结核菌H37Ra诱导迟发型超敏反应的探讨

[目的]探讨结核分枝杆菌H37Ra免疫小鼠后能否诱发迟发型超敏反应及最佳的观测时间.[方法]Balb/c小鼠随机分为3组.分别用H37Ra、BCG和NS皮内免疫,6周后每组小鼠皮内注射PPD,游标卡尺测定24、48和72h局部皮肤红肿、硬结直径.[结果]H37Ra组24、48和72h的局部皮肤红肿、硬结直径结果分别是(6.17±0.20)、(5.23±0.35)、(3.59±0.40)mm,24和48h反应稍弱于BCG组[(6.71±0.66)、(5.89±0.52)mm],无统计学意义(P>0.05).与NS对照组相比,H37Ra和BCG免疫小鼠后均能诱导显著的迟发超敏型反应(P<0.05).H37Ra组和BCG组均24h反应最明显.[结论]结核分枝杆菌H37Ra免疫小鼠6周后能诱导迟发型超敏反应,较BCG弱;24h为最佳观测时间.     

Ag85B蛋白诱导小鼠脾淋巴细胞表达IL-2、IFN-γ及促进细胞增殖的实验研究

目的探讨结核分枝杆菌Ag85B蛋白在体外诱导BALB/c小鼠脾淋巴细胞表达IL-2和IFN-γ的能力及对细胞增殖的影响,以了解Ag85B基因表达在特异性细胞免疫应答中的作用。方法体外分离培养BALB/c小鼠脾淋巴细胞,除去蛋白中的内毒素,采用BCA法对Ag85B蛋白进行定量,10μg/ml浓度的蛋白与小鼠脾淋巴细胞共同孵育24、72 h,RT-PCR方法检测细胞培养液上清中IL-2和IFN-γ的表达;用不同浓度的Ag85B蛋白刺激小鼠脾淋巴细胞24、48、72 h,MTT法检测其对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响。结果小鼠脾淋巴细胞在体外分离培养成功;经RT-PCR检测,Ag85B蛋白能诱导小鼠脾淋巴细胞表达IL-2和IFN-γ,对照组表达呈阴性;MTT法检测到Ag85B蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖具有促进作用,在一定范围内呈时间和剂量依赖性,在同对照组的增殖比较中,除0.5μg/ml组在24、48 h差异无统计学意义外,其他浓度组在各个时间点差异均有统计学意义(P0.05)。结论结核分枝杆菌Ag85B蛋白能诱导小鼠脾细胞产生IL-2和IFN-γ因子,能在体外促进小鼠脾淋巴细胞增殖,诱导了特异性的T细胞免疫应答。     

乙型脑炎减毒活疫苗与灭活疫苗序贯免疫的研究进展

流行性乙型脑炎(乙脑)是由乙型脑炎病毒(JEV)引起的以侵犯中枢神经系统为主的疾病, 是亚洲和西太区引起儿童病毒性脑炎的主要病因。接种疫苗是预防乙脑的主要措施, 当前我国有乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗在使用。由于疫苗供应、受种者主客观选择等原因, 会面临这两种疫苗序贯接种的需求, 但当前缺乏相关实施依据。本文收集国内外研究证据, 梳理了当前乙脑疫苗使用现状及序贯接种的研究进展, 阐述了在无法满足同一类型乙脑疫苗完成全程接种情况下的序贯接种建议, 以期为乙脑疫苗接种工作的开展和相关政策的制定提供参考。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗与不同剂型Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗序贯接种的抗体滴度比较

