免疫印迹法检测结缔组织病患者血清ENA抗体的研究

目的 检测系统性红斑八疮（ＳＬＥ）口才和其它结缔组织病患血清ＩｇＧ类ＥＮＡ抗体。方法 用小牛胸腺提取核抗原（ＥＮＡ），用免疫印迹法（ＷＢ）与对流免疫电泳（ＣＩＥ）检测结缔组织病口才血清ＥＮＡ抗体。结果 Ｓｍ、ＲＮＰ、ＳＳＢ抗体检出率分别为６３．２％、４４．７％、３８．６％、４４．７％，另发现９０ｋｄ，８５ｋｄ，６６ｋｄ等抗体。结论 免疫印迹法可在分子水平检测抗体，特异性高，并可用于抗原表位和发病     

免疫印迹法检测SLE病人血清抗Sm抗体阳性判断及检出率探讨

抗史密斯抗体是ＳＬＥ的标记抗是性用于诊断ＳＬＥ。免疫印迹法（ＩＢＴ）抗Ｓｍ的抗体，根据ＮＣ膜上三个印迹区带（２９ＫＤ／Ｂ、２８．５ＫＤ／Ｂ、１３．５ＫＤ／Ｄ） 以与否判断抗Ｓｍ抗体最性或生。对１２３例临床仍ＳＬＥ病人表同时测定ＡＮＡ－ＩＦ、抗ＥＮＡ－ＩＢＴ（包括抗Ｓｍ），结果ＡＮＡ阳性率９５．１２％，抗Ｓｍ＝ＣＩＥ阳性率４２．３％，抗Ｓｍ－ＩＢＴ以三区带同时显色判断阳性率３５．７７％，以一区带任一     

免疫双扩散与免疫印迹检测抗Sm抗体对系统性红斑狼疮诊断价值 …

目的：比较免疫双扩散（ＩＤ）与免疫印迹（ＩＢＴ）法检测抗Ｓｍ抗体对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的诊断价值。方法：抗Ｓｍ抗体阳性的２２８份病例分为３组：①ＩＤ法阳性组；②ＩＢＴ法阳性组；③２种方法均阳性组。分别计算和比较它们与ＳＬＥ临床诊断的符合率。结果：①ＩＤ法检测阳性１３１例，１１１例（８５％）为ＳＬＥ，２０例（１５％）为其他结缔组织病（ＣＴＤｓ）。②ＩＢＴ法检测阳性１５０例，５３例（３５％）为ＳＬ     

用快速斑点免疫金渗滤法检测抗双链DNA抗体

目的为了提供一种简便、快速、可靠的检测抗双链ＤＮＡ（ｄｓ－ＤＮＡ）抗体的新方法。方法将生物素化的质粒ｄｓ－ＤＮＡ结合于包被了亲和素的硝酸纤维素（ＮＣ）膜上，以胶体金标记的葡萄球菌蛋白Ａ（ＳＰＡ）作为显示剂，建立了一种检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的快速斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。结果ＤＩＧＦＡ对未经选择的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和活动性ＳＬＥ的阳性率分别为６７．２％和９５．９％；对非ＳＬＥ的自身免疫病患者的阳性率仅为２．９％；正常人未见假阳性。与短膜虫免疫荧光法（ＣＬ．ＩＦＡ）、放射免疫法（Ｆａｒ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫结合法（ＤＩＢＡ）四种方法比较，ＤＩＧＦＡ的敏感性优于ＣＬ．ＩＦＡ、ＥＬＩＳＡ和ＤＩＢＡ，特异性优于Ｆａｒ和ＥＬＩＳＡ。结论ＤＩＧＦＡ快速、简便，整个检测过程只需２分钟，不需特殊设备，是一种值得推广的检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的常规方法。     

可提核抗原多肽抗体谱的临床检测观察

应用免疫印迹技术（ＩＢＴ），对临床６３例常见免疫性疾病进行了检查。其中，疾病组４８例，主要为ＳＬＥ等自身免疫性疾病，对照组１５例。同时观察了荧光ＡＮＡ、ｄｓＤＮＡ、ＬＢＴ的结果。疾病组抗ＥＮＡ抗体阳性率为５８．３％，同一患者可有２～３种抗体。ＦＡＮＡ阳性率为５４．２％，ｄｓＤＮＡ阳性率为１８．８％，ＬＢＴ阳性率为５０％，对照组１例阳性（６．７％）。ＳＬＥ３３例中ＥＮＡ阳性率为６６．７％，主要是ＲＮＰ和Ｓｍ抗体。其中Ｓｍ抗体与ＦＡＮＡ斑点型显著相关（Ｐ＜０．０１）。     

