聚合酶链反应检测HBV─DNA及临床意义的再认识

采用聚合酶链反应检测１１４例肝病患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：１１４例患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３５．９６％，其中ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＮ、ＬＣ组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为４１．６７％、２１．４３％、５３．６６％和２６．３１％；ＨＢｅＡｇ（＋）组３９．０２％，抗ＨＢｃ（＋）组２２．７３％，ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｃ（＋）组４３．３７％，抗ＨＢｓ（＋）组４１．１８％；ＨＢＶＭ（－）组１１．１１％。结果提示：①ＣＡＨ组阳性率较高（５３．６６％）；②抗ＨＢｅ（＋）患者血清中有高滴度ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示仍有传染性；③抗ＨＢｅ（＋）、抗ＨＢｓ（＋）、ＨＢＶＭ（－）的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性可能为ＨＢＶ的变异株感染。     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

血清,白细胞HBV—DNA的PCR检测结果与HBV血清复制标志的关系

３０例慢性乙型肝炎患者中，有５３．３％的病人用ＰＣＲ可从血清和白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ；ＨＢｅＡｇ阳性和抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者１００％可以检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，而仅抗－ＨＢｃＩｇＭ阳性的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率为６６．７％。１３例乙肝血清学复制标志阴性的病人中有５例（３８．５％）也可检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。在ＨＢｓＡｇ转阴的３例病人中有１例可从白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HBVDNA

采用ＰＣＲ法检测４８例重型肝炎患者血清中ＢＨＶＤＮＡ存在情况，并与斑点杂交检测进行比较，结果表明：ＰＣＲ检测３９例阳性，检出率为８１．３％（３９／４８）．ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）组ＰＣＲ检测均阳性（８／８），ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（－）组阳性率为８８．０％（２２／２５），抗体阳性组检出率为７２．７％（８／１１），检测灵敏度为１．０ｆｇ；斑点杂交检测１５例阳性，阳性率３０．２％（１５／４８），各组斑点杂交阳性率均低于ＰＣＲ法．提示：（１）大多数重型肝炎患者血清中存在低滴度的病毒颗粒，对重肝发病有一定作用；（２）大部分ＨＢｅＡｇ阴性，抗体阳性的重型肝炎患者血清仍有传染性，应考虑抗病毒治疗．     

血清、白细胞HBV－DNA的PCR检测结果与HBV血清复制标志的关系

３０例慢性乙型肝炎患者中，有５３．３％的病人用ＰＣＲ可从清和白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ；ＨＢｅＡｇ阳性和抗－ＮＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者１００％可以检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，而仅抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率为６６．７％。１３例乙肝血清学复制标志阴性的病人中有５例（３８．５％）也可检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。在ＨＢｓＡｇ转阴的３例病人中有１例可从白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

聚合酶链反应检测HBV—DNA及临床意义的再认识

采用聚合酶链反应检测１１４例肝病患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：１１４例患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３５．９６％，其中ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＨ、ＬＣ组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为４１．６７％、２１．４３％、５３．６６％和２６．３１％；ＨＢｅＡｇ（＋）组３９．０２％，抗ＨＢｃ（＋）组２２．７３％，ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｃ（＋）组４３．３７％，抗ＨＢｓ（＋）组４１．１８％；ＨＢＶＭ（－）组１１．１１％。结果     

350例病毒性肝炎患者检测HBV-DNA与HBV血清学标志物相关性研究

采用ＰＣＲ技术对３５０例各型病毒性肝炎进行检测，旨在研究血清ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－Ｍ之间的相关性，以确定ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义。并以ＨＢＶ－ＤＮＡ为依据进一步考察ＨＢＶ－Ｍ的临床价值。结果显示：在ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）病例中ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）者１０２例（９０．２７％），说明ＨＢｅＡｇ基本可反应病毒处于复制状态；在１３７例ＨＢｅＡｇ（－）／抗－ＨＢｅ（＋）中，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）为６８例（４９．６３％），表明病毒活动并未终止；在抗－ＨＢｓ（＋）１４例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）２例（１４．２９％），说明抗－ＨＢｓ出现后仍然可有ＨＢＶ复制；在ＨＢＶ－Ｍ均阴性的８５例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）２３例（２７．０６％），说明不能单纯依靠ＨＢＶ－Ｍ检测来诊断乙肝，需定期查ＨＢＶ－ＤＮＡ或肝活体组织检查ＨＢＶ－ＤＮＡ、ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ。     

