人膀胱移行细胞癌各种透明质酸合成酶基因亚型的表达及意义

目的:研究各种透明质酸合成酶亚型(HASs)mRNA在人膀胱移行细胞癌中的表达及其潜在的临床价值.方法:运用半定量RT-PCR方法,对145例不同恶性度的人膀胱移行细胞癌、22例正常人膀胱黏膜组织标本和4种人BTCC细胞系的HAS亚型mRNA的表达情况进行研究.结果:PCR 23循环后,正常膀胱黏膜组织中7例扩增出微弱的HASl mRNA条带(28%,7/25),其余无任何条带扩增出来;所有膀胱移行细胞癌组织标本和细胞系有一种以上的HAS亚型mRNA被扩增出来.不同膀胱癌组织、细胞系表达的HASs mRNA的种类及表达程度各不相同,但随着肿瘤恶性程度的增高,其表达的各种HASs mRNA的种类趋向相同.每个膀胱癌组织、细胞系均有一种HASs mRNA优势表达,但其类型及优势表达程度互不相同.结论:人膀胱移行细胞癌出现了HAS亚型mRNA的异常高表达,可能与肿瘤的发生、发展有密切关系,是BTCC生物治疗潜在的靶点;同时进一步证实了尿透明质酸作为膀胱癌的"标志物"的可靠性.     

环氧化酶-2基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义

目的　探讨环氧化酶 2 (COX 2 )基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用免疫组织化学酶标记链霉素亲和生物素法 (LSAB)对 78例膀胱移行细胞癌组织进行COX 2基因表达的检测。结果　在膀胱癌中COX 2主要呈胞核表达 ,染色阳性率为 5 6.41% ;COX 2表达与膀胱移行细胞癌组织分级、分期和预后呈高度正相关 (P <0 .0 1)。结论　膀胱移行细胞癌中COX 2异常表达与肿瘤分级、分期和疾病进展等生物学行为密切相关。     

膀胱移行细胞癌中Survivin与Ki-67、p53的表达及临床意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌中Survivin、p53及Ki-67的表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系及其临床意义. 方法 用免疫组织化学方法 检测88例膀胱移行细胞癌与10例正常膀胱黏膜组织中Survivin、p53及Ki-67的表达,并用RT-PCR方法 验证其中30例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜组织中Survivin的表达. 结果 免疫组织化学方法 显示在膀胱移行细胞癌中Survivin、p53阳性表达率分别为63.6%(56/88)和45.5%(40/88),正常膀胱黏膜组织中均无表达,差异有统计学意义(P<0.01),且Survivin的表达与膀胱癌的临床分期密切相关(P<0.05).膀胱癌组织中Ki-67增殖指数(PI)为20.4士10.7,正常膀胱黏膜组织中为0.RT-PCR方法 显示在30例膀胱移行细胞癌中Survivin阳性表达率为100%,而正常膀胱黏膜组织中均无表达.结论 Survivin与膀胱癌的恶性程度有关,与p53及Ki-67共同参与了膀胱移行细胞癌的发生、发展及进程.     

膀胱移行细胞癌中PKM2与多聚嘧啶串结合蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨PKM2与多聚嘧啶串结合蛋白(PTB)在膀胱移行细胞癌中的表达及意义.方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定PKM2和PTB mRNA在不同分级膀胱癌组织和膀胱癌细胞株中表达水平的变化;Western blot法测定PKM1、PKM2和PTB蛋白表达水平的变化;免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌组织及正常膀胱组织中PKM1、PKM2与PTB的表达差异.结果 PKM2与PTB的mRNA水平和蛋白水平在膀胱移行细胞癌中明显增高,以高分级癌组织和癌细胞株中最为明显.免疫组织化学显示膀胱移行细胞癌组织PKM2阳性率为84.4%(38/45),高于正常膀胱黏膜组织60.0%(27/45),P＜0.05;PTB在膀胱移行细胞癌组中的阳性率为95.6%(43/45),高于正常膀胱粘膜组织55.6%(25/45),P＜0.05,且PKM2的表达与PTB呈正相关.结论 PKM2与PTB在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,两者的表达呈正相关,提示PTB可能通过对PKM2的选择性剪接而调控膀胱癌细胞的能量代谢.     

