淀粉样β蛋白所致大鼠突触素及其行为学改变

目的：观察淀粉样β蛋白对大鼠学习记忆能力及突触含量的影响。方法：实验于2004—02在郑州大学医学院生理学教研室完成。实验动物为三四月龄的健康雄性SD大鼠（Y迷宫筛选对电击敏感并逃避迅速）24只，随机数字表法分成正常对照组、假手术组、阿尔茨海默病模型组，每组8只，大鼠双侧海马微量注射聚合态淀粉样β蛋白1-40制备阿尔茨海默病动物模型，Y-型迷宫测定大鼠学习记忆能力。①学习测试：规定大鼠受电击后从起步区直接逃至安全区为正确反应，以连续10次中有9次（9／10）正确反应前所需的电击次数（即尝试次数）表示其学习获得能力。若尝试次数超过100次则不再测试：并以100次为最大值计数。以正确反应数占总测试数的百分比计算正确反应率。②记忆再现测试：大鼠休息24h后，同法检测其记忆力。以达9／10标准前的尝试次数表示记忆再现能力，并计算其正确反应率。随后处死大鼠，行突触素免疫组织化学染色。选择海马CA1区利用捷达801系列形态分析系统测定突触素免疫产物的平均吸光度，并以其代表突触素的量。每例标本检测4张切片，求其平均值，再计算每组动物的均值。结果：各组大鼠无意外死亡，全部结果进入结果分析。①光镜下观察突触素的产物呈颗粒状，主要分布在海马CA1、CA3区多形层和分子层及齿状回，呈点状沿多形层和分子层长轴分布。阿尔茨海默病模型组海马CA1区多形层和分子层突触素染色较正常对照组浅。②假手术组大鼠海马结构内突触素吸光度值与对照组接近，差异无显著性意义[（0．268&;#177;0．01），（0．270&;#177;0．01），t=1．549，P〉0．05]；阿尔茨海默病模型组大鼠海马结构内突触素吸光度值明显低于对照组，差异有显著性意义[（0．176&;#177;0．01），（0．270&;#177;0．01），t=2．875,P〈0．05]。③阿尔茨海默病模型组大鼠学习能力和记忆能力均显著下降，学习记忆获得尝试次数显著高于正常组和假手术组（P〈0．05），并且在整个过程中正确反应率明显低于正常组和假手术组（P〈0．05）。结论：海马内注射淀粉样β蛋白1-40可引起大鼠学习记忆能力下降，淀粉样β蛋白1-40所致阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆减退与海马CA1区突触的减少有关。     

淀粉样β蛋白对大鼠学习记忆的损伤

目的：通过Morris水迷宫实验来观察淀粉样β蛋白1-40对大鼠学习记忆的影响。方法：实验于2005-08／11在河南科技大学医学院完成。选用SD成年健康雄性大鼠30只，随机分为3组：正常对照组、生理盐水注射组、淀粉样β蛋白1--0注射组。淀粉样β蛋白1-40注射组给予双侧海马CA1区定向注射凝聚态淀粉样β蛋白1-40.5μL（2g／L），生理盐水注射组给予等量生理盐水，正常对照组不施以任何处理。术后2周行Morris水迷宫测试。学习时每只大鼠按东、西、南和北4个人水点分别放入水池（头朝池壁轻轻地放人）。记录动物的入水时间。记录潜伏期（动物自入水到找到站台后四肢爬上站台时所需的时间）；同时记录动物入水后的游泳轨迹。动物爬上站台后，让动物在站台上站立20s。若动物在入水后60s以内未能找到水池中的站台或未能爬上站台，则以60s记，引导其上台。实验历时5d。结果：30只大鼠均进入结果分析。Morris水迷宫训练第1天正常对照组、生理盐水注射组和淀粉样β蛋白1-40注射组的潜伏期分别是：（59．21&;#177;1．31）s，（60．00&;#177;0．00）s，（60．00&;#177;0．00）s，3组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。训练第2-5天，淀粉样β蛋白1-40注射组的潜伏期为（53．34&;#177;10．19）s，（38．15&;#177;10．77）s，（33．49&;#177;9．12）s，（28．52&;#177;9．87）s，均明显长于正常对照组和生理盐水注射组[正常对照组的潜伏期为（37．80&;#177;8．53）s，（23．50&;#177;6．54）s，（11．60&;#177;6．5）s，（7．71&;#177;3．56）s；生理盐水注射组的潜伏期为（38．13&;#177;9．83）s，（22．65&;#177;9．23）s，（13．05&;#177;8．67）s．（9．29&;#177;7．72）s]（P〈0．01）．正常对照组和生理盐水注射组的潜伏期差异无显著性意义（P〉0．05）。3组的游泳轨迹也显示正常对照组和生理盐水注射组从训练第5天起即由随机式转为直线式，而淀粉样β蛋白1-40注射组5d的游泳轨迹一直为随机式。结论：海马注射淀粉样β蛋白1-40可导致大鼠学习记忆功能明显受损。     

