LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中曲札茋苷及其药动学研究

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中曲札茋苷的浓度,并用该方法研究其在Beagle犬体内的药动学特征.方法:以虎杖苷为内标,血浆样品采用甲醇沉淀的方式分离蛋白并离心取上清进样,色谱柱为Kromasil?C18柱(150 mm×2.1 mm).以10 mmol·L-1甲酸铵水溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,...     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中妥洛特罗质量浓度及其在药动学研究中的应用

目的建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中妥洛特罗的质量浓度,研究Beagle犬给予妥洛特罗贴剂后的药动学特征。方法血浆经乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)提取。色谱柱为Agilent TC-C18柱,流动相为甲醇-体积分数1%甲酸溶液(体积比67∶33),流速为0.5 m L·min-1,进样量为30μL。质谱采用多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM),电喷雾离子源,分析时间4.5 min。采用DAS 2.0软件以非房室模型计算药动学参数。结果妥洛特罗质量浓度在0.1~10μg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,定量下限为0.1μg·L-1。日内、日间精密度(RSD)均小于15%,准确度(RE)为-4.27%~-0.60%,方法回收率大于(82.0±6.35)%。健康Beagle犬给予妥洛特罗贴剂(规格为每贴2 mg)后主要药动学参数:tmax为(5.25±1.49)h,ρmax为(7.82±1.98)μg·L-1,t1/2为(5.59±2.37)h;采用梯形法计算,AUC0-t为(99.26±15.05)μg·h·L-1,AUC0-∞为(101.94±14.99)μg·h·L-1。结论该方法可用于妥洛特罗临床前药动学研究。     

LC-MS/MS方法测定Beagle犬血浆中比卡鲁胺的浓度

目的 建立灵敏的液相色谱-串联质谱法测定狗血浆中比卡鲁胺的浓度.方法 血浆样品采用乙腈蛋白沉淀方法,以0.2％甲酸-乙腈(35∶65,v/v)为流动相;采用Zorbax SB C18柱(150 mm×4.6mm,5 μm)分离,通过电喷雾电离源,以选择多反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z428.9→254.7(比卡鲁胺)和m/z 269→169.6(内标,甲苯磺丁脲).结果 建立的体内比卡鲁胺测定方法线性范围为5～2 000 ng·mL-1,定量下限可达1 ng·mL-1.日内、日间精密度(RSD)均＜10％.结论 该方法预处理操作简洁、灵敏、专属性强,可方便用于比卡鲁胺药物的体内药动学研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆中的非索非那定及其药动学研究

目的:建立人血浆中非索非那定的LC-MS/MS测定方法,并研究其在健康人体内的药动学特征.方法:以格列吡嗪为内标,血样经甲醇沉淀法提取,采用Agilent ZORBAX SB-C18(100 mm×2.1 mm,3.5 μm),以甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵水溶液(70∶ 30)为流动相,流速0.20 ml·min-1;质谱选择性检测非索非那定和内标格列吡嗪离子对分别为m/z 502.1 →466.2,446.0→321.1.20名健康受试者分成两组,分别进行低、中单剂量和多剂量给药的药物动力学试验.结果:非索非那定的线性范围为1.0 ～ 600.0 ng· ml-1(r=0.997 6,n=5),定量下限为1.0 ng·ml-1,提取回收率＞87.6％,日内和日间RSD≤8.5％.非索非那定的t1/2为(9.29～ 11.14)h,MRT为(7.95 ～8.24)h;多剂量给药后Css.max为(206.89±123.23)ng·ml-1,AUCss为(1122.98±646.60)ng·h·ml-1,DF为(1.81±0.36).结论:该法灵敏、简便、快捷、准确、重现性好,适用于非索非那定血药浓度测定及人体药动学研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆中的倍他米松17-丙酸酯及其药动学研究