Uroplakin Ⅱ基因在膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究

目的　探讨UroplakinⅡ基因 (UPⅡ )在原发和转移性膀胱移行细胞癌 (TCC)中表达与意义。方法　收集 45例膀胱癌 (其中TCC 3 9例 ,非TCC 6例 )患者的癌组织 ,外周静脉血标本 ,提取总RNA ,行逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR ) ,检测UPⅡ基因mRNA的表达。 2 5例其他部位肿瘤及 8例非肿瘤患者组织标本和静脉血作为对照。结果　 45例膀胱肿瘤组织标本中 ,UPⅡ基因在TCC组织中平均阳性率 82 .1% (3 2 /3 9) ,6例非TCC类型膀胱癌 0表达。在T1、T2、T3、T4期膀胱TCC患者组织中UPⅡ基因阳性率分别为 76.5 %、71.4%、90 .9%、10 0 .0 % ;在患者外周血中UPⅡ基因阳性率分别为 5 .9%、14 .2 %、72 .7%、10 0 .0 %。在组织和外周血中低分期 (T1、T2 )与高分期 (T3、T4)TCC表达UPⅡ基因阳性率差异有显著性 (P <0 .0 5 )。其中 4例转移者均阳性 ,接受全身化疗后 3例未再表达。 2 5例其他部位肿瘤组织标本 ,7例肺癌在组织中有 1例阳性表达 ,外周静脉血中 0表达 ;5例肾移行细胞癌在组织中 2例阳性 ,外周静脉血 0表达 ;8例非肿瘤患者组织标本及外周静脉中 0表达。结论　组织及外周血中UPⅡ表达阳性率与肿瘤分期 ,是否转移呈相关性 ;检测TCC患者血中UPⅡ基因可作为监测TCC患者是否转移的指标 ,并可在一定程度上反映化疗疗效 ;     

不同类型膀胱癌组织中环氧化酶-2的表达及意义

目的探时环氧化酶-2（COX-2）在不同类型膀胱癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化染色方法检测52例膀胱移行细胞癌组织（其中T，18例、T2 14例、T3 14例、T4 6例，G1 13例、G2 25例、G3 14例，肿瘤单发37例、多发15例）、20例膀胱腺癌组织、10例膀胱鳞状细胞癌组织及17例正常膀胱黏膜组织中COX-2蛋白表达情况，根据染色阳性细胞所占比例，分为（-）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）4个等级，用等级资料x^2检验进行统计学分析。结果82例肿瘤组织COX-2蛋白表达率（82．9％，68／82）高于正常黏膜（23．5％，4／17）（P〈0．05），不同类型肿瘤COX-2蛋白表达率也有差别，鳞状细胞癌最强（100％，10／10），腺癌次之（90．0％，18／20），移行细胞癌相对较弱（76．9％，40／52）（P〈0．05）；在52例移行细胞癌标夺中，COX-2表达率与肿瘤分级、分期相关（P〈0．05）。结论COX-2在不同类型膀胱癌组织中呈岛表达，在鳞状细胞癌表达最强，可能成为膀胱癌化学预防的一个靶点。     

MT-3和bcl-2在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)中金属硫蛋白亚型(MT-3)的表达及其与bcl-2的相互关系。方法:采用逆转录多聚酶链式反应和原位杂交技术,对11例正常膀胱黏膜和23例BTCC进行MT-3和bcl-2分析。结果:11例正常膀胱黏膜中MT-3和bcl-2mRNA表达阳性率分别为0%(0/11)和18.2%(2/11),23例膀胱癌中MT-3和bcl-2mRNA表达阳性率分别为78.3%(18/23)和39.1%(9/23);在MT-3和bcl-2组正常膀胱组织与BTCC组织表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。MT-3的表达与bcl-2的表达密切相关(P<0.05)。结论:MT-3的表达与BTCC的早期诊断相关,可能成为一种新的肿瘤标志物;MT-3与bcl-2呈负相关,可能通过下调bcl-2的表达参与细胞调亡。     