红细胞免疫印迹法检测抗SSA抗体

本文以人红细胞（ＲＢＣ）胞浆提取物为ＳＳＡ抗原来源，探讨了免疫印迹法（ＩＢＴ）检测抗ＳＳＡ抗体的可能性及特点。结果显示，在ＲＢＣ－ＩＢＴ中有两条抗ＳＳＡ（干燥综合征抗原）抗体特异性酶染色带，分子量分别为５２ＫＤ和６０ＫＤ。非特异性染色带极少或无。也未见其它几种常一自身抗体（抗ＳＭ、ＲＮＰ、ＳＳＢ等）的显色带。这说明ＲＢＣ－ＩＢＴ对抗ＳＳＡ抗体的检测有高度的专一性和特异性，值得推荐。文中还就ＲＢＣ－ＩＢＴ法中主要的实验影响因素进行了探讨。     

红细胞免疫印迹法检测抗SSA抗体

本文以人红细胞（ＲＢＣ）胞浆提取物为ＳＳＡ抗原来源，探讨了免疫印迹法（ＩＢＴ）检测抗ＳＳＡ抗体的可能性及特点。结果显示，在ＲＢＣ－ＩＢＴ中有两条抗ＳＳＡ（干燥综合征抗原）抗体特异性酶染色带，分子量分别为５２ＫＤ和６０ＫＤ。非特异性染色带极少或无。也未见其它几种常见自身抗体（抗ＳＭ、ＲＮＰ、ＳＳＢ等）的显色带。这说明ＲＢＣ－ＩＢＴ对抗ＳＳＡ抗体的检测有高度的专一性和特异性，值得推荐。文中还就ＲＢＣ－     

MW－ELISA快速法检测五项乙肝试验

采用ＭＷ－ＥＬＩＳＡ快速法与常规ＥＬＩＳＡ法同时对比检测２０份阳性、阴性ＨＢＶ参考血清和２６８份临床连续标本（各共５１页ＨＢＶ标志物）。结果，两法阴性符合率为９８．３％（９７．９～１００％），阳性符合率为９５．４％（９３．３～１００％），ρ＞０．０５，差异不显著。２６８例临床样品两法符合率为９８．７％（９３．３～１００％），阳性预报值分别为２７．９％和２７．７％。ＭＷ法简便快速敏感，有推广价值。     

单克隆抗体双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原对抗血吸虫药疗效考核的价值

应用日本血吸虫抗３１／３２ｋＤ（１Ｄ＝０．９９２１ｕ）单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验（双夹心ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫循环抗原，用于城市急性血吸虫病经吡喹酮治疗５年后无再次感染患者的疗效考核，阳性率为１２．２０％。与快速法ＥＬＩＳＡ检测循环抗原的符合率为９６．３４％。与常用检测抗体的ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ法平行对照，阳性率基本一致。与改进的粪便孵化法比较，两法的符合率为８５．３６％。无疫水接触史健康人未见阳性反应。对肝病患者无交叉反应。结果显示双夹心ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原敏感性高，特异性强，具有良好的抗血吸虫药物疗效考核价值。     

抗核抗体及其变化在系统性红斑狼疮的临床意义

探讨抗核抗体及其变化在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的临床意义。对５０例ＳＬＥ病人血清进行连续五年的追踪观察。结果：ＩＦＡＮＡ、抗ｄｓ－ＤＮＡ、抗Ｓｍ、抗Ｕ１－ＲＮＰ、抗ＳＳ－Ａ、抗ＳＳ－Ｂ抗体的阳性率分别为１００％、７０％、３０％、４４％、５２％、２２％。ＩＦＡＮＡ的滴度高低与病情活动状况无关,转阴并不表示病情缓解;抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体与狼疮性肾炎相关,持续高滴度常表示疾病活动特别是狼疮肾活动;抗Ｓｍ抗体与病情无关,治疗后易消失;抗Ｕ１－ＲＮＰ抗体与雷诺氏现象相关;抗ＳＳ－Ａ抗体与光敏感相关;抗ＳＳ－Ｂ抗体与干燥综合征相关;这三种抗体多持续存在。表明在ＳＬＥ,各种ＡＮＡ可能代表不同的亚型。     