胰岛素样生长因子1对痴呆模型大鼠学习记忆能力及突触素表达的影响

目的：观察胰岛素样生长因子1对痴呆模型大鼠学习记忆能力影响及其对突触素的保护作用。方法：实验于2004-03／2005—06在吉林大学第一医院神经内科实验室完成。实验动物选择Morris水迷宫学习正常的雄性三四个月龄的Wistar大鼠30只，随机分为痴呆治疗组、痴呆对照组和正常对照组，每组10只。采用切断成年Wistar大鼠双侧穹窿海马伞，建立隔一海马胆碱能系统损害的痴呆模型。痴呆模型制备1d后开始侧脑室给药，连续21d，痴呆治疗组给予胰岛素样生长因子110μL（4g／L），痴呆对照组则同时间给予生理盐水10μL。正常对照组不给予处理。利用水迷宫对大鼠学习、记忆能力进行测试，观察潜伏期和跨越平台次数；利用Y电迷宫观察其行为学改变，以尝试次数和再显次数分析指标。所有大鼠在建立模型后21d以40g／L多聚甲醛心脏灌注固定，取脑，连续冠状切片，利用免疫组化及图像分析测定大鼠脑内突触素的表达。每只动物取切片5张，以同张切片胼胝体的吸光度值作为背景，分别选取海马和额叶2个区域测定吸光度值，取其均值。组间比较采用t检验。结果：在实验过程中，痴呆治疗组和痴呆对照组各有1只大鼠死亡，其余动物全部进入结果分析。①痴呆治疗组大鼠的学习记忆成绩优于痴呆对照组，痴呆治疗组潜伏期明显低于痴呆对照组，差异有显著性[（31．02&;#177;2．65），（45．32&;#177;6．57）s，t=6．056，P〈0．01]；跨越平台次数明显高于痴呆对照组，差异有显著性[（4．36&;#177;1．02），（2．35&;#177;0．76）次，t=4．213，P〈0．01]；尝试次数明显低于痴呆对照组，差异有显著性[（18．67&;#177;1．86），（25．16&;#177;2．42）次，t=6．382,P〈0．01]；再显次数明显高于痴呆治疗组，差异有显著性[（6．78&;#177;0．53），（3．97&;#177;0．45）次，t=12．112,P〈0．01]②痴呆治疗组海马突触素的表达量与痴呆对照组相比明显增多，差异有显著性[（23．92&;#177;2．76），（10．95&;#177;3．05），t=9．460，P〈0．01]；额叶突触素的表达量与痴呆对照组相比也明显增多，差异有显著性[（17．69&;#177;2．34），（6．58&;#177;1．02），t=13．055，P〈0．01）。痴呆治疗组脑内突触素的表达量没有达到正常对照组水平（P〈0．01）结论：胰岛素样生长因子1对中枢胆碱能系统有保护作用，能改善学习记忆能力。     

淀粉样β蛋白对大鼠学习记忆的损伤

目的:通过Morris水迷宫实验来观察淀粉样β蛋白1～40对大鼠学习记忆的影响。方法:实验于2005-08/11在河南科技大学医学院完成。选用SD成年健康雄性大鼠30只,随机分为3组:正常对照组、生理盐水注射组、淀粉样β蛋白1～40注射组。淀粉样β蛋白1～40注射组给予双侧海马CA1区定向注射凝聚态淀粉样β蛋白1～405μL(2g/L),生理盐水注射组给予等量生理盐水,正常对照组不施以任何处理。术后2周行Morris水迷宫测试。学习时每只大鼠按东、西、南和北4个入水点分别放入水池(头朝池壁轻轻地放入)。记录动物的入水时间,记录潜伏期(动物自入水到找到站台后四肢爬上站台时所需的时间);同时记录动物入水后的游泳轨迹。动物爬上站台后,让动物在站台上站立20s。若动物在入水后60s以内未能找到水池中的站台或未能爬上站台,则以60s记,引导其上台。实验历时5d。结果:30只大鼠均进入结果分析。Morris水迷宫训练第1天正常对照组、生理盐水注射组和淀粉样β蛋白1～40注射组的潜伏期分别是:(59.21±1.31)s,(60.00±0.00)s,(60.00±0.00)s,3组比较差异无显著性意义(P>0.05)。训练第2～5天,淀粉样β蛋白1～40注射组的潜伏期为(53.34±10.19)s,(38.15±10.77)s,(33.49±9.12)s,(28.52±9.87)s,均明显长于正常对照组和生理盐水注射组[正常对照组的潜伏期为(37.80±8.53)s,(23.50±6.54)s,(11.60±6.5)s,(7.71±3.56)s;生理盐水注射组的潜伏期为(38.13±9.83)s,(22.65±9.23)s,(13.05±8.67)s,(9.29±7.72)s](P<0.01),正常对照组和生理盐水注射组的潜伏期差异无显著性意义(P>0.05)。3组的游泳轨迹也显示正常对照组和生理盐水注射组从训练第5天起即由随机式转为直线式,而淀粉样β蛋白1～40注射组5d的游泳轨迹一直为随机式。结论:海马注射淀粉样β蛋白1～40可导致大鼠学习记忆功能明显受损。     

