珍珠菜抗肿瘤有效部位对宫颈癌裸小鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨珍珠菜抗肿瘤有效部位ZE4对裸小鼠皮下宫颈癌(HeLa)移植瘤的抑制作用及其分子机制。方法建立人宫颈癌HeLa裸小鼠移植瘤模型,观察不同浓度的ZE4对移植瘤生长的抑制作用,Western blot法检测Bax,Bcl-2,p53,p21,EGFR等蛋白的表达情况,免疫组化法检测移植瘤组织中血管内皮细胞膜抗原CD34的表达水平。结果与对照相比,ZE4对HeLa宫颈癌细胞移植瘤生长有明显的抑制作用,其中低、中剂量组效果尤为明显,抑瘤率分别可达44.57%和48.32%(与对照组相比P<0.01),且这两个剂量组的Bcl-2,EGFR蛋白的表达明显降低(P<0.01),而p53,p21,Bax蛋白的表达量则明显升高(P<0.05),免疫组化结果显示ZE4能有效抑制血管内皮细胞膜抗原CD34的表达。结论低、中浓度的ZE4对宫颈癌有明显的抑制作用,其抑瘤作用可能与诱导p53等凋亡相关蛋白表达及引起细胞周期阻滞有关,其中抑制血管生成及表皮生长因子EG-FR的表达也起了部分作用。     

珍珠菜总黄酮对白血病HL-60细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 研究珍珠菜总黄酮(ZE4)对白血病HL-60细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用.方法 成功建立人白血病HL-60细胞皮下移植瘤模型(移植瘤体积约100 mm3)后的30只裸鼠均分为五组:A、B、C组分别腹腔注射ZE4 100、200、400 mg/kg;D组注射环磷酰胺(CTX) 50 mg/kg;E组以生理盐水对照;每2天注射一次.21d后测量移植瘤大小,采用免疫组化法检测移植瘤组织中细胞增殖抗原Ki-67和血管内皮细胞膜抗原CD34的表达水平.结果 与E组比较,B和C组移植瘤生长明显抑制,抑瘤率分别可达51.32％和46.06％;免疫组化结果显示,B、C组移植瘤中Ki-67和CD34的表达明显少于E组.结论 ZE4对白血病HL-60细胞裸鼠移植瘤具有较明显的抑制作用,可能与其抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤新生血管形成相关.     

珍珠菜提取物ZE4对宫颈癌抑制作用的初步研究

目的观察珍珠菜提取部位ZE4对宫颈癌体内外的抑制作用。方法体外采用MTT法、3H-TdR参入法、集落形成实验观察药物对HeLa细胞的杀伤作用,Hoechst荧光染色法观察药物对HeLa细胞凋亡的诱导作用,划痕实验检测药物对HeLa细胞迁移的影响。体内以抑瘤率和脏器指数为指标观察药物对荷U14小鼠的作用。结果ZE4可抑制He-La细胞的增殖和迁移,并可诱导细胞发生凋亡,3H-TdR实验结果显示药物作用48h的IC50为40.56mg·L-1;对荷U14小鼠给予400mg·kg-1药物其抑瘤率可达49.9%。结论ZE4对宫颈癌具有很好的抑制作用。     

酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402的抑制作用,并分析其可能机制。方法:制备裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水、氨基酸混合物、环磷酰胺、酪丝亮肽高低剂量等5组,每组12只,观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402肿瘤组织坏死和凋亡的影响;电镜观察其对肿瘤细胞超微结构改变;流式细胞技术分析其对细胞周期及细胞凋亡率的影响。结果:酪丝亮肽能够诱导肿瘤细胞坏死和凋亡、细胞周期阻抑、显著抑制肿瘤的生长,给药剂量为80μg.kg-1.d-1和160μg.kg-1.d-1时,肿瘤抑制率分别为42%与58%。结论:酪丝亮肽可以显著抑制人肝癌BEL-7402的生长,作用机制与促进肿瘤细胞的凋亡和坏死有关。     

