丹参酮ⅡA对血管紧张肽Ⅱ诱导增殖的 大鼠血管平滑肌细胞中c-fos与c-myc的影响

［摘要］目的探讨丹参酮ⅡA对血管紧张肽Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及其机制。方法分离大鼠胸主动脉中层平滑肌，贴壁法培养平滑肌细胞，建立AngⅡ诱导的VSMC增殖模型；以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察丹参酮ⅡA对VSMC增殖的影响；流式细胞仪检测药物对细胞周期的影响；应用免疫细胞化学方法观察原癌基因c fos和c myc表达水平的变化。结果成功建立AngⅡ诱导的VSMC增殖模型；随着丹参酮ⅡA浓度增加，VSMC增殖活性呈明显下降趋势（P＜0.05）；流式细胞术结果显示丹参酮ⅡA使VSMC G0/G1期比例升高（P＜0.01），S期比例下降（P＜0.01）;丹参酮ⅡA各组随着浓度的增加，VSMC中c fos和c myc表达水平显著下降（P＜0.05）。结论丹参酮ⅡA具有抑制血管平滑肌细胞增殖的作用，并呈浓度依赖性。其机制可能与丹参酮ⅡA下调VSMC中c fos及c myc表达水平有关。     

氯胺酮对胚胎大鼠培养神经干细胞增殖和细胞周期的影响

目的　探讨氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞增殖、细胞周期的影响。方法　采用MTT法检测氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞生长的抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果　氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞具有生长抑制作用 ,并存在量效关系。流式细胞仪分析表明G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降。结论　氯胺酮对大鼠培养神经干细胞的增殖有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞有关。     

自噬对肝癌HepG2细胞增殖及对细胞周期影响的研究

目的研究用诱导肝癌HepG2细胞自噬与抑制肝癌HepG2细胞自噬的方法检测自噬对肝癌HepG2细胞增殖的影响,阐明细胞自噬的发生与细胞周期的关系。方法常规培养肝癌HepG2细胞,应用MTT比色法和流式细胞仪检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化。结果自噬诱导剂雷帕霉素组的肝癌HepG2细胞抑制率明显高于对照组（P〈0.05）,对照组的肝癌HepG2细胞抑制率明显高于自噬抑制剂3-MA组（P〈0.05）;流式细胞仪分析示自噬诱导剂雷帕霉素组细胞周期中G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多（P〈0.05）。自噬抑制剂3-MA组细胞周期中G1期细胞减少,S期细胞增多,G2/M期细胞相对减少（P〈0.05）。结论自噬对肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,自噬不利于肝癌HepG2细胞成活。肝癌HepG2细胞自噬的发生多停留在细胞周期的G1期。     

雷帕霉素对小鼠T淋巴细胞的体外作用

目的 研究雷帕霉素对小鼠T淋巴细胞体外的增殖、白细胞介素2(IL-2)表达及细胞周期的影响.方法 将C57BL/6小鼠脾脏制备成脾单个核细胞,使用免疫磁珠法分选出小鼠T淋巴细胞.T细胞分别加入0、10、20、30和40 ng/ml梯度浓度的雷帕霉素培养液培养72 h后,采用MTT法及ELISA法测定各组细胞的增殖情况及IL-2表达情况;用流式细胞仪测定40 ng/ml雷帕霉素浓度组及对照组(0 ng/ml)细胞周期的变化情况.结果 用雷帕霉素培养液培养细胞时,细胞增殖及IL-2的表达均受到抑制(P＜0.01).随药物浓度增加,细胞增殖及IL-2表达受抑制越明显(P＜0.01);细胞周期分析显示加入雷帕霉素培养的T淋巴细胞与未使用药物刺激者相比,G0G1期细胞的比例升高(P＜0.01),S期降低(P＜0.01).结论 在体外雷帕霉素对小鼠T细胞的增殖、IL-2的表达起抑制作用,且随浓度增加,抑制作用增强;雷帕霉素将小鼠T细胞抑制在G0G1期.     

