乙型肝炎病毒前C区及BCP区变异的临床意义

乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的全球性疾病.据报道,目前全球慢性HBV感染者达3.5亿人,大约每年100万的患者死于肝衰竭、肝硬化,并有可能进展为肝细胞癌[1].机体感染HBV后临床表现各不相同,至今仍缺乏有效控制,造成这一局面的原因很多,其中HBV基因组变异可能是重要原因.本文就乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子(BCP)区突变与临床的关系做一综述.     

PCR检测白细胞中乙型肝炎病毒前C区1896点突变

我们用3'端特异性引物聚合酶链反应(3'BS-PCR)分析原理,将慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清及白细胞内的乙肝病毒(HBV)前C区1896位点突变的突变型及野生型分离,探讨HBV有意义突变中,最常见的1896位点突变在外周血白细胞内的存在状态,结合临床进一步阐明乙肝的发病机制.     

乙型肝炎病毒前C／C基因变异的临床意义

乙型肝炎病毒（HBV）感染后可发生广泛的疾病谱，与宿主的免疫应答、也与病毒的变异有关。宿主的免疫应答是年龄、性别、遗传素质、营养状况等的综合反映；病毒变异是在长期受宿主的免疫压力后发生。与病变相关的HBV变异的热点，有前C区的A83和C基因的C289。前C区A83点突变使AA     

乙型肝炎病毒基因分型与C基因启动子变异临床意义研究

众所周之,HBeAg由前C／C基因表达,并受到C基因启动子(core promoter,CP)调控。CP和前C基因变异均能造成HBeAg表达下降或停止。本研究通过测序法检测基因型及CP基因序列,对基因型与C基因启动子变异的相关性进行探讨。     

乙型肝炎病毒前C区终28变异与临床

乙型肝炎病毒(H BV)感染在临床可产生不同的肝脏疾病谱,发生轻重悬殊的肝脏疾病。宿主对H BV抗原的免疫应答是肝细胞损害的可能机制,但宿主应答不同的原因迄今未充分阐明。近年分子病毒学的进展,发现H BV变异与临床关系密切,其中有关H BV前C区终28变异研究最多。1989年英国学者Carm an首次在地中海及远东地区国家,发现较严重的慢性活动性肝炎和重症肝炎患者中存在终28变异,在病人血中H BeAg阴性但H BV-DNA( ),序列分析后发现在前C区1896位点有G→A变异,使密码28由色氨酸(TGG)变成终止密码(TAG),导致H BeAg合成终止,以后有许多…     

HBV-前C区基因变异与乙肝病毒复制的相关性

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异与乙肝病毒复制的相关性.方法 选取38例慢性轻度,57例慢性中度,29例慢性重度的乙型肝炎患者为研究对象.采用突变特异PCR技术检测HBV前C基因nt1896位点突变情况,并对血清中HBVDNA进行测序.同时检测乙型肝炎病毒HBeAg/抗-Hbe、HBVDNA定量、肝纤维化指标.结果 (1)抗Hbe阳性者在单纯变异株感染的慢性乙型肝炎患者中所占的比例(84.61%)高于单纯野生株感染者(24.32%).(2)随着变异株感染率的增加,HBVDNA的含量增高.(3)随着变异株感染率增加,肝脏纤维化分期的逐渐加重.结论 前C区G1896A变异与乙肝病毒的复制程度相关.     

乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子区变异的临床研究

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异、基本核心启动子(BCP)A 1762T/G1764A变异及二者联合变异在HBeAg阴性和HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者中的变异特点及与病情进展的关系.方法 将120例HBV DNA阳性CHB患者分为A、B两组,A组为HBeAg阴性CHB患者60例,B组为HBeAg阳性CHB患者60例,用荧光定量PCR检测A、B两组HBV DNA水平,用直接测序法检测A、B两组前C区G1896A及BCP区A1762T/G1764A变异的发生率.根据前C区及BCP区测序结果又分为变异组和无变异组,分析前C区及BCP区变异发生与病情进展的关系.结果 120例HBV DNA阳性CHB患者中A组检出变异株47例,B组检出变异株15例,A组和B组CHB患者中G1896A变异检出率分别为40.0％和10.0％ (x2=14.40,P=0.000);A1762T/G 1764A变异检出率分别为38.3％和15.0％(x2=8.35,P=0.003);联合变异的检出率分别为21.7％和0％(x2=14.58,P=0.000).120例CHB患者中G1896A、A1762/G1764A、联合变异的变异组HBV DNA含量明显高于无变异组HBV DNA含量,P＜0.05,差异有统计学意义.HBeAg阴性CHB患者轻、中、重度不同病情中,G1896A变异、A1762T/G1764A变异及联合变异的变异组与无变异组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1 )HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异是导致HBeAg阴性、HBV DNA持续阳性的主要机制之一.(2) HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异可能加重HBeAg阴性CHB患者病情的发展.     

