白血病患者异基因造血干细胞移植后T细胞免疫重建的研究

目的 通过分析TCR Vβ基因片段选择性扩增，了解白血病患者异基因外周血干细胞移植后T淋巴细胞的免疫重建及其在移植物抗宿主病(GVHD)患者中的表达特点．方法 采用RT—PCR扩增10例移植后患者外周血的单个核细胞的TCR Vβ24个基因片段，分析其TCR Vβ基因的表达情况，GVHD患者的PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性．结果 经24个Vβ引物所分别进行的RT—PCR检测TCR Vβ各亚家族基因的表达情况，发现10例病人外周血与正常人表达24个Vβ亚家族有明显的不同，病人的部分Vβ亚家族T细胞仍未能重建，仅表达5-22个亚家族基因；9例GVHD患者外周血仅表达2—8个TCR Vβ亚细胞生长．结论 移植后病人外周血淋巴细胞TCR Vβ基因片段部分受抑制，部分基因片段呈选择性扩增．GVHD患者有Vβ3和Vβ8基因的优势表达，并有克隆性T细胞生成．     

异基因造血干细胞移植CD94分子在T细胞高表达的意义初探

目的检测CD94分子在T细胞表达的水平,同时探讨在异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD94分子在T细胞表达的意义。方法HSCT治疗高危白血病和遗传性溶血性贫血成功植入的儿童患者,其中同胞脐血移植(UCBT)10例,非血缘相关UCBT1例,异基因外周血造血干细胞移植(alloPBSCT)5例,在移植前后发生GVHD时采用流式细胞仪检测和比较外周血中CD94的表达,并与正常外周血水平比较。结果CD94主要表达于CD3+CD8+T细胞,正常情况下外周血和脐血T细胞表达率低于10%,其中CD4+细胞几乎不表达,低于2%。但在UCBT或alloPBSCT后CD94在CD4+T细胞和CD8+T细胞均明显增高。3例UCBT无GVHD,其余均发生了ⅠⅣ0急性GVHD。急性GVHD发生时CD4+CD94+和CD8+CD94+T细胞表达明显升高。结论异基因造血干细胞移植后发生GVHD时,T细胞高表达CD94,可能是在同种抗原的刺激下机体自我保护的结果。     

NK细胞在异基因造血干细胞移植中对移植物抗白血病效应及移植物抗宿主病作用的影响

白血病复发和移植物抗宿主病（GVHD）是异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后影响病人生存的主要障碍。自然杀伤细胞（NK）独特的受体表达使其具有不同于一般免疫细胞的“同种反应性”效应,这种作用使NK细胞在增强移植物抗白血病效应（GVL）的同时抑制GVHD的发生,从而达到两者的分离。NK细胞在异基因造血干细胞移植中产生GVL及GVHD作用的机制以及影响因素的深入研究可能为探讨如何改善异基因造血干细胞移植预后提供有益的参考。     

异基因造血干细胞移植后肺部并发症的发生和危险因素分析

目的探讨治疗恶性血液病异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后肺部并发症与相关危险因素的关系。方法回顾性分析1991年8月至2004年6月157例allo—HSCT患者的临床资料。结果71例患者发生87例次肺部并发症，其中15例患者发生2次以上肺部并发症，总发生率为45.2％。直接死于肺部并发症者37例（23．6％），发生中位时间103d（1～886d）。其中细菌性肺炎32例，间质性肺炎8例，肺真菌病3例，肺水肿3例，肺结核2例，肺栓塞1例，2种或2种以上病原所致的肺部并发症38例次。单因素分析显示：患者年龄、疾病状态、供受者关系、HLA配型相合程度及广泛型慢性移植物抗宿主病（cGVHD）是影响移植后肺部并发症的危险因素。多因素分析显示：疾病状态和广泛型cGVHD与肺部并发症的发生显著相关（P＜0．01）。结论肺部并发症是allo—HSCT后常见的并发症之一。患者移植时疾病状态和广泛型cGVHD是与allo—HSCT后肺部并发症发生相关的危险因素。     