姜黄素对人肝癌Bel-7402细胞的抑制作用研究

目的 研究姜黄素对人肝癌Bel-7402细胞的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 实验分为4组,分别为对照组和10、20和40 μmol/L姜黄素组.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的活性;流式细胞术结合Annexin V-FITC/PI双染检测Bel-7402细胞的凋亡情况;RT-PCR法检测Bax和Bcl-2的mRNA的表达,Western blot检测细胞色素C和Caspase-3蛋白的表达.结果 姜黄素显著抑制Bel-7402细胞的活性(P＜0.01).姜黄素处理后,Bel-7402细胞的凋亡率明显增加,与对照组相比具有统计学差异(P＜0.05),且具有剂量依赖性.另外,姜黄素使Bax的mRNA表达上升,Bcl-2的mRNA表达下降,Bax/Bcl-2比值明显上升(P＜0.05).同时,细胞色素C和Caspase-3蛋白的表达均显著上调(P＜0.01).结论 姜黄素可以抑制Bel-7402细胞的活性和增殖,促进Bel-7402细胞的凋亡,其机制可能与与姜黄素激活Bel-7402细胞线粒体凋亡途径有关.     

珍珠菜提取物对白血病细胞的抑制作用

目的:观察珍珠菜提取物对白血病细胞的体内外抑制作用。方法:以小鼠白血病L1210为模型,观察珍珠菜提取物的体内抗肿瘤作用;体外采用四氮唑盐法(MTT)及3H-TdR掺入法观察药物对人慢性粒细胞白血病细胞株(K 562)的细胞活力影响。结果:对荷L1210小鼠给予200 mg／kg药物其抑瘤率可达45％。MTT实验结果显示药物作用48 h的IC50为39．87μg／mL。结论:珍珠菜提取物对白血病细胞有明显的抑制作用。     

大黄素对荷人K562细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的:观察大黄素对白血病K562细胞BALB/c裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2的表达水平,探讨其作用机制。方法:建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,腹腔连续给药12d,处死裸鼠,称取瘤体质量,计算抑瘤率。采用HE染色光镜和透射电镜方法观察肿瘤细胞的凋亡情况,免疫组化方法观察肿瘤组织中Bax和Bcl-2蛋白表达情况,应用RT-PCR检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2的mRNA水平。结果:各用药组抑瘤作用与阴性对照组相比差异均具有显著性(P<0.05),高浓度组与羟基脲组具有同等的抑瘤效应(P>0.05),光镜和电镜检测发现大黄素低、中、高浓度组均可见瘤细胞凋亡和坏死,其中以高浓度处理组最为显著,羟基脲处理组部分瘤细胞以坏死为主。免疫组化和RT-PCR结果表明大黄素处理后肿瘤组织中Bax蛋白和Bax mRNA表达上调,Bcl-2蛋白和Bcl-2mRNA表达下调。结论:大黄素可以明显抑制K562细胞在裸鼠体内的生长,其作用机制可能是通过调控肿瘤中Bax及Bcl-2的表达,从而促进细胞凋亡。     

华蟾素对乳腺癌MCF-7移植瘤裸鼠的抗肿瘤作用及机制研究

目的研究华蟾素对人乳腺癌移植瘤裸鼠的抑制作用及作用机制。方法建立MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为5组：模型组、顺铂阳性对照组及华蟾素3个剂量组,另设正常对照组,腹腔注射给药12 d后,取血检测血常规、肝肾功能及T淋巴细胞亚群;处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率;取脏器,计算脏器指数,检测脾淋巴细胞增殖水平。结果华蟾素可抑制乳腺癌模型裸鼠肿瘤的生长;对荷瘤裸鼠血常规及肝肾功能无明显影响;抑制胸腺增大;促进T淋巴细胞增殖。结论华蟾素既可抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长,也可提高其免疫功能。     