葛根素对淀粉样β蛋白所致痴呆模型小鼠学习记忆的影响

背景：葛根素是中药葛根的主要有效成分，能对抗东莨菪碱、D-半乳糖等因素引起的动物学习记忆障碍。目的：探讨葛根素对淀粉样β蛋白所致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的保护作用及脑和血中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的变化。设计：随机对照实验。单位：首都医科大学药理学系。材料：实验于2002-03/06在首都医科大学药理学系完成。实验选用40只ICR小鼠，随机分成4组：假手术组、痴呆模型组、葛根素25mg/kg组、葛根素50mg/kg组，每组10只。方法：①造模：小鼠戊巴比妥钠麻醉，痴呆模型组、葛根素25mg/kg组、葛根素50mg/kg无菌操作下一次性右侧脑室内注射淀粉样B蛋白3μL/只。假手术组操作同模型组，但不注射淀粉样β蛋白。②给药：假手术组、模型组：腹腔注射生理盐水10mL/kg；葛根素25mg/kg组腹腔注射25mg/kg；葛根素50mg/kg组腹腔注射50mg/kg。各组于造模当日开始给药，12d后开始行为学检测。③用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力，记录2min内寻找到平台的时间（逃避潜伏期），航行距离，初始角度及搜索策略，作为学习成绩。④小鼠完成上述实验后，乙醚麻醉眼眶取血，制备血清，然后断头处死，迅速取右脑冰浴下制备脑匀浆，检测脑、血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。主要观察指标：①各组小鼠到达平台的逃避潜伏期和游泳距离、搜索策略及初始角度。②各组小鼠脑、血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。结果：40只小鼠均进入结果分析。①葛根素25mg/kg和50mg/kg组逃避潜伏期、航行距离缩短（P〈0．05～0．01）。搜索策略及初始角度结果显示随着训练天数的增加，各组小鼠随机＋边缘式策略的出现率逐渐下降；其中假手术组及葛根素25mg/kg组、葛根素50mg/kg组的下降速度和程度较痴呆模型组快，同时趋向＋直接式的增加速度和程度也较痴呆模型组快。初始角度各组间均无显著差异（P〉0．05）。②葛根素25mg/kg组、葛根素50mg/kg组能使模型小鼠脑及血中超氧化物歧化酶增多、丙二醛的减少（P〈0．05-0．01）。结论：葛根素可对抗淀粉样β蛋白的神经毒性，使模型小鼠的学习记忆成绩提高，与剂量无关，可能与清除脑自由基及提高抗氧化活性作用有关。     

胰岛素样生长因子1对痴呆模型大鼠学习记忆能力及突触素表达的影响

目的:观察胰岛素样生长因子1对痴呆模型大鼠学习记忆能力影响及其对突触素的保护作用。方法:实验于2004-03/2005-06在吉林大学第一医院神经内科实验室完成。实验动物选择Morris水迷宫学习正常的雄性三四个月龄的Wistar大鼠30只,随机分为痴呆治疗组、痴呆对照组和正常对照组,每组10只。采用切断成年Wistar大鼠双侧穹窿海马伞,建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。痴呆模型制备1d后开始侧脑室给药,连续21d,痴呆治疗组给予胰岛素样生长因子110μL(4g/L),痴呆对照组则同时间给予生理盐水10μL。正常对照组不给予处理。利用水迷宫对大鼠学习、记忆能力进行测试,观察潜伏期和跨越平台次数;利用Y电迷宫观察其行为学改变,以尝试次数和再显次数分析指标。所有大鼠在建立模型后21d以40g/L多聚甲醛心脏灌注固定,取脑,连续冠状切片,利用免疫组化及图像分析测定大鼠脑内突触素的表达。每只动物取切片5张,以同张切片胼胝体的吸光度值作为背景,分别选取海马和额叶2个区域测定吸光度值,取其均值。组间比较采用t检验。结果:在实验过程中,痴呆治疗组和痴呆对照组各有1只大鼠死亡,其余动物全部进入结果分析。①痴呆治疗组大鼠的学习记忆成绩优于痴呆对照组,痴呆治疗组潜伏期明显低于痴呆对照组,差异有显著性[(31.02±2.65),(45.32±6.57)s,t=6.056,P<0.01];跨越平台次数明显高于痴呆对照组,差异有显著性[(4.36±1.02),(2.35±0.76)次,t=4.213,P<0.01];尝试次数明显低于痴呆对照组,差异有显著性[(18.67±1.86),(25.16±2.42)次,t=6.382,P<0.01];再显次数明显高于痴呆治疗组,差异有显著性[(6.78±0.53),(3.97±0.45)次,t=12.112,P<0.01]②痴呆治疗组海马突触素的表达量与痴呆对照组相比明显增多,差异有显著性[(23.92±2.76),(10.95±3.05),t=9.460,P<0.01];额叶突触素的表达量与痴呆对照组相比也明显增多,差异有显著性[(17.69±2.34),(6.58±1.02),t=13.055,P<0.01)。痴呆治疗组脑内突触素的表达量没有达到正常对照组水平(P<0.01)结论:胰岛素样生长因子1对中枢胆碱能系统有保护作用,能改善学习记忆能力。     

