHSS对AAP诱导的肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与保护肝线粒体、抑制Fas基因表达及肝细胞凋亡有关。