缺血损伤对大鼠海马神经元形态及密度的影响

应用Ｎｉｓｓｌ法和Ｇｏｌｇｉ法观测了正常大鼠（１组）及脑缺血３０ｍｉｎ，６０ｍｉｎ，９０ｍｉｎ大鼠（２，３，４组）的海马神经元的形态及密度，结果表明，缺血后海马内大部分神经元出现胞体严重空泡化，树突结节化，树突棘脱落，随着缺血时间延长，各种变化加剧，３，４组海马的神经元密度明显小于１，２组（Ｐ〈０．０１），而在Ｉ组与Ⅱ组之间Ⅲ组与Ⅳ组之间均无显著差异（Ｐ〉０．０５）。本文对神经元的缺血损伤机理，神     

利多卡因对大鼠海马锥体神经元GABAA-Cl-电流的影响

目的 研究利多卡因对大鼠海马锥体神经元全细胞γ-氨基丁酸介导的氯电流(GABA—CI^-电流)的影响，及其中枢致惊厥作用的可能机制。方法 酶解急性分离2周龄左右大鼠海马锥体神经元，采用全细胞膜片钳技术，记录利多卡因对单个海马锥体神经元GABA—CI^-电流的影响。结果 将钳制电位固定在-60mV，GABA以剂量依赖性方式诱导出内向电流；利多卡因明显抑制GABA诱导的CI^-电流(IGABA)，50％抑制浓度(IC50)4.05mmol／L，10mmol／L可使GABA浓度效应曲线明显右移，50％有效浓度(EC50)由7、72nlmol／L增加到17.2mmol／L，且最大电流明显降低。结论 利多卡因以非竞争性的方式，抑制海马锥体神经元GABAA-CI^-电流，可能是其中枢致惊厥作用的机制。     

普罗布考对癫痫大鼠海马神经元的影响

[目的]探讨普罗布考对戊四氮所致癫痫大鼠的抗氧化作用及对海马神经元的保护作用.[方法]将SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组及普罗布考组.采用Dihel点燃癫痫模型制作方法,实验持续14d.观察模型对照组及普罗布考组大鼠癫痫发作潜伏期及发作持续时间,并测定各组大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MD...     

锌对新生大鼠海马神经元bcl-2 mRNA表达的影响

目的：观察微量元素锌对新生大鼠海马神经元细胞凋亡抑制基因ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达的影响。探讨锌影响中枢神经系统发育的分子机制。方法;采用无血清培养Ｗｉｓｔａｒ新生儿大鼠海马神经元细胞,分别在无血清培养液中加入不同浓度的ＺｎＳＯ４溶液培养７ｄ,采用图像分析技术分析其生长分化情况;收集海马神经元细胞,利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术检测海马神经元ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达情况。结果：锌可通过提高ｂｃｌ－２ｍＲＮ     

高压氧对大鼠颅脑外伤后神经元凋亡的抑制作用

目的:研究高压氧治疗对大鼠颅脑外伤后神经元凋亡的影响,以探讨高压氧治疗颅脑外伤的机制。方法:(1)运用RT-PCR技术,检测高压氧治疗后大鼠脑组织Bcl-2、Bax、Caspase-3基因的变化。(2)运用TUNEL染色法,检测高压氧治疗对TUNEL染色阳性细胞的影响。结果:(1)大鼠颅脑外伤后6小时起高压氧治疗后,与对照组相比Bcl-2基因表达增加,而Bax基因表达下降,Bcl-2/Bax比值明显上升,Caspase-3基因表达增加,均具有统计学意义。(2)高压氧治疗后与对照组相比TUNEL染色阳性细胞数明显减少。结论:高压氧治疗对大鼠颅脑外伤后神经元的凋亡具有抑制作用,从而减轻大鼠颅脑外伤后的继发性脑损害。     

侧脑室微量注射神经生长因子对实验性抑郁症大鼠抑郁行为和海马神经元损伤的影响

目的：观察中枢给予外源性NGF对实验性抑郁症大鼠行为和海马神经元损伤的影响。方法：采用长期不可预见性中等强度应激造成大鼠抑郁症模型，运用侧脑室微量注射技术、Openfield行为测定、组织化学、光镜和是镜技术观察中枢给予外源性NGF对实验性抑郁症大鼠抑制行为和海马神经元损伤的影响。结果：侧脑室微量注射NGF可显著改善实验性抑郁症大鼠的抑郁行为，使实验性抑郁症大鼠海马CA1、CA3及齿状回（DG）神经元数目显著增加，酸性磷酸酶片面性显著降低，明显改善海马神经元的超微结构，结论：外源性给予NGF可能通过减轻大鼠海马神经元的损伤，从而改善动物的抑郁行为。     