骨碎补总黄酮对牙周炎大鼠龈沟液骨钙素及牙槽骨骨密度的影响

目的：观察骨碎补总黄酮对牙周炎大鼠龈沟液骨钙素（OC）和牙槽骨骨密度的影响,探讨其治疗牙周炎的机制。方法成功建立 SD 大鼠牙周炎模型之后,使用完全随机分组方法将大鼠分为正常组、牙周炎组、骨碎补总黄酮组,每组18只。建模4周后分别灌服生理盐水和骨碎补总黄酮240 mg／（kg·d）。各组大鼠分别在建模后第4,6,8周各处死6只。放射免疫分析法测定龈沟液 OC 水平,显微 CT 测定大鼠牙槽骨骨密度。结果牙周炎组龈沟液 OC 水平显著高于正常组和骨碎补总黄酮组（P ＜0．05）;骨碎补总黄酮组龈沟液 OC 水平在6周和8周时显著低于牙周炎组（P ＜0．05）,8周时与正常组龈沟液 OC 水平相比差异无统计学意义（P ＞0．05）。牙周炎组牙槽骨骨密度显著低于正常组和骨碎补总黄酮组（P ＜0．05）;骨碎补总黄酮组牙槽骨骨密度在 6 和8周时显著高于牙周炎组（P ＜0．05）。结论骨碎补总黄酮可降低牙周炎大鼠龈沟液骨钙素水平,增加牙槽骨骨密度,对大鼠牙周炎具有一定治疗作用。     

锁骨颅骨发育不良患者牙髓细胞的生物学特性及超微结构分析

目的：通过分离培养锁骨颅骨发育不良( CCD)患者的牙髓细胞,观察其牙髓细胞的生物学特性及其超微结构。方法临床收集1例CCD患者的下恒牙,分离培养牙髓细胞,检测细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,透射电镜观察细胞超微结构,并与正常牙髓组织比较。结果成功分离培养CCD患者牙髓细胞,与正常人相比, CCD患者的牙髓细胞生长趋势较为缓慢,处于G1期的细胞比例显著增高( P<0．01),处于S期的细胞比例显著降低(P<0．01)。透射电镜结果显示CCD患者的牙髓细胞胞质内呈现大小不等的板层状小体,粗面内质网扩张。结论本研究成功分离培养了CCD患者恒牙的牙髓细胞,其生长特性及超微结构均发生了一定程度的改变。     

葛根总黄酮对高糖致血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制

目的观察葛根总黄酮对高糖致脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和细胞周期的影响,探讨葛根总黄酮保护高糖致HUVEC损伤的作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度葡萄糖对HUVEC增殖的影响,并观察不同浓度葛根总黄酮对高糖环境下HUVEC增殖及用流式细胞仪检测细胞周期的变化,并测定细胞上清液中SOD活性、NO和ICAM-1的含量。结果30 mmol.L-1葡萄糖可明显抑制HUVEC的增殖反应;降低S期细胞的百分率,增加G0/G1期细胞百分率;并降低HUVEC上清液中SOD活性和NO的含量、升高ICAM-1的含量。葛根总黄酮干预后,随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞百分率递减,而S期细胞百分率递增;并可提高细胞上清液中NO水平和SOD活性,降低ICAM-1水平,与30 mmol.L-1葡萄糖比较(P<0.05)。结论葛根总黄酮对高糖致HUVEC损伤具有一定的保护作用,该作用的产生可能与其抑制高浓度葡萄糖作用下HU-VEC的增殖,促使细胞由G0/G1进入S期,使DNA合成增加,使细胞上清液中SOD活性和NO含量增加,而ICAM-1的含量降低等有关。葛根总黄酮对防治糖尿病血管病变的发生发展具有积极的意义。     

