莪术醇抑制人骨肉瘤细胞系的增殖和促凋亡

目的 探究莪术醇对人骨肉瘤细胞系MG-63和U2OS体外增殖、凋亡的影响和作用机制。方法 将MG-63细胞和U2OS细胞分为对照组、莪术醇20、40、80和160μmol/L干预组;MTT法检测MG-63、U2OS细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;流式细胞测量细胞凋亡;RT-qPCR和Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、caspase和β-catenin的mRNA和蛋白表达。结果 莪术醇呈浓度依赖性地抑制MG-63和U2OS细胞增殖,IC₅₀值分别为128.03μmol/L、117.95μmol/L。与对照组相比,莪术醇显著抑制MG-63、U2OS细胞的体外迁移和侵袭(P<0.05),并诱导细胞凋亡(P<0.05)。与对照组相比,莪术醇组促进Bax、caspase 3表达,抑制Bcl2表达(P<0.05),MG-63、U2OS细胞内β-catenin的mRNA表达水平和蛋白表达均被显著抑制(P<0.05)。结论 莪术醇显著抑制人骨肉瘤细胞系MG-63、U2OS增殖,诱导细胞凋亡。     

下调LRH1 对骨肉瘤细胞生长和Wnt/β-catenin 信号通路的影响

目的：探讨下调肝受体类似物1(LRH1)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法：采用RT-qPCR和Western blot分别检测人骨肉瘤细胞U2OS和成骨细胞hFOB1.19中LRH1 mRNA和蛋白表达差异;将体外培养的U2OS细胞分为对照组（Ctrl）、阴性对照（NC）-siRNA组和LRH1-siRNA组,RT-qPCR检测各组U2OS细胞中LRH1 mRNA表达,MTT、流式细胞术、Transwell小室和划痕实验分别检测各组U2OS细胞增殖活力、细胞周期分布情况、穿膜细胞数和划痕愈合率,Western blot检测各组U2OS细胞中LRH1和Wnt/β连环蛋白（β-catenin）信号通路相关蛋白β-catenin、细胞周期素D1(CyclinD1)、c-Myc、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。结果：与hFOB1.19细胞相比,U2OS细胞中LRH1 mRNA和蛋白表达明显升高（P<0.05）;与NC-siRNA组相比,LRH1-siRNA组U2OS细胞中LRH1 mRNA表达、细胞增殖活力、S期细胞占比、穿膜细胞数、划痕愈合率和LRH1、β-...     

S100A6上调人乳腺癌细胞系MCF-7中β-catenin及其机制

目的 探讨钙细胞周期蛋白S100A6对人乳腺癌细胞系MCF-7中β-catenin的影响及其机制.方法 分别用表达S100A6及其siRNA的重组腺病毒AdS100A6与AdsiS100A6处理MCF-7细胞,RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测β-catenin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK3β)表达或分布的变化.结果 在MCF-7细胞中,S100A6可以上调β-catenin的蛋白表达水平(P＜0.01),但对其mRNA表达无显著性影响;S100A6对E-cadherin的mRNA表达、蛋白质表达水平及分布均无显著性影响;S100A6可以提高β-catenin降解复合体的主要成员GSK3β磷酸化水平(P＜0.01).结论 S100A6上调β-catenin的可能机制是通过促进GSK3β磷酸化失活,而不是通过调节E-cadherin实现的.     