葛根素对淀粉样β蛋白所致痴呆模型小鼠学习记忆的影响

背景葛根素是中药葛根的主要有效成分,能对抗东莨菪碱、D-半乳糖等因素引起的动物学习记忆障碍.目的探讨葛根素对淀粉样β蛋白所致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的保护作用及脑和血中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的变化.设计随机对照实验.单位首都医科大学药理学系.材料实验于2002-03/06在首都医科大学药理学系完成.实验选用40只ICR小鼠,随机分成4组假手术组、痴呆模型组、葛根素25 mg/kg组、葛根素50 mg/kg组,每组10只.方法①造模小鼠戊巴比妥钠麻醉,痴呆模型组、葛根素25 mg/kg组、葛根素50 mg/kg无菌操作下一次性右侧脑室内注射淀粉样β蛋白3μL/只.假手术组操作同模型组,但不注射淀粉样β蛋白.②给药假手术组、模型组腹腔注射生理盐水10mL/kg;葛根素25 mg/kg组腹腔注射25 mg/kg;葛根素50mg/kg组腹腔注射50mg/kg.各组于造模当日开始给药,12 d后开始行为学检测.③用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力,记录2 min内寻找到平台的时间(逃避潜伏期),航行距离,初始角度及搜索策略,作为学习成绩.④小鼠完成上述实验后,乙醚麻醉眼眶取血,制备血清,然后断头处死,迅速取右脑冰浴下制备脑匀浆,检测脑、血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量.主要观察指标①各组小鼠到达平台的逃避潜伏期和游泳距离、搜索策略及初始角度.②各组小鼠脑、血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量.结果40只小鼠均进入结果分析.①葛根素25 mg/kg和50 mg/kg组逃避潜伏期、航行距离缩短(P＜0.05～0.01).搜索策略及初始角度结果显示随着训练天数的增加,各组小鼠随机+边缘式策略的出现率逐渐下降;其中假手术组及葛根素25 mg/kg组、葛根素50 mg/kg组的下降速度和程度较痴呆模型组快,同时趋向+直接式的增加速度和程度也较痴呆模型组快.初始角度各组间均无显著差异(P＞0.05).②葛根素25 mg/kg组、葛根素50 mg/kg组能使模型小鼠脑及血中超氧化物歧化酶增多、丙二醛的减少(P＜0.05～0.01).结论葛根素可对抗淀粉样β蛋白的神经毒性,使模型小鼠的学习记忆成绩提高,与剂量无关,可能与清除脑自由基及提高抗氧化活性作用有关.     