细胞因子在白血病异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病中的水平及其意义

目的:探究细胞因子TNF-α、IL-6和IL-8在白血病异基因造血干细胞移植后的变化和病情及预后的关系.方法:用放射免疫分析检测了白血病异基因造血干细胞移植患者(48例)、正常健康人(30例)血清TNF-α、IL-6和IL-8水平,对移植后发生或未发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)及发生或未发生慢性移植物抗宿主病(cGVHD)进行了比较,并对预后也进行比较.结果:急、慢性GVHD组与未发生急、慢性GVHD组患者的血清TNF-α、IL-6及IL-8水平均高于正常对照组(P＜0.05,除未发生cGVHD组的TNF-α浓度低外);急、慢性GVHD组与未发生急、慢性GVHD组比血清TNF-α、IL-6及IL-8水平均升高(P＜0.05);移植后死亡组生存时间≤6月及＞6月(除＞6月的IL-8水平外)各组TNF、IL-6与IL-8水平均高于同期的存活组(P＜0.05).结论:异基因造血干细胞移植术后动态监测TNF、IL-6、IL-8水平变化有助于对发生aGVHD 或cGVHD的可能提供另一种检测方法,并对判断愈后有一定的临床意义.     

小鼠异基因造血干细胞移植后使用G-CSF对aGVHD的影响

 目的: 探讨小鼠异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后使用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响及其可能的机制。方法: 以雄性C57BL/6小鼠(H-2^b)为异基因供鼠,雄性BALB/c小鼠(H-2^d)为同基因供鼠;以接受8 Gy[⁶⁰Co] γ射线全身照射(TBI)预处理雌性BALB/c小鼠为受鼠,并随机分为7组:单纯TBI组、同基因骨髓+脾细胞移植(Syn-BMST)组、异基因骨髓移植(allo-BMT)组、异基因骨髓+脾细胞移植(allo-BMST)组、Syn-BMST后G-CSF给药(Syn-BMST+G-CSF)组、allo-BMT后G-CSF给药(allo-BMT+G-CSF)组和allo-BMST后G-CSF给药(allo-BMST+G-CSF)组,各G-CSF给药组从移植后第1天(+1 d)开始皮下注射G-CSF 2 μg/d,观察至+60 d。比较各组生存时间、aGVHD发生情况和病理改变,流式细胞术检测骨髓H2-Kb⁺细胞百分率(异基因嵌合率),比较allo-BMST和allo-BMST+G-CSF组+10 d时血清细胞因子(IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α)水平、脾总有核细胞数(SpTNC)和脾细胞免疫表型的差异。结果: 单纯TBI组小鼠于照射后9~15 d死于造血衰竭,其余各组+10 d时均100%获得造血重建,随机抽取2只异基因骨髓移植受鼠,+30 d供者细胞嵌合率分别为99.8%和99.4%,表明清髓性allo-HSCT模型建立成功。Syn-BMST、Syn-BMST+G-CSF、allo-BMT和allo-BMT+G-CSF组小鼠观察至+60 d均未发生aGVHD。与allo-BMST组相比,allo-BMST+G-CSF组受鼠出现aGVHD时间早、程度重、病理改变严重、存活时间明显缩短(P<0.05)、+10 d SpTNC明显增加(P<0.05)、脾脏NK细胞显著扩增 (P<0.01)、DC1/DC2比值减低(P<0.05),而2组血清IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α水平差异无统计学意义。结论: 移植后使用G-CSF对小鼠异基因单纯骨髓移植后aGVHD无明显影响,但能显著加重allo-BMST后aGVHD的严重程度并缩短受鼠生存时间,该效应可能与G-CSF诱导供鼠NK细胞扩增有关,提示临床allo-HSCT后早期使用G-CSF可能触发或加重aGVHD的风险。     