低表达S100钙离子结合蛋白A6促进食管腺癌SK-GT-4细胞的增殖和迁移

目的 探讨S100钙离子结合蛋白A6（S100A6）对食管腺癌SK-GT-4细胞增殖和迁移的影响。 方法 慢病毒转染,构建稳定细胞系shNC和shS100A6,Real-time PCR检测S100A6 mRNA表达情况;倒置显微镜和MTT检测细胞的增殖能力,Transwell检测细胞的迁移能力及U0126（MER1/2的抑制剂）、LY294002（PI3K抑制剂）对细胞增殖、迁移的影响;Western blotting检测细胞中S100A6、p-ERK、p-Akt及其下游参与增殖、迁移的相关蛋白的表达情况,检测U0126、LY294002对p-ERK、p-Akt及其下游参与增殖、迁移的相关蛋白表达的影响。 结果 构建了敲低S100A6的稳定细胞系,敲低S100A6促进了细胞的增殖和迁移,p-ERK、p-Akt水平升高,细胞周期抑制蛋白p21表达量下降、细胞周期蛋白D1(cyclinD1）表达升高,间质细胞标志蛋白——波形蛋白（vimentin）、β-连环蛋白（β-catenin）表达升高;U0126处理shS100A6细胞后,对细胞的增殖无影响,抑制细胞的迁移,p-ERK、β-catenin表达下降;LY294002处理shS100A6细胞后,抑制细胞的增殖和迁移,p-Akt表达下降,p21表达量升高,cyclinD1表达量下降,β-catenin表达下降。 结论 低表达S100A6促进细胞的增殖和迁移,其可能机制是通过p-Akt调控细胞周期的进程促进细胞增殖,通过激活p-Akt/p-ERK调控β-catenin促进细胞的迁移。     

沉默Cat D对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及相关信号通路

研究组织蛋白酶D(cathepsin D,Cat D)在骨肉瘤细胞中的表达，并通过shRNA技术沉默Cat D,探讨该分子对骨肉瘤细胞MG63和U2OS增殖、凋亡及侵袭的作用和机制。构建sh-Cat D质粒及阴性对照质粒sh-NC并转染至骨肉瘤细胞MG63和U2OS中，RT-PCR和Western blotting检测Cat D在骨肉瘤细胞中的表达；CCK-8法、克隆形成实验和EdU荧光染色实验检测骨肉瘤细胞的增殖活性；Transwell实验检测肿瘤细胞的侵袭能力；FACS检测肿瘤细胞的凋亡情况；Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达及Akt/mTOR信号通路相关蛋白(Akt和mTOR)的磷酸化水平。结果显示，相较健康人成骨细胞hFOB,Cat D在骨肉瘤细胞中的表达显著升高，尤其是MG63和U2OS细胞中Cat D的高表达均显著(均P<0.001)。与sh-NC组相比，Cat D沉默显著抑制MG63和U2OS细胞的增殖和侵袭(均P<0.001)。与sh-NC组相比，Cat D沉默通过上调Bax表达和下调Bcl-2表达促进肿瘤细胞的...     

CD44对骨肉瘤细胞增殖、黏附和侵袭性的影响

目的研究细胞表面黏附分子CD44对骨肉瘤细胞增殖、黏附和侵袭特性的影响,探讨骨肉瘤细胞生长侵袭的机制。方法流式细胞术和Westernblot检测3株骨肉瘤细胞系MG63、HOS和U2-OS中CD44的阳性表达率和相对蛋白含量;逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法研究3株细胞系之间CD44mRNA的表达差异;同时应用MTT法、美蓝硼酸盐法和微孔迁移技术研究阻断CD44的作用前后3株细胞的增殖、黏附和侵袭能力的变化。结果HOS和U2-OS中CD44的阳性百分率均高于99%,但HOS中CD44的平均荧光强度显著高于U2-OS(P<0.01);而MG63中CD44阳性百分率仅为(2.10±0.46)%;Westernblot亦证明HOS中CD44的蛋白含量显著高于U2-OS(P<0.05),而MG-63中CD44表达为阴性;CD44mRNA在HOS和U2OS中的表达也显著高于MG-63(P值均<0.05)。HOS的侵袭性显著高于MG63和U2-OS(P值均<0.01);HOS与MG63的增殖速率和黏附性差异无统计学意义,但均显著高于U2OS(P值均<0.01)。应用中和抗体阻断CD44的作用之后,HOS和MG-63的黏附性均显著降低(P值均为0.03),U2-OS的黏附性无明显变化(P=0.93);HOS和U2-OS的侵袭力显著降低(P值均<0.01),而MG-63的侵袭力无明显改变(P=0.18);3株细胞的增殖速率均无显著变化(P值均>0.05)。结论CD44能促进骨肉瘤细胞系HOS的黏附和侵袭,并参与U2-OS的侵袭和MG-63的黏附过程,但是不影响骨肉瘤细胞的增殖速率。     

