高效液相色谱法测定人血清和尿中盐酸青藤碱浓度及药代动力学研究

用RP-HPLC法,以三唑仑为内标,反相C₁₈为分析柱,乙腈—0.01mol·L^-1磷酸二氢钠—四甲基乙二胺(46∶54∶0.22v/v)为流动相,磷酸调至pH6.9,检测波长263nm,测定血清和尿中盐酸青藤碱浓度,线性范围分别为6～480ng·mL^-1和0.06～3μg·mL^-1,平均回收率75.88%和91.35%,日内日间误差小于5%,最低检测浓度血清4ng·mL^-1,尿40ng·mL^-1。8名健康男性志愿者单次口服盐酸青藤碱片80mg,测定血清及尿浓度,该药符合二室开放模型,体内消除符合一级动力学消除过程,主要药代动力学参数:T_1/2α0.791±0.491h,T_1/2β9.397±2.425h,T_{max 1.040±0.274h,Cmax246.604±71.165ng·mL^-1,AUC 2651.158±1039.050ng·h·mL^-1,CL 0.033±0.01ng·mL^-1。}     

LC-MS/MS法测定浸润麻醉豚鼠血浆中罗哌卡因浓度

目的建立测定豚鼠血浆中罗哌卡因浓度的液相三重四极杆串联质谱(LC-MS/MS)法,用以测定豚鼠局部浸润麻醉皮内注射后血浆中罗哌卡因浓度,并考察罗哌卡因药动学。方法血浆样品用蛋白沉淀法进行预处理后HPLC-MS/MS法测定罗哌卡因含量。色谱系统:ZORBAX SB-C₁₈(3.0 mm×150 mm,3.5μm),甲醇-水(80∶20,内含5mmol·L^-1甲酸铵)为流动相,流速0.4 mL·min^-1,柱温25℃。通过电喷雾离子源(ESI)三重四极杆串联质谱,在正离子模式下以多重反应选择离子检测(MRM)。色谱分析时间为4 min。药动学研究中豚鼠皮内浸润麻醉给药0.5%罗哌卡因注射液,按时测定血浆药物浓度。采用TOPFIT软件计算药动学参数。结果罗哌卡因在6.58～6 580 ng·mL^-1内线性良好(r=0.999 1),方法的最低检测浓度为1 ng·mL^-1,方法回收率在95.6%～96.6%之间,日内、日间精密度(RSD)均小于6%。豚鼠皮内注射0.5%罗哌卡因后,主要药动学参数:T_1/2α(0.13±0.01)h,T_1/2β(1.20±0.08)h,C_max(4 960±13)ng·mL^-1,AUC_0→9(11.3±1.6)mg.h·L^-1,AUC_0→∞(13.1±2.3)mg.h·L^-1,MRT(1.74±0.13)h。结论建立的LC-MS/MS法快速、准确、灵敏,可用于罗哌卡因豚鼠浸润麻醉的药动学研究。     

HPLC法测定布洛伪麻缓释片的释放量

摘 要 目的:建立高效液相色谱法测定布洛伪麻缓释片释放量的方法。方法: 色谱柱为迪马 C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-三乙胺-0.04 mol·L^-1 磷酸二氢钠溶液 (60∶0.02∶40),流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为215 nm,柱温为35℃,进样量为20 μl。结果:布洛芬的线性范围为40～2 000 μg·mL^-1（r＝1.000 0）,平均加样回收率为99.2％,RSD＝0.8％(n=9),最低定量浓度为0.04μg· mL^-1;盐酸伪麻黄碱的线性范围为6～300 μg·mL^-1（r＝1.000 0）,平均加样回收率为98.5％,RSD＝0.6％(n=9),最低定量浓度为0.06μg· mL^-1。结论: 该方法简便快速、准确灵敏,可用于布洛伪麻缓释片释放量的测定。     

固相萃取高效液相色谱法测定人血浆中依那普利浓度

建立了用固相萃取高效液相色谱法测定依那普利血药浓度的方法。色谱柱为200mm×4.6mm不锈钢柱,内填 Spherisorb C₈(5μm),流动相为乙醇—水—10% H₃PO₄—三乙胺(30∶70∶1.5∶0.1);流速1.0ml·min^-1,紫外检测波长215nm。血样用固相小柱预处理。此法线性范围25～150ng·mL^-1。最小检测浓度1.5ng·mL^-1,日内及日间误差<8.8%,平均回收率>91.6%。用此法测定了8例健康志愿者po国产依那普利片后的血药浓度并计算了药代动力学参数。     