54例HBsAg阴性慢性肝炎乙肝病毒感染的分析

用聚合酶链反应方法检测５４例乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性的慢性肝炎患者血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，结果３１例阳性（５７．４％）。其中单项抗─ＨＢｃ（＋）１０例，检出９例，ＨＢＶ标志物三抗体阳性５例中，检出１例；ＨＢＶ标志物全阴性１４例中检出９例。提示慢性肝炎即使ＨＢｓＡｇ阴性，仍有可能是ＨＢＶ感染，尤其是抗─ＨＢｃ（＋）者。     

孕妇对乙肝病毒和风疹病毒易感状况的调查

用ＥＬＩＳＡ法检测１７１对母儿血清中乙肝病毒（ＨＢＶ）抗原、抗体及３１５例孕妇血清中风疹病毒（ＲＶ）ＩｇＧ抗体。１０．５％孕妇血清中ＨＢｓＡｇ阳性，其中ＨＢｅＡｇ阳性率为５０％；５例新生儿脐血ＨＢｓＡｇ阳性，其中２例抗－ＨＢｃＩｇＭ滴度较高；５例抗－ＨＢｅ阳性的母亲其子女脐血无ＨＢｓＡｇ阳性。３１５例孕妇血清抗－ＲＶＩｇＧ阳性率为９１．１％，新近感染者１９例占６．０％，ＲＶ易感者２８例占８．９％；孕早期抗－ＲＶＩｇＧ阳性率为８６．８％，孕晚期为９２．１％；孕妇年龄低于２４岁者血清抗－ＲＶＩｇＧ阳性率为７７．８％，３３岁以上者为１００％。提示孕妇对这两种病毒有较高的易感性，需加强免疫和监管。     

Polymerase chain reaction in the detection of hepatitis B virus carriers with sole positive anti-hepatitis B core antigen]

To assess the prevalence of serum HBV DNA in the individuals with positive anti-HBc alone, seroepidemiologic investigations in three populations were carried out with polymerase chain reaction. The detection of sole anti-HBc were 21 of 294 (7.1%), 193 of 1995 (9.7%) and 23 of 377 (6.1%) individuals respectively. Among the anti-HBc positive sera, HBV DNA was detected in 6 (28.6%), 68 (35.2%) and 7 (30.4%) respectively. Follow-up observations showed that 83.8%, 93.1% and 71.4% still remained HBV DNA positive respectively. These might be reasonably regarded as chronic asymptomatic HBV carriers with undetectable HBsAg.     

HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的初步研究

目的：检测HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的情况，为HBV宫内传播机制研究提供理论依据。方法：用胰蛋白酶（0．25％）－DNase I(0.15U/ml)联合消化法，获取纯度较高的人绒毛膜滋养层细胞。将状态良好的对数生长期人绒毛膜滋养层细胞分为6组，HBsAg-anti-HBs复合物组（I），热灭活的HBsAg、HBsAg、anti-HBc均阳性血清和高滴度anti-HBs阳性血清共同孵育物组（Ⅱ），热灭活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均阳性血清组（Ⅲ），HBsAg组（Ⅳ），热灭活的正常人血清组（Ⅴ），及正常细胞培养液组（Ⅵ，空白对照组）。分别收集各组细胞铺片，免疫组化检测细胞的感染状况。结果：所获人绒毛膜滋养层细胞纯度较高，符合后续实验要求。用鼠抗人anti-HBs免疫组化检测收集的细胞铺片，发现I、Ⅱ组均有大量HBsAg阳性信号，Ⅲ组细胞亦有少量HBsAg阳性信号出现，其他各组细胞均未发现HBsAg阳性信号。结论：体外培养的人胎盘滋养层细胞能将HBsAg-抗HBs复合物中的HBsAg，但不能将单独的HBsAg“摄入”胞内。     

供乙肝疫苗质检用的新动物模型——乙肝疫苗预防树鼩感染HBV的研究

接种乙肝疫苗的10只树鼩,9只血清出现抗-HBs。注射含HBV的人血清后,其中只有1只血清出现短暂的HBsAg,保护率为88.88％;其血清抗-HBc始终阴性。未接种乙肝疫苗的10只对照树鼩注射HBV人血清后,5只血清HBsAg阳性;8只抗-HBc阳性。接种疫苗组HBV感染率显著低于对照组(p<0.01)。实验前所有树鼩血清HBsAg、抗-HBs及抗-HBc均阴性。实验结果表明:1)乙肝疫苗能阻断树鼩感染HBV,进一步确证树鼩能感染HBV,是用于研究HBV的有用的动物模型;2)树鼩可能代替黑猩猩进行乙肝疫苗安全性和免疫保护效果鉴定之用。     