目的:建立人血浆中倍他米松17-丙酸酯（B17P）的LC-MS/MS测定方法,并研究其在健康人体内的药动学特征。方法:采用Agilent Zorbax C18（2.1 mm×100 mm,3.5μm）色谱柱,以甲醇-水（88:12）为流动相,流速0.15 ml·min^-1;电喷雾（ESI）离子源,正离子电离模式,多反应离子监测（MRM）的扫描方式,B17P和二丙酸倍氯米松（内标,IS）的检测离子对分别选择为m/z 471.1→397.1和543.2→433.1。结果:B17P的线性范围为0.02～2.0 ng·ml^-1（r=0.999 3,n=5）,定量下限为0.02 ng·ml^-1,日内和日间精密度（RSD）均小于10.9%,提取回收率在70%左右,方法回收率均在94.5～106.6%范围内。B17P的t_1/2为（82.5±17.3）h,C_max为（0.73±0.18）h,AUC_0～1为（63.9±13.6）ng·h·ml^-1。结论:该法简便、快速、灵敏、准确,适用于B17P血药浓度测定及其人体药动学研究。     

LC-MS/MS法分析人血浆中利培酮浓度及健康人体的药动学研究

目的 建立一种简便、灵敏的液相串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中利培酮的浓度,并应用于健康人体的药动学研究。方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,使用ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈ （50 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱分离,以60%乙腈-40%甲醇、0.1%甲酸-5%乙腈-10 mmol/L乙酸铵水溶液作为流动相,梯度洗脱;在电喷雾离子化源（ESI）正离子检测条件下,采用多反应离子监测模式（MRM）对利培酮及内标利培酮-d4进行定量分析,检测离子对分别为m/z 411.3→191.2、m/z 415.3→195.2;进行专属性、系统适用性、准确度、精密度、基质效应、提取回收率、稳定性等方法学验证;8名健康成年受试者（无脱落）空腹单次口服利培酮片1 mg后,分别于给药前0 h和给药后10、20、30、45 min,1.00、1.25、1.50、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、8.00、12.00、16.00、24.00、36.00、48.00 h采集血样至含有肝素钠的抗凝管中,分离血浆样品,进行LC-MS/MS分析。结果 建立的LC-MS/MS法专属性良好,系统适用性良好,内标与待测物之间不存在交叉影响,人血浆中利培酮的线性范围为0.1～20.0 ng/mL,定量下限（LLOQ）为0.1 ng/mL,利培酮在空腹血浆、餐后血浆及溶血血浆中经内标归一化的基质效应分别为0.991～1.00、1.00～1.01和0.994～0.999,利培酮在人血浆中的平均提取回收率为96.8%～99.7%,准确度、精密度以及稳定性等均符合有关要求。健康受试者单次口服利培酮片1 mg后,主要药动学参数t_max、C_max、AUC_0~t、t_1/2分别为（0.969±0.248）h、（7.83±2.24）ng/mL、（25.5±12.0）h·ng/mL、（3.31±1.74）h。结论 建立的LC-MS/MS法前处理简便快速,灵敏度高,满足生物分析的法规要求,可应用于利培酮在健康人体中的药动学研究。     

LC-MS/MS法测定克拉霉素血浓度及药动学

目的建立测定人血浆中克拉霉素的LC-MS／MS法，研究市售克拉霉素胶囊在人体的药动学特点。方法以罗红霉素为内标，取血浆样品0．3mL经蛋白沉淀后，以甲醇-水（1％甲酸溶液）-乙腈=（80：10：10）为流动相，用C18柱分离，采用电喷雾离子源，正离子方式检测，扫描方式为多反应检测（MRM）。结果克拉霉素线性范围为10～2500μg·L^-1，日内、日间RSD均〈3．5％。应用此法研究18名健康受试者单剂量口服250mg克拉霉素市售胶囊的药动学参数tmax、ρmax、t1/2、AUC0→t和AUC0→∞，其值分别为（1．95±0．71）h、（949±399）μg·L^-1、（4．79±0．84）h、（5600±1753）μg·h·L^-1、（5766±1776）μg·h·L^-1。结论该法用于人体药动学的研究具有专属、快速、灵敏等特点。     