局灶性脑缺血大鼠海马CA3区突触体素的动态表达

背景：突触体素(synaptophysin，SYN)与神经生长、修复、再生和突触重塑密切相关，成为近年来医学研究的热点。以往学者对脑缺血再灌注大鼠模型顶叶突触体素表达研究较多。采用线栓法堵塞大鼠大脑中动脉，建立局灶性脑缺血模型，观察海马CA3区突触体素的动态表达，可为临床研究脑缺血后神经重塑提供理论依据。目的：研究局灶性脑缺血后海马CA3区突触体素的动态表达以及神经修复的可塑性。设计：随机对照的实验研究。单位：承德医学院附属医院老年病科、承德医学院解剖教研室和河北医科大学。材料：选取健康成年SD大鼠40只，随机分为脑缺血组和对照组，每组又分为7，14，21，30d4个时间点，每个时间点取5只大鼠。干预：采用线栓法建立大脑中动脉脑缺血大鼠模型，采用苏木精一伊红染色，光镜下观察有无梗死灶。应用免疫组化技术观察海马CA3区突触体素的表达。主要观察指标：①苏木精-伊红染色结果。②海马CA3区突触体素的表达。结果：假手术组在大脑皮质及海马区，苏木精．伊红染色可见神经元呈层状分布，各层细胞数量较多，形态完整，细胞核圆大且核仁明显，核仁被染成紫色，胞浆呈浅粉色，神经元同周围组织间无空隙存在。缺血组可见梗死灶，表现为正常结构消失，排列紊乱，细胞数量减少，胞核固缩、深染。假手术组SYN阳性神经元的吸光度值各时间点比较差异无显著性意义(P&;gt;0.05)。实验组同假手术组比较，SYN吸光度值明显降低(P&;lt;0.01)，组内7～21d时的吸光度值逐渐升高，且差异有显著性意义(P&;lt;0.01)，30d时SYN的吸光值降低，但同21d时相比差异无显著性意义(P&;gt;0.05)。结论：脑缺血损伤后海马CA3区突触体素表达减少，但机体自身存在着神经元的修复和再生，可使突触体素的表达逐渐上调。     

复方金思维对阿尔茨海默病大鼠脑组织突触后致密区蛋白95表达的影响：与安慰剂及盐酸多奈哌齐干预效果的比较

目的：脑突触后致密区蛋白95具有调节人脑认知活动中突触功能和结构的作用，观察复方金思维干预实验动物致密区蛋白95表达以及学习记忆能力的变化，并与安慰剂及盐酸多奈哌齐干预相对照。方法：实验于2004-11-15／2005-02在北京中医药大学东直门医院药理实验室及首都医科大学宣武医院神经生化室进行。取雄性SD大鼠32只，随机分为4组，每组8只：生理盐水组、模型组、盐酸多奈哌齐组和金思维组。生理盐水组大鼠海马注入2μL生理盐水，其他3组大鼠缓慢注入2μL淀粉样B蛋白1～42(5g／L)，复制阿尔茨海默病模型。造模后3d开始给药，盐酸多奈哌齐组按0．92mg／kg的剂量灌胃；复方金思维(由中药人参、肉苁蓉、石菖蒲及郁金等组成)配置成0．36g／mL的浓度，按0．7μL／g的剂量给药；模型组及生理盐水组给3mL的双蒸水，均1次／d，共4周。4周后，以Morris水迷宫测试大鼠学习期间的逃避潜伏期和游泳距离以及记忆测定中的记忆能力，评价行为学变化；以免疫组化检测大鼠海马CA1区、皮质突触后致密区蛋白95表达的变化。结果：经补充后32只大鼠进入结果分析。①Morris水迷宫的学习、记忆测试结果：模型组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力显著低于生理盐水组(P&;lt;0．01)，盐酸多奈哌齐组、金思维组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力较模型组高(P&;lt;0．05)，盐酸多奈哌齐组和金思维组无差异(P&;gt;0．05)。②脑突触后致密区蛋白95表达：模型组大鼠海马和皮质的表达少于生理盐水组(P&;lt;0.01)；盐酸多奈哌齐组、金思维组大鼠海马、皮质的阳性表达高于模型组(P&;lt;0．05)，但盐酸多奈哌齐组与金思维组之间无明显差异(P&;gt;0．05)。结论：模型组大鼠脑突触后致密区蛋白95表达减少，说明脑突触功能弱化和受损，而金思维和盐酸多奈哌齐治疗组大鼠脑突触后致密区蛋白95表达较模型组增加，说明突触的功能及可塑性有所恢复。提示复方金思维对实验动物脑突触功能和结构具有改善作用。     

局灶性脑缺血大鼠海马CA3区突触体素的动态表达

背景突触体素(synaptophysin,SYN)与神经生长、修复、再生和突触重塑密切相关,成为近年来医学研究的热点.以往学者对脑缺血再灌注大鼠模型顶叶突触体素表达研究较多.采用线栓法堵塞大鼠大脑中动脉,建立局灶性脑缺血模型,观察海马CA3区突触体素的动态表达,可为临床研究脑缺血后神经重塑提供理论依据.目的研究局灶性脑缺血后海马CA3区突触体素的动态表达以及神经修复的可塑性.设计随机对照的实验研究.单位承德医学院附属医院老年病科、承德医学院解剖教研室和河北医科大学.材料选取健康成年SD大鼠40只,随机分为脑缺血组和对照组,每组又分为7,14,21,30 d 4个时间点,每个时间点取5只大鼠.干预采用线栓法建立大脑中动脉脑缺血大鼠模型,采用苏木精-伊红染色,光镜下观察有无梗死灶.应用免疫组化技术观察海马CA3区突触体素的表达.主要观察指标①苏木精-伊红染色结果.②海马CA3区突触体素的表达.结果假手术组在大脑皮质及海马区,苏木精-伊红染色可见神经元呈层状分布,各层细胞数量较多,形态完整,细胞核圆大且核仁明显,核仁被染成紫色,胞浆呈浅粉色,神经元同周围组织间无空隙存在.缺血组可见梗死灶,表现为正常结构消失,排列紊乱,细胞数量减少,胞核固缩、深染.假手术组SYN阳性神经元的吸光度值各时间点比较差异无显著性意义(P＞0.05).实验组同假手术组比较,SYN吸光度值明显降低(P＜0.01),组内7～21 d时的吸光度值逐渐升高,且差异有显著性意义(P＜0.01),30 d时SYN的吸光值降低,但同21 d时相比差异无显著性意义(P＞0.05).结论脑缺血损伤后海马CA3区突触体素表达减少,但机体自身存在着神经元的修复和再生,可使突触体素的表达逐渐上调.     