多肽HM-3对人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤抑制作用研究

目的检测HM-3类不同血管生成抑制剂治疗人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤的药效学,考察血管生成抑制剂与肿瘤微环境的相互作用,为临床确定治疗方案提供参考和依据。方法建立人非小细胞肺癌A549的裸鼠移植瘤模型,以多西他赛(10 mg·kg~(-1))为阳性对照药物,评价了在肿瘤体积≥300 mm~3给予有效、过高剂量HM-3和贝伐单抗对肿瘤生长的抑制作用。结果动物实验表明,肿瘤的体积≥300mm~3给药,阳性对照组多西他赛具有很好的抗肿瘤活性。G2多西他赛(10 mg·kg~(-1))组的瘤重抑瘤率为60.80%。G3 HM-3(3 mg·kg~(-1))组、G4 HM-3(48 mg·kg~(-1))组、G5Avastin(5 mg·kg~(-1))组抑瘤效果不佳,瘤重抑瘤率分别为43.60%、-34.80%、44.40%。结论由于受肿瘤生长阶段、肿瘤微环境、作用靶点等影响,血管生成抑制剂HM-3有一定抑制肿瘤生长的效果,但效果不佳。HM-3抑瘤效果在(0~6 mg·kg~(-1))范围内存在剂量依赖关系。而HM-3(48mg·kg~(-1))过高剂量对人非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤无抑制作用,表现促进作用。特殊量效关系提示临床使用血管抑制剂时应注意使用剂量。     

蜂毒多肽对膀胱移行细胞癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察蜂毒多肽对T24膀胱癌细胞增殖、凋亡、细胞侵袭及裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将1、10、100 mg/ml的蜂毒多肽分别作用于膀胱癌T24细胞12、24和48 h,MTT法检测细胞活力变化及生长抑制率,流式细胞术及Transwell小室法检测蜂毒多肽作用48 h时T24细胞周期、细胞凋亡率及细胞侵袭力.将T24膀胱癌细胞接种于裸鼠,成瘤后分为对照组、蜂毒多肽低剂量组[1 mg/（kg·d）]、中剂量组[5 mg/（kg＆#183;d）]和高剂量组[25 mg/kg＆#183;d）],检测5、10和15 d裸鼠移植瘤体积、肿瘤生长抑制率及15 d时肝肾功能、血常规变化.结果 随蜂毒多肽浓度增加及作用时间延长,T24细胞生长及凋亡发生受到显著影响（P〈0.05,P〈0.01）,100 mg/ml 蜂毒多肽作用48 h时,细胞生长抑制率升高,生长周期阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率升高,细胞侵袭力显著下降（P〈0.01）.蜂毒多肽组裸鼠移植瘤体积显著小于对照组,15 d时蜂毒多肽高剂量组肿瘤体积显著降低（P〈0.01）.各组肝肾功能和血常规无明显变化（P＆gt;0.05）.结论 蜂毒多肽可引起体外T24膀胱癌细胞增殖抑制、凋亡率增加及细胞侵袭力下降,可显著抑制裸鼠膀胱癌细胞移植瘤生长.     

稀土钇-和钐-氟尿嘧啶配合物对荷人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其毒性

目的研究稀土钇-氟尿嘧啶配合物(Y-FU)和钐-氟尿嘧啶配合物(Sm-FU)对荷人胃癌裸小鼠皮下移植瘤生长的影响及其毒性。方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分别ip给予Y-FU和Sm-FU,每周3次,连续4周。通过测定瘤体积和重量观察移植瘤生长,电镜观察和脱氧尿苷三磷酸(dUTP)缺口末端标记技术(TUNEL)检测肿瘤组织中的细胞凋亡。脏器系数和组织病理学检查观察其对主要脏器的影响。结果Y-FU28和56mg·kg-1使瘤重减轻66%和72%,Sm-FU31和62mg·kg-1使瘤重减轻64%和81%,与FU30mg·kg-1组相比瘤重无显著性差异。电镜观察和TUNEL法检测肿瘤组织发现,Y-FU和Sm-FU组移植瘤中有凋亡细胞,TUNEL阳性细胞较5-FU组明显增加。结论Y-FU和Sm-FU对裸鼠人胃癌移植瘤生长有较强的抑制作用,其机制可能与其具有较强的诱导细胞凋亡作用有关。在所观察剂量范围内对主要脏器无明显影响。     