血管生成素-2在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的　初步探讨血管生成素 2 (Ang 2 )在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与临床分期、病理分级的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 4 3例初治膀胱癌及 2 8例正常膀胱组织中的Ang 2表达水平 ,并与临床资料对照进行统计分析。 结果　正常膀胱组织中未见Ang 2阳性染色 ;4 3例膀胱移行细胞癌中Ang 2阳性染色者 2 1例 ,Ang 2在许多膀胱癌细胞和癌组织中微血管内皮上呈强阳性染色 ,且染色率随膀胱癌病理分级、临床分期的上升而升高 (P <0 .0 5 )。结论　①Ang 2促进肿瘤新生血管形成 ,参与膀胱癌的发生和发展。②Ang 2的表达与膀胱移行细胞癌的临床分期、病理分级正相关。     

膀胱移行细胞癌Id-1表达的实验研究

目的　探讨正常膀胱移行上皮和不同分化程度膀胱移行细胞癌 (BTCC)Id 1的表达 ,分析膀胱癌生物学行为与Id 1的关系。方法　免疫组化ABC法检测 111例BTCC和 12例正常膀胱组织Id 1表达。结果　Id 1正常膀胱组织 3例表达阳性 ,阳性率 2 5 % ;BTCC 97例表达阳性 ,阳性率 87.38% ,膀胱癌G1、G2 、G3 阳性率分别为 88.89%、87.5 %、85 .72 % ,与对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 1) ,病理分级间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;表浅性膀胱癌与浸润性膀胱癌表达阳性率分别为 82 .76 %、92 .4 5 % ,两者比较具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　膀胱移行细胞癌Id 1过表达 ;Id 1与膀胱癌发生和侵袭性有一定关系 ;Id 1可能作为膀胱癌的一种肿瘤标记物为膀胱癌的筛查、早期诊断和术后随访提供帮助。     

ABC免疫电泳对膀胱癌P21蛋白表达的观察

采用ＡＢＣ免疫电泳检测２９例膀胱移行细胞癌组织、６例癌旁粘膜、３例膀胱炎贴膜和３例正常膀胱粘膜的Ｐ２１蛋白表达，结果２５例膀胱癌组织、３例癌旁粘膜、１例正常膀胱粘膜、２例膀胱炎粘膜有Ｐ２１蛋白表达，随肿瘤分级增高，Ｐ２１蛋白条带的光密度积分增加，肿瘤组织Ｐ２１蛋白光密度积分高于癌旁粘膜，癌旁粘膜又高于正常膀胱粘膜。     

Survivin mRNA和VEGF mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Survivin mRNA和VEGF mRNA在膀胱癌不同病理分级、临床分期、初发和复发的膀胱移行细胞癌组织中的表达和临床意义.方法 采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应试验方法检测51例膀胱癌组织及12例膀胱正常组织中Survivin mRNA和VEGF mRNA的表达,将所得数据进行统计学分析.结果 Survivin mRNA和VEGF mRNA在正常膀胱组织、低级别、表浅型和初发膀胱癌组织中的表达明显低于其分别在膀胱癌组织、高级别、浸润型和复发中的表达,两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);Survivin mRNA和VEGFmRNA两者之间呈正相关(r=0.889,P＜0.05).结论 Survivin mRNA和VEGF mRNA的高表达可能在膀胱癌的发生发展中起重要作用,两者可作为判断膀胱癌生物学行为的重要指标,联合检测Survivin mRNA和VEGF mRNA的表达水平有助于膀胱癌患者病情判断和预后评估.     

人膀胱移行细胞癌T24细胞中CK20mRNA表达检测方法的建立

目的建立巢式RT—PCR方法检测人膀胱移行细胞癌T24细胞中CK20。RNA表达进行分析的实验方法。方法培养人膀胱移行细胞癌T24细胞,利用普通RT—PCR及巢式RT—PCR方法分别检测其CK20mRNA的表达。结果1．5％琼脂糖凝胶电泳发现普通RT—PCR及巢式RT—PCR结果均出现与预期结果一致的阳性条带。结论巢式RT—PCR方法检测人膀胱移行细胞癌T24细胞中有CK20mRNA的表达。为进一步利用巢式RT—PCR方法研究临床膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞及肿瘤组织中CK20mRNA的表达、提高检测敏感性及可靠性打下基础。为膀胱癌早期诊断和术后监测提供一种新的有效手段。     