单倍体造血干细胞移植治疗白血病23例

BACKGROUND:Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is one of the effective methods in the treatment of leukemia. The haploidentical HSCT is an option for the patients who need a HSCT without a human leukocyte antigen (HLA)-matched donor. OBJECTIVE:To study the clinical efficacy of HLA-haploidentical HSCT on leukemia and its complications. METHODS:A total of 23 patients (4 cases of acute lymphoblastic leukemia, 12 of acute myelogenous leukemia, and 7 of chronic granulocytic leukemia) who had been treated with HLA-haploidentical HSCT from November 2007 to March 2015 were enrolled. Conditioning regimen I was set as cyclohexyl nitrosourea+cytarabine+busulfan+cyclophosphamide; regimen II as cyclophosphamide+total body irradiation; regimen III as fludarabine+cytarabine+busulfan+cyclophosphamide; and regimen IV as busulfan+cyclophosphamide. Cyclosporin A, mycophenlate mofetil, antithymocyte globulin and methotrexate were used to prevent graft-versus-host disease (GVHD). Hematopoietic remodeling, complications and prognosis were observed in all patients undergoing HLA-haploidentical HSCT. RESULTS AND CONCLUSION:Of the 23 patients, 22 achieved reconstitution of the granulocyte series, and 19 achieved reconstruction of the megakaryocyte series. Additionally, there were 7 cases of acute GVHD and 4 of chronic GVHD. Transplant-related mortality was 22% (5/23) within 100 days post transplantation including graft failure, acute GVHD, intracranial hemorrhage and disseminated infections. There were 14 cases of disease-free survival from 100 days to 24 months post transplantation, 2 cases of death due to GVHD and fungal infection, or recurrence and chronic GVHD, and 2 cases of recurrence under treatment. These findings indicate that HLA-haploidentical HSCT is an effective approach for the treatment of patients with leukemia, which is worth further investigation in clinical practice.     

异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病*

背景：异基因外周血造血干细胞移植是治疗白血病的有效手段。 目的：比较血缘与非血缘供者异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病的造血重建、免疫重建、感染、移植物抗宿主病及疗效。 方法：选择接受异基因外周血造血干细胞移植治疗的白血病患者45例,其中30例患者接受血缘供者造血干细胞移植(血缘组),15例患者接受非血缘供者造血干细胞移植(非血缘组)。 结果与结论：①造血重建：血缘组白细胞和血小板重建时间均快于非血缘组(P < 0.05)。在移植后30~40 d植活证据指标测定提示异体造血干细胞在受者体内完全植活。②T细胞重建：两组移植后各时间点T细胞重建差异无显著性意义。③感染发生率：两组移植后早期感染发生率,急、慢性移植物抗宿主病发生率差异无显著性意义(P > 0.05)。④白血病复发：两组移植后复发率差异无显著性意义(P > 0.05)。⑤无病生存：两组移植后2年无病生存率差异无显著性意义(P > 0.05)。表明血缘供者异基因外周血造血干细胞移植后的造血重建较非血缘供者迅速,但两者间移植后T细胞重建、感染发生率、移植物抗宿主病及无病生存并无差异。      

异基因造血干细胞移植后的移植物抗白血病作用的临床观察

移植物抗白血病作用（GVL）是异基因造血干细胞移植后,引起造血系统肿瘤持续缓解状态的一种免疫介导的反应。目前,对GVL的机理仍不清楚。临床上观察到,在GVL出现前,病人多经历了一个急或慢性的移植物抗宿主病（GVHD）过程。GVHD使受者正常的组织和细胞受到损伤,而同时产生     

