补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠血浆TXB2、6-keto-PGF1a含量的影响

目的揭示补阳还五汤及拆方抗脑缺血再灌注损伤的作用机理.方法通过四血管结扎法制作SD大鼠脑缺血再灌注模型,观察总方组与拆方黄芪组、活血组药物对模型血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)含量的影响.结果模型组大鼠血浆TXB2含量明显增高,6-Keto-PGF1a含量明显降低;总方组与拆方黄芪组、活血组均能降低TXB2含量,升高6-Keto-PGF1a含量,总方组作用最强.结论补阳还五汤及拆方具有通过影响花生四烯酸的代谢产物血栓素B26-Keto-PGF1a含量,从而达到抗脑缺血再灌注损伤的作用.总方组的疗效明显优于拆方组.     

偏头痛病人发作期血浆TXB2和6-Keto-PGF1α含量的改变

目的：为了探讨偏头痛的发病机理。方法：用放免法测定了偏头痛病人发作期血浆ＴＸＢ_2和６－Ｋｉｔｏ－ＰＧＦ_1α的含量。结果：偏头痛发作期血浆ＴＸＢ_2的含量明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）,６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_1α的含量稍高于对照组,但无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。结论：偏头痛病人发作期存在血浆ＴＸＢ_2和６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_1α的失衡,以血浆ＴＸＢ_2的改变为主。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织ET-1基因表达的影响

目的 :观察补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织 ET- 1基因表达的影响 ,探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用线栓法制成大鼠 MCAO再灌注模型 ,并用地高辛精标记 ET- 1基因进行原位杂交。结果 :补阳还五汤治疗组缺血再灌注侧皮层及尾状核 ET- 1基因表达显著低于生理盐水对照组 (P<0 .0 5 ) ,两组大鼠缺血再灌注侧皮层和尾状核 ET- 1基因表达均显著高于健侧相应脑区 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论 :脑缺血再灌注可以诱导脑组织 ET- 1基因的异常表达 ,从而进一步加重脑损伤 ,补阳还五汤可在一定程度上下调脑缺血诱导的ET- 1基因的表达 ,可能是其防治缺血性脑血管病的主要作用机制之一。     

补阳还五汤有效部位对脑缺血再灌注大鼠IL-1β和ICAM-1表达的作用

目的探讨补阳还五汤有效部位对大脑局灶性脑缺血后再灌注大鼠脑组织IL-1β和ICAM—1表达的作用。方法采用大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型，检测脑组织IL-1β和ICAM—1的表达。结果脑缺血2h再灌注46h后，模型组海马及髓质区IL-1β表达阳性细胞数显著增加（P〈0．05，P〈0．01），海马及皮质区ICAM—1表达阳性细胞数显著增多（P〈0．01，P〈0．05）；补阳还五汤有效部位生物碱可使髓质区IL-1β阳性细胞数显著减少（P〈0．01）；苷可使皮质区ICAM-1β阳性细胞数显著减少（P〈0．01）。结论脑缺血再灌注后，脑组织IL-1β和ICAM—1表达增加，补阳还五汤有效部位生物碱和苷可分别抑制髓质部位IL-1β蛋白表达及皮质区10w—1蛋白表达，提示生物碱和苷可能是补阳还五汤抗脑缺血后炎症反应的部分物质基础。     

大秦艽汤、镇肝熄风汤及补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨大秦艽汤、镇肝熄风汤和补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法 将大鼠随机分为生理盐水组、大秦艽汤组、镇肝熄风汤组和补阳还五汤组。线栓法复制局灶性脑缺血再灌注模型，观察术后3、24、72h神经学分级评定、脑含水量、钙离子含量、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的改变。结果 大秦艽汤及镇肝熄风汤对脑缺血再灌注损伤无保护作用，补阳还五汤有明显保护作用。结论 补阳还五汤对缺血性中风具有较好的治疗作用。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠脑组织NO及NOS的影响

目的观察补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织一氧化氮（NO）及其合酶（NOS）的影响。方法采取血管内栓塞阻断法制成大鼠脑缺血再灌注模型,比较补阳还五汤与尼莫地平对大鼠脑组织中的NO、NOS的变化。结果与假手术组比较,各组大鼠脑组织NO及NOS含量均不同程度降低;补阳还五汤组与尼莫地平组均较模型组显著增高NO及NOS含量,补阳还五汤组作用明显。结论补阳还五汤具有增加脑NO及NOS含量的作用。     