目的  比较Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin strain-based inactivated poliovirus vaccine,sIPV)与不同剂型Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗(bivalent types Ⅰ and Ⅲ oral poliovirus vaccine,bOPV)序贯接种的抗体滴度。 方法  选择柳州400名2月龄婴儿,按1：1：1：1随机分为sIPV+2bOPV糖丸、sIPV+2bOPV液体、2sIPV+bOPV糖丸、2sIPV+bOPV液体4组,按0 d、28 d、56 d免疫程序接种疫苗。检测免前、免后28 d脊灰中和抗体滴度。 结果  序贯程序相同时,1剂sIPV糖丸组与液体组免后Ⅰ型抗体滴度分布差异有统计学意义(Z=-2.589,P=0.010),Ⅱ型(Z=-0.331,P=0.741)和Ⅲ型(Z=-1.556,P=0.120)差异均无统计学意义(均有P>0.05);2剂sIPV糖丸组与液体组免后Ⅰ型(Z=-1.249,P=0.212)、Ⅱ型(Z=-1.658,P=0.097)和Ⅲ型(Z=-1.436,P=0.151)抗体滴度分布差异均无统计学意义(均有P>0.05)。剂型相同时,2剂sIPV组与1剂sIPV组各型抗体滴度分布差异均有统计学意义(均有P < 0.05)(1剂sIPV液体组与2剂sIPV液体组：Ⅰ型：Z=-2.766,P=0.006;Ⅱ型：Z=-9.137,P < 0.001;Ⅲ型：Z=-5.529,P < 0.001。1剂sIPV糖丸组与2剂sIPV糖丸组：Ⅰ型：Z=-3.748,P < 0.001;Ⅱ型：Z=-7.660,P < 0.001;Ⅲ型：Z=-6.030,P < 0.001)。 结论  bOPV糖丸和液体剂型免疫效果相似,各地接种部门应结合疫苗效果、接种对象特征和人口密度,选择适宜剂型接种;如sIPV供应充足,建议优先选择2剂sIPV序贯程序完成脊灰基础免疫接种。     

26-45岁成人两种乙型肝炎疫苗序贯免疫的免疫原性北大核心

目的观察成人两种乙型肝炎(乙肝)疫苗(Hepatitis B vaccine,HepB)—20μg重组酵母HepB(HepB-Y)和20μg重组CHO HepB(HepB-CHO)序贯免疫的免疫原性。方法在陕西省2个县招募乙肝五项血清标志物均阴性的26-45岁成人,随机分为四个组,按照0-1-6月免疫程序分别接种3剂HepB-Y、3剂HepB-CHO、2剂HepB-Y和1剂HepBCHO、2剂HepB-CHO和1剂HepB-Y,检测全程免疫后30-45d血清乙肝表面抗体(HBsAb),比较抗体阳转率和几何平均浓度(GMC)。结果四个组研究对象HepB全程免疫后HBsAb阳转率分别为93.62%(88/94)、93.48%(129/138)、99.00%(99/100)、94.79%(91/96)(χ^2=5.17,P=0.147),GMC(IU/L)分别为2039.74、3158.70、2672.09、3531.59(F=1.36,P=0.254)。结论成人序贯接种20μg HepB-Y和20μg HepB-CHO不降低HepB全程免疫的免疫原性。     

结核菌H37Ra和BCG感染巨噬细胞的实验研究

目的：探讨H37Ra和BCG诱导巨噬细胞产生一氧化氮（NO）的能力,细菌在巨噬细胞内生存和破坏巨噬细胞的能力.方法：H37Ra和BCG分别感染BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、RAW264.7细胞株及THP-1细胞株,24h后取培养上清液,Griess法检测NO的释放量;分别于感染后的0、4 d及7 d用1%Triton X-100裂解巨噬细胞后接种罗氏培养基,培养18 d后计数菌落形成单位（CFU）;同时于每个时间点,用MTT法检测巨噬细胞存活率的变化.结果：H37Ra和BCG均可诱导BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、RAW264.7细胞株及THP-1细胞株产生多量的NO,两组均显著高于对照组（P＜0.05）;H37Ra感染组稍高于BCG感染组,但差异无统计学意义（P＞0.05）;H37Ra和BCG均可在巨噬细胞内生存繁殖,H37Ra或BCG的感染均降低巨噬细胞的存活率,随着感染时间的延长细菌破坏巨噬细胞的效果越来越显著.结论：H37Ra和BCG均可增强巨噬细胞的抗微生物活性,它们对巨噬细胞均具有一定的毒力;H37Ra的毒力低于BCG.     

注射用盐酸苦参碱对卡介苗加脂多糖致小鼠免疫性肝损伤的保护作用

[目的]研究注射用盐酸苦参碱对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.[方法]采用BCG加LPS致小鼠免疫性肝损伤,采用不同剂量盐酸苦参碱干预,对其血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)进行测定和比较,取肝脏、脾脏、胸腺测定脏器指数并进行比较.[结果]与模型组比较,盐酸苦参碱各剂量组均能显著对抗BCG加LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST及小鼠肝脏指数和脾脏指数的升高. [结论]盐酸苦参碱各剂量对BCG加LPS致小鼠免疫性肝损伤具有保护作用.     