CD40L表达在异基因造血干细胞移植中GVHD发生的意义

目的：初步探讨在异基因造血干细胞移植（HSCT）中发生移植物抗宿主病（GVHD）患者DC40L表达的变化以及意义。方法：HSCT治疗重型β-地中海贫血（n=12）和遗传性溶血性贫血（n=1）成功植入的儿童患者，其中脐血移植（UCBT）8例，异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)5例，在移植前、移植后发生GVHD时采用流式细胞仪检测和比较外周血中CD40L和CD40的表达。结果：3例UCBT无GVHD，其余均发生了Ⅰ-Ⅳ度急性GVHD。急性GVHD发生时CD4^ CD40L^ 和CD8^ CD40LT细胞表达明显升高，allo-PBSCT者更明显；慢性GVHD发生时患者的CD40L^ 、CD25^ 和CD69^ 在CD4^ 和CD8^ T细胞上的表达亦增加。CD19^ CD40^ B细胞的表达在UCBT和allo-PBSCT的3个月内则一直处于低于正常的水平。结论：CD40L高表达与GVHD的发生相关，提示CD40-CD40L共刺激途径在GVHD的发生中可能起着重要作用。     

外周血miR-200c水平对移植异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病发生的预测作用

目的 探讨外周血miR-200c水平对移植异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生的预测作用。方法 选择2014年1月至2018年10月在昆明医科大学第一附属医院血液科行异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)的51例患者作为研究对象,根据移植后是否发生aGVHD原则分为实验组(发生aGVHD)33例、对照组(未发生aGVHD)18例。抽取肘部外周血5 mL,RT-qPCR检测两组miR-200c,分析两组miR-200c表达差异。结果 两组患者均移植成功,且恢复造血功能,恢复时间为18 d,其中33例发生aGVHD,18例未发生aGVHD,发生率为64.71%;实验组在移植前、移植后7、14、及72 d时,miR-200c表达均低于对照组(P<0.05);aGVHD发生后外周血中miR-200c显著低于发生前(P<0.001);与aGVHDⅠ度相比,aGVHDⅡ度患者外周血中miR-200c表达下调(P<0.05),与Ⅱ度相比,aGVHDⅢ度患者外周血中miR-200c表达下调(P<0.001);miR-200c高表达组患者2年总生存率高于低表...     

异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病临床疗效分析

目的总结162例异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）[包括：同胞allo-HSCT125例．非血缘关系allo-HSCT30例和非清髓异基因外周血造血干细胞移植（allo-PBSCT）7例1治疗恶性血液病疗效和生存状况。方法慢性粒细胞白血病（CML）患者62例，急性髓系白血病（AML）患者58例，急性淋巴细胞白血病（ALL）患者28例．骨髓增生异常综合征（MDS）6例，多发性骨髓瘤（MM）3例，非霍奇金淋巴瘤（NHL）3例，慢性粒单细胞性白血病（CMML）1例．霍奇金淋巴瘤（HD）1例。经预处理，进行人类白细胞抗原（HLA）相合的同胞异基因骨髓移植（allo-BMT）27例．allo-PBSCT98例和非血缘关系allo-BMT4例，非血缘关系aUo-PBSCT26例．HLA相合的同胞非清髓allo-PBSCT7例。非血缘关系allo-HSCT患者采用长程加强的移植物抗宿主病（GVHD）的预防方案（将环孢菌素A提前至预处理开始时使用，同时加用霉酚酸酯）。结果移植后中位随访38（2-259）个月。allo-HSCT患者长期DFS为54、9％（89／162），CML至今DFS为61-3％（38／62），AML至今DFS为56，9％（33／58），ALL至今DFS为39-3％（11／28）．MDS至今DFS为83-3％（5／6），3例NHL存活1例，1例CMML存活．3例MM均死亡．霍奇金淋巴瘤（HD）1例死亡。移植后100d内移植相关死亡率（TRM）19．8％（32／162），死亡原因分别为急性GVHD、播散性感染、复发和植入失败；移植后100d至2年内TRM为24、7％（40／162）．死亡原因分别为慢性GVHD、CMV感染和疾病复发，1例于移植后1413d死亡．其余移植超过2年均存活，死亡原因是慢性GVHD合并感染，最长生存已11年。结论allo-HSCT可使相当部分白血病患者获得长期无病存活．治疗MDS效果良好．治疗MM效果很差。该组患者移植后100d内死亡原因主要是急性GVHD：移植后100d至2年内死亡的主要原因是慢性GVHD和CMV感染、疾病复发；故除正确处理移植相关并发症?     