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内caveolin1、2的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内caveolin1、2的影响。方法采用大脑中动脉阻塞法复制脑缺血模型,将动物随机分为正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组,分别给予不同处理,在12 h、1、3、7 d不同时间点处死动物,采用免疫组织化学法观察caveolin1、2的表达。结果补阳还五汤能显著减轻神经功能缺损;正常脑内有一定量的caveolin1、2表达,缺血后caveolin1、2迅速增加,分别于术后3 d或1 d达高峰,补阳还五汤组显著提高caveolin1、2的表达,在3、7 d时模型组与补阳还五汤组差异有统计学意义(P<0.01)。结论补阳还五汤可调节脑缺血后caveolin1、2的表达,是其促进神经功能恢复的可能机制之一。     

补阳还五汤对大鼠全脑缺血再灌注的药效研究

【目的】比较补阳还五汤复方胶囊与原方汤剂保护和修复大鼠全脑缺血再灌注损伤神经细胞的作用,并从抗氧化角度探讨其作用机制。【方法】选用SD雄性大鼠,随机分为假手术组,模型组,补阳还五汤原方汤剂组(剂量为10 g.kg-1.d-1),复方胶囊高、中、低剂量组(剂量分别为7.56、3.78、1.89 g.kg-1.d-1);采用4血管闭塞法复制全脑缺血再灌注模型,比较补阳还五汤复方胶囊和原方汤剂对海马CA1区病理形态结构的修复程度,并对血清及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织含水量进行测定。【结果】原方汤剂组及复方胶囊各剂量组对海马CA1区神经元细胞病理形态变化均有康复改善作用,且复方胶囊中剂量组作用最为显著;在血清和脑组织中,原方汤剂组及复方胶囊组均可使SOD活性显著升高,MDA含量显著下降(P<0.01),且以复方胶囊中剂量组作用最为明显;原方汤剂组及复方胶囊各剂量组均可显著降低脑组织含水量(P<0.01),其中复方胶囊高剂量组作用最明显。【结论】补阳还五汤原方汤剂及复方胶囊对大鼠全脑缺血再灌注损伤均有保护作用,但复方胶囊疗效更为确切。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠皮质神经细胞凋亡的影响

目的研究补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法36只SD大鼠随机分为3组，每组12只：①假手术组；②模型对照组；③补阳还五汤组。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型，脑缺血-再灌注48h后TIC染色计算脑梗塞体积，TUNEL染色检测神经细胞凋亡，免疫组化方法检测缺血侧皮质Bcl-2／Bax的表达，电镜观察线粒体的变化。结果脑缺血再灌注后缺血侧皮质神经细胞凋亡增多，同时Bcl-2表达减少，Bax表达增多，Bcl-2／Bax比值下降，线粒体肿胀且大多破裂。补阳还五汤干预后，细胞凋亡减少，脑梗塞体积减小，Bcl-2／Bax比值上升，线粒体肿胀减轻。结论补阳还五汤可能通过抑制神经细胞凋亡而减小脑梗塞体积，其机制可能是通过上调Bcl-2／Bax比值，保护线粒体，防止发生线粒体通透性转变。     

补阳还五汤对脑缺血后大鼠脑内GLT-1表达的影响

目的 :观察脑缺血后补阳还五汤对大鼠脑内海马CA1区GLT-1(glutamate transporter-1)表达的影响。方法 :大脑中动脉栓塞法制备缺血性脑损伤大鼠模型,术后补阳还五汤灌胃,灌胃1、3、5、7 d后灌注取材。采用免疫组织化学染色法观察海马CA1区的GLT-1表达,采用免疫荧光双染确定GLT-1的细胞定位。结果 :同模型组相比,补阳还五汤在1 d和3 d后可显著增加海马CA1区GLT-1的表达,随后GLT-1的表达逐步下降,而且两组之间没有明显差异(5 d和7 d)。另外免疫荧光双染表明GS主要表达于星形胶质细胞。结论 :补阳还五汤可通过提高脑缺血后CA1区GLT-1的表达减少谷氨酸的浓度发挥保护作用。     

补阳还五汤及拆方对代谢综合征模型大鼠胰岛素、TXA_2水平的影响

目的:观察补阳还五汤及拆方对代谢综合征模型大鼠胰岛素、血栓素A2(TXA2)水平的影响并初步探讨其作用机制。方法:高糖脂餐加链脲佐菌素建立代谢综合征大鼠模型,并观察补阳还五汤及其去黄芪方对模型大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(Ins)、稳态模型评价胰岛素抵抗(HOMA-IR)和血清血栓素A2(TXA2)水平的影响。结果:模型对照组Ins、HOMA-IR、TXA2水平明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,补阳还五汤组的Ins、HOMA-IR、TXA2水平明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,补阳还五汤去黄芪方组Ins、HOMA-IR无统计学差异(P>0.05),FBG明显升高(P<0.01),TXA2明显降低(P<0.05)。补阳还五汤去黄芪方组与补阳还五汤组比较,Ins、HOMA-IR、TXA2水平均明显升高(P<0.05)。结论:补阳还五汤能够改善模型大鼠的胰岛素抵抗和降低TXA2水平;方中黄芪是改善胰岛素抵抗的有效成分,6味活血药是降低TXA2的有效成分。     