大鼠海马CA3区神经元和星形胶质细胞三维结构重塑

目的 观察大鼠海马CA3区神经元锥体细胞及其周围星形胶质细胞(AST)的分布，重塑两者之间的三维构象。方法 采用脑片膜片钳全细胞记录、细胞内荧光黄(LY)染色、免疫荧光和激光共聚焦显微镜检查(LSCM)相结合的技术。结果 根据放电形式的不同把海马锥体细胞分为位相型和非位相型放电神经元。LSCM下单层光学图像和三维立体重建显示许多AST紧密围绕在LY染色锥体细胞周围并形成紧密接触。2类神经元与AST形成接触的部位存在区别。非位相型放电神经元的树突和胞体周围都有许多AST形成接触的部位在，而位相型放电神经元则仅位于树突。结论 不同特性海马神经元周围AST的空间分布可能存在差异。     

牛磺酸拮抗铅对大鼠海马NOS阳性神经元数目的影响

Objective: To study taurine resist lead impact ability of learning and memory. Methods: Using NADPH-d histochemistry method to study the quantity change of the rat's NOS positive neuron in hippocampus , the rat in experiment sections which are feeded with distinct dosage lead acetate in drinking (0.02, 0.2g/L) and feed contain distinct dosage taurine (5, 10g/kg). Results: Taurine could increase NOS positive neuron quantity obviously in hippocampus of rat induced lead lesion. Conclusion: Taurine could resist lead impact ability of learning and memory obviously.     

原代培养新生大鼠海马神经元实验技术的建立

目的：摸索应用适合培养条件获取新生大鼠海马神经元的技术方法。方法：采用较低浓度、短时的酶消法配合应用含B-27的特殊培养基培养海马神经元细胞。结果：培养出的新生大鼠海马神经元结构特征明显且生长良好,有较高纯度。结论：本方法可以稳定地获得较高纯度的新生大鼠海马神经元。     

高压氧治疗对沙土鼠脑缺血再灌注海马CA1区神经元凋亡的影响

目的:观察高压氧 (HBO) 作用下沙土鼠脑缺血再灌注海马CA1区神经元凋亡的变化,探讨HBO对脑缺血再灌注损伤的疗效及其机制.方法:建立沙土鼠脑缺血后再灌注模型,用HBO治疗连续3 d后,应用H-E和TUNEL染色方法,观察海马CA1区神经元的凋亡情况.结果:两种方法均显示沙土鼠脑缺血再灌注3 d后海马CA1区大量神经元凋亡,HBO治疗组凋亡细胞数明显减少(P<0.01),并以0.25 ATA HBO治疗组为佳.结论:HBO治疗对海马神经元缺血性损伤有保护作用,能减少其凋亡,是HBO治疗脑缺血性损伤的疗效机制之一.     

氧惊厥时海马生长抑素神经元的原位杂交组织化学变化

目的；观察大鼠海马生长抑素阻断神经元在高压氧致惊厥中的变化。方法；应用原位杂交组织化学法。结果；大鼠氧惊厥时ＳＳｍＲＮＡ阳性神经元在海马各区均有分布，且数目而其余各组ＳＳｍＲＮＡ阳性神经元多分丰于海马ＣＡ４区。结论；海 ＳＳ神经元在氧惊厥时可能通过对γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）的抑制及释放ＳＳ兴奋海马的锥体体细胞，发挥与兴奋性氨基酸相类似的作用而参与氧惊厥的发病机理。     