大脑中动脉梗塞模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触素蛋白表达变化

目的:观察大脑中动脉梗塞大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触素蛋白表达变化,为探讨其学习记忆能力提供理论依据。方法:实验于2005-03/05在北京中医药大学老年医学研究所完成。选用健康SD雄性大鼠18只,随机分为3组,正常组、假手术组与模型组,每组6只。制备大脑中动脉梗塞模型,并于模型制备1个月后取各组大鼠脑组织,采用免疫组化技术检测胆碱乙酰转移酶和突触素表达量。结果:参加实验大鼠18只,每组6只,在模型制备过程中有6只死亡,进入结果分析数量12只,每组4只。①海马胆碱乙酰转移酶、突触泡膜素蛋白阳性表达面积:模型组眼(1004±464),(1704±672)μm2演较正常组眼(3994±939),(3619±993)μm2演和假手术组眼(3754±922),(3579±877)μm2演显著性减少(P<0.01)。②免疫组化染色可见模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶阳性神经细胞数量明显减少,免疫染色浅,未见神经纤维染色;突触泡膜素阳性颗粒明显减少、稀疏。结论:大脑中动脉梗塞模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触泡膜素蛋白表达下降可能是其学习记忆障碍的神经生物学基础。     

大脑中动脉梗塞模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触素蛋白表达变化

目的：观察大脑中动脉梗塞大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触素蛋白表达变化，为探讨其学习记忆能力提供理论依据。 方法：实验于2005-03／05在北京中医药大学老年医学研究所完成。选用健康SD雄性大鼠18只，随机分为3组，正常组、假手术组与模型组，每组6只。制备大脑中动脉梗塞模型，并于模型制备1个月后取各组大鼠脑组织，采用免疫组化技术检测胆碱乙酰转移酶和突触素表达量。 结果：参加实验大鼠18只，每组6只，在模型制备过程中有6只死亡，进入结果分析数量12只，每组4只。①海马胆碱乙酰转移酶、突触泡膜素蛋白阳性表达面积：模型组[（1004&;#177;464），（1704&;#177;672）μm^2]较正常组[（3994&;#177;939），（3619&;#177;993）μm^2]和假手术组[（3754&;#177;922），（3579&;#177;877）μm^2]显著性减少（P〈0．01）。②免疫组化染色可见模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶阳性神经细胞数量明显减少，免疫染色浅，未见神经纤维染色；突触泡膜素阳性颗粒明显减少、稀疏。 结论：大脑中动脉梗塞模型大鼠海马胆碱乙酰转移酶和突触泡膜素蛋白表达下降可能是其学习记忆障碍的神经生物学基础。     

褪黑素对毛果芸香碱致痫大鼠行为和海马Fos蛋白表达的影响

目的:探讨褪黑素对毛果芸香碱致痫大鼠的抗惊厥作用及其作用特点。方法:实验于2003-08/12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室完成。建立毛果芸香碱致痫大鼠模型,依据褪黑素不同的给药时间、给药剂量进行分组,观察褪黑素对癫痫大鼠行为学和海马Fos蛋白表达的影响。结果:17:00给药时,褪黑素10～50mg/kg腹腔注射组均可明显延长毛果芸香碱致痫大鼠首次痫性发作出现的潜伏期(P<0.01),并可显著抑制海马Fos蛋白的表达P<0.01),上述作用尤以褪黑素25mg/kg(腹腔注射组明显。结论:褪黑素在毛果芸香碱致痫大鼠模型中具有抗惊厥作用,且这种作用呈一定的剂量、时间依赖性。     

大鼠海马注射β-淀粉样蛋白1-40后β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达及加减地黄饮子提取物的干预烛