黄芩提取物中有效成分黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠中的药动学研究

目的比较黄芩提取物中主要成分黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠和正常大鼠体内的药动学.方法腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,灌胃黄芩提取物后取血分离血浆,采用HPLC-Uv法检测血浆中黄芩苷和汉黄芩苷浓度,以矩量法计算药动学参数,AUC(0-τ)的计算采用梯形法.采用黄芩提取物与大鼠粪便温孵,从肠道代谢研究黄芩苷和汉黄芩苷动力学改变的初步机制.结果与正常大鼠比较,糖尿病大鼠给予黄芩苷和汉黄芩苷后体内Cmax1明显增加[黄芩苷(6.07±0.95)vs.(17.01±3.60)μg·mL-1,P＜0.01;汉黄芩苷(3.50±0.72)vs.(9.34±2.04)μg·mL-1,P＜0.01],Cmax2明显增加[黄芩苷(1.61±0.18)vs.(7.39±3.04)μg·mL-1,P＜0.01;汉黄芩苷(1.95±0.52)vs.(6.72±2.60)μg·mL-1,P＜0.01],AUC(0-τ)也明显增加[黄芩苷(38.72±7.25)vs.(86.70±20.91)μg·mL-1·h,P＜0.01;汉黄芩苷(39.20±12.10) vs.(69.40±24.20)μg·mL-1·h,P＜0.01],粪便悬浮液中黄芩苷降解也加快(Ke0.087 vs.0.173 min-1).结论黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠与正常大鼠之间存在明显的药动学差异,在糖尿病大鼠肠道内代谢加快.     

应用LC-MS/MS法研究茶多酚在大鼠体内的多组分药动学

目的:建立一种LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中茶多酚的4种儿茶素类抗氧化活性成分,进而研究其多组分药动学。方法:选用Hypersil ODS C18柱,甲醇-水(30∶70)为流动相,等度洗脱;ESI离子源,多反应离子监测,负离子扫描。血浆样品经EtOAc液-液萃取;采用峰面积内标法定量。结果:各待测物和内标不受基质干扰,LLOQ达10或5 ng.mL-1;血浆QC样品批内和批间精密度(RSD)<12%,准确度在97%~106%;萃取回收率>72%,基质效应为88%~106%。大鼠iv茶多酚50和100 mg.kg-1后4种儿茶素类的血浆药动学均符合三室模型,酯型儿茶素类的消除半衰期t1/2γ较长,但非酯型t1/2γ较短;4种活性成分的Vd均大于总体水体积。po茶多酚后药时曲线呈双峰或多峰现象,但胆瘘大鼠无此现象;po生物利用度<15%。结论:本实验建立的LC-MS/MS法高度灵敏、特异且精密,茶多酚自深室的消除较慢,分布广泛;po生物利用度较低,药时曲线双峰现象与EHC有关。酯型儿茶素类与非酯型儿茶素类药动学存在明显差异。     

LC/MS/MS法测定比格犬血浆中埃克替尼及其在药动学研究中的应用

目的:建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定比格犬血浆中埃克替尼,并用于药动学研究。方法:健康比格犬32只,随机分成4组后,静脉(10mg/kg)或灌胃(10,20和40mg/kg)给予埃克替尼。采用LC/MS/MS法测定血药浓度,并计算出药动学参数。结果:测定埃克替尼的线性范围是0.5～10000ng/mL,日内和日间精密度(RSD)均小于10。静脉给药后AUC0-t为(27.3±15.3)μg.mL-1.h。灌胃给药后AUC0-t分别为(7.47±3.30)、(23.5±11.5)、(54.5±24.9)μg.mL-1.h,埃克替尼在犬体内的绝对生物利用度是27.4。结论:该分析方法选择性好、灵敏度高、操作简便,并成功应用于埃克替尼的比格犬药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中布地奈德

建立液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中布地奈德。血浆样品碱化后，经乙酸乙酯液-液萃取，以乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵(60∶40，v/v)为流动相，Capcell Pak C₁₈ MG柱分离；采用电喷雾电离源，以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 489→m/z 357(布地奈德)和m/z 493→m/z 413(内标，曲安奈德)。测定血浆中布地奈德方法的线性范围为25.0～2 000 pg·mL^-1，定量下限为25.0 pg·mL^-1，日内、日间精密度(RSD)均小于15%，准确度(RE)在-8.1%～-1.7%。应用本法研究6只比格犬单次和多次给予布地奈德缓释胶囊9 mg后的药代动力学结果显示：单次给药后T_max为(3.5±3.3) h，C_max为(786±498) pg·mL^-1；多次给药后C_max为(2 142±1 515) pg·mL^-1。该法选择性强、灵敏度高、操作简便，适用于布地奈德缓释制剂的药代动力学研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯浓度。方法:选用 Zorbax Eclipse XDB—C_(18)色谱柱,以甲醇-10 mmol·L~(-1)醋酸铵为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品用甲醇进行蛋白沉淀后进样,选用3200QTRAP 型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果:单硝酸异山梨酯的线性范围为5.0～1000.0ng·mL~(-1),定量下限和最低检测限分别为5.0和0.5 ng·mL~(-1)。准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差-4.5%～4.6%,方法提取回收率大于85%,稳定性较好。结论:本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重现性高,可用于单硝酸异山梨酯人体药物动力学试验。     

