湛江地区淋球菌流行株质粒谱型的研究

为探讨淋球菌耐药谱与质粒谱之间的相互关系,对１９９８年－１９９９年广东省湛江地区分离鉴定出的９８株淋球菌,以碱裂解法进行质粒的抽提,并分析质粒谱型的分布情况。结果显示９８株淋球菌流行株,检出质粒的有９０株,占９１．８４％;质粒谱型１２种,以７．４ｋｂ＋４．２ｋｂ,３９．５ｋｂ＋７．４ｋｂ＋４．２ｋｂ为主,占３８．７６％,从而揭示湛江地区淋球菌流行株质粒的分布现状,为该地区淋病的分子流行病学研究打下     

淋球菌耐药现状及耐药质粒研究进展

淋球菌引起的淋病是我国目前流行的性传播疾病中发病率最高的一种。随着淋球菌对传统的抗生素如青霉素、四环素耐药的增强，探索更有效的抗生素以指导临床治疗显得十分重要。近年来，氟喹诺酮类和头孢菌素类是治疗淋病最有效的抗生素，但目前已出现了针对这些抗生素的耐药菌株，且随着抗生素的广泛应用有日渐增加的趋势，淋球菌的耐药性与耐药质粒的关系比较密切，为此，本文就淋球菌耐药现状、耐药质粒及耐药机制的研究进展综述如下。     

淋球菌抗生素耐药谱和质粒图谱研究

目的 为了解广州地区淋球菌的性素耐药谱和质粒谱。方法 采用琼脂稀释法测定了５种抗生素对８９株淋球菌的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）和碱裂解法分析１０６株菌的质粒衅谱。结果 ２株为产β－内酰胺酶菌株（ＰＰＮＧ）,３株为质粒介导的高度耐四环素菌株９ＴＲＮＧ０;环丙沙星耐药率较高（６２．９％）,青霉素次之（５９．５％）,头孢三嗪和壮观霉素未发现耐药菌株。质粒检出率为９０．６％,其中２．６Ｍｄ隐蔽质粒携带率为８５．６％,４．５ＭｄＲ质粒为６７．８％,２４．５Ｍｄ结合质粒为３３．８％。质粒谱型以２．６Ｍｄ＋４．５Ｍｄ和２．６Ｍｄ＋４．５＋ｉ２４．５Ｍｄ多见,分别为３７．７％和２５．４％。结论 表明了广州地区淋球菌抗生素耐药谱和质粒图谱,有助于淋病的治疗和防治。     

贵阳市淋球菌耐药质粒及其与淋病流行的关系

目的：为了了解贵阳市淋球菌耐药质粒的大致范围及淋球菌耐药质粒在细菌间的流向。方法：采用改良的Jo.Annes法对20株淋球菌临床分离株进行质粒提取,测定其分子量的大小;从中筛选出产青霉素酶淋球菌菌株（PPNG）,分别与大肠杆菌和淋球菌青霉素敏感菌株进行接合和转化试验。结果：20株淋球菌临床分离株检出7株PP－NG菌株,淋球菌4.5Md质粒的携带为40％,3.7Md质粒的携带率为25％。3株带有24.5Md质粒的PPNG菌株,其耐药（R）质粒均可通过接合而传递给大肠杆菌和淋球菌敏感菌株;2株PPNG菌株可通过转化将R质粒传递给大肠杆菌和淋球菌敏感菌株。结论：贵阳市流行的淋球菌中有2种耐药质粒存在,以4.5Md质粒为主;PPNG菌株可通过接合和转化的传递方式,将耐药质粒在淋球菌青霉素敏感菌株和大肠杆菌中传递,与淋病的流行有密切的关系。     

