抑那通和维生素E对顺铂所致大鼠卵巢功能损伤保护的实验研究

目的:通过使用抑那通(亮丙瑞林)、维生素E,观察其对顺铂所致大鼠卵巢功能损伤的保护作用。方法:选择SPF级别12周龄SD雌鼠64只,随机分4组。A组为正常对照,腹腔注射生理盐水,2 m l/d。B组为顺铂组,C组为抑那通+顺铂组,D组为维生素E+顺铂组。C组皮下注射抑那通0.25 mg/只。B、C、D组腹腔注射顺铂,2mg/(kg.d),D组灌胃维生素E 50 mg/(kg.d),连续用药10天。给药结束后及结束后30天分别每组处死8只,称体重、卵巢及子宫重量,光镜观察卵泡数量及卵泡直径和各级卵泡的计数,卵巢和子宫病理学观察;经心脏采血测雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)。结果:给药结束后B、C、D组和A组相比,大鼠精神及饮食状况差,体重及子宫重量下降(P<0.05),B组最明显(P<0.05);给药后30天大鼠精神状态有改善,4组体重增加(P<0.05),但B、C、D组仍比A组轻;C、D组比B组体重增加明显(P<0.05)。给药结束后B、C、D组子宫黏膜层变薄,胞质分泌泡少,纤维成分多,子宫腺体少,有顶浆分泌现象;给药后30天,B、C、D组子宫内膜厚度及腺体量有所改善。给药结束后B组生长卵泡、成熟卵泡数明显减少,间质有纤维化和坏死,粒细胞层明显减少,呈退行性变化(P<0.05)。B、C、D组的成熟卵泡数少于A组(P<0.05)。C组与其余3组相比原始卵泡数增多(P<0.05)。给药后30天,B组成熟卵泡数减少(P<0.05),C组原始卵泡数减少,成熟卵泡数明显增多(P<0.05)。给药结束后B、C、D组FSH升高,E2下降(P<0.05),且B组与C、D组相比,FSH升高,E2下降更明显(P<0.05);给药后30天,C、D组FSH降低,E2升高(P<0.05)。结论:顺铂对大鼠机体及卵巢有毒性作用;抑那通可使原始卵泡数增多,使卵泡处于静止期;维生素E对大鼠的生长卵泡和成熟卵泡有保护作用。     

三聚氰胺对SD雌鼠卵巢毒性的研究

目的:初步探讨不同剂量三聚氰胺对SD雌鼠卵巢的毒性作用。方法:将60只SD雌性大鼠随机分A、B、C、D四组,A、B、C为实验组,D为对照组。分别予以400 mg/kg、800 mg/kg、1 600 mg/kg的三聚氰胺灌胃,1次/日,持续35天,用药结束后24 h处死大鼠。切取卵巢称量湿重、做病理切片、记数各级卵泡。取大鼠卵巢组织固定切片,做HE染色;用免疫组化方法检测P450arom在大鼠卵巢中的分布及表达。结果:A、B、C 3组大鼠卵巢湿重与D组相比明显减轻(P<0.05);B、C组卵巢湿重相比无统计学差异,但与A组相比亦有减轻(P<0.05);A、B、C 3组的总卵泡数、成熟卵泡数、初级卵泡数和生长卵泡数明显少于D组(P<0.05)。与对照组比较,各实验组P450表达强度减弱(P<0.05);B组和C组各级卵泡数均减少,B组伴间质及颗粒细胞的崩解坏死;A组生长卵泡、成熟卵泡数均明显减少。结论:三聚氰胺所致的卵巢毒性与摄入量有一定的相关性。过量的三聚氰胺能够抑制鼠体内细胞色素芳香化酶P450的表达,使体内E2生成障碍,从而影响卵泡发育。     