EphA2在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨EphA2在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义。方珐50例膀胱病理切片标本分为正常对照组、膀胱移行细胞癌Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级4组;25例新鲜组织标本分为正常组织、Ta～T1、T2～T3、T4期4组;并培养具有不同侵袭力的两种膀胱癌细胞株（BIU87和T24）。采用免疫组化和荧光实时定量PCR方法检测组织标本和细胞株EphA2在蛋白及mRNA水平的表达。结果EphA2在膀胱移行细胞癌各组表达与对照组相比均有显著差异。EphA2mRNA在正常组织细胞、T24和BIU87细胞中的相对表达量两两比较均无显著性差异（P〉0．05）。EphA2mRNA在膀胱组织中除T2～T3期与其他各分期有显著性差异（P〈O．05）外,其余各期两两比较均无显著性差异（P〉O．05）。结论EphA2的高表达与膀胱移行细胞癌的恶性程度以及患者预后有关,在临床分期中无明显相关性,且EphA2的蛋白表达与基因表达量不成比例。     

X染色体相关凋亡抑制蛋白在移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨X染色体相关凋亡抑制因子(XIAP)在移行细胞癌(TCC)组织中的表达及意义, 方法应用免疫组化S-P法、蛋白质印迹法、RT-PCR法检测43例TCC(肾盂癌6例、输尿管癌2例、膀胱癌35例)以及12例正常移行上皮细胞组织中XIAP蛋白及mRNA表达水平,并采用t检验和方差分析进行统计学比较. 结果 XIAP蛋白及mRNA表达在TCC和正常移行上皮组织(S-P法:22±5和16±2;蛋白质印迹法:1.21±0.15和0.61±0.24;mRNA:1.17+0.30和0.75±0.17)、膀胱癌复发者与初发者(S-P法:24±3和20±3;蛋白质印迹法:1.66±0.28和1.10±0.23;mRNA:1.44±0.27和1.05±0.23)之间比较差异有统计学意义(P<0.05).而在TCC分级、膀胱癌与输尿管和肾盂癌、膀胱癌分期以及膀胱癌单发与多发之间XIAP表达比较差异均无统计学意义(P>0.05), 结论 XIAP在TCC中呈高表达,可能是促进移行上皮恶变的一个重要因素.膀胱癌复发者XIAP表达较初发者明显增高,检测XIAP表达可能成为判断膀胱癌预后、预防膀胱癌复发的新指标.     

FHITmRNA及蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

目的：研究膀胱移行细胞癌组织中脆性组氨酸三联体（fragilehistidinetriad,FHIT）mRNA及蛋白在膀胱移行细胞癌发生、发展中的作用。方法：采用RT—PCR和免疫组化SP法检测FHITmRNA及蛋白在62例膀胱移行细胞癌组织及35例正常组织中的表达情况。结果：FHITmRNA在癌组织及正常对照组中的缺失率分别为54．84％和2．86％。随着临床分期,FHITmRNA和蛋白异常表达呈增高趋势;并且随着膀胱移行细胞癌分化程度呈下降趋势。结论：FHIT基因与膀胱移行细胞癌的发生、发展过程密切相关,FHIT基因的检测可能成为膀胱移行细胞癌的预测指标。     

E-Cadherin在膀胱移行细胞癌中的表达

目的 探讨Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义。方法 采用免疫组织化学方法,检测６３例膀胱移行细胞癌石蜡标本Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达情况。结果 ６３例膀胱癌组织标本中Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达异常者４２例（６７％）,异常表达率与膀胱癌的病理分期、分级、肿瘤复发和生存率间的差别均有显著性意义。结论 Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ的异常表达与膀胱癌的恶性程度及复发密切相关,可作为判定肿瘤预后和复发     