阳江地区淋球菌质粒谱与耐药性关系研究

目的 研究阳江地区淋球菌流行株质粒谱与耐药性的关系。方法 应用碱裂解和溶菌酶双重处理100株淋球菌流行株，进行质粒抽提及质粒谱分型研究。利用K-B法测定淋球菌流行株对10种抗生素的敏感性。结果 检出4种不同分子量的质粒，其中分子量为4．2kb、7．4kb和39．5kb的质粒检出率较高，分别为66．00％、58．00％和41．00％。质粒谱型共12型，以7．4kb 4．2kb、39．5kb 7．4kb 4．2kb、39．5kb 4．2kb3型为主，分别占21．00％、17．00％和15．00％；耐药谱型42型，以CPLX^R、TCR CPLX^R、CPLX^R CP^R菌株为主，分别占12．00％，、12．00％和7．00％。将3型主要的耐药谱与相应的质粒谱进行比较。结果 CPLX^R菌株以39．5kb 4．2kb质粒谱为主；TC^R CPLX^R菌株以7．4kb 4．2kb质粒谱为主；CPLX^R CP^R菌株以7．4kb和39．5kb 7．4kb 4．2kb质粒谱为主。结论 阳江地区淋球菌流行株的质粒谱与其相应的耐药谱之间有一定的关系。     

广东省江门地区淋球菌分离株抗生素耐药性及其质粒图谱结果分析

目的:了解江门地区淋球菌对抗生素耐药性及其质粒图谱.方法:采用纸片酸度法检测产β-内酰胺酶菌株(PPNG).采用wHO推荐琼脂稀释法测定5种抗生素(青霉素、四环素、环丙沙星、头孢三嗪、壮观霉素)对菌株药物敏感性试验.用碱裂解法分析菌株的质粒图谱.结果:检测87株菌耐药性和105株菌质粒图谱,PPNG为4.6%,质粒介导的高度耐四环素菌株(TRNG)2.3%,青霉素耐药41.4%、环丙沙星耐药率62.1%;壮观霉素敏感100%,头孢三嗪敏感98.9%.质粒菌株谱检出率83%,其中以2.6 MD,4.5 24.5 MD和2.6 4.5 24.5 MD谱型为主,分别为19%,33.3%和15.2%.结论:明确了江门地区流行菌株耐药情况及其质粒图谱,有助于临床对淋病的防治.     

淋球菌耐药性质粒的转移性研究

目的研究淋病奈瑟菌(简称淋球菌)所携带的质粒与耐药性之间的关系。方法对淋球菌耐药株所携带的质粒进行质粒消除实验,并以此消除的质粒转化感受态的大肠杆菌,比较耐药质粒消除和转化前后菌株的耐药性变化情况。结果在亚致死浓度的十二烷基磺酸钠(SDS)作用下,淋球菌的耐药质粒可以被部分消除(仍然携带42.5kb的质粒)或者完全消除,且消除子在消除前后对抗生素的耐药性发生不同程度的改变;而耐药质粒在不同种属的菌株之间可进行传递,淋球菌的耐药质粒可以传递给感受态的大肠杆菌,筛选出的转化子分别携带含有tetM基因的42.5kb四环素耐药质粒和携带含有TEM-1基因的7.4kb青霉素耐药质粒,转化子可产生对相应抗生素的耐药性。结论淋球菌耐药质粒在介导菌株对抗生素的耐药性起着重要作用,并且可以不同菌株间进行传递。     

淋球菌质粒研究

本文对12株奈瑟淋球菌的质粒携带情况进行了研究。发现10株淋球菌携有2.6MDa(百万道尔顿)隐蔽性质粒,其中,同时带有4.5MDa耐药性质粒者6株,带有3.7MDa耐药性质粒者4株,有2株还同时带有24.5MDa结合性质粒。另2株淋球菌未检出质粒。     