吲哚美辛对COPD大鼠TNF-α与Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨吲哚美辛对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠趾长伸肌TNF-α及Bcl-2和Bax表达的影响.方法:100只健康Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(A组).模型组采用熏香烟和气管内滴注猪胰蛋白酶(PEE)法建立COPD模型大鼠,以低于A组大鼠平均体重的90％判断发生营养不良的标准,将模型组大鼠分为COPD营养正常组(B组)和COPD营养不良组,COPD营养不良组随机化原则分为COPD营养不良生理盐水组(C组)、吲哚美辛1组(D组)、吲哚美辛2组(E组)、吲哚美辛3组(F组).A、B、C三组灌注等量生理盐水,D、E、F组给予不同剂量吲哚美辛(IND)灌胃干预.TUNEL法测定趾长伸肌细胞凋亡率,免疫组织化学法测定Bcl-2、Bax蛋白表达,双抗体夹心法测定血清及趾长伸肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度.结果:吲哚美辛干预后,E组趾长伸肌细胞凋亡率、Bcl-2、Bax的蛋白表达、趾长伸肌匀浆和吲哚美辛干预后血清TNF-α浓度低于C、D、F组,但高于A、B组,P＜0.05;E组趾长伸肌Bcl-2蛋白表达高于C、D、F组,低于A、B组,P＜0.05,结论:Bcl-2、Bax及TNF-α参与COPD模型大鼠趾长伸肌细胞凋亡,适当剂量的吲哚美辛可改善COPD营养不良模型骨大鼠趾长伸肌的凋亡.     

吡格列酮、二甲双胍治疗PCOS雌鼠后卵巢组织炎性因子以及超微结构改变的研究

目的:探讨吡格列酮、二甲双胍治疗后多囊卵巢综合征(PCOS)雌鼠卵巢组织匀浆中促炎因子、抑炎因子以及卵巢超微结构的改变。方法:将50只成年雌性SD大鼠随机分为5组,其中40只建立PCOS雌鼠模型。A组为正常雌鼠,B组为PCOS雌鼠,C组为经吡格列酮灌胃干预的PCOS雌鼠,D组为经二甲双胍灌胃干预的PCOS雌鼠,E组为吡格列酮联合二甲双胍灌胃干预的PCOS雌鼠。各组雌鼠干预处理后32h取卵巢组织,将一侧卵巢制备成组织匀浆液行固相夹心法酶联免疫吸附实验,检测促炎因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)与抑炎因子白介素10(IL-10)、脂联素(ADP)含量变化。将另一侧卵巢在透射电镜下观察超微结构的变化。结果:A、B、C、D、E组hsCRP水平分别为(541.62±74.26)、(820.81±46.84)、(686.33±99.12)、(779.02±38.46)、(501.92±56.18)ng/ml,B、C、D组hs-CRP水平均高于A组及E组(P均0.05);A、B、E组PCT水平分别为(42.57±2.42)、(93.31±7.17)、(47.21±11.10)pg/ml,B组PCT水平均高于A、E两组(P均0.05)。A、B、C、D、E组IL-10水平分别为(6.68±0.83)、(3.41±0.88)、(5.25±1.38)、(7.84±1.00)、(7.87±0.26)pg/ml,B、C组IL-10水平均低于A、D、E组(P均0.01)。ADP水平各组两两比较差异均无统计学意义(P均0.05)。A、E组卵巢颗粒细胞超微结构均为正常表现,B组颗粒细胞呈凋亡改变,C、D组颗粒细胞超微结构较B组有改善。结论:PCOS雌鼠卵巢组织匀浆中促炎因子与抑炎因子失衡,颗粒细胞呈凋亡变化。二甲双胍、吡格列酮联合干预可能改善这种慢性轻度炎症状态。     