目的：观察SD大鼠海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40后β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达的变化及加减地黄饮子对其的干预作用。方法：①实验于2005-09／2006-09在齐齐哈尔医学院医药科学研究所完成。②选用100只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐组、加减地黄饮子组共5组，每组20只。通过海马立体定向注射β-淀粉样蛋白，40诱导老年性痴呆动物模型。③盐酸多奈哌齐按0.33mg，（kg·d）给药，加减地黄饮子组按1.0g，（kg·d）给药，共给药28d。空白对照组和假手术对照组给予等量生理盐水。④第5周处死大鼠，应用实时定量PCR法检测大脑海马组织13位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达（用2^-△△ct表示，Ct为阈循环值，△Ct=Ctbace1CtGAPDH，△△Ct=△Ct各干预组-△Ct空白对照组）。⑤多组间差异的显著性分析用单因素方差分析，组间两两比较运用LSD-f检验。结果：实验选用100只大鼠，每组随机选5只用于抽提大脑海马组织总RNA，因此共有25只大鼠纳入结果分析。β位淀粉样前体蛋白裂解酶12^-△△ct值模型组（4.67±0.52）显著高于假手术对照组（1.07±0.08）（P〈0.01），表明模型组B位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达上调。盐酸多奈哌齐组（1.80±0.23）和加减地黄饮子组（1.26±0.20）显著低于模型对照组，表明13位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达下调。结论：大鼠大脑海马注射β-淀粉样蛋白，40后海马组织β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达水平明显增高，加减地黄饮子提取物可以抑制海马组织β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA的表达，从而发挥抗老年性痴呆的作用。     

大鼠海马注射β-淀粉样蛋白1-40后β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达及加减地黄饮子提取物的干预

目的:观察SD大鼠海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40后β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达的变化及加减地黄饮子对其的干预作用。方法:①实验于2005-09/2006-09在齐齐哈尔医学院医药科学研究所完成。②选用100只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐组、加减地黄饮子组共5组,每组20只。通过海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40诱导老年性痴呆动物模型。③盐酸多奈哌齐按0.33mg/(kg·d)给药,加减地黄饮子组按1.0g/(kg·d)给药,共给药28d。空白对照组和假手术对照组给予等量生理盐水。④第5周处死大鼠,应用实时定量PCR法检测大脑海马组织β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达(用2-ΔΔCt表示,Ct为阈循环值,ΔCt=CtBACE1-CtGAPDH,ΔΔCt=ΔCt各干预组-ΔCt空白对照组)。⑤多组间差异的显著性分析用单因素方差分析,组间两两比较运用LSD-t检验。结果:实验选用100只大鼠,每组随机选5只用于抽提大脑海马组织总RNA,因此共有25只大鼠纳入结果分析。β位淀粉样前体蛋白裂解酶12-ΔΔCt值模型组(4.67±0.52)显著高于假手术对照组(1.07±0.08)(P<0.01),表明模型组β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达上调。盐酸多奈哌齐组(1.80±0.23)和加减地黄饮子组(1.26±0.20)显著低于模型对照组,表明β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达下调。结论:大鼠大脑海马注射β-淀粉样蛋白1-40后海马组织β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA表达水平明显增高,加减地黄饮子提取物可以抑制海马组织β位淀粉样前体蛋白裂解酶1mRNA的表达,从而发挥抗老年性痴呆的作用。     

淀粉样β蛋白对大鼠脑细胞内三磷酸肌醇的影响

目的:观察淀粉样β蛋白对大鼠脑肌醇1,4,5-三磷酸含量的影响,通过磷脂酰肌醇代谢的变化,进一步探讨淀粉样β蛋白的神经毒性机制,方法:实验于2004-04/09在中国医科大学药理学及生理学实验室进行,取Wistar成年雄性大鼠10只,随机分为模型组和生理盐水两组各5只。模型组双侧脑室各注射淀粉样β蛋白1～425μL(各30nmol);生理盐水组注射5μL的生理盐水。所有大鼠常规方法饲养1周后麻醉状态下处死取脑皮质,测定两组大鼠脑组织肌醇1,4,5-三磷酸含量基础值,并观察M受体激动剂卡巴胆碱(1mmol/L)及KCl(40mmol/L)对肌醇1,4,5-三磷酸生物合成的影响。结果:10只大鼠均进入进入结果分析。①模型组大鼠脑组织基础肌醇1,4,5-三磷酸含量显著低于生理盐水组(6.7±2.2),(12.0±1.4)nmol/g,P<0.01。②脑组织经1mmol/L卡巴胆碱作用后肌醇1,4,5-三磷酸的产生两组均增加,120s时达高峰,但模型组明显低于对照组(P=0.00788)。③40mmol/LKCl作用后两组大鼠脑组织肌醇1,4,5-三磷酸的产生均增加,30s时达高峰,但模型组明显低于对照组(P=0.000324)。结论:①淀粉样β蛋白降低基础肌醇1,4,5-三磷酸的含量,并能抑制卡巴胆碱及KCl诱发的肌醇1,4,5-三磷酸的生物合成。②淀粉样β蛋白抑制肌醇1,4,5-三磷酸的合成与损害G蛋白-磷脂酶C偶联和磷酯酰肌醇4,5-二磷酸敏感的磷脂酶C均有关。     