山西地区乙型肝炎病毒BCP区和前C区突变与肝细胞癌进展研究

近年来,经过大量流行病学调查分析、实验室及生态学研究,乙型肝炎病毒（HBV）已被世界卫生组织（WTO）两次宣称（1983,1987）为引起肝硬变及肝细胞癌（HCC）的重要原因,即认为HBV DNA在肝细胞中整合可导致癌基因激活和抑癌基因失活,但其具体致癌机制仍未充分证实。     

乙肝病毒前C区A1896变异与机体细胞免疫功能的关系

目的：探讨慢性乙型肝炎患者乙肝病毒(HBV)前C区A1896变异与机体细胞免疫水平的关系。方法：对91例慢性乙肝患者通过流式细胞分析技术(FCM)检测外周血T淋巴细胞亚群，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清细胞因子(IFN—γ、TNF—α和IL—2)水平，采用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA C基因区片段，并对PCR产物直接测序。结果：发生A1896变异者49例，变异率为53．85％，随病情加重A1896变异率逐渐增加，以重型肝炎组最高；变异株组IFN—γ、TNF—α水平明显增高，CD8^ 细胞相对数逐渐下降，CD4^ ／CD8^ 比值逐渐升高，差别有统计学意义，而CD4^ 相对数及IL—2水平比较差别无统计学意义。结论：A1896变异普遍存在于慢性乙型肝炎患者中，且随病情加重变异株感染率逐渐增加，单纯变异株的比例也随之增高；A1896变异株可能通过改变HBcAg的表达及分布，激活大量的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)释放细胞因子，在肝脏局部发挥免疫效应提高对宿主的杀伤力。     

微流芯片检测乙型肝炎病毒前核心区及基本核心启动子变异

乙型肝炎病毒(HBV)可以变异,其基因组存在多个变异位点[1]。HBV变异常出现在某些特定位点(热点变异),如前核心区(前C区,nt1896)及启动子(BCP,nt1762/1764)变异。同一患者可同时存在野生株和变异株,其比例可随时间而变     

乙型肝炎病毒前C区基因变异及与干扰素治疗的关系

目的　探讨乙型肝炎病毒前 C区基因变异对慢性乙型肝炎患者的影响及前 C区基因变异与 α-干扰素治疗的关系。方法　采用多聚酶链反应银染技术检测 3 2例 HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者用干扰素治疗前后的 HBV前 C区基因变异。结果　在治疗前有前 C区突变株感染 8例 ,突变株检出率为 2 5 % ;在治疗后有前 C区突变株感染 9例 ,突变株检出率为 2 8.1%。HBV DNA阴转 17例 ,阴转率为 5 3 .1%。结论　 HBV前 C区基因变异不影响对干扰素的应答     

乙型肝炎病毒C基因启动子热点变异的检测及分析

目的　探讨乙型肝炎病毒C基因启动子 (CP)热点变异的临床意义。方法　应用克隆测序的方法检测 2 0例HBV感染者HBVCP序列 ,并结合临床进行分析。结果　 10例HBeAg(+)患者中 ,CP的T176 2、A176 4联合变异有 2例 (2 0 % ) ;10例HBeAg(- )患者中T176 2、A176 4联合变异有 7例 (70 % ) ,χ2 =6 73,P <0 0 5 ,有显著性差异。结论　T176 2、A176 4联合变异多见于HBeAg(- )的慢性乙型肝炎患者。     