威海地区淋球菌流行株质粒谱研究

目的:研究威海地区淋病奈瑟菌(简称淋球菌)耐药质粒的传播情况。方法:收集威海地区2000~2003年共82株淋球菌,采用碱裂解法提取质粒,以λDNA/HindIII作为分子质量参照,以标准分子质量的电泳结果为标准系统,以其相对迁移率为自变量,其分子质量对数值为因变量建立回归方程,计算样品所带核酸的分子量。结果:82株淋球菌中检出11株PPNG菌株,阳性率为13.41%。所有PPNG菌株均携带4.5 Kb的“亚洲型”质粒。对由质粒介导的四环素高度耐药株(TRNG)(MIC≥16μg/mL)为2株,加上中度耐药株53株(MIC≥8μg/mL)。82株淋球菌中有74株携带质粒,质粒总检出率为90.2%。共检出4种分子质量的质粒,分别为2.6、4.5、24.5和25.2 Kb,其中2.6 Kb质粒携带为49株,携带率为66.22%,携带4.5 Kb者59株,其中53株(89.83%)对青霉素耐药。携带25.2 Kb质粒的12株对四环素高度耐药。质粒谱共有7种,分别为4.5、2.6、(4.5 2.6)、(24.5 4.5)、(24.5 4.5 2.6)(、25.2 2.6)Kb及非质粒型,其中以(4.5 2.6)Kb和(24.5 4.5 2.6)Kb质粒谱型为主,分别占24.32%和14.86%。结论:质粒介导性耐药(包括PPNG和TRNG)是威海地区淋球菌产生耐药的主要原因。     

汕头市淋球菌耐药菌株和质粒图谱测定

目的：了解本地区淋球菌耐药菌株的流行情况。方法：用琼脂稀释法测定菌株对抗菌剂敏感性。采用纸片酸度法检测产β－内酰胺酶菌株（PPNG）。用碱裂解法检测质粒。结果：检测了173株淋球菌。青霉素、环丙沙星和四环素耐药率分别为87．9％、90．2％和66．5％，PPNG检出率4％，质粒检出率90．2％。质粒介导的高度耐四环素菌（TRNG）11．5％。结论：青霉素、四环素、环丙沙星治疗淋病的作用已很差。淋球菌对大观霉素和头孢曲松钠较敏感。     

济南地区淋球菌耐药性检测及质粒谱型分析

目的了解济南地区淋球菌对抗生素的耐药性和质粒图谱。方法用琼脂稀释法测定4种抗生素对148株淋球菌的最小抑菌浓度(MIC)及其中70株淋球菌的质粒图谱。结果检出PPNG占28.38%,TRNG占18.92%,环丙沙星耐药达98.99%,头孢曲松、大观霉素未发现耐药菌株。质粒谱型主要有4.2kb+5.4kb(38.58%),4.2kb+7.4kb(20.00%),4.2kb+5.4kb+39.5kb(15.71%)。结论济南地区淋球菌对抗生素耐药性维持在较高水平,头孢曲松、大观霉素是治疗首选;质粒图谱显示出地域特殊性。     

成都地区淋病奈瑟菌耐药谱质粒谱相互关系研究

目的为了探讨淋病奈瑟菌耐药谱与质粒谱之间的相互关系。方法我们对本地区１９９１年、１９９６年各５０株标本进行了耐药谱、质粒谱分析。以琼脂扩散法测定其１２种抗生素敏感性;碱裂解加溶菌酶法进行质粒抽提。结果１９９１年分离的标本以同时耐２种抗生素者为主,耐药谱型２４种,质粒谱型５种。１９９６年分离的标本以同时耐３或４种抗生素者为主,耐药谱型３４种,质粒谱型１０种。结论不同时期分离的标本耐药谱、质粒谱变化较大。同一时期分离的标本尽管耐药谱型较分散,但质粒谱型相对稳定。说明本地区淋病奈瑟菌耐药菌株的流行主要是染色体突变所致。     

