自发性2型糖尿病小鼠发病早期认知功能的研究

目的通过对自发性2型糖尿病小鼠发病早期认知功能的研究,探讨糖尿病脑病的发病机制。方法利用自发性2型糖尿病动物模型KK-Ay小鼠,动态研究其认知功能的变化,并进行脑组织形态学观察。结果在Morris水迷宫实验中,糖尿病小鼠在发病6周时已出现轻度认知功能障碍,在发病12周时认知功能障碍明显加重,游出时间、游出距离显著长于正常对照鼠(P<0.01)。光镜和电镜都观察到糖尿病小鼠脑组织形态学的变化,以电镜下超微结构的变化为主。发病12周时海马及颞叶神经元固缩、深染,核膜凹陷,核内染色质溶解,核糖体解聚,线粒体退变,内容物呈絮状,未观察到毛细血管基底膜增厚,管腔狭窄等血管病变。结论KK-Ay小鼠可以作为研究糖尿病脑病的一种较好的动物模型;高血糖等代谢因素可引起认知障碍的发生。     

金思维对东莨菪碱致记忆障碍小鼠脑胆碱能系统的影响

目的 通过建立东莨菪碱记忆障碍模型,采用中药复方金思维进行干预,观察金思维对东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠行为学和胆碱能系统的影响,探讨该药的神经保护作用机制?方法 将ICR 小鼠随机分为正常对照组;模型组,溶媒0.5% CMC;阳性对照组,多奈哌齐,0.92 mg/ (kg·d);金思维大?中?小剂量组,20?10?5 mg/(kg·d)?每组18 只,按0.1 mL/10 g 小鼠体重连续灌胃给药30 d?末次给药后造模,对照组腹腔注射生理盐水,其余各组腹腔注射东莨菪碱3 mg/ (kg·d),溶于0.9%生理盐水,按0.1 mL/10 g 小鼠体重注射,进行Morris 水迷宫实验?实验结束后取皮层和海马组织,分别测定皮层和海马中乙酰胆碱(Ach)含量?乙酰胆碱酯酶(AchE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性?结果 金思维可使模型小鼠游泳距离和游泳时间缩短及目标象限停留时间增长;金思维可使模型组小鼠脑内Ach 含量升高?AchE 活性下降和ChAT 活性升高?结论 金思维可以改善东莨菪碱导致的记忆障碍模型小鼠学习记忆能力,其机制可能与胆碱能能系统有关?     

中枢胆碱能系统的改变对老年痴呆大鼠行为的影响

目的 观察Meynert核损害对大脑内胆碱乙酰转移酶(ChAT) 和突触素(P38)的影响.方法 lbotenic acid定位损伤大鼠脑建立AD模型,利用水迷宫和跳台观察其行为学改变,利用原位杂交,免疫组化及图像分析测定大鼠内胆碱乙酰转移酶(ChAT)和突触素的表达.结果 胆碱能损害组大鼠的学习记忆能力低于正常对照组和假手术组,其脑内ChAT和突触素的表达也明显下降,结论保护中枢胆碱能系统和增加突触素水平有助于改善认知记忆力.     

中枢胆碱能系统的改变对老年痴呆大鼠行为的影响

目的 观察Meynert核损害对大脑内胆碱乙酰转移酶(ChAT) 和突触素(P38)的影响.方法 lbotenic acid定位损伤大鼠脑建立AD模型,利用水迷宫和跳台观察其行为学改变,利用原位杂交,免疫组化及图像分析测定大鼠内胆碱乙酰转移酶(ChAT)和突触素的表达.结果 胆碱能损害组大鼠的学习记忆能力低于正常对照组和假手术组,其脑内ChAT和突触素的表达也明显下降,结论保护中枢胆碱能系统和增加突触素水平有助于改善认知记忆力.     