Antibodies to extractable nuclear antigen polypeptides: detection and its clinical significance]

Using immunoblotting technique (IBT) and saline extracts of rabbit thymus powder as antigen, we detected seven autoantibodies i.e. anti-Sm, anti-RNP, anti-SSA, anti-SSB, anti-Scl-70, anti-Jo-1 and anti-ribosome with only a strip of blot. Comparison of IBT and counter-immunoelectrophoresis (CIE) showed that the antibodies against Sm in SLE could be detected more sensitively by IBT than by CIE (P < 0.01). And the antibodies against ribosome by IBT were much specific for SLE (P < 0.01). So the detection of antibodies against ENA polypeptides by IBT was helpful in the diagnosis of SLE. In rheumatic diseases, the antibodies against SSB could be detected more sensitively by IBT than by CIE (P < 0.05), while the antibodies against SSA could be detected more sensitively by CIE than by IBT (P < 0.01). The antibodies against Scl-70 and Jo-1 by IBT were much specific for PSS and PM/DM respectively (P < 0.01).     

抗-SSA/Ro抗体三种检测方法的比较

目的 比较酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫双扩散（ID）和免疫印迹（IB）3种方法检测抗-SSA/Ro抗体,评价3种方法的符合度,同时提高IB检测相对分子质量52 000条带的认识.方法 采用ELISA法、IB法及ID法检测以下3组对象的抗-SSA/Ro抗体水平：正常献血员血清122份;实验室常规检测血清7736份;诊断明确结缔组织病血清166份.结果 （1）正常献血员122份血清ELISA、ID和IB检测抗-SSA/Ro抗体全部阴性;（2）实验室常规检测的7736份血清,IB检测相对分子质量52 000阳性1085例,其中抗核抗体和其他抗-ENA抗体均阴性的有92份,该组病人经过ID和ELISA两种方法检测全部阴性;（3）结缔组织病组166例,ELISA、ID和IB检测抗-SSA/Ro抗体的阳性率分别是76.5%（127/166）,65.1%（108/166）,49.4%（82/166）;（4）结缔组织病166份血清中,ELISA和ID两种方法检测的符合率88.6%（147/166）,两种方法的比较,χ2=17.1,P＜0.001;ID和IB两种方法检测的符合率为75.9%（126/166）,两种方法的比较,χ2=15.6,P＜0.001;（5）ELISA和ID进行Spearman等级相关分析,相关系数为0.828,P＜0.001.结论 （1）ELISA和ID特异性优于IB.（2）IB特异性较差,但如果同时ANA和或抗-ENA其他条带阳性,特异性会显著提高.（3）ELISA敏感性优于ID,ID敏感性优于IB.（4）ELISA和ID结果在数值上存在显著的正相关关系.     

儿童系统性红斑狼疮血清抗C1q抗体的检测及意义

目的：探讨抗 C1q 抗体与儿童系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）的相关性及临床意义,为儿童 SLE 的早期诊断提供经验。方法选择包头医学院第一附属医院2009年6月至2013年12月间初诊住院 SLE 患儿40例,同期健康儿童20例。记录患儿和健康儿童抗 C1q 抗体、抗 dsDNA 抗体、抗 SM 抗体、抗 U1RNP 抗体、抗 SSA 抗体、抗 SSB 抗体、补体 C3、C4等相关免疫检验指标并分析其与抗 C1q 抗体的相关性。结果1）SLE 患儿与健康儿童平均年龄相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;2）40例 SLE 儿童抗 C1q 抗体阳性率为37.5%,而健康儿童组抗 C1q 抗体均为阴性,两组阳性率比较差异有统计学意义（x^2=8.1,P〈0.01）,抗 C1q 抗体对儿童 SLE 的诊断敏感度为37.5%,特异度为100%;抗 dsDNA 抗体对儿童 SLE 诊断的敏感度为62.5%,特异度为95%;抗 SM 抗体对儿童 SLE 诊断的敏感度为22.5%,特异度为90%。3）抗 C1q 抗体阳性组的抗 SM 抗体、抗 RNP 抗体、抗 SSA 抗体、抗 SSB 抗体、补体 C3、C4与抗 C1q 抗体阴性组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;两组抗 dsDNA 抗体相比,差异有统计学意义（x^2=5.98,P=0.02）;4）抗 dsDNA 抗体与抗 C1q 抗体正相关（r=0.51,P〈0.01）。结论抗 C1q 抗体对儿童 SLE 的诊断具有较高的特异性,有助于抗 dsDNA 抗体阴性的儿童 SLE 的诊断。     