大鼠肝组织中普伐他汀的高效液相色谱法测定

目的　建立反相色谱法测定普伐他汀在大鼠肝组织中的含量。方法　肝组织样品加普伐他汀和内标(丙炎松),用Bond Elut C₁₈小柱进行固相提取,然后用色谱方法分析。采用C₁₈反相色谱柱,流动相为0.035mol·L^-1磷酸氢二钠缓冲液(pH3.0)-乙腈(155∶42)。结果　普伐他汀的线性范围为0.05-10.00μg·g^-1肝,回归方程为Y=0.1843X-4.238×10^-3(γ=0.9934);用普伐他汀标准液试验,最低检测限达13ng·mL^-1,定量限为50ng·g-1肝(RSD<20%);不同浓度固相提取回收率平均为80.8%;RSD为4.3%-15%。用此法测定了Lewis大鼠(ig20mg·kg^-1)肝组织中普伐他汀的含量,并绘制了药时曲线。结论　方法灵敏,可用于普法他汀的组织分布和药动学研究。     

全血及血清中羟氯喹HPLC测定方法的建立及其应用

目的：建立高效液相色谱法测定人全血及血清中羟氯喹浓度。方法：200 μL人全血（血清）样品经400 μL的10%甲酸-乙腈（1∶9）沉淀后,取上清液进行色谱分析。采用Zorbax SB-C₁₈为色谱柱,以乙腈-0.2 mol·L^-1磷酸二氢钾（15∶85,v/v,磷酸调pH=3.0）为流动相,检测波长：254 nm,流速：0.8 mL·min^-1,进样量：30 μL。结果：对46例长期（>1年）服用硫酸羟氯喹（200 mg·d^-1）的系统性红斑狼疮患者的血药谷浓度进行检测分析。羟氯喹在10~3000 ng·mL^-1线性关系良好,批内、批间精密度RSD均小于8.6%,全血及血清样品的提取回收率分别为74.5%~78.6%和80.7%~85.4%。患者平均全血/血清谷浓度分别为（707.6±398.4） ng·mL^-1、（282.2±153.8） ng·mL^-1。结论：本法操作简便,灵敏,准确度高,适用于羟氯喹血药浓度检测及药效学研究。     

LC-MS/MS 法测定人血浆中倍他米松

建立测定人血浆中倍他米松的LC-MS/MS方法。采用Venusil XBP C₈ (200 mm×3.9 mm ID, 5 μm)色谱柱，流动相为甲醇-水(含甲酸铵5 mmol·L^-1)(80∶20)，流速0.4 mL·min^-1；质谱仪离子源为电喷雾离子源(ESI)，正离子模式检测，监测离子为393.3→355.2(倍他米松)和361.3→343.2(泼尼松龙,内标)。血浆样本用乙酸乙酯处理。倍他米松在0.5~80.0 ng·mL^-1线性关系良好(r=0.999 2)， 血浆低、 中、 高3种浓度(1.0， 10.0， 60.0 ng·mL^-1)平均提取回收率为88.24%，定量限为0.5 ng·mL^-1。本方法操作简便、准确、灵敏，适用于复方倍他米松注射液人体药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆和脑脊液中左氟沙星浓度及药代动力学研究

目的旨在测定左氟沙星药代动力学。用RP-HPLC法,以环丙沙星为内标,反相C₁₈为分析柱,10mmol·L^-1磷酸二氢钾—10mmol·L^-1溴化四丁铵—乙腈(45∶45∶10)为流动相,磷酸调至pH3.0,检测波长295nm,测定血浆和脑脊液中左氟沙星浓度,平均回收率分别为74.76%和82.43%,日内日间误差小于5%,最低检测浓度血浆10μg·L^-1,脑脊液6μg·L^-1。10名开颅手术病人单次口服左氟沙星片300mg的血液和脑脊液药代动力学特征均符合开放性一室模型。     

碳糊电极阳极伏安法测定秋水仙碱

在0.05mol·L^-1H₂SO₄介质中,用碳糊电极(石墨粉:液体石蜡油=1.5∶1)阳极扫描伏安法测定秋水仙碱,检测限1×10^-7mol·L^-1,检测线性范围4.0×10^-7～1×10^-3mol·L^-1,氧化时出现两个氧化峰,峰电位分别为1.07V和1.33VvsSCE,峰电位随pH值升高而正移。对原料和片剂进行了测定,均获得满意的结果。     