构建裸鼠皮下荷瘤模型:人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和143B

背景:多种细胞株参与骨肉瘤动物模型的和构建。目的:比较人骨肉瘤细胞株中MG63、U2OS和143B在裸鼠皮下的成瘤情况,为骨肉瘤的动物实验研究奠定基础。方法:将18只裸鼠随机等分成3组:MG63组、U2OS组和143B组,分别于各组裸鼠后侧背部皮下注射MG63、U2OS和143B三种细胞株,观察成瘤情况。结果与结论:MG63和U2OS细胞株注射的裸鼠未能成瘤。143B细胞株注射的裸鼠于(6±1)d成瘤,成瘤率100%(6/6),肿瘤生长较迅速,2个月时平均瘤体体积为(3 475±1 544)mm3,荷瘤裸鼠存活时间为(68±10)d。苏木精-伊红染色显示瘤体组织中可见癌细胞成巢,核大深染,多分裂。说明143B细胞株成瘤良好,可用于骨肉瘤动物实验研究。     

miR-96通过靶向调控KRAS蛋白抑制骨肉瘤的增殖和转移

目的 探讨miR-96在骨肉瘤组织和细胞中的表达情况及其对骨肉瘤细胞的调控作用。方法 采用RT-qPCR方法检测骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中miR-96的表达;miR-96 mimics转染骨肉瘤细胞后,CCK-8法检测细胞增殖;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和转移;荧光素酶报告基因实验检测miR-96与鼠类肉瘤病毒癌基因（KRAS）的3’UTR区的靶向结合作用。Western blot检测KRAS蛋白表达变化。结果 与对照组相比,骨肉瘤组织和细胞中miR-96表达较低。体外实验中发现,miR-96的过表达能够抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭、转移。荧光素酶报告基因实验发现KRAS的3’UTR是miR-96的靶点。miR-96过表达能下调骨肉瘤细胞中KRAS蛋白的表达。结论 miR-96在骨肉瘤患者中表达下调,miR-96过表达能显著抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭转移,该作用与靶向调控KRAS蛋白相关。     

人骨形态发生蛋白3抑制骨肉瘤细胞系MG63和U20S的体外生长

目的 研究人骨形态发生蛋白3（hBMP3）对骨肉瘤细胞系MG63和U2OS的生物学作用。方法 hBMP3的重组腺病毒和表达hBMP3的条件培养液（rhBMP3-CM）干预MG63和U2OS,台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化;空白组不做任何处理,实验对照组用AdGFP组和rGFP-CM处理。 结果 实验对照组和空白组间差别无显著性。与各自的对照组相比,在观察时间内,两种处理均致实验组细胞：（1）存活率降低;（2）凋亡率增加;（3）穿膜细胞数减少;（4）碱性磷酸酶活性增加。 结论 hBMP3对骨肉瘤细胞系具有抑制作用,并促其向成骨方向分化。     

沉默HAX1基因对人骨肉瘤细胞凋亡的影响

目的观察HS1相关蛋白X-1(HS1-associated protein X-1,HAX1)对骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法应用基因沉默技术在骨肉瘤细胞系MG63中下调HAX1基因的表达,并且通过Western blot实验与免疫荧光实验检测基因沉默效率;应用MTT方法及克隆形成实验,评价沉默HAX1基因对MG63细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡并通过Western blot实验检测下游蛋白的表达变化。结果沉默HAX1基因抑制人骨肉瘤细胞系MG63的增殖能力与克隆形成能力,流式细胞技术显示沉默HAX1可以诱导MG63细胞凋亡,Western blot实验说明HAX1诱导的MG63细胞凋亡与caspase3和caspase9蛋白上调相关。结论 HAX1可能是维持骨肉瘤细胞增殖能力的关键基因,沉默该基因诱导骨肉瘤细胞凋亡可能与caspase3/caspase9上调相关。     

