BCL-6表达对生发中心形成及淋巴瘤发生的作用

目的 探讨BCL－6在正常淋巴组织和一组淋巴瘤中的表达与生发中心形成及不同类型淋巴瘤发生的关系。方法 形态学免疫组织化学方法对17例反应性增生淋巴组织（RLH）及74例不同类型淋巴瘤进行检测并分类，免疫组化法检测各组织石蜡标本中BCL－6表达情况。结果 17例RLH生发中心细胞、10例滤泡性淋巴瘤（FL）及4例弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中等强度表达BCL－6，3例FL及21例DL－BCL BCL－6表达为强阳性（72％），高于其他各组（P＜0．01）。17例RIH生发中心外细胞，4例DLBCL，14例小淋巴细胞淋巴瘤（SLL）、4例套细胞淋巴瘤（MCL）及14例经典型霍奇金淋巴瘤（HD）BCL－6阴性。结论 BCL－6表达与生发中心形成密切相关。少数FL和大部分DLBCL中BCL－6过表达，可能与这些淋巴瘤发病机制有关。检测BCL－6有助于FL与SLL，MCL间及RLH与HD间的鉴别诊断。     

牙髓NGF染色中抗原修复的探讨

在免疫组织化学染色中 ,抗原修复的好坏直接影响免疫组织化学染色的结果。为了提高在牙髓ＮＧＦ免疫组织化学染色中的抗原性 ,使阳性部位显色更加明显 ,我们对牙髓组织中的抗原修复 ,采用酶消化和热煮沸法进行比较 ,以探讨最佳的抗原修复方法。１材料与方法１．１组织标本牙髓标本来源于本院牙体牙髓室。采用１０ %福尔马林液固定。１．２方法载玻片预处理后 ,切片采用ＡＰＥＳ涂片 ,增加组织与玻片的粘附性。切片为４μｍ厚度 ;脱蜡至水 ;经３%过氧化氢处理室温１０ｍｉｎ ;蒸馏水洗 ,进行抗原修复。实验所用免疫试剂均购于武汉博士德生物…     

煮沸法在石蜡切片抗原修复中应用的探讨

目前组织学与病理学切片由常规采用的１０ %福尔马林固定 ,石蜡包埋组织制成。此种切片的苏木精———伊红染色（ＨＥ染色）提供了清晰的 ,可供诊断的组织、细胞图像。随着免疫组织化学技术的出现和逐渐推广 ,发现这种切片的组织中许多抗原物质被掩盖 ,影响对该病变一些抗原表达的观察。为此 ,人们相继采取各种酶、微波和高压处理等方法修复抗原 ,均使各种抗原得到不同程度的修复 ,抗原表达的阳性率提高。但上述诸方法也显示出各自不同的缺点 ,例如 :易脱片、操作复杂或是费用较高等。笔者在观察甲状腺乳头状癌和滤泡癌病变组织中ＣＤ４４（…     

采用高压法对免疫组织化学染色切片进行抗原修复

为了恢复组织的抗原性和提高抗原抗体的敏感程度 ,我们采用高压锅法和微波法对 10多种组织抗原进行修复比较。1　方　　法1 1　微波炉加热　将已脱蜡的组织切片放入立式玻璃染色缸中 ,加入适量的 ｐＨ =6 0的柠檬酸盐缓冲液 ,置于微波炉中加热至微沸后 ,分别于 4、 6、 8、 10ｍｉｎ后取出容器 ,置于室温 ,冷却后用ＰＢＳ缓冲液洗 3次 ,每次 2ｍｉｎ ,下接Ｓ -Ｐ免疫组织化学染色步骤。1 2　高压锅加热　锅内加水 15 0 0～ 2 0 0 0ｍｌ,将已脱蜡的组织切片插入 2 2片装金属染色架上 ,再放入 12ｃｍ不锈缸内 ,缸内加入适量的ｐＨ6 0柠檬酸…     

冰冻切片抗体在石蜡切片免疫组化中的应用

目的：探讨经抗原系列修复后冰冻切片抗体应用于石蜡切片的免疫组化技术。方法：在常规免疫组化的基础上,于Triton X-100处理后,用0．1mol／L的甘氨酸4℃过夜或0．2mol／L的甘氨酸室温2h。0．01mol／L枸橼酸缓冲液pH6．095--98℃微波10min进行组织抗原修复。观察比较GDNF,Caspase-3和：XRCC1冰冻切片抗体在石蜡切片中的免疫反应性(IR)。结果：经过上述条件处理后,石蜡切片中均出现3种冰冻抗体的IR阳性。其中GDNF IR反应性优于Caspase-3和XRCC1-IR,但3种冰冻抗体在冰冻切片或滴片中的IR均高于石蜡切片。结论：石蜡切片经系列抗原修复后免疫反应有一定改善,但与应用的抗体类型有关。     