LC-MS/MS法用于他喷他多在大鼠体内的药动学研究

目的建立测定大鼠血浆中他喷他多浓度的LC-MS/MS法,用以研究他喷他多在大鼠体内的药动学行为。方法采用甲醇沉淀蛋白法提取血浆中目标成分。色谱条件:色谱柱为DiamonsilC18柱,流动相为甲醇-5 mmol.L-1醋酸铵-乙酸(体积比58∶42∶0.5),流速为0.5 mL.min-1,柱温为室温。以多反应离子监测(MRM)方式,在正离子模式下进行检测,用于定量分析的主要离子对分别为m/z 222.2→107.1(他喷他多),m/z 307.1→220.1(氟康唑)。结果血浆中内源性物质不干扰他喷他多的测定,他喷他多的线性范围为2.0～200μg.L-1,方法的准确度在96.2%～97.5%内,日内、日间精密度均小于15%。结论作者建立的LC-MS/MS法,简单快速、专属性强,可用于他喷他多在大鼠体内的药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中forsklin的浓度及其药代动力学（英文）

目的建立了测定大鼠血浆中forsklin的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。方法血浆样品经叔丁基甲醚萃取后,以水（0.1%甲酸）-乙腈为流动相梯度洗脱,BetaBasic-C18柱分离。通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 411→375.3（forsklin）和285→193（地西泮）。结果在本实验条件下,forsklin血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~1000 ng/ml,定量下限为0.5 ng/ml。日内、日间精密度（相对标准差RSD）均小于14.4%;准确度（相对误差RE）在-3.5%和3.8%之间。方法的专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。结论该法快速、灵敏、准确,可用于forsklin的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中甘草次酸及其临床药代动力学研究

目的建立人血浆中甘草次酸的LC-MS/MS测定方法,研究男性健康志愿者单剂量服用甘草酸二铵胶囊,其代谢产物甘草次酸体内药代动力学行为。方法健康男性志愿者单剂量口服甘草酸二铵胶囊150 mg,血浆样品经乙酸乙酯提取,进行LC-MS/MS分析。色谱柱为Agilent ZORBAXSB C18(3.0×100 mm,5μm),流动相为甲醇∶乙腈∶醋酸铵缓冲液(5 mmol.L-1醋酸铵,0.2%冰醋酸)(15∶60∶25,V/V/V),检测离子为m/z469.4/355.2(甘草次酸)、m/z358.9/279.9(内标泼尼松龙)。测定甘草次酸血药浓度,计算其药代动力学参数。结果在1.5～192μg.L-1内,甘草次酸与内标的峰面积比值与浓度的线性关系良好,定量限为1.5μg.L-1,提取回收率为77.14%～83.64%。人体中甘草次酸药代动力学参数:Cmax为(73.85±25.25)μg.L-1,Tmax为(11.50±3.07)h,T21β为(11.82±3.56)h,AUC0-60为(1252.49±489.06)μg.h.L-1。结论建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于临床药代动力学研究。口服甘草酸二铵胶囊,其代谢产物甘草次酸在体内的药代动力学特点是达峰时间长,约占受试者总人数50%的药时曲线有双峰现象。     