ANA、抗ENA抗体联合检测对自身免疫病诊断的意义

目的 探讨抗核抗体(ANA)和抗可提取性核抗原(ENA)多肽抗体谱检测对自身免疫病诊断的意义.方法 对285例各种自身免疫病患者和30例健康人血清采用间接免疫荧光法检测ANA,免疫印迹法检测ENA多肽抗体.结果 ANA在SLE患者中最高,阳性率为97.1%;抗SSA、抗SSB 抗Sm、抗dsDNA、抗NUC和抗ulRNP抗体在SLE中检出率分别为85.6%,75.3%,37.4%,90.8%,83.3%和77.6%;抗SSA、抗SSB和抗ulRNP在SS中检出率分别为84.8%,78.8%和69.7%;抗Jo-1抗体在PM/DM中检出率为52.6%;抗ulRNP抗体在MCTD中检出率为90.5%;抗Scl-70抗体在PSS中检出率为46.7%.结论 ANA和ENA抗体谱阳性分布有明显的倾向性,不同的自身免疫病患者血清所含自身抗体有差异,因此ANA和ENA抗体联合检测对自身免疫病具有诊断意义.     

自身抗体与狼疮肾炎病理类型的相关性分析

目的 探讨自身抗体与狼疮肾炎（lupus nephritis,LN）病理类型的相关性.方法 采用免疫印迹法测定75例行肾活检LN患者的抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗核小体（NUC）及抗组蛋白（HIS）抗体,并与56例无肾脏损害的系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者对照,分析自身抗体与LN病理类型的关系.结果 75例LN患者中,抗dsDNA、抗Sm和抗HIS阳性率均明显高于无肾脏损害患者（P＜0.05）;75例LN病理类型分属Ⅰ～Ⅵ型,与无肾脏损害组对照,抗dsDNA和抗HIS抗体阳性率在各型LN中均增高,但仅Ⅱ型LN差异有统计学意义（P＜0.01）,抗SSA抗体在Ⅰ型LN中与无肾脏损害组对照,差异有统计学意义（P＜0.05）,抗U1nRNP抗体在Ⅴ型LN中与无肾脏损害组对照,差异有统计学意义.结论 抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗HIS抗体阳性可指导LN的诊断,且抗dsDNA抗体和抗HIS抗体与Ⅱ型LN发病相关,抗SSA抗体与Ⅰ型LN发病有关,抗U1nRNP抗体则可能在Ⅴ型LN病变中发挥作用.     

Serum IgA against type 3 muscarinic acetylcholine receptor is a novel marker in diagnosis of Sj(o)gren's syndrome

Background Antibodies against type 3 muscarinic acetylcholine receptor (M3R) are involved in the pathogenesis of Sj(o)gren's syndrome (SS), but the clinical value of them in SS patients has been controversial. The aims of this study were to: (1) establish an improved enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect IgA antibodies against M3R; (2)evaluate the value of IgA antibodies against the second extracellular loop of M3R205-220 (c2M3RP) in diagnosis of SS.Methods To increase the ELISA sensitivity, c2M3RP was coupled to bovine serum albumin (BSA) by the glutaraldehyde method and a 96-well microplate was treated by ultraviolet rays before coated. Concentrations of anti-c2M3RP, anti-SSA, and anti-SSB were measured in the sera of 240 individuals: 91 patients with primary SS and 149 controls (16 secondary SS, 27 systemic lupus erythematosus, 40 rheumatoid arthritis and 66 healthy controls).Diagnostic properties of anti-c2M3RP were determined by receiver-operating characteristic curve analysis.Results The prevalence of serum IgA anti-c2M3RP antibodies in patients with pSS (46%, 42/91) was significantly higher than that in patients with systemic lupus erythematosus (19%, 5/27), in rheumatoid arthritis (15%, 6/40) and in healthy controls (5%, 3/66). However, there was no significant difference between the two SS groups (P=0.727). The diagnostic performance of IgA anti-M3RP antibodies was similar to anti-SSA assay, but had 22% higher sensitivity than anti-SSB. By analyzing of IgA anti-c2M3RP antibodies, combination of anti-SSA and anti-SSB resulted in increased sensitivity, whereas their specificity was not significantly changed.Conclusions The improved anti-c2M3RP ELISA is a novel, sensitive, and specific serological test for the diagnosis of SS. The combined application of anti-c2M3RP, anti-SSA and anti-SSB tests can improve the laboratory diagnosis of SS.The IgA anti-c2M3RP antibodies may serve as a novel diagnostic marker for SS.     