环氧合酶2在胰腺癌中表达及其抑制剂对肿瘤生长的抑制作用

目的　研究胰腺癌组织中环氧合酶 2 (COX 2 )的表达及其与临床分期的关系 ;探讨选择性COX 2抑制剂对胰腺癌生长的体内外抑制作用。方法　分别应用免疫组织 (细胞 )化学染色、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和Westernblot等研究胰腺癌组织和细胞株PC 3及PANC 1中COX 2表达。分析胰腺癌组织COX 2表达与临床TNM分期的关系。应用四唑氮蓝还原法 (MTT)研究选择性COX 2抑制剂Celebrex和NS 3 98对胰腺癌细胞生长的体外抑制作用。观察Celebrex对裸鼠移植瘤 (接种PC 3细胞 )生长的体内抑制作用。结果　COX 2免疫组织 (细胞 )化学染色结果显示 :2 4例胰腺癌组织阴性 3例 ,弱阳性 10例 ,强阳性 11例 ,阳性率 87 5% ;3例慢性胰腺炎组织 1例弱阳性 ,2例阴性 ;胰腺癌细胞株PC 3和PANC 1均为阳性。RT PCR结果显示两株胰腺癌细胞株和胰腺癌组织COX 2mRNA的表达较正常胰腺组织明显上调。Westernblot显示胰腺癌细胞株PC 3、PANC 1中COX 2蛋白表达阳性。胰腺癌组织COX 2表达程度与临床TNM分期呈正相关 (P <0 0 5)。NS3 98和Celebrex体外均呈剂量依赖性地抑制胰腺癌细胞株PC 3的增殖 ,以Celebrex的抑制作用较为显著。而Celebrex体内抑瘤率达 51 6%。结论　COX 2在胰腺癌中表达显著上调 ,其表达程度与胰腺癌临床TNM分期有关。     

Aspirin induces apoptosis in oesophageal cancer cells by inhibiting the pathway of NF-kappaB downstream regulation of cyclooxygenase-2

Background: Aspirin has potential in the prevention or treatment of oesophageal cancer, the seventh most common cancer in the world, but its mechanism of action is still not certain. Methods: The oesophageal squamous cell carcinoma cell line TE‐13 was cultured with aspirin at different concentrations or for different times. Proliferation and apoptosis were measured by MTT reduction and flow cytometry. Expression of COX‐2 mRNA was measured by RT‐PCR and COX‐2 protein levels with Western blot analysis. Nuclear NF‐kappaB and cytoplasmic IkappaB protein levels were determined by electrophoretic mobility shift assay and Western blot, respectively. Results: Aspirin significantly inhibited cell proliferation and induced apoptosis at concentrations of 1, 4, 8 mmol/L. Aspirin dose‐dependently decreased the levels of COX‐2 mRNA, COX‐2 protein and nuclear NF‐kappaB protein and increased the cytoplasmic IkappaB protein. Conclusion: We conclude that aspirin inhibits the proliferation of, and induced apoptosis in, the cultured TE‐13 SCC cell line. These changes correlate with a reduction in COX‐2 mRNA and protein expression, prostaglandin synthesis, an inhibition of NF‐kappaB nuclear translocation, and an increase in cytoplasmic IkappaB. These results support the further investigation of the cyclooxygenase pathway in investigating the potential of aspirin and similar drugs in cancer prevention and therapy.     

RUNX3 基因启动子甲基化与膀胱移行细胞癌发生的关系

目的 检测抑癌基因RUNX3 启动子区CpG 岛甲基化状态及其在 BTCC 中 mRNA 和蛋白表达水平.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation - specific PCR,MSP)技术检测 BTCC 中RUNX3 基因启动子区域甲基化状态,RT - PCR 和 Western blot 法分别检测其 mRNA 和蛋白表达水平.结果 RUNX3基因在正常膀胱组织中未发生甲基化,而在 BTCC 组织中甲基化频率占46.9%(15/32),并且随着肿瘤分级、分期的增加,其甲基化水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01).在15例启动子异常甲基化的癌组织标本中,14 例同时伴有 RUNX3 基因表达缺失或下调,二者存在明显的相关性(r=0.6472,P=0.012).RUNX3 mRNA 和蛋白表达在正常膀胱组织和 BTCC 组织分别为93.8%(30/32)、34.4%(11/32),二组间表达差异有统计学意义(P相似文献   

PBK/TOPK表达对膀胱癌BIU-87细胞株增殖及迁移的影响

目的 探讨PBK/TOPK在膀胱癌中的表达及其表达对BIU-87细胞株增殖及迁移的影响。方法 采用QRT-PCR及Western blot检测3例配对膀胱癌及癌旁正常组织中PBK/TOPK的表达。随后,对膀胱癌BIU-87细胞株中PBK/TOPK的表达分别干扰及过表达,通过CCK-8实验检测细胞的增殖,Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果 结果一致表明PBK/TOPK在膀胱癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。干扰PBK/TOPK表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力下降(P<0.05) ;而PBK/TOPK过表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力增强(P<0.05) 。结论 PBK/TOPK高表达于膀胱癌,有助于膀胱癌细胞的增殖及迁移。