白介素-18对肝癌裸鼠皮下移植瘤浸润的CD4+T细胞子集的影响

目的探讨白介素-18(IL-18)影响肝癌裸鼠皮下移植瘤浸润的T细胞子集变化的机制。方法以HepG2细胞在裸鼠皮下接种,形成人肝癌皮下移植瘤的同时,以不同剂量IL-18分为4组治疗,4组分别腹腔注射IL-18 0.75,1.00,1.25,0(模型组)μg(0.1 mL)/只,治疗4周,另设正常对照组。观察肿瘤的生长速度和瘤体大小的变化。4周后处死取肿瘤组织和脾组织,免疫磁珠阴选组织中CD4+T细胞,流式细胞术检测各组肿瘤组织及脾组织中IL-17+/IFN-γ-CD4+T(Th17细胞)、IL-17-/IFN-γ+CD4+T(Th1)和IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞的变化。结果 HepG2细胞株建立了裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,IL-18抑制人肝癌皮下移植瘤的形成及转移,治疗时间越长剂量越大,抑制效果越明显;与正常对照组比较,肿瘤组织中Th17和IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞浸润数目增加,Th1细胞降低,与脾组织中一致,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05)。给IL-18后,随着剂量的增加,Th1细胞增加,IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞和Th17细胞浸润数目降低,给药组与模型组比较有显著差异(P<0.05或0.01)。结论 IL-17+/IFN-γ+CD4+T细胞数目在裸鼠移植瘤及其脾组织中增加,可能是在肿瘤环境中,促进其向Th17细胞分化;IL-18通过诱导IFN-γ的生成促进Th1细胞的生成,呈正反馈效应抑制肿瘤的增殖和转移。     

羧基-D-氨基葡萄糖对食管癌裸鼠及相关基因表达的影响

目的观察羧基-D-氨基葡萄糖(COPADG)对食管癌裸鼠及相关基因表达的影响。方法建立食管癌裸鼠模型,随机分为对照组、COPADG组、氟尿嘧啶组(5-FU)和联合组(CF)。计算抑瘤率;用免疫组化法,检测细胞增殖核抗原(PCNA)、天冬氨酸半胱氨酸特异性蛋白酶(caspase3)、血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD);用流式细胞术,检测肿瘤细胞凋亡。结果 COPADG组、5-FU组和CF组抑瘤率分别为54.16%,38.78%,73.91%;以上3组VEGF和MVD表达均低于对照组(P<0.01),caspase3表达均高于对照组(P<0.01);COPADG组和CF组的PCNA表达低于对照组和5-FU组(P<0.01),以上3组的早期凋亡细胞率均高于对照组(P<0.01)。结论 COPADG通过抑制食管癌肿瘤细胞增殖和血管形成及诱导肿瘤细胞凋亡,抑制食管癌裸鼠肿瘤的生长。     

用细胞膜色谱法和HPLC-TOF/MS研究附子中的有效成分

目的通过细胞膜色谱技术和高效液相-飞行时间质谱（HPLC-TOF／MS）技术相结合,初步筛选和鉴定附子中的有效成分。方法初步筛选采用自制的大鼠心肌细胞膜色谱柱,流动相为10mmol／L磷酸盐缓冲溶液,流速为0．2ml／min。色谱分离采用SHISEIDO CAPCELL PAKC18柱,流动相为0．1％甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,流速为1．0ml／min。质谱鉴定采用TOF／MS,正离子模式扫描。结果确定了附子中8个可能的有效成分。结论通过细胞膜色谱技术和HPLC-TOF／MS技术相结合,为从天然产物中快速寻找新的活性成分提供了途径。     