荧光原位杂交技术在异基因造血干细胞移植监测中的作用**

背景：异基因造血干细胞移植后,嵌合率下降与移植物被排斥及白血病复发密切相关,常规骨髓细胞学检查、染色体检查、流式细胞学检查等均不能敏感特异地监测嵌合率。 目的：验证荧光原位杂交技术检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的敏感性和特异性。 方法：应用荧光原位杂交法检测异性同胞异基因造血干细胞移植后患者X、Y 性染色体及慢性粒细胞白血病序列特异性bcr/abl融合基因,以骨髓细胞学检查为对照。 结果与结论：3例异基因造血干细胞移植患者共复查骨髓细胞学检查及荧光原位杂交检查7次。4次骨髓细胞学检查及荧光原位杂交检查均完全相符,另外3次骨髓细胞学检查提示完全缓解,而荧光原位杂交检查能检测到少量异常信号,证实应用荧光原位杂交法较骨髓细胞学具有显著优越性,能动态敏感、特异地检测嵌合率。 关键词：荧光原位杂交;白血病;异基因;造血干细胞;细胞移植 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.06.021     

HLA单倍体与全相合异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

背景：异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病的一种非常有效的方法。单倍体相合的造血干细胞移植扩大了移植的应用范围,是无HLA相合供者患者的一种重要选择。 目的：比较HLA单倍体相合与全相合异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床疗效。 方法：回顾性分析接受异基因造血干细胞移植79例恶性血液病患者的临床资料,其中HLA单倍体相合组26例、全相合组53例,对比两组受者移植物抗宿主病的发生率、复发率、2年生存率等。 结果与结论：78例受者获得完全、持久供者干细胞植入;1例受者在移植后28 d尚未植入,后因感染死亡。两组慢性移植物抗宿主病发生率、复发率和2年无病生存率差异无显著性意义(P > 0.05)。单倍体相合组急性移植物抗宿主病发生率高于全相合组(P < 0.05);2年总生存率低于全相合组(P < 0.05)。提示血缘HLA单倍体相合移植治疗恶性血液病的安全性及疗效接近于全相合移植,在缺乏HLA相合供者的情况下,行HLA单倍体相合造血干细胞移植治疗恶性血液病是切实可行的选择。     

异基因造血干细胞移植后EB病毒再激活的危险因素分析

背景：异基因造血干细胞移植后EB病毒再激活可导致致死性的移植后淋巴细胞增殖性疾病及相关疾病,目前国内尚未建立完整的EB病毒再激活及其相关性疾病的诊疗体系。 目的：前瞻性研究异基因造血干细胞移植后患者EB病毒再激活的发生和相关危险因素。 方法：纳入129例接受异基因造血干细胞移植的患者,采用实时定量PCR方法定期测定外周血中EB病毒载量,Kaplan-Meier模型分析其再激活的发生率,Logistic回归分析模型分析其再激活的相关危险因素。 结果与结论：异基因造血干细胞移植后EB病毒再激活及其相关疾病发生率高,EB病毒再激活发生的危险因素有HLA配型不合、应用抗胸腺细胞球蛋白、Ⅲ~Ⅳ度急性移植物抗宿主病及年龄小于20岁。     