淀粉样β蛋白对大鼠脑细胞内三磷酸肌醇的影响

目的：观察淀粉样β蛋白对大鼠脑肌醇1，4，5-三磷酸含量的影响，通过磷脂酰肌醇代谢的变化，进一步探讨淀粉样β蛋白的神经毒性机制，方法：实验于2004—04／09在中国医科大学药理学及生理学实验室进行，取Wistar成年雄性大鼠10只，随机分为模型组和生理盐水两组各5只。模型组双侧脑室各注射淀粉样β蛋白1～425μL（各30nmol）；生理盐水组注射5μL的生理盐水。所有大鼠常规方法饲养1周后麻醉状态下处死取脑皮质，测定两组大鼠脑组织肌醇1，4，5-三磷酸含量基础值，并观察M受体激动剂卡巴胆碱（1mmol／L）及KCI（40mmol/L）对肌醇1，4，5-三磷酸生物合成的影响。结果：10只大鼠均进入进人结果分析。①模型组大鼠脑组织基础肌醇1，4，5-三磷酸含量显著低于生理盐水组[（6．7&;#177;2．2），（12．0&;#177;1．4）nmol／g，P〈0．01]。②脑组织经1mmol/L卡巴胆碱作用后肌醇1，4，5-三磷酸的产生两组均增加，120s时达高峰，但模型组明显低于对照组（P=0．00788）。③40mmol／L KCl作用后两组大鼠脑组织肌醇1，4，5-三磷酸的产生均增加，30s时达高峰，但模型组明显低于对照组（P=0．000324）。结论：①淀粉样β蛋白降低基础肌醇1，4，5-三磷酸的含量，并能抑制卡巴胆碱及KCI诱发的肌醇1，4，5-三磷酸的生物合成。②淀粉样β蛋白抑制肌醇1，4，5-三磷酸的合成与损害G蛋白-磷脂酶C偶联和磷酯酰肌醇4，5-二磷酸敏感的磷脂酶C均有关。     

Comparison of autotomy behavior induced in rats by various clinically-used neurectomy methods

When a peripheral nerve is cut, a neuroma develops at its proximal end. Nerve-end neuromas are known to be a source of ectopic sensory input. In some humans this input may cause spontaneous and evoked neuropathic pain. There is currently no available animal model for developing better methods of cutting nerves that produce less painful neuromas than those currently in clinical use. Transection of the sciatic and saphenous nerves in rats also produces nerve-end neuromas. Afferent fibers in such neuromas spontaneously emit ectopic input that coincides with the outbreak of licking, scratching and self-mutilation of the denervated limb ('autotomy'). This behavior is considered to be the expression of spontaneous disagreeable sensations such as paresthesias, dysesthesias or neuropathic pain. We propose here that the autotomy model can be used as the first step for development of better neurectomy methods. As a demonstration, in this report we compared the course of autotomy expressed by rats following several methods of cutting peripheral nerves that are currently in clinical use. We found that the lowest extent of autotomy was caused by sciatic and saphenous neurectomy with a CO(2) laser. Tight ligation of the nerve, or a simple cut with scissors, also yielded significantly lower autotomy scores compared to cryoneurolysis and electrocut. The differing scores of autotomy caused by these neurectomy methods may derive from different properties of the injury discharge produced by these methods at the time of nerve cut. Our results raise the possibility that a higher incidence of neuropathic pain or related sensory disorders in humans may be expected following cryosurgical and electrocut neurectomies. If validated by further studies, neurectomy methods eliciting lower incidence of autotomy, and sensory disorders in models not based on autotomy may produce lower levels of neuropathic pain in humans.     

远志总皂苷干预β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞Caspase-3及Par-4的表达

背景：远志总皂苷具有良好的神经保护作用。目的：分析远志总皂苷对β-淀粉样蛋白致伤海马神经干细胞的保护作用及机制。方法：自昆明小鼠海马分离培养神经干细胞,取第3代神经干细胞,用含不同质量浓度远志总皂苷与β-淀粉样蛋白致伤体外培养的神经干细胞共孵育。结果：应用免疫组织化学法检测Caspase-3阳性神经干细胞,与对照组相比,远志总皂苷组Caspase-3阳性细胞率及Par-4的表达明显降低,差异具有显著性意义（P〈0.05）。提示远志总皂苷能够降低β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞中Caspase-3及Par-4的表达。