Alpha2-adrenoceptor subtypes involved in the regulation of catecholamine release from the adrenal medulla of mice

BACKGROUND AND PURPOSE: This study was carried out to elucidate which alpha(2)-adrenoceptor subtypes mediated the inhibition of noradrenaline and adrenaline release from the adrenal medulla of mice. EXPERIMENTAL APPROACH: Isolated adrenal medullae from wild-type and alpha(2A), alpha(2B) and alpha(2C)-adrenoceptor knockout (KO) mice were placed in superfusion chambers. Catecholamine overflow was evoked by 1,1-dimethyl-4-phenylpiperazinium (500 microM) in absence or in presence of the alpha(2)-adrenoceptor agonist medetomidine. The effect of medetomidine was tested in presence of the alpha-adrenoceptor antagonists rauwolscine, WB 4101, spiroxatrine, phentolamine and prazosin. KEY RESULTS: In wild-type mice, medetomidine reduced noradrenaline and adrenaline overflow in a concentration-dependent manner (EC(50) in nM: 1.54 and 1.92; E(max) in % of inhibition: 91 and 94, for noradrenaline and adrenaline, respectively). The pK (D) values of the antagonists for noradrenaline overflow did not correlate with pK(D) values at alpha(2A), alpha(2B), or alpha(2C) binding sites. The pK (D) values of the antagonists for adrenaline overflow correlated positively with pK(D) values at alpha(2C) binding sites (opossum kidney cells). The effect of medetomidine (100 nM) on noradrenaline overflow was significantly reduced in all three alpha(2)KO mice (57, 54, 44 % inhibition, for alpha(2A), alpha(2B), and alpha(2C), respectively), whereas the effect of medetomidine on adrenaline overflow was greatly reduced in alpha(2C)KO mice (14 % inhibition). CONCLUSIONS AND IMPLICATIONS: In the adrenal medulla of mice, all three alpha(2)-adrenoceptor subtypes (alpha(2A), alpha(2B), and alpha(2C)) play an equal role in the inhibition of noradrenaline overflow, whereas the alpha(2C)-adrenoceptor is the predominant alpha(2)-adrenoceptor subtype involved in the inhibitory mechanism controlling adrenaline overflow.     

The anti-diabetic effects of ethanol extract from two variants of Artemisia princeps Pampanini in C57BL/KsJ-db/db mice.

The anti-diabetic effects of two variants of Artemisia princeps Pampanini, sajabalssuk (SB) and sajuarissuk (SS), were investigated in type 2 diabetic animal using their ethanol extracts. Male C57BL/KsJ-db/db (db/db) mice were divided into control, SB ethanol extract (SBE), SS ethanol extract (SSE), or rosiglitazone (RG) groups and their age-matched littermates (db/+) were used. Supplementation of the SBE (0.171 g/100g diet), SSE (0.154 g/100g diet), and RG (0.005 g/100g diet) improved glucose and insulin tolerance and significantly lowered blood glycosylated hemoglobin levels, as compared to the control group. Plasma insulin, C-peptide and glucagon levels in db/db mice were higher in the db/+ mice, however these values were significantly lowered by SBE, SSE or RG-supplement. Hepatic GK activity was significantly lower in the db/db mice than in the db/+ mice, while hepatic G6Pase activity was vice versa. Supplementation of SBE, SSE and RG reversed these hepatic glucose-regulating enzyme activities. In addition, SBE and SSE markedly increased the hepatic glycogen content and muscle ratio as compared to the control group, but they did not alter the food intake, body weight and plasma leptin level. The RG group, however, showed a significant increase in the food intake, body weight and plasma leptin. These results suggest that SBE and SSE exert an anti-diabetic effect in type 2 diabetic mice.