CISD2基因沉默通过AKT通路抑制人骨肉瘤细胞U2OS的增殖

目的检测CDGSH铁硫结构域2 (CDGSH iron sulfur domain 2, CISD2)基因对骨肉瘤细胞增殖能力的影响。方法应用化学合成小干扰RNA技术沉默人骨肉瘤细胞系U2OS中CISD2基因的表达,分别通过免疫荧光染色与Western blot实验检测基因沉默效率;通过MTT实验与克隆形成实验,研究沉默CISD2基因对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期;Western blot实验检测AKT,p-AKT蛋白的表达。结果设计的siRNA抑制人类骨肉瘤细胞系U2OS细胞CISD2基因表达。沉默CISD2基因抑制U2OS细胞的增殖能力与克隆形成能力;流式细胞术实验结果表明沉默CISD2可以诱导U2OS细胞G_0/G_1期抑制;Western blot实验显示沉默CISD2可以抑制p-AKT蛋白的表达。结论沉默CISD2基因抑制骨肉瘤细胞系U2OS的增殖能力与抑制AKT信号传导通路相关。     

Zeste基因增强子同源物2通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响脑胶质瘤细胞凋亡

目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)通过调控Wnt/β-catenin信号通路对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法:以RT-q PCR和Western blot检测胶质瘤U87、H4和U251细胞及正常人脑星形细胞(NHA)中EZH2的表达水平。在H4细胞中转染EZH2 siRNA和siRNA control,MTT测定细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,分光光度计法检测caspase-3的活性,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白β-连环蛋白(β-catenin)和下游靶分子c-Myc的蛋白表达。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂处理转染EZH2 siRNA的H4细胞,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定β-catenin和c-Myc的表达。结果:胶质瘤U87、H4和U251细胞中EZH2的mRNA和蛋白水平均明显高于NHA(P0.05),并且H4细胞中EZH2 mRNA和蛋白水平高于U87和U251细胞(P0.05)。EZH2 siRNA可以明显下调H4细胞中EZH2的mRNA和蛋白水平。EZH2表达下调后的H4细胞从48 h开始细胞活力降低,并且细胞凋亡率也明显升高,细胞中caspase-3活性也明显升高(P0.05),同时EZH2表达下调还可以抑制β-catenin和c-Myc的表达。Wnt/β-catenin信号通路的激活剂可以减少EZH2诱导的H4细胞凋亡,降低细胞中caspase-3的活性。结论:EZH2在脑胶质瘤细胞中过度表达,下调其表达可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活而诱导胶质瘤细胞凋亡。     

EBV-LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌中的表达关系及意义

目的 探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)和β-连环素(β-catenin)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达关系及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测LMP2A和β-catenin蛋白在32例鼻咽黏膜慢性炎、56例NPC和18例NPC淋巴结转移灶中的表达,采用Westem blot法和免疫荧光细胞化学染色法观察LMP2A和β-catenin蛋白在CNE2-LMP2A细胞及其对照组CNE2-Vector和CNE2细胞中的表达.结果 (1)LMP2A在NPC及其淋巴结转移灶中的阳性率分别为89.3％ (50/56)和77.8％(14/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(37.5％,12/32)(P均＜0.01);β-catenin在NPC及其淋巴结转移灶中的异常表达率分别为62.5％ (35/56)和83.3％(15/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(3.1％,1/32)(P均＜0.01);LMP2A与β-catenin正常表达呈负相关(rs=-0.391,P ＜0.01);LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌T分期、N分期和临床分期组间表达率的差异均有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).(2)CNE2-LMP2A细胞中β-catenin蛋白表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2细胞;CNE2-LMP2A细胞中β-catenin胞质和胞核的表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2(P均＜0.01).结论 LMP2A高表达和β-catenin异常表达与鼻咽癌临床生物学行为进展密切相关,其机制可能与LMP2A上调β-catenin蛋白水平并促进其核转位有关.     