中枢胆碱能系统的改变对老年痴呆大鼠行为的影响

目的观察Meynert核损害对大脑内胆碱乙酰转移酶（ChAT）和突触素（P38）的影响。方法Ibotenicacid定位损伤大鼠脑建立AD模型，利用水迷宫和跳台观察其行为学改变，利用原位杂交、免疫组化及图像分析测定大鼠内胆碱乙酰转移酶（ChAT）和突触素的表达。结果胆碱能损害组大鼠的学习记忆能力低于正常对照组和假手术组，其脑内ChAT和突触素的表达也明显下降．结论保护中枢胆碱能系统和增加突触素水平有助于改善认知记忆力。     

糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶表达与认知功能的相关性

目的：观察糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）mRNA和蛋白表达及其与认知功能的关系,探讨糖尿病脑病的发病机制.方法：38只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（C组）和糖尿病组（D组）,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型.建模成功后11wk用Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力;RT-PCR,原位杂交法检测ChATmRNA表达;免疫组化,WesternBlot法检测ChAT蛋白表达.结果：D组大鼠学习和记忆能力明显减退,其逃避潜伏期时间延长;C组40.90±10.90与D组77.56±27.86相比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）.穿越目标区域次数C组（3.93±0.44）次与D组（1.37±0.85）次相比较明显减少（P〈0.05）;中心区域停留时间百分率C组（5.41±0.97）%与D组（2.20±1.28）%相比较明显下降（P〈0.05）.海马ChATmRNA和ChAT蛋白表达C组0.48±0.03,0.55±0.02与D组0.37±0.01,0.33±0.01相比较均明显降低（P〈0.05）.结论：糖尿病大鼠海马ChATmRNA和蛋白低水平表达可能是糖尿病脑病的发病机制之一.     

花生油对2型糖尿病大鼠海马CA1区神经生长因子及胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的通过观察2型糖尿病大鼠海马CA1区神经生长因子（NGF）和胆碱乙酰转移酶（ChAT）表达的改变,研究花生油对2型糖尿病大鼠海马神经元NGF及ChAT表达的影响,探讨花生油在防治糖尿病脑病中的作用。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（C组）、2型糖尿病组（T2DM组）、2型糖尿病给予2 mL花生油组（T2DM＋2 mL组）及2型糖尿病给予5 mL花生油组（T2DM＋5 mL组）。其中C组给予正常饮食,糖尿病组大鼠给予高脂饮食喂养,2个月后,按25 mg/kg体质量腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制成2型糖尿病模型,T2DM组、T2DM＋2 mL组及T2DM＋5 mL组大鼠继续给予高脂饮食。糖尿病造模1个月后处死全部大鼠,行脑冰冻切片,用免疫组织化学方法检测各组大鼠海马CA1区NGF和ChAT的表达。结果 （1）T2DM组大鼠海马CA1区NGF表达比C组明显降低（P〈0.05）,T2DM＋2 mL组及T2DM＋5 mL组大鼠海马CA1区NGF表达均明显高于未给予花生油的T2DM组（P〈0.05）。（2）T2DM组大鼠海马CA1区ChAT表达显著低于C组（P〈0.05）,T2DM＋2 mL组和T2DM＋5 mL组大鼠海马CA1区ChAT表达均明显高于未给予花生油的T2DM组（P〈0.05）。结论 2型糖尿病大鼠海马CA1区神经生长因子表达降低,胆碱能神经元数量减少,这可能是2型糖尿病脑病发生的原因之一。花生油能增加2型糖尿病大鼠海马区内神经生长因子表达,促进胆碱能神经元存活,表明花生油具有一定的保护大鼠糖尿病脑病的作用。     

抗癎增智颗粒对点燃模型鼠脑内胆碱能系统的影响

癫癎是常见的神经疾病,小儿癫癎大发作约34.4%～45%伴智力低下。抗癎增智颗粒是马融教授20余年临床实践基础上筛选的中药方剂,其独到之处是把抗癎、增智结合起来,目前很少有报道。     