高压氧暴露对大鼠硝酸甘油耐受性的影响

目的:观察大鼠高压氧暴露(HBO)对硝酸甘油(NTG)效应的影响,探讨NTG耐受性形成的机制.方法:20只大鼠随机分为常压空气吸入对照组(n=7)、NTG连用组(NTG 10 mg/kg皮下给药,每日3次,连用6 d,n=6)和HBO组(350 kPa压力下纯氧吸入120 mm,每日1次,连续4 d,n=7).以静注NTG后鼠尾容积变化评定耐受性,最后测定血管组织亚硝酸盐(NO2-)、总硝酸盐(NOx-)、氧自由基(O2-·)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)水平,并与对照组进行比较.结果:HBO使舌静脉注射NTG增加鼠尾容积的作用明显减弱,主动脉组织中的NO2-明显降低,O2-·和MDA含量显著增高.这些结果与NTG连用组相似.另外,NTG连用引起NOx-明显升高和SOD活力明显下降,而HBO组则无明显变化.结论:HBO可引起与NTG连续应用相似的耐受性,表明氧化应激血管组织O2-·产物升高是硝酸酯类耐受性形成的重要机制;连续应用NTG出现O2-·增高可能与SOD活力降低也有关系.     

成年大鼠海马CAI区锥体细胞的急性分离方法

目的建立一种膜片钳技术(patch clamp technique,PCT)的成年大鼠海马CAI区锥体细胞(adultra hippocampal CAI pyramidal neuron,ARHCPN)的急性分离方法.方法采用酶加机械分离的方法制备ARHCPN,用相差显微镜观察其形态特征,并用PCT的细胞贴附模式记录L-型Ca2 通道的单通道电话动.结果所分离的ARHCPN不仅形成学特征保存完好,而且保存了L型Ca2 通道的电生理学特性.结论成功地建立了一种简单、快速、可靠的适用于膜片钳单通道记录的ARHCPN的急性分离方法.     

高压氧对液压颅脑损伤大鼠脑组织线粒体及认知功能的影响

目的 探讨高压氧(HBO)治疗对液压颅脑损伤大鼠脑组织线粒体和认知功能的改善作用.方法 SD大鼠分为模型组和假损伤组,其中模型组均经液压颅脑损伤建模并根据所接受的氧疗方式分为低浓度氧治疗组(n=23)、高浓度氧治疗组(n=24)和HBO治疗组(n=23);假损伤组(n=22)则接受与模型组同样的手术,但不予液压颅脑损伤,接受与低浓度氧治疗组相同的治疗.氧疗结束后,高效液相色谱分析测定大脑皮层三磷酸腺苷(ATP)水平;流式细胞仪检测脑组织线粒体活性氧分子(ROS)的生成;Nissl染色对海马区神经元进行计数.Morris水迷宫法记录大鼠逃避潜伏期,评判颅脑损伤后11～15 d的大鼠认知功能.结果 HBO治疗组和高浓度氧治疗组脑组织ATP水平与假损伤组接近(P＞0.05),显著高于低浓度氧治疗组(P＜0.05).HBO治疗组海马CA2/3区和门区神经元计数均显著高于低浓度氧治疗组和高浓度氧治疗组(P＜0.05).各组间脑组织线粒体ROS生成量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).Morris水迷宫测试中,HBO治疗组大鼠逃避潜伏期明显短于低浓度氧治疗组和高浓度氧治疗组(P＜0.05).结论 HBO治疗液压颅脑损伤大鼠,有助于维持大脑线粒体ATP合成功能;同时减少海马区神经元丢失,改善认知功能.     

高压氧对液压颅脑损伤大鼠脑组织线粒体及认知功能的影响

目的 探讨高压氧（HBO）治疗对液压颅脑损伤大鼠脑组织线粒体和认知功能的改善作用.方法 SD大鼠分为模型组和假损伤组,其中模型组均经液压颅脑损伤建模并根据所接受的氧疗方式分为低浓度氧治疗组（n=23）、高浓度氧治疗组（n=24）和HBO治疗组（n=23）;假损伤组（n=22）则接受与模型组同样的手术,但不予液压颅脑损伤,接受与低浓度氧治疗组相同的治疗.氧疗结束后,高效液相色谱分析测定大脑皮层三磷酸腺苷（ATP）水平;流式细胞仪检测脑组织线粒体活性氧分子（ROS）的生成;Nissl染色对海马区神经元进行计数.Morris水迷宫法记录大鼠逃避潜伏期,评判颅脑损伤后11～15 d的大鼠认知功能.结果 HBO治疗组和高浓度氧治疗组脑组织ATP水平与假损伤组接近（P＞0.05）,显著高于低浓度氧治疗组（P＜0.05）.HBO治疗组海马CA2/3区和门区神经元计数均显著高于低浓度氧治疗组和高浓度氧治疗组（P＜0.05）.各组间脑组织线粒体ROS生成量比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.Morris水迷宫测试中,HBO治疗组大鼠逃避潜伏期明显短于低浓度氧治疗组和高浓度氧治疗组（P＜0.05）.结论 HBO治疗液压颅脑损伤大鼠,有助于维持大脑线粒体ATP合成功能;同时减少海马区神经元丢失,改善认知功能.     