利用微波促进组织抗原恢复在石蜡切片免疫组化染色中的应用

将石蜡切片浸泡于抗原恢复液，利用微波进行高强度辐射，以恢复组织 因甲醛固定而被封闭的抗原，提高抗原的检出率和染色强度。结果表明，抗原被封闭的组织经抗原恢复处理后，免疫组化染色强度有不同程度的增加，获得了满意的染色效果。一些常规免疫组化方法呈细胞角蛋白，波形蛋白和结蛋白染色阴性或弱阳性的组织，特别是经甲醛长时间固定的组织因抗原的恢复而呈阳性或强阳性反应。     

两种抗原修复法在免疫组织化学中应用的比较

目的探讨微波法与高温高压法对抗原修复的效果。方法分别应用微波辐射法、高压锅直接煮沸法进行抗原修复,行免疫组化染色并比较其应用效果。结果微波修复背景较清晰,阳性细胞表达在应该出现的标本切片中可以见到但阳性强度弱。使用高压锅修复,这样修复的效果是背景干净清晰而且阳性信号强。结论高温高压法较微波法切片背景干净,显色对比鲜明,结构清晰,定位准确,易于观察,方法稳定,结果可靠,可提高病理诊断的准确性。     

抗原修复技术在免疫组化中的应用

免疫组织化学是免疫学与分子生物学和病理形态学相结合的一门学科,已成为现代生物医学的一项重要方法学,其操作简单、特异性强、敏感性高.在病理诊断和科研中已被大家广泛采用,能提供抗原特异性表达和准确定位,促进了临床病理诊断的提高[1].但目前所进行的常规石蜡切片标本均用甲醛固定,使抗原性物质或由于形成醛、羧甲键等原因而被封闭了部分抗原决定簇,或由于蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,从而影响免疫组织化学结果,为解决这些问题需要做抗原修复.常用抗原修复技术有酶消化法、加热法、高温高压加热法等,本文就抗原修复技术的原理、方法和应用进展综述如下.     

微波法与高温高压法抗原修复的探讨

目的:探讨微波法与高温高压法对抗原修复的效果.方法:分别应用微波辐射法、高压锅直接煮沸法进行抗原修复,行免疫组化染色并比较其应用效果.结果:微波修复背景较清晰,阳性细胞表达在应该出现的标本切片中可以见到但表达不明显.使用高压锅修复,这样修复的效果是背景干净清晰而且阳性信号强.结论:高温高压法较微波法切片背景干净,显色对比鲜明,结构清晰,定位准确,易于观察,方法稳定,结果可靠,可提高病理诊断的准确性.     

免疫组织化学抗原修复微波方法的一点改进

本文主要探讨了免疫组织化学抗原修复微波的一点改进方法.     

BCL-2、p53蛋白在胆管癌组织中的表达

目的 研究ＢＣＬ－２蛋白、Ｐ５３蛋白表达与胆管癌预后的关系。方法 应用免疫组化研究４０例胆管癌组织中ＢＣＬ－２蛋白、ｐ５３蛋白表达及其与胆管癌组织类型及术后生存期的关系。结果 胆管癌组织中ＢＣ 白和Ｐ５３蛋白表达旨也生率分别为５５％和４７．５％;ＢＣＬ－２蛋白与Ｐ５３蛋白的表达呈负相关,低分化癌Ｐ５３蛋白阳性率高于高分化癌,高分化癌ＢＣＬ－２蛋白阳性率高于低分化癌;ＢＣＬ－２蛋白表达高或Ｐ５３蛋白     

抗原修复液pH值对淋巴组织免疫组化染色的影响

目的：研究抗原修复液pH值对免疫组化染色结果的影响.方法：选用CD3、CD5、CD10、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、CyclinD1、κ、γ为一抗,Elivision二步法免疫组化染色.染色时分别用pH5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0的抗原修复液作微波抗原修复.结果：不同条件可造成阳性细胞数量及染色强度变化.结论：本实验选用淋巴组织,抗原修复液选择pH7.0,8.0柠檬酸盐缓冲液均优于其它pH值,其中pH8.0染色效果最佳.修复液pH＞8.0影响切片附着,造成脱片.     

抗原修复液pH值和抗体浓度对免疫组织化学技术检测PD-L2染色结果的影响

目的:探讨不同浓度抗体和不同pH值的抗原修复液对免疫组织化学反应结果的影响,以提高免疫组织化学染色阳性率.方法:采用3种不同抗体浓度作预处理后,分别在pH值6.0和pH值9.0条件下,进行免疫组织化学SP法检测PD-L2分子在食管磷状细胞癌组织中的免疫组织化学染色效果.结果:PD-L2抗体稀释浓度1∶400的免疫组化染色效果优于抗体浓度1∶800;pH值9.0的抗原修复液处理后的免疫组化染色效果优于pH值6.0的抗原修复.结论:PD-L2抗体稀释浓度1∶400,pH值9.0抗原修复液处理后的免疫组化染色效果最佳,既可提高免疫组织化学反应阳性表达率,又能提高制片质量,是理想的检测PD-L2分子免疫组织化学反应的优化方案.     