淋球菌对10种抗生素的药敏研究

用琼脂对倍稀释法检测１１７株淋球菌对１０种抗生素的敏感性，用头孢硝噻吩法检测淋球菌的β－内酰胺酶，结果显示１１７株淋球菌中没有１株产酶株，然而淋球菌对青霉素的敏感性只有４０．１７％，淋球菌对头孢三嗪，壮观霉素，阿齐霉素，美满霉素１００％，对氟哌酸，氟嗪酸的敏感率分别为９２．３％，９１．４６％，出现了对氟哌酸，氟嗪酸耐药的菌株，并发现淋球菌对氟哌酸和氟嗪酸存在交叉耐药。     

淋球菌营养型与耐药性及质粒的关系

目的 为了解淋球菌的营养型、耐药性及质粒之间的关系.方法 对重庆市收集的83株淋球菌进行营养型、抗生素敏感性和质粒检测.结果 83株菌共分为8个营养型,以Pro-型(51-8%)和Proto型(18-1%)为主.利用琼脂稀释法检测菌株对青霉素、四环素和壮观霉素的敏感性.青霉素耐药株占15.6%,四环素耐药株占70%,壮观霉素耐药株占1-2%.通过快速碱裂解法对其中的44株菌进行质粒检测,70%菌株含24-5Md质粒,80%含2.6Md质粒,66%同时含24-5Md和2.6Md质粒,16%未查到质粒.并发现Pro^-型菌株中青霉素耐药株高于其它营养型(P<0.05),且含24-5Md质粒菌也显著高于其它营养型(P<0.05).含24-5Md+2.6Md质粒菌株中四环素耐药株更常见(P<0.05).检测到1株产青霉素酶淋球菌(PPNG),经质粒消除试验证实其耐药性由4-4Md质粒介导.结论 本研究不仅表明了重庆地区淋球菌营养型、耐药性及质粒的分布状况,而且揭示了它们之间存在一定关系.这将对该地区淋球菌的流行病学调查和淋病防治提供帮助.     

营养分型法对淋球菌流行菌株的监测

对１９９３～１９９４年南京地区分离的淋球菌菌株进行营养分型研究，发现Ｐｒｏ－和Ｐｒｏｔｏ占绝大多数，达９５％以上。营养型的构成与１９８９～１９９０年分离的菌株是一致的。这表明当前本地流行株的特点与几年前相同。     

脉冲场凝胶电泳及随机扩增多态性DNA对淋球菌的基因分型

目的　评价脉冲场凝胶电泳限制性内切酶分析 (PFGE REA)及随机扩增多态性DNA (RAPD )分析对淋球菌分离株进行基因分型的能力。方法　 3 6株淋球菌分离株基因组DNA以SpeⅠ酶切及脉冲场凝胶电泳。并以随机引物OPA 0 3对 3 6株菌进行RAPD分析。结果　PFGE REA在 3 6株菌中产生 1 2～ 1 9个DNA片段 ( 5～ 6 0 0kb) ,区分出 2 0种PFGE型。以OPA 0 3扩增淋球菌DNA ,获得 1 5个不同的DNA片段( 2 80～ 1 90 0bp)。每株菌有 3～ 9个片段。 3 6株菌呈现 1 8种RAPD型。研究表明 ,PFGE REA与RAPD可区分属相同营养型及抗生素谱的菌株 ,二种方法分型结果总的趋向一致。不同地区的分离株甚至同一地区的某些分离株存在相当大的DNA多态性。具相同或十分相似基因型的菌株为某一特定地区所特有。认为PFGE REA及RAPD是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的分子技术 ,有助于了解菌株来源、菌株间的克隆相关性及抗生素耐药性的传播。与PFGE REA相比 ,RAPD分析相对快速、简便和经济     

中药石榴皮对淋球菌感染的体内外抑制作用

对石榴皮抑制淋球菌感染进行体内外实验研究。结果显示，石榴皮水提液体外对多株产青霉素酶和非产青霉素酶的淋球菌有明显抑制作用。作为一种阴道栓剂，对３４例女性淋病患者治疗观察，仅１例在转种培养上有淋球菌生长。提示石榴皮阴道栓剂是一种有效的抗淋球菌感染药物。