凝血酶敏感蛋白-1对胆囊癌细胞生长增殖的作用

目的探讨研究凝血酶敏感蛋白-1（TSP-1）对胆囊癌细胞株GBC-SD生长增殖的作用及其作用途径。方法根据处理因素将胆囊癌细胞分为：空白对照组,TSP-1组,CD36单抗阻断组、CD47单抗阻断组。用四唑盐比色法（MTT）和流式细胞术检测TSP-1及受体CD36、CD47对胆囊癌细胞生长、细胞周期的影响。结果TSP-1组、CD36阻断组、CD47阻断组细胞生长明显低于对照组（抑制率分别为：23.63%,9.57%,18.13%）。CD36阻断组的抑制率小于CD47阻断组。TSP-1组G0/G1期细胞数增加,S期和G2/M期细胞数减少,与对照组和CD36阻断组相比有显著性差异。增殖指数分别为：对照组（39.55±2.12）、TSP-1组（26.21±0.61）、CD36阻断组（36.43±1.28）、CD47阻断组（30.73±0.38）;各组之间两两比较均有差异。结论TSP-1可对抑制胆囊癌细胞的生长,通过与受体CD36的结合阻滞胆囊癌细胞停止于G0/G1期可能是主要的作用途径。     

穿膜融合多肽TAT N24对Jurkat细胞增殖的影响

摘要目的观察穿膜融合多肽TAT N24对急性T细胞白血病Jurkat细胞增殖的影响。方法以穿膜融合多肽TAT N24处理Jurkat细胞,噻唑蓝（MTT）法观察细胞的生长情况,应用流式细胞仪检测Jurkat细胞周期进程。结果穿膜融合多肽TAT N24处理急性T细胞白血病Jurkat细胞48 h,细胞生长受到抑制,随着多肽浓度的增加,抑制作用增强,表现出明显的浓度依赖性（P＜0.05）;48 h后细胞生长明显受抑,并随时间延长生长受抑更加明显,表现出时间依赖性（P＜0.05）。空白对照组Jurkat细胞中G0/G1期细胞数为（41.91±1.96）%,S期和G2/M期细胞数分别为（52.16±1.76）%和（5.93±0.30）%;对照多肽组Jurkat细胞中G0/G1期细胞数为（46.38±2.31）%,S期和G2/M期细胞数分别为（44.22±1.69）%和（9.40±0.98）%;TAT N24组Jurkat细胞中G0/G1期细胞数为（54.83±1.92）%,S期和G2/M期细胞数分别为（30.75±2.27）%和（14.42±0.68）%。结论融合多肽TAT N24可以有效抑制急性T细胞白血病Jurkat细胞的增殖,阻滞其周期进程。     

异丹叶大黄素对低氧肺动脉平滑肌细胞增殖的作用及机制

摘要：目的:观察异丹叶大黄素（ISO）对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响,并探讨其可能机制。方法:不同浓度的ISO在低氧或常氧培养条件下孵育大鼠PASMCs 24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞增殖与细胞毒作用,流式细胞仪分析细胞周期,实时定量PCR（RT-PCR）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白E（Cyclin E）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）、细胞周期蛋白依赖性激酶6（CDK6） mRNA的表达,Western Blot检测总的及磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）与蛋白激酶B（Akt）表达,荧光酶标仪检测活性氧族（ROS）的产生。结果:CCK-8检测结果表明ISO能够抑制低氧PASMCs增殖（P<0.05）,且实验浓度ISO对PASMCs无明显毒性作用（P>0.05）;流式细胞仪结果表明ISO使处于G0/G1期的PASMCs比例增加（P<0.05）,处于S期PASMCs比例减少（P<0.05）; RT-PCR检测结果表明ISO能够抑制Cyclin D1、CyclinE、CDK2、4、6 mRNA的表达（P<0.05）; Western Blot检测结果表明ISO能够抑制PI3K/Akt信号通路的活化（P <0.05）;荧光酶标仪检测结果表明ISO能够抑制ROS的产生（P <0.05）。结论:ISO可抑制低氧PASMCs增殖,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的活化及ROS的产生有关。     