PCR-反向杂交膜片技术检测石蜡包埋组织中的结核杆菌

[目的]探讨PCR-膜片RDB (recerse dot blot)技术检测石蜡包埋组织中的结核杆菌的方法.[方法]合成检测结核杆菌的寡核苷酸探针并制作膜芯片,扩增结核分支杆菌插入序列IS6110基因片段,利用PCR-膜片RDB技术,检测12株结核分支杆菌临床分离株、2株大肠杆菌,120例结核病人及38例非结核病人石蜡包埋组织中结核杆菌.石蜡组织的膜片检测结果与抗酸染色法和PCR检测结果比较.[结果]12株扩增阳性的结核分支杆菌,膜片检测11株杂交阳性,2株大肠杆菌和阴性对照结果均为阴性.120例结核病人石蜡组织标本,抗酸染色,PCR和PCR-膜片RDB技术检测灵敏度分别为43.3%(52/120),76.7%(92/120)和87.5%(105/120),三者比较差异有统计学意义(P<0.01).38例非结核病人石蜡组织标本,抗酸染色,PCR和PCR-膜片RDB技术检测特异度分别为100%(38/38),94.7%(36/38)和100%(38/38),三者比较差异无统计学意义(P>0.05).[结论]PCR-膜片RDB技术有助于提高石蜡包埋组织中结核杆菌检出率.     

慢性甲醛吸入对小鼠肝脏的氧化性损伤

目的 :探讨甲醛中毒的肝脏损害机制。方法 :选择健康昆明小鼠 40只 ,随机分为 4组 :甲醛低剂量组 (2 .5m g/m3 )、中剂量组 (5mg/ m3 )、高剂量组 (10 mg/ m3 )、阴性对照组 ,每组 10只。除阴性对照组外 ,其余 3个剂量组每日吸入甲醛 1次 ,每次 4h,连续 16周。测定小鼠血浆、肝脏超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量及小鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)活性。结果 :3个剂量组血浆和肝脏 MDA含量显著高于对照组 (P<0 .0 5)、SOD活力均低于对照组 (P<0 .0 5) ;中、高剂量组肝 GSH-Px活力低于低剂量组和阴性对照组 (P<0 .0 5)。结论 :慢性甲醛吸入可能引起小鼠肝组织发生脂质过氧化 ,脂质过氧化可能是甲醛致肝脏损害的机制之一     

桦木酸对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的研究桦木酸(betulinic acid,BA)对酒精性肝损伤的保护作用。方法 56只健康雄性KM小鼠随机分为:正常对照(NC),酒精模型(MC),BA低、中、高剂量(L-BA,M-BA,H-BA,按0.25、0.5、1mg/kg b w给与),BA低、中、高剂量与酒精联合(L-BAA,M-BAA,H-BAA)8组;NC、MC组灌胃1%的可溶性淀粉,其余各组灌胃混悬于可溶性淀粉中不同剂量的BA,1/d,连续14d后,除NC组,L-BA,M-BA,H-BA组灌胃生理盐水外,其余4组均按10 ml/kg灌胃50%酒精诱发酒精性肝损伤模型。测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的活性,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)的含量;肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性以及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,并观察肝脏病理改变。结果 BA预处理后,能显著降低酒精诱导肝损伤小鼠血清AST、ALT、ALP活性及TC和TG含量,提高ALB、A/G水平,增强SOD、CAT、和GSH-Px活性及GSH含量,降低MDA含量,明显减轻肝组织损伤程度,且呈量效关系。结论 BA具有抗氧化损伤的能力,缓解酒精引起的脂质过氧化,对酒精诱导肝损伤有预防性的保护作用。     