β淀粉样肽结合乙醇脱氢酶及胆碱乙酰转移酶在糖尿病小鼠海马内表达的时程变化

目的本研究通过观察β淀粉样肽结合乙醇脱氢酶(amyloid-βpeptide-binding alcohol dehydrogenase,ABAD)及胆碱乙酰转移酶(choline acetyl transferase,ChAT)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠海马CA1区表达的时程变化,探讨DM脑病发病的相关机制。方法 48只雄性昆明小鼠采用数字表法随机分为对照组(control,C,n=24)和DM组(n=24)。小鼠禁食12 h后,按200 mg/kg腹腔注射新鲜配制的链脲佐菌素(streptozocin,STZ),3 d后尾部测非禁食血糖,大于15 mmol/L者为DM模型复制成功。分别在造模后1周、4周及8周应用免疫组织化学染色方法观察C组与DM组小鼠海马CA1区ABAD及ChAT阳性细胞的变化。结果 1)ABAD免疫组织化学染色结果显示,C组小鼠海马CA1区ABAD阳性细胞数量少,染色浅;而造模后1周、4周、8周,DM组小鼠海马CA1区ABAD阳性细胞数量较C组增多,染色深。细胞计数结果显示,1周、4周及8周,DM组小鼠海马CA1区ABAD阳性细胞数量(18.50±2.72,21.10±2.47,18.90±2.08)比C组(14.30±2.63,15.30±3.13,14.10±3.07)明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。2)ChAT免疫组织化学染色结果显示,C组小鼠海马CA1区ChAT阳性细胞数量多,染色深;而造模后1周、4周及8周,DM组小鼠海马CA1区ChAT阳性细胞数较C组减少,染色变浅。细胞计数结果显示,1周、4周及8周DM组小鼠海马CA1区ChAT阳性细胞数量(21.20±2.15,19.60±3.50,21.30±3.20)比C组(25.50±3.63,26.40±3.37,26.30±4.88)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 DM早期(1周)小鼠海马内即出现ABAD表达增加,并持续至实验终点(8周),同时DM小鼠海马内ChAT表达明显减少。ABAD可能参与DM小鼠胆碱能神经元的变性过程,在DM脑病的发病机制中具有重要作用。     

不同类型脑震荡对基底前脑胆碱能神经元的影响

目的 通过免疫组织化学的方法,观察不同类型脑震荡大鼠基底前脑胆碱能神经元的影响,初步探讨脑震荡认知障碍的机制。方法 成年SD大鼠36只,复制不同损伤程度的脑震荡模型,用胆碱乙酰转移酶（ChAT）标记基底前脑的胆碱能神经细胞,光镜下计数,并捡测反映ChAT活性的荧度值。结果 单纯型、复杂型脑震荡与对照组相比,复杂型脑震荡组与单纯性脑震荡组相比,大鼠基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支ChAT阳性表达细胞数减少,ChAT活性降低,差异具有显著性。结论 不同类型的脑震荡基底前脑胆碱能神经元变化程度不同,这种变化可能是脑震荡后不同程度认知障碍的病理学基础。     

100Hz电针刺激对脑组织和脾脏胆碱乙酰转移酶mRNA表达的影响

目的：观察100 Hz电针刺激对脑组织和脾脏胆碱乙酰转移酶mRNA表达的影响,初步探讨电针的免疫功能调节作用机制。方法：将昆明小鼠24只随机分成对照组、插针不电组和电针组。给予小鼠电针4天后处死,用RT-PCR分别检测小鼠血清、延髓、下丘脑和脾脏中胆碱乙酰转移酶mRNA的表达情况。结果：RT-PCR显示：小鼠的血清、延髓、下丘脑和脾脏中均有胆碱乙酰转移酶mRNA的表达。结论：胆碱能抗炎通路可能参与了100 Hz电针调节免疫功能的作用。     