泄浊除痹方总黄酮对小鼠肾小管上皮细胞增殖与尿酸吸收的影响

目的:研究泄浊除痹方总黄酮对小鼠肾小管上皮细胞(RTECs)增殖与尿酸吸收的影响。方法:采用优化后的小鼠RTECs原代培养方法分离该细胞,不同浓度的泄浊除痹方总黄酮孵育48h,MTT法检测细胞活性,配制尿酸吸收培养基,进行尿酸吸收实验,采用尿酸检测试剂盒测定尿酸吸收值。结果:所分离培养的细胞为目的细胞,即小鼠RTECs,具有尿酸吸收功能;高浓度药物(10、7.5、5.0g.L-1)对细胞增殖有不同程度的抑制作用,低浓度药物(2.5、0.5g.L-1)对细胞增殖无显著性影响;在对细胞生长活性无显著性影响的浓度梯度范围内(2.5、2.0、1.5、1.0、0.5g.L-1),药物对尿酸吸收表现出不同程度的抑制作用。结论:泄浊除痹方总黄酮对小鼠RTECs尿酸吸收功能有一定的抑制作用。     

Regulation effect of nardosinone on the proliferation and functioning of neural stem cells

The purpose of this study was to investigate the effect of nardosinone(Nar) on the proliferation,migration and differentiation of mouse neural stem cells(NSC).The NSC were isolated from mice embryos at gestational day E14 and cultured using the neurosphere culture system.Nar or vehicle was added to the culture media at the start of culture.Cell viability and proliferation were measured with MTT and BrdU incorporation assays respectively.Cell cycle was analyzed by flow cytometric cell sorting.The NSC migration and differentiation were monitored with immune-fluorescence techniques.ERK/CREB signaling pathway was detected with Western blotting analysis.The results demonstrate that after 3 d incubation with the cells,Nar 50 μmol·L-1 increased the viability,BrdU incorporation,and the proportion of cells in S and G2 phase(P<0.05).Exposure to Nar for 24 h promoted cell migration in a dose-dependent manner.Quantitative analyses revealed Nar 50 μmol·L-1 and 25 μmol·L-1 increased the proportion of neurons and oligodendrocytes differentiated from NSC after 7 d and 14 d(P<0.05).Nar,co-incubation with the NSC in proliferation media for 3 d,increased the level of phosphorylated ERK1/2(p-ERK1/2) and phosphorylated CREB(p-CREB) in NSC(P<0.05) without altering the expression of ERK1/2 and CREB.Nar 50 μmol·L-1 and 25 μmol·L-1 also increased the level of p-ERK1/2 and p-CREB in NSC after 7 d co-incubation in differentiation media,however,only increased p-ERK1/2 was observed after 14 d treatment.Together,these findings suggest that Nar promotes the proliferation and migration of NSC,and influence the preference of NSC differentiation.These effects may relate to the action on ERK/CREB signaling pathway.     

Effect of tetrahedral DNA nanostructures on proliferation and osteo/odontogenic differentiation of dental pulp stem cells via activation of the notch signaling pathway

Dental pulp stem cells (DPSCs) derived from the human dental pulp tissue have multiple differentiation capabilities, such as osteo/odontogenic differentiation. Therefore, DPSCs are deemed as ideal stem cell sources for tissue regeneration. As new nanomaterials based on DNA, tetrahedral DNA nanostructures (TDNs) have tremendous potential for biomedical applications. Here, the authors aimed to explore the part played by TDNs in proliferation and osteo/odontogenic differentiation of DPSCs, and attempted to investigate if these cellular responses could be driven by activating the canonical Notch signaling pathway. Upon exposure to TDNs, proliferation and osteo/odontogenic differentiation of DPSCs were dramatically enhanced, accompanied by up regulation of Notch signaling. In general, our study suggested that TDNs can significantly promote proliferation and osteo/odontogenic differentiation of DPSCs, and this remarkable discovery can be applied in tissue engineering and regenerative medicine to develop a significant and novel method for bone and dental tissue regeneration.     