补阳还五汤对全脑缺血再灌大鼠皮层神经元NR1的影响

目的：研究补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制。方法：将66只SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组（补阳还五汤顸干预）,模型组和药物组再分别设置2、24h2个观察时间点。连续给药5d后．采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌后2、24h采用免疫组化法检测各组大鼠皮质神经细胞NMDA受体（N—methyl—D—aspartic acid receptor）亚单位NR1的表达水平。结果：与正常组比较,模型组2、24h2个不同时间点,NR1的表达水平显著升高（P〈0．05）;与模型组比较,药物组再灌注后2、24h2个不同时间点,NR1表达水平显著降低（P〈0．01）。结论：补阳还五汤预干预对全脑缺血再灌注模型大鼠大脑皮层神经元NR1表达水平的增高有调低作用。     

补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡和Caspase-3基因表达的影响

目的:研究补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡和Caspase-3基因表达的影响。方法:成年健康雌性Wistar大鼠40只,随机选取10只作为假手术组,其余应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞-再灌注模型,将造模成功的20只大鼠随机分为阴性对照组,补阳还五汤治疗组(补阳还五汤组),每组10只。补阳还五汤组经腹腔注射补阳还五汤(用量为每公斤体重16 g)治疗,阴性对照组和假手术组给予等量的0.1mol/L PBS缓冲液腹腔注射。原位末端标记(TUNEL)技术检测神经细胞凋亡,免疫组化技术和酶联免疫(ELISA)技术检测Caspase-3的表达。结果:假手术组大鼠皮质、纹状体、海马区脑组织凋亡细胞数量较少,呈散在分布,而Caspase-3表达微弱。阴性对照组大鼠脑组织各区凋亡细胞数量较假手术组显著增多(P0.05),Caspase-3表达增强,显著高于假手术组(P0.05)。补阳还五汤组各区脑组织TUNEL阳性细胞数量及Caspase-3表达均明显低于阴性对照组(P0.05)。结论:补阳还五汤可下调Caspase-3表达而抑制大鼠脑缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡。     

补阳还五汤对大鼠全血比黏度、TXB2、LPO及SOD的影响

目的 探讨补阳还五汤用于治疗贫腔瘀血综合征（PCS）的作用机制。方法 选用雌性Wistar大鼠30只，分为3组：正常对照组，用等量的生理盐水灌胃；模型组，按文献方法处理；补汤组，给予等量的补汤煎液灌胃，其他处理同模型组。所有受试组动物于第15d处死，颈动脉采血，检测全血比黏度、TXB2、LPO及SOD。结果 模型组大鼠全血比黏度、血浆中TXB2、血清LPO水平明显高于正常对照组（P＜0．01），而SOD水平则明显低于对照组（P＜0．01）。补汤组全血比黏度、血浆TXB2、血清LPO较模型组有显著降低（P＜0．01），红细胞SOD高于模型组（P＜0．01）。结论 补阳还五汤治疗“气虚血瘀”的机制可能与提高SOD的活性，抑制体内LPO生成减少自由基反应对血管内皮的损伤，从而减少血小板聚集释放反应有关。     

补阳还五汤对全脑缺血再灌注不同时点大鼠皮质神经细胞谷氨酸受体2表达的影响

目的 研究补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制.方法 将SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组(补阳还五汤预干预),模型组和药物组再分别设置2、12、24、48、72 h五个观察时间点.连续给药5 d后,采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌注后2、12、24、48、72 h分别检测各组大鼠皮质神经细胞谷氨酸受体2(glutamate receptor 2,GluR2)的表达水平.结果 与正常组比较,再灌注各时点模型组大鼠大脑皮质神经细胞GluR2表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,再灌注各时点药物组GluR2表达水平显著升高(P<0.01);与再灌注2 h比较,再灌注12、24、48、72 h药物组GluR2表达水平显著升高(P<0.01).结论 补阳还五汤可预防大鼠脑缺血再灌注引起的GluR2表达减少,且在再灌注2 h后这种抑制作用更强.     