Wnt/β-catenin信号通路在低氧促进骨肉瘤细胞体外增殖和侵袭中的作用

目的探讨缺氧条件下,Wnt/β-catenin信号通路在骨肉瘤细胞增殖和侵袭中的作用和机制。方法分别在常氧(21%O_2)和缺氧(1%O_2)环境下培养骨肉瘤SaOS-2细胞系24 h,采用CCK-8法检测细胞在缺氧环境下的增殖能力变化,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Real time-PCR和Western blot法检测细胞中Wnt/β-catenin mRNA和蛋白的表达水平,进一步使用β-catenin特异性siRNA阻断其表达并检测。结果缺氧可明显促进骨肉瘤SaOS-2细胞的增殖以及体外侵袭能力的增强,同时上调Wnt/β-catenin mRNA和蛋白表达水平。靶向沉默Wnt/β-catenin之后,缺氧失去了对骨肉瘤SaOS-2细胞增殖和侵袭的诱导作用。结论缺氧条件下,骨肉瘤SaOS-2细胞系中的Wnt/β-catenin信号通路显著激活,从而促进细胞的异常增殖与侵袭能力增强。     

MG63和MG63/ADR骨肉瘤裸鼠模型血管内皮生长因子和核因子κB1的表达

背景：恶性肿瘤耐药研究中发现核因子κB1及血管内皮生长因子基因可能与肿瘤耐药密切相关。 目的：观察MG63和MG63/ADR骨肉瘤裸鼠模型中血管内皮生长因子和核因子κB1表达的差异。 方法：对数期生长的MG63细胞采用阿霉素浓度递增培养法冲击诱导建立MG63/ADR细胞株。BALB/C裸鼠随机分为2组,分别将含5.0×106个MG63和MG63/ADR细胞的0.2 mL细胞悬液采用皮下接种法注入裸鼠的一侧腋部皮下。第6周处死裸鼠取材。 结果与结论：注射MG63和MG63/ADR细胞的2组裸鼠成瘤率均为100%;免疫组织化学及RT-PCR方法检测发现MG63/ADR组瘤灶中血管内皮生长因子和核因子κB1基因和蛋白的表达均明显高于MG63组(P < 0.05)。说明血管内皮生长因子和核因子κB1表达的上调可能是导致骨肉瘤耐药的重要原因。     

Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS存活率的影响

 目的: 探讨 Notch-1 下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS细胞存活率的影响及其作用机制。方法: 双氢青蒿素(5、10、15和20 μmol/L)孵育U-2OS细胞后,采用免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中Notch-1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和Notch-1通路下游基因 Hes-1 的蛋白和mRNA的表达水平。下调 Notch-1 表达后,采用MTT法、免疫印迹法和细胞迁移实验检测在双氢青蒿素作用下U-2OS细胞的存活率,MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白表达以及U-2OS细胞的迁移能力。结果: 免疫印迹法与逆转录聚合酶链反应结果显示双氢青蒿素呈剂量依赖性降低U-2OS细胞中Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白和mRNA的表达水平(P<0.05);下调 Notch-1 表达后,增强了双氢青蒿素抑制U-2OS细胞生长的作用,MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白表达及细胞迁移能力进一步降低,显著低于加药组(P<0.05)。结论: 双氢青蒿素可抑制U-2OS细胞中Notch-1通路的活性;下调 Notch-1 的表达可增强双氢青蒿素抗骨肉瘤的作用。     

siRNA干扰URG11表达对骨肉瘤细胞系MG63的生物学功能和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨siRNA干扰URG11表达后骨肉瘤细胞系MG63的生物学功能和Wnt/β-catenin信号通路的变化。方法:将体外培养的MG63细胞分为Control组（未转染）、NC-siRNA组（转染非特异性NC-siRNA）和URG11-siRNA组（转染URG11-siRNA）,采用逆转录聚合酶链式扩增（RT-P...     