羟基红花黄色素A对氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨羟基红花黄色素A(HSYA)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和丝裂原活化蛋白激酶磷酯酶-1(MKP-1)基因转录及蛋白表达之间的关系。方法 HSYA 10μmol.L-1和ox-LDL 35 mg.L-1与VSMC共培育48 h,MTT检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期,逆转录PCR(RT-PCR)观察ERK1/2和MKP-1基因表达,Western印迹法观察ERK1/2和MKP-1蛋白表达。结果与ox-LDL 35 mg.L-1模型组比较,加入HSYA 10μmol.L-1组细胞存活率明显下降,G0/G1期细胞明显增多,ERK1 mRNA表达下降了42.2%(P<0.01),MKP-1 mRNA显著增加了86.9%(P<0.01),p-ERK1/2蛋白表达降低了39.9%(P<0.01),MKP-1蛋白表达增加了80.6%(P<0.01);加入PD98059 10μmol.L-1组,细胞存活率明显降低了58.3%(P<0.01),G0/G1期细胞明显增多(P<0.01),ERK1 mRNA表达下降了45.9%(P<0.01);p-ERK1/2蛋白表达下降了45.9%(P<0.01);PD98059 10μmol.L-1+HSYA 10μmol.L-1同时加入,细胞生存率下降了61.9%(P<0.01),G0/G1期细胞明显增多(P<0.01),ERK1 mRNA表达进一步减少(P<0.01),MKP-1 mRNA增加了110%(P<0.01),p-ERK1/2蛋白表达下降了51.2%(P<0.01),MKP-1蛋白表达增加了62.4%(P<0.01)。结论 HSYA通过增强MKP-1蛋白表达、降低p-ERK1/2蛋白活性和抑制细胞周期运转的机制抑制VSMC增殖。     

舒芬太尼对体外培养HepG 2 细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的了解阿片类镇痛药舒芬太尼对体外培养肝癌细胞株HepG2细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,实验组在RPMI-1640培养液中加入不同浓度舒芬太尼（0.0001,0.001,0.01,0.1,1,10,20μmol·L-）1,对照组RPMI-1640培养液中不加舒芬太尼,分别孵育48小时后,采用MTT比色法检测HepG2细胞增殖活性,采用流式细胞技术检测舒芬太尼对HepG2细胞周期的影响,用Hoechst33258染色方法分析鉴定舒芬太尼对HepG2细胞凋亡的影响。结果舒芬太尼浓度≥1μmol·L-1时,细胞增殖活性较对照组显著下降（P〈0.05）;随着舒芬太尼浓度增加,G1期细胞比例逐渐增高,S期细胞比例逐渐降低。用Hoechst33258方法染色后在表面荧光显微镜下发现实验组部分HepG2细胞发生凋亡,当舒芬太尼浓度≥0.1μmol·L-1时,荧光显微镜下一个视野内凋亡细胞占总细胞数的比例较对照组显著增加（P〈0.05）。结论舒芬太尼在临床常用剂量范围内对肝癌细胞株HepG2细胞增殖和凋亡无明显影响,当浓度≥1μmol·L-1时可以抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖,主要将细胞周期阻滞在G1期,当舒芬太尼浓度≥0.1μmol·L-1时可引起肝癌HepG2细胞凋亡。     

紫杉醇对血管外膜成纤维细胞增殖和迁移的影响

目的观察紫杉醇对血管外膜成纤维细胞(AF)增殖、表型转化和迁移的影响。方法选取雄性SD大鼠,用贴壁法培养胸主动脉外膜AF,用免疫荧光法检测AF增殖细胞核抗原(PCNA),用流式细胞仪检测细胞周期,用Transwell法测定细胞迁移能力。结果 10 nmol.L-1紫杉醇对成纤维细胞存活率较空白组无明显差异,表明其对成纤维细胞无明显杀伤作用。与空白组比较,9 nmol.L-1紫杉醇可显著增加G0/G1期AF细胞百分比(P<0.05),降低G2/M及S期细胞百分比(P<0.05),并显著降低AF细胞PCNA表达,抑制其迁移能力(P<0.01)。结论低浓度紫杉醇在不影响成纤维细胞生存活力的情况下,能显著抑制细胞增殖和迁移能力。     