食管鳞癌细胞石蜡切片转铁球蛋白受体的检测

以石蜡切片单克隆抗体ＯＫＴ９检测食管鳞癌细胞转铁球蛋白受体（ＴＦＲ）的表达。结果显示食管鳞癌细胞ＴＦＲ阳性率为７０．１％。探讨了标本固定、熔蜡温度等因素与ＴＦＲ免疫原性的关系。应用该方法检测ＴＦＲ表达具有可行性。     

BCL-x1和BCL-2在喉鳞状细胞癌细胞中的表达

目的 探讨B细胞淋巴瘤/白血病—2(B-cell lymphoma/leukemia-2,BCL—2)基因及B细胞淋巴瘤/白血病—x基因长片段(B-cell lymphoma/keukemia-x,long，BCL-x1)在喉鳞状细胞癌细胞中的表达及应用干扰素—。对其表达的影响。方法 采用SABC免疫组织化学染色，观察比较干扰素治疗10周后喉癌组织(25例)和未治疗组(27例)喉癌组织中喉鳞状细胞中BCL-x1、BCL—2蛋白的表达。结果 ①治疗组喉癌组织中BCL—xl表达OD值为0．12，未治疗组OD值为0．2l，两组表达率差异有显著性意义(P＜0．05)；②52例喉癌组织中均无BCL-2蛋白表达。结论 BCL—xl可能在喉癌细胞凋亡中发挥抗凋亡作用，干扰素—α可能通过抑制BCL-x1表达而发挥其凋亡诱导作用。     

急性白血病抗凋亡基因BCL-2的表达及其意义

目的：探讨ＢＣＬ－２基因转录在急性白血病中的作用。方法：应用逆转录／聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测２０例急性白血病患者细胞中ＢＣＬ－２ｍＲＮＡ的表达。结果：９例完全缓解（ＣＲ）患者中２例（２２．２％）呈ＢＣＬ－ｍＲＮＡ阳性,而１１例不缓解（ＮＲ,包括难治及复发）患者均呈ＢＣＬ－２ｍＲＮＡ阳性（１００％）,两组ＢＣＬ－２ｍＲＮＡ阳性比例的差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。结论：急性白血病ＢＣＬ－２的表达升高可直接影响化疗效果,且是判断患者预后的有用指标。     

CD44v6、ki-67在宫颈癌的表达及临床意义

目的：探讨CD44v6、Ki-67在宫颈癌中的表达情况及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测63例宫颈癌和正常宫颈组织中CD44v6、Ki-67的表达情况并分析其与有关的临床病理因素间的关系。结果：CD44v6的着色部位主要在细胞膜和细胞质;而Ki067主要在胞核。CD44v6在正常宫颈上皮、宫颈原位癌和宫颈浸润癌性表达率显著升高（P＜0．01）。CD44v6阳性表达与宫颈癌的盆腔淋巴结转移、脉管浸润和Ki－67的表达情况有关（P＜0．05）;而与临床分期、分化程度、组织学类型、间质浸润和癌灶大小无关（P＞0．05）。有淋巴结转移、脉管浸润和Ki-67过表达者CD44v6的阳性表达率显著高于无淋巴结转移、脉管浸润和ki－67低表达者。结论：CD44v6的阳性表达可能在宫颈癌的发生发展、淋巴结转移、脉管浸润和癌细胞增殖过程中起着重要的作用,但非唯一决定因素。CD44v6的检测对于了解宫颈癌的生物学行为和判断宫颈癌患者的预后有一定的实用价值。     

CD15s抗原和CD44v6基因蛋白在胆管癌中的表达及其临床意义

目的　探讨CD15s抗原和CD4 4v6基因蛋白表达与胆管癌生物学行为的关系。方法　用催化信号放大免疫组化方法 ,检测 4 3例胆管癌组织中CD15s抗原和CD4 4v6基因蛋白表达 ,综合分析了CD15s和CD4 4v6表达与胆管癌临床病理因素间的关系。结果　在胆管癌组织中 ,CD15s和CD4 4v6表达阳性率分别为 6 7 4 %和 6 2 8%。CD15s和CD4 4v6表达与胆管癌的国际癌症分类法 (TNM )分期、分化程度和转移密切相关 (P <0 0 5 )。CD15s表达与CD4 4v6表达呈正相关 (r =0 4 9,P <0 0 0 5 )。结论　CD15s和CD4 4v6表达提示胆管癌生物学行为不良     

不同的抗原修复方法在免疫组化染色中的应用

目的:选择最适宜的抗原修复法.方法:在免疫组织化学染色中,选用鼠抗人5种单克隆抗体,用不同的抗原修复法,对不同染毒剂量、正常对照暴露大脑皮质及海马,石蜡组织切片,依阳性颗粒表达的情况,确定适宜的抗原修复.结果:抗原修复的方法直接影响到组织中抗原的暴露,高压加热法能把被掩盖或交联变性的抗原暴露或修复,使免疫组化的结果更准确可靠,特别是核阳性组织,适用于高压加热法;电炉煮沸法,阳性结果不佳;酶消化抗原修复法,与高压锅加热抗原修复法的阳性结果无区别.结论:核阳性表达的抗体应选用高压锅抗原修复法,推测核阳性表达的抗体也适用于酶消化抗原修复法.