亮丙瑞林、维生素E对顺铂所致大鼠生殖毒性保护及血清抑制素B变化的研究

目的:探讨亮丙瑞林、维生素E对顺铂所致大鼠子宫、卵巢毒性保护,及测定抑制素B对卵巢储备功能预测的价值。方法:选用清洁级、12周龄雌性SD大鼠64只,体重(270±20)g,随机分为A、B、C、D4组(每组16只),A组为正常对照组,B组为顺铂组,C组为抑那通(GnRHa类药物)+顺铂组,D组为维生素E(自由基清除剂)+顺铂组。A组给予生理盐水2mg/d腹腔注射,连续10天;B组给予顺铂2mg/(kg.d)腹腔注射,连续10天;C组给予亮丙瑞林0.25mg/只1皮下注射,期间持续观察性周期10天,待全部处于间情期,即第11天给予顺铂2mg/(kg.d),连续10天,D组给予维生素E50mg/(kg.d),胃灌注同时腹腔注射顺铂2mg/(kg.d),连续10天。用药结束后当天及用药结束后30天雌鼠分别各组处死8只,经心脏采血,测血清抑制素B水平、卵泡刺激素(FSH)水平,摘除双侧卵巢在光镜下进行形态学病理学观察,进行各级卵泡计数。结果:用药结束后当天:B组与其他各组比较,各级卵泡数目,抑制素B水平均明显降低,FSH水平升高,且卵巢伴有间质纤维化、坏死;C组原始卵泡数量明显多于B组;D组各级卵泡数量均减少,但多于B组(P0.05),出血、坏死现象较B组减轻,两组抑制素B水平与A组相比降低但高于B组,C组FSH水平降低。用药结束后30天:B组、D组各级卵泡数量均减少,但多于用药结束后当天(P0.05),有成熟卵泡发育;各组抑制素B水平比用药结束后当天均升高,但同组相比B组最低(P0.05),FSH水平未见明显差异。结论:①顺铂分别与亮丙瑞林、维生素E的联合应用对预防化疗所致的大鼠卵巢损伤有一定的保护作用。②血清抑制素B水平下降是反映卵巢储备功能下降的直接指标,较FSH水平升高更早期、更敏感。     

低剂量西维因与氰戊菊酯联合染毒对雌性大鼠卵巢细胞凋亡的影响

目的观察西维因与氰戊菊酯联合染毒对雌性大鼠卵巢细胞凋亡的影响。方法将40只健康成年清洁级雌性SD大鼠按2×2析因设计随机分为4组,分别为阴性对照(玉米油)组、西维因(1/50 LD50,11.2 mg/kg)单独染毒组、氰戊菊酯(1/50 LD50,9.02 mg/kg)单独染毒组和西维因(11.2 mg/kg)+氰戊菊酯(9.02 mg/kg)联合染毒组,每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,连续染毒8周。检测卵巢颗粒细胞的凋亡情况以及大鼠血清中雌性激素孕酮(P)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)含量,并统计卵巢组织中各级卵泡数目构成的变化。结果西维因和氰戊菊酯联合染毒对大鼠卵巢系数和卵巢细胞早期凋亡率均呈现拮抗作用(P<0.05,P<0.01),对血清中E2水平和卵巢组织中闭锁卵泡构成比呈现协同作用(P<0.05)。结论西维因和氰戊菊酯联合染毒可影响大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴系统的调节,从而抑制卵巢分泌E2,影响卵巢的发育和分泌激素的功能,促进大鼠卵巢细胞凋亡,引起大鼠卵巢损伤。     

米非司酮对体外大鼠颗粒细胞凋亡的影响研究

目的探讨米非司酮对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法体外培养SD雌性大鼠的卵巢颗粒细胞,采用流式细胞术及荧光染色观察并分别了解加入米非司酮后细胞的凋亡情况。结果颗粒细胞凋亡数量随米非司酮剂量增加而增多,凋亡率在米非司酮低剂量组与对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05),中剂量组、高剂量组高于对照组(P<0.05),各处理组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论米非司酮可诱导颗粒细胞发生凋亡,离体颗粒细胞凋亡率随米非司酮剂量增加而增高,可能是米非司酮抑制卵泡发育的机制之一。     