牛磺酸对心肌成纤维细胞细胞周期的影响及其机制的研究

目的研究牛磺酸(taurine,Tau)对血管紧张素Ⅱ(an-giotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiacfibroblast,CFb)增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法用AngⅡ诱导新生大鼠CFb增殖,建立心肌纤维化模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖;羟脯氨酸测定检测胶原含量;流式细胞仪检测细胞周期及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物p27的变化;免疫细胞化学法测定细胞周期调控蛋白D(cyclin D)及p27蛋白的含量。结果Tau(40、80、160mmol.L-1)可明显抑制AngⅡ诱导的CFb增殖与胶原合成,同AngⅡ组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01),且呈现剂量依赖性。流式细胞仪检测表明Tau在80、160mmol.L-1可促进p27的蛋白表达;细胞G0/G1期百分率随Tau浓度增加而增加,S期细胞百分率随Tau浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。免疫细胞化学染色结合图像分析系统的分析结果也表明Tau可增加p27的蛋白表达,与AngⅡ组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论牛磺酸通过促进p27的表达,使细胞周期阻滞于G0/G1期,而抑制CFb增殖和胶原含量的增加。     

硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系

目的硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系。方法 Brdu ELISA法测细胞增殖活性;Boyden小室培养测细胞的迁移率;Western blot测细胞uPA、NF-κB的蛋白水平;细胞免疫化学测NF-κB细胞表达及细胞定位。结果 (1)与对照组(无血清培养基组)相比,10%FCS组细胞增殖活性与迁移率明显增高(P<0.05);与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖及迁移,硼替佐米浓度为(4μg.L-1),人胃癌SGC-7901细胞增殖活性与迁移率均明显降低(P<0.05);与PDTC组(10μmol.L-1)相比,两者无明显差别;(2)与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB蛋白表达,硼替佐米浓度为(4μg.L-1)时uPA、NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05);与NF-κB特异性抑制剂PDTC组相比,两组uPA、NF-κB表达均无明显差别;硼替佐米浓度为(4μg.L-1)能明显降低NF-κB核蛋白含量,与PDTC组相比,两者无显著差异(P>0.05);(4)细胞免疫化学结果示:硼替佐米(4μg.L-1)抑制10%FCS诱导人胃癌SGC-7901细胞NF-κB核移位。结论①硼替佐米抑制血清诱导胃癌SGC-7901细胞增殖迁移及uPA、NF-κB蛋白表达,②硼替佐米降低胃癌SGC-7901细胞侵袭力可能与其抑制NF-κB活性,降低UPA水平有关。     

体外诱导人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化

目的 通过体外培养将人脐带间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞.方法 将体外培养的人脐带间充质干细胞分为诱导组和对照组.诱导组先后予以1 mmol·L-12-巯基乙醇培养2 d,10 μg·L-1表皮生长因子、10 μg·L-1碱性成纤维细胞生长因子及2% B27培养7 d,之后添加20 mmol·L-1尼克酰胺及艾塞那肽培养7 d.对照组不添加诱导剂,继续换液培养.通过观察细胞形态变化、RT-PCR体外扩增两组细胞的胰腺-十二指肠同源框-1（PDX-1）基因、放射免疫法测定两组细胞胰岛素分泌量三种方法来鉴定胰岛素分泌细胞.结果 （1）通过形态学观察,诱导组细胞类似胰岛样细胞,对照组细胞则无明显改变;（2）应用RT-PCR方法,诱导组细胞可扩增出PDX-1基因,而对照组则没有.（3）诱导组细胞培养上清液可检测出胰岛素分泌,7 d时胰岛素浓度为（6.32±0.18）mIU·L-1,21 d时增至（34.57±4.54）mIU·L-1,而对照组则未测出.结论成功在体外微环境下将人脐带间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞.     

紫杉醇对成纤维细胞增殖侵袭能力的影响

目的研究在Transwell培养条件下紫杉醇对成纤维细胞增殖侵袭能力的影响。方法培养、传代并鉴定胸主动脉外膜成纤维细胞,然后用Transwell小室建立细胞培养模型,以0,9 nmol.L-1紫杉醇分别干预;用MTT法检测成纤维细胞侵袭增殖的情况。结果 0,9 nmol.L-1紫杉醇组成纤维细胞光吸收值分别为(0.56±0.08),(0.44±0.05),2组比较有统计学意义(P<0.01)。结论紫杉醇能显著降低血管外膜成纤维细胞的增殖能力,可以延缓介入治疗后血管的再狭窄。