LC-MS／MS法测定右溴苯那敏的血药浓度及其药动学特征评价

目的建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中右溴苯那敏的浓度,并评价右溴苯那敏在健康受试者体内的药动学特征。方法血浆经参有氯苯那敏为内标的甲醇沉淀后在Inertsil ODS-3柱（150mm×2．1mm,5μm）上分离,流动相采用含10mmol·L^-1甲酸铵的甲醇／sic／甲酸（60：40：0．1,V／V／V）溶液。串联质谱sciex API 3000采用正电喷雾离子源和多反应监测的扫描模式。结果右溴苯那敏在0．1—40μg·L^-1内线性良好,定量下限为0．1μg·L^-1。方法的准确度为87％～113％,批内、批间的RSD均〈15％。右溴苯那敏的主要药动学参数ρmax、tmax、t1/2、AUC0→t。和AUC0→∞在单剂量给药后分别为：（3．58±1．14）μg·L^-1、（9．42±2．94）h、（18．46±9．48）h、（108．4±53．97）μg·L^-1和（126．3±73．91）μg·L^-1;在多剂量给药后分别为：（14．59±6．75）μg·L^-1,（6．35±2．09）h、（21．40±7．74）h、（487．9±316．2）μg·L^-1和（578．0±437．3）μg·L^-1。稳态时的药动学参数AUC^88、ρmax、tmax和DF分别为：（153．0±74．47）μg·L^-1、（12．07±5．84）μg·L^-1、（12．75±6．21）μg·L^-1和（21．2±7．7）％。结论本方法专属性强,精确,灵敏度高,操作简单,快速。结果表明单剂量和多剂量给药后ρmax、tmax和AUC^88之间的差异有统计学意义,右溴苯那敏在体内有蓄积。     

液-质联用法测定大鼠血浆中异烟肼及其代谢产物乙酰异烟肼的浓度

目的：建立应用LC-MS/MS测定大鼠血浆中异烟肼及其体内代谢物乙酰异烟肼浓度的方法,并将其应用于异烟肼及乙酰异烟肼在大鼠体内过程的研究。方法：血浆样品采用甲醇沉淀蛋白进行提取,以ESI电离源在正离子模式下检测,用Waters Cortecs C₁₈（4.6 mm×100 mm,2.7 μm）色谱柱,甲醇-水溶液为流动相等度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1。结果：异烟肼及乙酰异烟肼在大鼠血浆中的线性范围及定量限均符合测定要求,日内、日间精密度及基质效应均<15%。结论：本方法快速、灵敏、专属性强且重现性好,可用于大鼠血浆中异烟肼及乙酰异烟肼药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中加巴喷丁的浓度及其药动学研究

建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定人血浆中加巴喷丁的浓度并将其应用于人体药动学研究。取血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇0.2%甲酸水溶液(80∶20)为流动相,用Inertsil ODS-3 C18柱(50 mm×2.1 mm ID,3μm)分离,采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,定量分析的离子反应分别为m/z 172→m/z 154(加巴喷丁)和m/z 130→m/z 71(内标二甲双胍)。加巴喷丁线性范围为40.8～8.16×103 ng.mL 1,定量限为40.8 ng.mL 1,每个样品测试时间仅2.2 min,日内、日间精密度(RSD)均小于12%,准确度(RE)在±6.4%范围内。应用此法研究了20名健康志愿者单剂量口服加巴喷丁胶囊600 mg后的药动学特点。该方法快速、专属、灵敏、适用性强,可应用于加巴喷丁的人体药动学研究。     

LC-MS/MS法测定恒河猴血浆中巴替非班的浓度及药代动力学研究

目的:建立恒河猴血浆中巴替非班浓度的高效液相-串联质谱(Liquid Chromatography-TandemMass Spectrometry,LC-MS/MS)测定法,并研究其在恒河猴体内的药代动力学。方法:取恒河猴血浆200μL,加入含2μg.mL-1内标依替巴肽的乙腈-甲醇(70∶30)混合溶剂600μL沉淀蛋白,取上清液吹干,残留物加100μL流动相复溶,取上清液进行LC-MS/MS分析。色谱柱为ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-20 mmol.L-1甲酸铵(50∶50),流速为0.4 mL.min-1;质谱采用电喷雾离子化,正离子检测,巴替非班和内标的选择性检测离子分别为m/z 818.3→632.4和m/z 832.0→646.2。结果:巴替非班的线性范围为25～5 000 ng.mL-1,最低定量下限(lower limit of quantitation,LLOQ)为25 ng.mL-1,准确度、精密度及回收率均符合要求。结论:本方法专属性强,检测限低,灵敏度高,线性关系良好,方法简便快捷,适用于巴替非班临床前药代动力学研究。