氨磷汀和维生素E对顺铂导致大鼠卵巢功能损伤作用机制探讨

目的 探讨氨磷汀和维生素E是否可减轻顺铂对大鼠卵巢功能的损伤及其作用机制。方法 将40只雌性SD大鼠随机分为顺铂组(A组)、顺铂+维生素E组(B组)、顺铂+氨磷汀组(C组)、空白对照组(D组)4组,每组10只。D组大鼠正常饲养。A、B、C组大鼠于实验的第1天、第8天分别给予顺铂6 mg/kg腹腔注射;B组大鼠再于实验开始后每日给予维生素E 100 mg/kg灌胃,共13 d; C组大鼠再于实验第1天、第8天分别给予氨磷汀200 mg/kg腹腔注射。实验第14天处死大鼠,取腹主动脉血清,ELISA法检测雌二醇(E₂)和卵泡刺激素(FSH)值。取左卵巢组织4%甲醛固定石蜡包埋切片后HE染色,光镜下对各组大鼠卵巢的各级卵泡记数;取右卵巢组织提取细胞胞质,通过WST-1法测胞质超氧化物歧化酶(SOD)活性值。结果 A组原始卵泡数为(12.70±2.79)个,与B组的(19.30±2.79)个比较,差异有统计学意义,P=0.001;与C组的(22.00±6.16)个比较,差异有统计学意义,P<0.001。A组生长卵泡数为(7.90±0.32)个,与B组的(12.70±...     

卵巢早衰大鼠应用补肾活血方对其免疫学指标及凋亡细胞的影响分析

目的:探讨补肾活血方调节卵巢免疫反应、改善卵巢功能的机制,明确对卵巢早衰模型大鼠的治疗机理。方法:利用雷公藤多甙来构建免疫性卵巢早衰大鼠模型,获得150只雌性卵巢早衰大鼠。将其编号后,电脑随机平均分为A、B、C、D、E 5组,其中A、B、C组为实验组,D、E组为对照组,分别给予高、中、低剂量补肾活血药剂,补佳乐及生理盐水1个月。另随机选取30只正常大鼠为空白组G组,给予同剂量生理盐水1个月。对比雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)及抑制素(Inh)水平和T淋巴细胞比例(CD4+CD25+/CD4+),并比较卵巢组织形态学改变及卵巢细胞的凋亡情况。结果:补肾活血方能够明显降低卵巢早衰大鼠FSH和T水平,提高Inh和E2水平,减少细胞凋亡。结论:补肾活血方尤其是中剂量的补肾活血方能够改善卵巢早衰大鼠的卵巢健康情况,为现代医学治疗卵巢早衰提供了科学依据,值得在临床上推广和使用。     

亚慢性甲苯染毒对大鼠卵巢的毒性作用

目的:探讨亚慢性甲苯染毒对大鼠卵巢的直接毒性作用。方法:将40只雌性大鼠随机分为对照组和甲苯染毒组。对照组给予1 ml不含甲苯的玉米油,染毒组甲苯剂量从低到高分别为35、70、330 mg/kg,连续染毒40～45天,观察甲苯对卵巢脏器系数、组织结构的影响;计数各级卵泡及黄体数目,用TUNEL法检测颗粒细胞凋亡率,并测血清E2、P的浓度。结果:①中、高剂量甲苯组卵巢脏器系数较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。②4组之间原始卵泡数目无显著改变,随着染毒剂量的增加,生长卵泡减少,闭锁卵泡增加,黄体数目减少,且中、高剂量组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。③中、高剂量甲苯组颗粒细胞凋亡率(26.6%,35.3%)高于对照组(10.9%),差异有统计学意义(P<0.001)。④中、高剂量甲苯组E2、P较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:亚慢性甲苯染毒对大鼠卵巢有毒性作用,且与甲苯剂量呈正相关。