小鼠血浆中马钱素的高效液相色谱测定法及药代动力学

目的建立测定小鼠血浆中马钱素浓度的高效液相色谱法,并研究马钱素在小鼠体内的药代动力学。方法色谱柱为C18柱,流动相甲醇-水(30∶70),流速为0.8 mL·min^-1,检测波长240 nm;血浆样品用固相萃取法预处理。结果线性范围0.01～5.00 μg·mL^-1。日内RSD<10%,日间RSD<15%,回收率86.0%～91.5%,最低定量浓度为10 ng·mL^-1。ig给药0.5 h后血浆药物浓度达峰值,C_max为6.8 μg·mL^-1,_t1/2α为26.1 min,_t1/2β为29.01 min。结论 该方法灵敏度高,操作方便,适用于马钱素的药代动力学研究;本品口服吸收快消除也快。     

高效液相色谱法测定血浆中文拉法辛浓度及其在治疗药物监测中的应用

目的建立人血中文拉法辛的测定方法,为临床应用和药动学研究提供分析手段。方法采用HPLC紫外检测法,流动相甲醇-水-四甲基乙二胺-冰醋酸(63∶37∶0.44∶0.37,v/v),Agilent Eclipse XDB-C18分离柱,UV检测波长为230nm,以安眠酮为内标,正戊烷提取。结果线性范围20～1 200μg.L-1,平均回收率为99.1%,日内日间RSD在1.1%～4.5%,且常用的其他抗抑郁药及安定类药物不干扰测定。结论本方法简单,分析速度快,灵敏度高,适用于临床血药浓度测定及药物动力学研究。     

HPLC法测定异福胶囊中异烟肼和利福平的含量

目的：建立异福胶囊中同时测定异烟肼和利福平的含量的方法。方法采用HPLC梯度洗脱法,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱（Agilent ZORBAX Eclipse XDB－C18,4．6mm ×250mm,5μm）,流动相分别为流动相A：甲醇－0．015mol? L －1磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值为6．5）（5∶95）,流动相B：甲醇－0．015mol? L－1磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值为6．5）（62∶38）;流速：1．3mL? min －1,检测波长：262nm。结果以峰面积（y）对进样浓度（x）线性回归,异烟肼回归方程：y＝29773x－7020．2,r＝0．9998,线性范围为11．48～183．6μg? mL －1;利福平回归方程：y＝35061x－67601,r＝0．9997,线性范围为13．78～275．6μg? mL －1,峰面积与浓度呈良好的线性关系。异烟肼和利福平加样回收率分别为：分别为100．1％和99．9％（n＝9）,RSD分别为O．23％和0．26％。结论本方法操作简便、准确、重现性好,可用于同时测定异福胶囊中异烟肼和利福平的含量。     

高效液相色谱法测定人血浆中文拉法新浓度

目的 建立测定人血浆中文拉法新浓度的高效液相色谱法.方法 以DiamonsilTM C18反相柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.03mol·L-1醋酸铵-甲醇(19:81);流速:1.0mL·min-1;柱温:40℃;检测波长:254nm.以乙酸乙酯与二氯甲烷(80∶20)为提取剂.结果 文拉法新的低、中、高(20.0,160.0,640.0ng·mL-1)3种浓度平均相对回收率分别为101.32%,98.63%,99.61%,提取回收率分别为73.57%,76.85%,81.26%;日内、日间差RSD均低于10%(n=5);分析方法的检测限5.0ng·mL-1;线性范围为10.0～800.0ng·mL-1.线性方程:Y=22.75X+2.07,r=0.9989(n=8).结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于文拉法新临床血药浓度监测和药动学研究.     

全自动二维液相色谱法测定腹腔感染患者血清中替加环素的浓度

目的：建立全自动二维色谱法（2D-LC-UV）测定血清中替加环素浓度,用于腹腔感染患者替加环素药物浓度的监测。方法：150μL样品进样,在一维柱ASTON C8（100 mm×4.6 mm,5μL）上初步分离,通过中间柱ASTON SCX（20 mm×4.6 mm,5μm）截取保留并在二维柱Agilent Extent-C18（150 mm×4.6 mm,5μm）上进一步分离,直至最终测定。一维柱流动相为30 mmol·L-1磷酸二氢钠-乙腈-甲醇（40∶30∶30,pH=5.4）;中间柱流动相为纯水;二维柱流动相为30 mmol·L-1磷酸二氢钠-乙腈（75∶25,pH=3.5）,流速均为1.0 mL·min-1,柱温40℃,检测波长244 nm。采集40名腹腔感染患者静滴替加环素（首剂量100 mg,维持剂量50 mg q12h）血清样本,测定峰浓度、中浓度、谷浓度,并估算AUC值。结果：本色谱条件下,替加环素与各杂质分离良好,线性范围0.03~30μg·mL-1,最低检测限10 ng·mL-1。40名腹腔感染患者平均血清峰浓度（1.60±0.77）μg·mL-1,中浓度（0.84±0.36）μg·mL-1,谷浓度（0.57±0.25）μg·mL-1,估算平均AUC值（22.66±9.77）μg·h·mL-1。结论：此法操作简单,准确、精密度好,适用于替加环素浓度-药效研究及临床监测。     