高压氧对缺氧新生大鼠脑超微结构及细胞凋亡的影响

目的观察高压氧治疗对新生大鼠缺氧损伤后脑超微结构及脑细胞凋亡的影响.方法新生30h的Wistar大鼠制作缺氧性脑损伤模型,随机分为缺氧后24h组、9d组和高压氧治疗组,并设正常对照组,采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡率、电镜观察海马区超微结构.结果脑细胞凋亡率缺氧后24h和第9天分别为3.21%和1.32%,均明显高于正常对照组(0.16%)和经高压氧治疗9d组(0.57%).缺氧后24h海马神经细胞线粒体肿胀、脊断裂、高尔基体囊泡扩张,神经毡水肿明显;缺氧后9～18d,神经细胞固缩改变、双核仁,胞浆致密,线粒体肿胀,脑组织点状溶解灶,周围髓鞘变性,胶质细胞增生,微血管腔受压变形.经高压氧治疗9～18d后,海马脑组织除胶质细胞和突起轻微肿胀外,神经元和突触无明显异常.结论高压氧治疗可减轻缺氧所致脑损伤.     

高压氧所致脂质过氧化反应的初步探讨

本文观察了3.5ATA(标准大气压)和2.0ATA条件下吸入纯氧或空气30min后,SD大鼠血浆、心肌和脑组织中LPO、SOD含量的变化。显示在该条件下LPO含量增高,SOD含量减少。认为高压氧能促进脂质过氧化反应。     

HBO对内皮素-1诱导的大鼠局灶性脑缺血模型的疗效观察

目的:利用内皮素-1(endothelin-1, ET-1)建立一种操作简单、稳定性和重复性好的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型并观察高压氧(hyperbaric oxygen, HBO)治疗的效果.方法:动物麻醉后,将3 μl ET-1(60 pmol/μl)注射到大鼠大脑中动脉附近,建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.ET-1 HBO组大鼠术后1 h给予HBO[100% O2, 2.5 atmosphere absolute(ATA), 2 h]治疗;ET-1组不予治疗.所有动物在术后4、8和24 h进行神经学评分,24 h断头取脑,测定左右半球脑含水量,进行TTC和H-E染色. 结果:ET-1诱导的大鼠局灶性脑缺血模型成功率较高(20/24),梗死体积稳定,重复性好.经HBO治疗后,ET-1 HBO组与ET-1组相比,4、8和24 h的神经学评分均明显改善(4 h和8 h有P＜0.05, 24 h有P＜0.01),脑含水量显著降低(P＜0.01),梗死体积显著缩小(P＜0.05),H-E染色示脑损伤明显减轻.结论:ET-1诱导的大鼠局灶性脑缺血模型是研究人类脑缺血疾病较理想的实验动物模型,HBO治疗能明显减轻缺血性脑损伤.     

大鼠创伤性脑损伤后高压氧治疗的时间窗研究

目的观察不同开始时间和不同次数高压氧（HBO）治疗对创伤性脑损伤（TBI）大鼠神经损伤的疗效,明确HBO治疗的时间窗和有效的治疗次数。方法采用Feeney法制备TBI模型,分别在致伤3、6、12、24、48、72h后开始HBO治疗,观察治疗后大鼠神经行为学、海马结构形态学的变化,确定HBO治疗的有效时间窗和治疗次数。结果治疗组伤后3、6、12h进行1次HBO治疗,大鼠海马CA2、CA3区锥体细胞形态及神经行为学评分显著改善,细胞丢失显著减少,其中3、6h的作用最佳（均P〈0．01）。而伤后24、48、72h进行1次HBO治疗,与对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0．05）。伤后6h,进行I、3、5次HBO治疗,各次治疗后在神经行为学、海马结构形态学方面的差异均无统计学意义（均P〉0．05）。但伤后24h,进行1、3、5次HBO治疗后,3、5次治疗效果明显好于1次治疗（均P〈0．05）。结论大鼠TBI后6h内起行HBO治疗效果显著,增加治疗次数有助于增加疗效。