RNA干扰组蛋白去乙酰化酶4诱导骨肉瘤细胞凋亡

目的探讨沉默组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)对骨肉瘤细胞HOS,U2OS生物学行为的影响。方法用脂质体瞬时转染法将化学合成HDAC4-siRNA转染至骨肉瘤HOS及U2OS细胞中,实时荧光定量PCR(q-PCR)法检测细胞中HDAC4 mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞HDAC4及其下游基因HIF-1α的蛋白表达;CCK-8法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力。结果转染后HOS及U2OS细胞中HDAC4 mRNA表达明显降低(P0.01)。沉默HDAC4后HOS细胞早期凋亡率为(16.8±2.1)%,较si-control组(10.2±2.5)%明显增加(P0.05);U2OS细胞早期凋亡率为(21.4±3.1)%,较si-control组(12.5±2.3)%明显增加(P0.05);HOS细胞si-con组及si-HDAC4组细胞的穿膜细胞数分别为(146±34)个、(45±20)个,U2OS细胞为(207±35)个、(121±23)个,分别显著低于si-con组(P0.05)。si-HDAC4能够明显降低HDAC4以及下游基因HIF-1α的表达。结论针对HDAC4基因的特异性RNA小干扰片段能够下调HDAC4mRNA及蛋白的表达,并抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,诱导细胞凋亡。     

siRNA介导的nestin基因沉默对人食管癌ECA109细胞侵袭和迁移的影响及机制

目的:探讨巢蛋白(nestin)对食管鳞癌ECA109细胞的侵袭与迁移能力的影响及可能的分子机制。方法:通过靶向沉默食管癌ECA109细胞内源性nestin基因后,采用real-time PCR和Western blot分别检测nestin基因的干扰效率及细胞内MMP2、MMP9、VEGF及β-catenin的表达水平;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:与control-siRNA组相比,nestin-siRNA组中nestin mRNA和蛋白水平明显降低;细胞侵袭迁移能力受到明显抑制;MMP2,MMP9及VEGF表达明显降低;细胞总β-catenin及核内β-catenin表达明显减少。结论:Nestin与食管癌侵袭迁移能力密切相关,下调nestin表达可明显抑制食管癌细胞ECA109的侵袭迁移能力,其机制可能与抑制β-catenin的核内转移与下调MMP2、MMP9及VEGF的表达有关。     

缺氧诱导骨肉瘤U2OS细胞分泌IL-11的机制研究

目的探讨缺氧诱导骨肉瘤U2OS细胞分泌IL-11的分子机制。方法体外缺氧(1%O2)环境下培养人骨肉瘤U2OS细胞系,同时加入HIF-1α抑制剂孵育,或预先加入不同信号通路抑制剂处理,Western blot检测HIF-1α的蛋白水平,定量PCR检测IL-11的mRNA水平,ELISA检测IL-11的蛋白水平。结果与正常氧环境培养的U2OS细胞相比,缺氧显著诱导U2OS细胞上调HIF-1α的表达,同时促进IL-11的mRNA水平和蛋白水平增加,并具有时间依赖性;加入HIF-1α抑制剂后可显著抑制缺氧诱导的HIF-1α表达以及IL-11的mRNA和蛋白水平;加入JNK信号抑制剂亦显著抑制缺氧诱导的IL-11表达和分泌,上述差异均具有统计学意义(P 0. 05)。但HIF-1α的表达无显著变化,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论缺氧可通过HIF-1α-JNK信号诱导骨肉瘤U2OS细胞分泌IL-11,从而促进骨肉瘤的发生发展。