RP-HPLC法测定人血清中舒芬太尼的浓度

目的:建立测定人血清中舒芬太尼浓度的简便方法。方法:血清中舒芬太尼用乙酸乙酯-石油醚(4:1)单步提取后采用反相高效液相色谱法进行测定,其中色谱柱为Symmetry C18,流动相为乙腈-0.02mol.L-1醋酸铵-盐酸(pH4.3)(45:55),检测波长为230nm,柱温为室温,内标为艾司唑仑。结果:舒芬太尼血药浓度在0.025～4.000μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999);日内、日间RSD分别为3.49%～4.51%、4.67%～5.99%,平均回收率为101.92%～107.04%。结论:本方法提取步骤少,方法简单、快速、专一性强、准确,适合人血清中舒芬太尼的浓度监测。     

RP-HPLC法测定人血浆中烟酸的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中烟酸浓度的方法。方法:以咖啡因为内标,血浆样品用10%硫酸锌沉淀后进行分析,色谱柱为DiamonsilTM C18,流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢钾(内含0.01mol·L-1四丁基溴化铵,pH6.5)=15:85,流速为1.0mL·min-1,检测波长为262nm,柱温为40℃。结果:烟酸血药浓度在0.2～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测浓度为0.1μg·mL-1;低、中、高浓度的回收率在93.27%～102.65%之间,日内、日间RSD均<8%。结论:本方法准确、灵敏、重复性好,且不受他汀类药物的干扰,能为烟酸,尤其临床上与他汀类药物联合应用时的血药浓度监测及人体药动学研究提供检测手段。     

高效液相色谱法测定人尿中酮洛酸含量

目的建立以高效液相色谱法测定人尿中酮洛酸浓度的方法。方法色谱柱为Waters Sunfire C18,流动相为0.02mol·L-1磷酸二氢钾溶液-乙腈(70∶30,用磷酸调节pH值至4.5),检测波长为315nm,柱温为35℃,流速为1mL.min-1,进样量为20μL,保留时间为9.1min。结果人尿中酮洛酸浓度在0.1～10.0μg·mL-1范围内线性关系良好,日内和日间RSD<10%,最低定量限为0.1μg·mL-1。结论本法简便、快捷、灵敏,适用于酮洛酸人体药动学研究。     

RP-HPLC法测定氧氟沙星栓中氧氟沙星的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定氧氟沙星栓中氧氟沙星的含量。方法采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05mol.L-1枸橼酸溶液(三乙胺调节pH4.0)(15∶85);检测波长为293nm。结果氧氟沙星质量浓度在20.02～400.3μg.mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.999 7),平均加样回收率为99.3%(n=9),RSD为0.6%。结论该方法简便快速,结果准确,可作为该制剂含量测定的方法。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法采用Hypersil-C18反相色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,水（pH=7.3,内含三乙胺0.15%,磷酸0.05%）-乙腈（46∶54）为流动相;流速为1.0mL.min-1;柱温为30℃;样品经碱化提取分离后用流动相溶解;采用紫外检测,检测波长为223nm。结果本方法测定咪达唑仑血药浓度在50～2000ng.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,咪达唑仑的保留时间为9.60min,其低、中、高（200、500、2000ng.mL-1）浓度的提取回收率分别为92.11%、90.25%、93.27%,方法回收率分别为96.81%、101.97%、101.58%,日内、日间RSD均〈5.0%。咪达唑仑血浆样品预处理室温放置10h及咪达唑仑标准贮备液于4℃下15d稳定。结论本法简单,准确,快速,稳定,灵敏度高,可满足咪达唑仑血药浓度的检测及临床药代动力学研究要求。     

高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度

目的 建立一种快速测定人血清中万古霉素浓度的RP-HPLC法.方法 采用液-液萃取法对血样进行预处理,以去甲万古霉素为内标.色谱柱:依利特C18柱(4.6mm×250mm,5μm).流动相:乙腈-0.05mmo1·mL-1磷酸二氢钾缓冲液(10:94,pH=3.2),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为230 nm.结果 万古霉素血清浓度在5.00～100.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,(n=5,r=0.9996),提取回收率＞95％,日内、日间RSD均小于10％.结论 该方法方便、经济、无杂质干扰,适用于万古霉素血药浓度监测及药动学研究.