乙型肝炎前C区终止变异及C基因启动子双变异的临床意义

本收集HBV前C区终止变异(前C变异)及C基因启动子(BCP)双变异(BCP变异)乙型肝炎患的资料,就这两种热点变异的临床特征作一分析。     

乙型肝炎病毒携带产妇前C区和核心启动子区热点变异及其与宫内感染的关系

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)携带产妇前C区和核心启动子(CP)区热点变异情况及与宫内感染的关系.方法 采用HBV核酸扩增荧光定量检测试剂盒抽提99对无症状乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性携带临产孕妇及其新生儿血清HBV DNA,EIA法检测血清HBsAg、HBeAg,半巢式PCR法扩增产妇HBV前C区、CP区核苷酸片断,ABI3730型DNA自动荧光测序仪对PCR产物直接测序.结果 82例(单阳性52例,双阳性30例)孕妇HBV前C区和CP区核苷酸片断扩增测序成功.无症状HBV携带单阳性孕妇中1896G→A变异的检出率为21.2％(11/52,仅测到1例双阳性孕妇存在1896G→A变异);1899G→A变异仅发生在1例单阳性孕妇,且与1896G→A变异连锁出现.1762A→T/1764C →A变异总是连锁出现,且仅发生于单阳性孕妇,单阳性孕妇中双变异的检出率为17.3％(9/52).1896G→A变异和无该点变异孕妇所生新生儿宫内感染率分别为25.0％(3/12)和37.1％(26/70) (P＞0.05);1762A→T/1764GA变异和无该点变异的单阳性孕妇所生新生儿宫内感染率分别为22.2％(2/9)和37.2％(16/43)(P＞0.05).结论 HBV前C区和CP区1896G→A及1762A→T/1764G →A热点变异在无症状HBV携带单阳性孕妇中有较高的检出率,而在HBsAg、HBeAg双阳性孕妇中的检出率较低.HBV前C区和C启动子区热点变异对宫内感染率无显著影响.     

乙型肝炎病毒C基因启动子区及前C区突变与乙型肝炎病情的关系

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(BCP)双突变及前C区nt1896位点突变与乙型肝炎临床表现及e抗原(HBeAg)表型的关系。方法采用巢式聚合酶链反应(PCR)扩增nt1660~1935的HBVDNA片段及PCR产物直接测序的方法检测BCP区及前C区基因的变异情况。结果130例经证实为HBVDNA阳性的急慢性肝炎患者中共有75例BCP区nt1762、nt1764双突变,HBeAg阳性组BCP突变者32例(58.2%),而HBeAg阴性组43例(57.3%)。检出前C区nt1896突变者20例,其中慢性肝炎10例(12.8%)、重型肝炎2例(25.0%)、肝硬化8例(22.2%);nt1896突变者在HBeAg阳性组3例(5.5%),HBeAg阴性组17例(22.7%),两组比较差异有统计学意义。nt1896突变组丙氨酸转氨酶(ALT)及HBV DNA水平较无突变组差异均有统计学意义。结论BCP双突变及前C nt1896均与肝炎的慢性化、重型化及肝硬化的发生密切相关,前者对HBeAg的表达及HBV-DNA水平并无明显影响;后者影响HBeAg的表达,并且增强病毒复制水平。     

抗HBe阳性乙型肝炎和无症状携带者的HBVC基因启动子和前C基因变异

目的 研究抗HBe阳性乙型肝炎病人和抗HBe阳性无症状携带(AsC)的乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(CP)和前C基因变异。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测34例抗HBe阳性和55例抗HBe阴性乙型肝炎病人及28例抗HBe阳性AsC的血清HBVCP和前C基因序列。结果 (1)抗HBe阳性肝炎组的前C终止变异(nt1896G→A)的发生率显高于抗HBe阴性肝炎组(61．8％和14．5％);而CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)则在两组中无明显差异(50．0％和45．5％);(2)同抗HBe阳性AsC组比较,抗HBe阳性肝炎组的HBVDNA定量呈高水平,前C终止变异的发生率也显增高(61．8％和28．6％);(3)同抗HBe阳性慢性乙型肝炎(CHB)组比较,抗HBe阳性重型乙型肝炎(CSH)病人的前C终止变异发生率和CP双变异发生率无明显差异(70．0％和58．3％,50．0％和50．0％),HBV DNA定量也无明显差异,而CPnt 1752A→G变异发生率则显增高(80．0％和29．2％)。结论 前C终止变异、nt1846突变和病毒复制可能与抗HBe阳性乙型肝炎发病有关;而Cpnt1752突变则可能与抗HBe阳性CSH发病有关。     