补阳还五汤对全脑缺血再灌注不同时点大鼠皮质神经细胞谷氨酸受体2表达的影响

目的研究补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制。方法将SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组(补阳还五汤预干预),模型组和药物组再分别设置2、12、24、48、72h五个观察时间点。连续给药5d后,采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌注后2、12、24、48、72h分别检测各组大鼠皮质神经细胞谷氨酸受体2(glutamate receptor 2,GluR2)的表达水平。结果与正常组比较,再灌注各时点模型组大鼠大脑皮质神经细胞GluR2表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,再灌注各时点药物组GluR2表达水平显著升高(P<0.01);与再灌注2h比较,再灌注12、24、48、72h药物组GluR2表达水平显著升高(P<0.01)。结论补阳还五汤可预防大鼠脑缺血再灌注引起的GluR2表达减少,且在再灌注2h后这种抑制作用更强。     

针刺关元对寒凝证类痛经大鼠三阴交穴区温度及TXB2／6-keto-PGF1a比值的影响

目的观察针刺关元穴对寒凝证类痛经大鼠三阴交穴区温度(双侧)的影响并探讨其与TXB_2/6-keto-PGF_(1a)有关的机制。方法将大鼠随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组(简称模型组)、针刺关元组。采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇和缩宫素注射法造模,用红外热成像方法检测各组大鼠左右两侧三阴交穴区0、5、10、20、30、40、50、60 min各时间点温度,同时用ELISA法测定血浆TXB_2和6-keto-PGF_(1a)含量。结果盐水组在基础温度、0~60 min各个时间点,大鼠左右三阴交穴区温度平衡(P0.05);模型组在5~60 min各个时间点,大鼠左右三阴交穴区温度失衡(P0.05,P0.01);针刺关元组在基础温度、0~30 min大鼠左右三阴交穴区温度失衡(P0.05),40~60 min逐渐趋近平衡(P0.05)。与盐水组比较,模型组TXB_2/6-keto-PGF_(1a)比值明显升高(P0.05);与模型组比较,针刺关元组TXB_2/6-keto-PGF_(1a)比值明显降低(P0.05)。结论寒凝证类痛经大鼠左右三阴交穴区温度失衡;针刺关元穴能调节其失衡状态,且调节需要一定的时间过程,在针刺结束后10~40 min作用显著,其内在机制与针刺调节体内血管舒缩物质TXB_2/6-ketoPGF_(1a)比值的失衡有关。     

补阳还五汤及其有效部位组方对沙鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸和超微结构的

比较研究补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血再灌注后脑组织兴奋性氨基酸（EAA）含量和海马CA1区超微结构的影响。采用沙鼠脑缺血模型,缺血15min后进行再灌注,于再灌注不同时间取脑组织测定。结果：（1）在再灌注48h,补阳还五汤及其有效部位方可使脑组织谷氨酸（Glu)含量降低,有效部位方还可使天冬氨酸（Asp)含量降低;（2）在再灌注后5d,补阳还五汤及其有效部位方均可对抗海马CA1区神经元变性死亡,对CA1区超微病理改变有改善作用,两者改善程度相近;（3）在再灌注后5d,补阳还五汤及其有效部位方均减少海马CA1区神经元凋亡发生的例数,具有抗脑缺血后神经元凋亡的作用,两者作用相近。认为补阳还五汤及其有效部位方均具有抗缺血性脑损伤的作用,它可对抗EAA的兴奋毒性,改善神经元的超微病理结构,对抗神经元凋亡。     

补阳还五汤对大鼠坐骨神经损伤的修复作用

目的 :研究补阳还五汤(BYHWD)对大鼠坐骨神经夹伤损伤的修复作用。方法 :SD雄性大鼠50只,随机分为BYHWD高、中、低剂量组(剂量分别为25.92、12.96、6.48 g生药/kg)、弥可保组(剂量为625μg/kg)、生理盐水阴性对照组。行大鼠坐骨神经夹伤5 mm术,术后每日灌胃给药,持续4周。于术后1、2、3、4周行足迹实验,测定展趾功能,术后4周行电生理检测,测定复合肌动作电位和神经干动作电位,组织形态学分析,运用光镜和电镜组织学方法对手术侧再生神经进行形态学和免疫组织化学检测,利用图像分析系统进行计量分析,观察BYHWD对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。结果 :与生理盐水对照组相比,BYHWD组展趾功能、复合肌动作电位和神经干动作电位波幅及恢复率、板层数显著高于生理盐水组。结论 :BYHWD可促进大鼠坐骨神经夹伤后神经功能的恢复,且存在剂量-效应关系。     

补阳还五汤对小鼠脑缺血再灌注后海马神经元的保护作用

目的：观察补阳还五汤对小鼠脑缺血再灌注后海马神经元的保护作用。方法：将24只昆明小鼠随机分为假手术组、缺血损伤组和补阳还五汤组。通过阻断双侧颈总动脉血流制作小鼠脑缺血模型,缺血20min再灌注7d后采用病理学方法观察小鼠海马CA1区组织学分级,并计数1mm区段内正常形态的锥体神经元数目——神经元密度。结果：补阳还五汤能够明显降低小鼠脑缺血再灌注后海马CA1区组织学分级（与缺血损伤组相比P〈0．05）,提高神经元密度（与缺血损伤组相比P〈0.01）。结论：补阳还五汤对小鼠脑缺血再灌注引起的海马神经元损伤具有明显的预防和保护作用,其机理有特进一步研究。