芹菜素对血吸虫病小鼠肝纤维化的影响

目的探讨浓度梯度的芹菜素(AP)对血吸虫病肝纤维化的影响。方法建立血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型,随机分为6组:正常对照组、吡喹酮组、γ干扰素组、芹菜素低、中、高剂量组。测定小鼠的肝脏或者血液的羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和层粘连蛋白(Ln)含量,间接反映芹菜素对血吸虫病肝纤维化的影响;应用HE染色、免疫组化法及多媒体病理图文定量分析,观察各实验组小鼠肝脏的病理改变及TGF-β1和PDGF-BB表达变化。结果 Hyp、HA、PCⅢ和LN含量第4 w到第8 w呈降低趋势,且中剂量芹菜素的各项指标最接近空白组,抑制血吸虫病肝纤维化作用最明显。芹菜素剂量水平,未见量效增强关系。HE染色液显示中剂量芹菜素组肝脏变性坏死减轻最为明显,小叶结构最完整。中剂量芹菜素组TGF-β1和PDGF-BB含量与对照组、吡喹酮组、低剂量芹菜素组和高剂量芹菜素组都有显著性差异(P<0.05)。其中中剂量组300 mg/(kg bw.d)综合效果较佳。结论芹菜素中剂量组300 mg/(kg bw.d)对血吸虫病肝纤维化综合效果较佳。[营养学报,2012,34(6):591-594,598]     

消渴胶囊对高血糖模型小鼠的降糖作用

目的：探讨中药复方消渴胶囊（XKC）对四氧嘧啶（ALX）致糖尿病（DM）模型小鼠血糖水平的影响。方法：以45mg／kgBW剂量的ALX尾静脉注射建立DM模型小鼠80只，并以血糖水平随机分为4组，分别经口灌胃给予0、0．4、0．8、2．4g／kgBW剂量的XKC，同时以2．4g／kgBW剂量的XKC经口给予15只正常小鼠，每天1次给予，连续30d。试验结束时，禁食3．5h后测定正常小鼠和DM小鼠的空腹血糖及口服2g／kgBW剂量的葡萄糖后0tl、0．5h和2h的血糖，并以血糖曲线下面积表示糖耐量。结果：与模型空白对照比较，0．8g／kgBW的XKC的空腹血糖、2h血糖与血糖曲线下面积明显降低（P〈0．05），2．4g／kgBW组的2h血糖值与血糖曲线下面积显著减少（P〈0．01），对正常小鼠血糖无影响。结论：中药复方消渴胶囊具有降低ALX致DM模型小鼠高血糖水平的作用。     

番茄汁对镉中毒小鼠体内抗氧化酶活力的影响

[目的]比较番茄汁和单体番茄红素对镉中毒小鼠抗氧化酶活力影响的差异.[方法]小鼠饲喂CdCl2、番茄红素或不同浓度番茄汁,4周后处死,测定肝、肾镉含量,测血清尿素氮(BUN)及谷丙转氨酶(ALT)的含量,测定血、肝、肾超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)的含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力. [结果]与染镉组相比,番茄红素、番茄汁可促进肝、肾镉的排出,降低BUN、ALT的含量,降低血、肝、肾MDA的含量,使SOD、GSH-PX的活力恢复,以上各指标中,番茄汁随着浓度增大作用加强,低剂量组的作用虽比番茄红素组差,中剂量组的作用与番茄红素组相比无差别,高剂量组的作用比番茄红素组强.[结论]番茄汁对镉中毒小鼠肝、肾损伤的保护作用强于番茄红素,这可能与番茄红素和果汁中的其他植物化学物质发挥协同作用有关.     

褪黑素降低亚硒酸钠对小鼠的肝毒性

目的研究褪黑素对亚硒酸钠致小鼠肝毒性的影响。方法 30只雄性昆明小鼠(体重18~20 g),随机分为3组,每组10只。对照组,每日灌胃生理盐水;亚硒酸钠组和亚硒酸钠+褪黑素组,每日灌胃亚硒酸钠6 mg/kg bw。2 h后,对照组和亚硒酸钠组灌胃2%的乙醇水溶液;亚硒酸钠+褪黑素组,灌胃褪黑素15 mg/kg bw(溶解在2%的乙醇水溶液)。连续6 d。检测小鼠血清转氨酶,肝脏丙二醛含量,总抗氧化能力,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力、及肝脏谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽硫转移酶活力,研究褪黑素对亚硒酸钠致肝毒性、氧化应激和调节含硒酶和二相酶的影响。结果与结论褪黑素可以减轻毒性剂量亚硒酸钠产生的氧化应激,降低亚硒酸钠的毒性,且不降低其预防癌症的疗效。