萍乡地区HBV前C区和BCP区基因突变研究

乙型肝炎病毒是一个双链DNA病毒.HBV感染能导致急、慢性的肝病,其中全球慢性乙型肝炎(CHB)患者超过3.6亿.每年由于HBV慢性感染引起的肝硬化、肝细胞癌死亡患者超过47万人[1].而由于HBV病毒的复制过程缺乏校对机制,在慢性感染的过程中发生基因突变的几率很高,相关研究最多的HBV突变株主要有:一是发生在翻译水平的前C突变(G1896A):二是发生在核心启动子区(BCP区),即A1762T和G1764A的联合突变;三是发生在HBV DNA聚合酶(反转录酶)区的变异包括P区528、552位点的突变.我们采用生物芯片技术检测,对113例乙型病人HBV前C区和BCP区基因多态性进行分析,以探讨其临床意义,现报告如下:     

HBeAg/HBeAb双阳性者血清病毒C基因启动子热点变异分析

目的　了解乙型肝炎患者 HBe Ag和 HBe Ab双阳性状态下 C基因启动子区 ( BCP)变异情况。方法　采用时间分辨荧光免疫分析方法定量检测乙型肝炎“二对半”,对 HBe Ag/ HBe Ab双阳性标本采用巢式聚合酶链反应扩增目的 DNA片段 ,并对阳性的 PCR产物直接标记测序 ,测序结果和 Grenbank中登录的标准序列相比较。结果　对 17例 HBe Ag和 HBe Ab双阳性患者血清中 HBV DNA进行了检测 ,阳性 13例 ,测序结果显示 ,13例 HBV DNA阳性者均存在 T1762和 A1764的突变。结论　在乙型肝炎 HBe转换过程中均伴有 C基因启动子区 T1762与 A1764变异     

石家庄地区乙型肝炎病毒基因分型及P区耐药基因突变分析

目的:分析石家庄地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布以及核苷(酸)类似物耐药基因突变状况。 方法:对2011年1月-2013年12月在石家庄市五医院就诊的遵医嘱口服核苷(酸)类似物6个月以上的354例慢性乙型肝炎患者进行HBV P区基因序列测定。结果:HBV B型为17例(4.8%),C型为337例(95.2%);共检出突变182例,在B型中检测出有10例突变(58.8%),在C型中检测出有172例突变(51.1%),两组间突变率无显著差别;182例HBV P区存在突变的病例中以rtL180M+rtM204I/V/S联合突变最多,占突变比例24.2%;其次是rtM204I/V/S单位点突变,占突变比例20.3%,这两种突变模式的比例达到44.5%;第3位是rtL180M+rtM204I/V/S 再加上其他一个或多个位点的突变,占突变比例12.6%。结论:石家庄地区HBV基因型以C型为主;核苷(酸)类似物耐药基因突变以拉米夫定和替比夫定耐药最常见。     

乙型肝炎病毒C基因启动子和前C基因变异对HBeAg表达及病情的影响

目的研究乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子 (CP)和前C基因变异对HBeAg表达和病情的影响。方法通过DNA扩增、测序检测乙型肝炎患者的HBVCP和前C基因序列 ,通过微粒子发光法和荧光定量PCR技术定量检测血清中的HBeAg和HBVDNA。结果 (1 )前C终止变异在重型乙型肝炎病例中的发生率显著升高 ;CP双变异在慢性乙型肝炎中度和重度病例中的发生率显著升高。 (2 )双变异组和终止变异组的HBeAg含量均显著下降 ,而后者下降更明显 ,且e抗体阳性率显著升高 ;而终止变异联合双变异组的HBeAg含量及e抗体阳性率与终止变异组相似。(3)双变异组、终止变异组和对照组之间的HBVDNA定量无明显差异。结论前C终止变异对HBeAg表达的影响较CP双变异更大 ,对病情的影响也更明显