系统性红斑狼疮患者血清中ANA、抗ds-DNA、抗ENA的水平

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体谱的水平,探讨三种抗体对SLE的诊断应用价值。方法:将收集到的68例SLE患者血清(试验组)和40例健康人血清(对照组)分别采用间接免疫荧光(IIF)方法检测ANA、抗ds-DNA,用免疫印迹法(IBT)检测抗ENA多肽抗体。结果:在SLE患者血清(试验组)中检出ANA的阳性率最高为88.2%、抗ds-DNA的阳性率为67.6%、Sm抗体的阳性率为30.9%、nRNP/Sm抗体的阳性抗体的阳性率为47.1%、SS-A抗体的阳性率为51.5%、SS-B抗体的阳性率为38.2%、Scl-70抗体的阳性率为4.4%、Jo-1抗体的阳性率为5.9%,ANA的阳性率与其他各项阳性率进行比较差异有统计学意义(P<0.05)。健康人血清(对照组)中只有ANA的阳性率为2.5%,其他抗体均为阴性。与试验组进行比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:血清中的ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体联合测试可明显提高SLE患者的诊断率。     

原发性干燥综合征患者血清 ANA、抗－SSA 抗体、抗－SSB 抗体检测分析

目的：探讨原发性干燥综合征（PSS）患者血清抗核抗体（ANA）、抗干燥综合征 A 抗体（抗－SSA）及抗干燥综合征 B 抗体（抗－SSB）检测的临床意义。方法：采用间接免疫荧光法（IIF）检测血清 ANA,免疫印迹法检测血清抗－SSA、抗－SSB 抗体。收集80例 PSS 患者为疾病组,100例健康人群为对照组,并对结果进行分析。结果：疾病组血清抗－SSA 抗体、抗－SSB 抗体、ANA 阳性率均高于对照组;年龄≥50岁的 PSS 患者抗－SSA、抗－SSB 抗体及 ANA 的阳性率均较高;疾病组 ANA 滴度为1∶100的阳性率较高。结论：血清 ANA、抗－SSA 及抗－SSB 抗体测定对 PSS 的诊断有重要参考价值,是判断病情和评价预后的重要手段。     

槽式对流免疫电泳法检测可提取性核抗原抗体的研究

用引进的槽式对流免疫电泳法（槽ＣＩＥ）和国内常规的免疫双扩散法（ＩＤ），同时对８９例病人血清可提取性核抗原（ＥＮＡ）的抗体进行了测定和比较。槽ＣＩＥ法图像清晰、沉淀线呈弧型，结果明显比ＩＤ法容易判断，ＥＮＡ抗体阳性病人血清的检出率非常显著地高于ＩＤ法（Ｐ＜０．００１），抗ＳＭ、ＲＮＰ、ＳＳＡ、ＳＳＢ等每种抗休的检出率也均高于ＩＤ法，其中前３种差异非常显著（分别Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。     

抗SSA、SSB抗体的荧光特点和临床意义

目的评价SSA、SSB抗体的荧光特点和临床意义,并探索在进行临床抗核抗体（ANA）筛查的过程中,鉴定这些抗体的必要性。方法对所有送检标本进行ANA和可提取性核抗原（ENA）检测,选择SSA、SSB阳性标本进行实验室和临床分析。结果在4 978个送检样本中,259个样本抗SSA、SSB阳性,阳性样本分为SSA＋SSB-、SSA-SSB＋和SSA＋SSB＋三组。与SSA＋SSB-组和SSA-SSB＋组比较,SSA＋SSB＋组ANA阴性样本比例（0.5%）明显降低（P〈0.01）,而高滴度样本比例（53.5%）明显增高（P〈0.01）。SSA和（或）SSB阳性样本除呈现颗粒型荧光外,还出现各种荧光核型。SSA＋SSB＋组颗粒型荧光的比例明显高于SSA＋SSB-和SSA-SSB＋（P〈0.01）。与SSA＋SSB-组相比,SSA＋SSB＋组患有干燥综合征（SS）的比例明显增高,患有其他疾病的比例明显降低。SSA-SSB＋组共8例患者,所患疾病各不相同。结论临床上检测SSA、SSB抗体具有必要性,联合检测SSA和SSB抗体可以提高SS诊断特异性。