对血站合格献血员复检HBV HCV阳性率分析

目的：了解我区献血员的管理及筛查情况。方法：随机采集了我区4个盟市血站503份合格献血员血样,并进行了相关调查,采用ELISA法复检。结果：HBsAg阳性率为1.99%（10/503）;抗-HBc阳性率15.90%(80/503);抗-HBs阳性率21.87%(110/503);抗-HCV阳性率2.19%(11/503),其中HBV、HCV双重感染的8例,HBsAg、抗-HBc双阳性3例。对抗-HBc、抗-HBs双阳性以及单纯阳性者经PCR法检测HBVDNA均为阴性。结论：说明我区血站管理及对献血员筛查工作还存在着一定的漏洞,献血员筛查抗-HBc对预防输血后乙肝无多大价值,应把重点放在选用灵敏度高的试剂进行筛查。     

以构音障碍为首发表现的Wilson’s病误诊一例

患者,男,二十三岁。三月前开始无诱因地渐出现讲话声音减低,一周后即不能讲话,同时缄默,面无表情,四肢无力。在当地医院用多种药物治疗均无效,故于1988年3月19日转我院。患者过去史无特殊。查体T 37.2℃,R 20次/min,P 80次/min。BP15.97/9.31kPa神清,表情呆滞,构音障碍。     

用免疫荧光法比较原发性肝癌血清中抗乙肝病毒相关核抗原与抗核抗体

用抗补体免疫荧光染色在111份原发性肝癌患者血清中发现8份血清为抗乙肝病毒相关核抗原(HBNA)阳性,阳性率为7.2％。与国外相比,我国肝癌患者中抗HBNA阳性率略高,可能与乙肝病毒(HBV)感染有关,所有抗HBNA阳性血清均为抗HBC阳性,而HBV DNA均为阴性,提示HBNA在HBV停止复制后出现。用免疫荧光法,所有的抗核抗体(ANA)阳性血清均使PLC/PRF/5细胞着色,但所有的抗HBNA阳性血清均不使大鼠肝细胞着色。此结果表明抗HBNA与ANA无关。抗HBNA与HBNA是一对新的抗原抗体。     

低浓度HBsAg感染者乙肝5项标志物测定意义

目的 :观察低浓度 HBs Ag感染者乙肝 5项标志物的模式特征。方法 :采用 EL ISA法测定了 38例 HBs Ag浓度在5μg/ L以下血清中乙肝病毒表面抗体 (抗 - HBs)、乙肝病毒核心抗体 (抗 - HBc)、乙肝病毒 e抗原及其抗体 (HBe Ag、抗 - HBe)。结果 :低浓度 HBs Ag感染者血清 5项 HBV标志有 8种表现模式 ,以“HBs Ag、抗 - HBc、抗 - HBe阳性 ,抗 - HBs、HBe Ag阴性”模式为主(6 5 .79% ) ,其次为“HBs Ag、抗 - HBc、HBe Ag阳性 ,抗 - HBs、抗 - HBe阴性”和“HBs Ag、抗 - HBc阳性 ,抗 - HBs、HBe Ag、抗 - HBe阴性”模式 (分别为 10 .5 3%和 7.89% ) ,HBs Ag和抗 - HBc同时阳性者 92 .11%。结论 :低浓度 HBs Ag感染者具有特殊的流行病学特点 ,提高 HBs Ag测定灵敏度具有重要意义。     

免疫金银染色法检测SLE患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体的临床研究

目的　探讨检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清抗核抗体 (ANA)和抗双链DNA抗体 (A -dsDNA)的临床意义。方法　用免疫金银染色法 (immunogold -silverstaining ,IGSS)和斑点免疫金银染色法 (dot -immunogold -silverstaining ,Dot-IGSS)同步检测SLE患者血清ANA和A -dsDNA。结果　 16 9例活动期SLE患者血清ANA和A -dsDNA的阳性率分别为 98.2 %和 77.2 % ;4 4例非活动期患者ANA和A -dsDNA的阳性率分别为 72 .2 %和15 .9% ,两组比较 ,阳性率有显著性差异 (P <0 .0 1)。活动期病人的血清滴度也较非活动期患者高 (P <0 .0 1) ;A -dsDNA阳性患者的肾损害率明显高于A -dsDNA阴性者 (P <0 .0 1)。结论　ANA、A -dsDNA阳性且滴度高提示SLE处于活动期 ,A -dsDNA阳性提示有肾损害的可能 ;但A -dsDNA阴性亦不能排除SLE。