异基因造血干细胞移植治疗24例重型再生障碍性贫血北大核心

背景:重型再生障碍性贫血病情重、病死率高,需快速恢复造血功能,目前异基因造血干细胞移植为一线治疗方案,同胞全相合异基因造血干细胞移植为首选,单倍体相合造血干细胞移植作为替代治疗方案也取得了较好的效果。目的:探讨异基因造血干细胞移植(包括同胞全相合造血干细胞移植及单倍体相合造血干细胞移植)治疗重型再生障碍性贫血的临床疗效。方法:回顾性分析2015年4月至2021年7月于徐州市中心医院接受异基因造血干细胞移植治疗24例重型再生障碍性贫血患者的临床资料,其中接受同胞全相合造血干细胞移植8例,接受单倍体相合造血干细胞移植16例。24例重型再生障碍性贫血患者预处理方案为氟达拉滨、环磷酰胺、抗淋巴细胞球蛋白方案。同胞全相合造血干细胞移植采用环孢素联合短程甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病,单倍体相合造血干细胞移植在此基础上增加吗替麦考酚酯。结果与结论:①24例重型再生障碍性贫血患者中有2例患者预处理期间死于严重感染,其余22例均达造血重建;中性粒细胞植入中位时间为12.5(10-18)d,血小板植入中位时间为14.5(10-26)d;②22例植入成功患者发生急性移植物抗宿主病8例(36%),Ⅲ/Ⅳ度急性移植物抗宿主病2例,慢性移植物抗宿主病累计发生4例(18%),Ⅲ/Ⅳ度慢性移植物抗宿主病1例;③18例患者存活,6例患者死亡,5年预计总生存率为74%;④结果表明,异基因造血干细胞移植为重型再生障碍性贫血的有效治疗手段,同胞全合供者作为首选,无同胞全相合供者时可选择单倍体相合供者作为替代。     

清肿瘤性异基因造血干细胞移植

标准的清髓性异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)对于需代替治疗的造血与免疫系统的非恶性疾病,应当是合理或足够的;然而,对于恶性血液病患者,清除患者骨髓造血组织,成功重建异体正常造血与免疫系统,并不一定能完全治愈恶性血液病,因为白血病(干)细胞并非只限骨髓中存在,它可浸润骨髓之外的其他任何组织。临床实践证实,allo-HSCT后仍然有30%左右的患者疾病复发,特别是具有高危因素或难治复发患者复发率可高达40%～70%以上。这些复发的白血病细胞几乎全系源自患者移植前本身的白血病细胞,其中半数患者以髓外部位复发开始,有证据提示,清髓性移植并没有完全杀灭患者体内的白血病细胞,特别是那些对化放疗不敏感或栖居在髓外"庇护所"中的白血病干细胞,最终导致疾病复发。因此笔者提出并建立了一个清肿瘤性异体造血干细胞移植(TAHSCT)的概念,在临床上对其进行了初步的探讨。其内容贯穿于移植技术全过程的各个环节,但主要为应用个体化清肿瘤性预处理方案和加强移植后免疫治疗。     

过继免疫疗法在异基因造血干细胞移植中的应用

近年来免疫识别等方面取得的一些研究进展为克服或逆转异基因造血干细胞移植（Allo－HSCT）的主要伴发症——继发性免疫缺陷和移植物抗宿病（GVHD）提供了新思路：如过继输注病毒特异性T淋巴细胞,重建移植病人的特异性免疫功能;Allo-HSCT后行供体淋巴细胞输入（DLI）延长病人的缓解期,以及诱导移植物抗白血病（GVL）效应等。因此,本文就近几年来异基因造血干细胞移植中过继免疫疗法的某些研究进展进行综述。     

异基因造血干细胞移植后骨髓免疫微环境重建研究

GVHD 和GVL 是影响异基因造血干细胞移植术成败的关键因素。骨髓不仅是造血器官,更是免疫器官,骨髓中的免疫微环境关乎移植后造血重建、免疫功能重建、移植后白血病复发。本文将从骨髓微环境的病理生理特点、异基因造血干细胞移植后免疫功能重建、骨髓免疫微环境与移植后造血恢复及移植后白血病复发等角度,综述近年来关于异基因造血干细胞移植后骨髓免疫微环境重建与造血重建和白血病复发相关研究情况。