猫基底前脑内胆碱能神经元的分布、形态特征及隔——海马投射

本文用胆碱乙酰化酶(choline acetyltransferase ChAT)免疫组化法观察了猫基底前脑内胆碱能神经元的分布及细胞形态特征,并研究了在切断一侧伞一穹窿后,隔区胆碱能神经元消失情况。含有胆碱能神经元的核包括:内侧隔核、斜束带核、隔袱核、尾核、苍白球、下丘脑视前区和外侧区及冠状回邻近的皮质区。核中细胞呈多角形、卵圆形、梭形或三角形。以中型(20-25μm)和小型(<20μm)为常见,偶有大型的(>25μm)。切断一侧伞—穹窿后,术侧内侧隔核和斜束带垂直部胆碱能神经元比健侧的明显减少(P<0.01),说明此处胆碱能神经元发支经伞—穹窿投射至海马。     

链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠2型糖尿病模型研究

目的建立与2型糖尿病(非胰岛素依赖型糠尿病、NIDDM)病人临床特征和发病过程相似的NIDDM动物模型.方法用高脂肪饲料喂养C57BL/6J雄性断乳小鼠3周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ),继续喂养4周,测定给药前和给药后1、3、4周非空腹血糖、实验结束时非空腹胰岛素水平,观察胰腺形态学变化.结果喂养3周后(给药前)高脂饲料-STZ组及高脂饲料-柠檬酸组血糖浓度(7.0±0.39)mmol/L、( 6.8±0.45)mmol/L高于普通饲料-STZ组及普通饲料-柠檬酸组(5.3±0.40)mmol/L、(5. 4±0.39)mmol/L,P＜0.05;实验结束时,高脂饲料-STZ组血糖浓度(13 .1±2.01)mmo/L高于高脂饲料-柠檬酸(6.9±0.46)mmol/L、普通饲料-柠檬酸组(6.0± 0.46)mmol/L和普通饲料-STZ组(7.1±0.62)mmol/L(P＜0.05),各组间血浆胰岛素浓度、体重及饮水量差异无显著性,P＞0.05;实验过程中高脂饲料STZ组和柠檬酸组小鼠每天进食热量(64.49±9.2)kJ/只,(70.7±9.6)kJ/只, 显著高于普通饲料STZ组和柠檬酸组(52.7±7.9)kJ/只,(57.3±11.7)kJ/只;各组小鼠胰腺和胰岛细胞形态正常.结论高脂肪饲料和STZ是用C57BL/6J断乳幼鼠建立NIDDM模型所必须的,100mg/kg体重STZ对普通饲料小鼠血糖无影响;用高脂饲料和STZ 处理的小鼠血糖升高、胰岛素浓度正常,与NIDM病人临床特征和发病过程相似;C57BL/6J小鼠易得,建模方法简便,费用低,是在NIDDM实验研究中能广泛使用的较理想的非遗传性NID DM动物模型.     

2型糖尿临床新食疗法研究

为寻找新食的疗法,根据祖国医学药食用源的理论和近几年国内外的有关报道,我们进行了"南瓜酱",对2例糖尿病的临床新食疗法的探讨研究,取得了满意的效果.     

乙酰胆碱对脑内5-羟色胺代谢的影响

本文观察了乙酰胆碱(ACh)对大鼠脑内5-羟色胺(5-HT)代谢的影响。发现:胆碱酯酶抑制剂毒扁豆碱和ACh合成阻断剂密胆碱(HC_(-3))不仅可分别升高或降低脑内ACh的水平,而且可分别升高或降低脑内5-HT及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的水平。认为ACh对脑内5-HT的代谢发生明显的影响。     

免疫凝聚比浊试验对糖尿病肾病早期诊断的临床意义

比较了ＡＴ（Ｌａｔｅｘ免疫凝聚比浊测定法）和ＲＩＡ法（放射免疫测定法）检测新鲜的随机尿样微量白蛋白（ｍＡ），并评价其临床应用价值。健康对照组ＡＴ（－）（１１例），尿白蛋白６．０±２．３ｍｇ／Ｌ糖尿病组ＡＴ（－）（６１例），１１．０±８．７ｍｇ／Ｌ；ＡＴ（＋）组（１３例），３８．１±１０．２ｍｇ／Ｌ。用ＲＩＡ法测尿帆ｍＡ，以ｍＡ３０ｍｇ／Ｌ作为分割线，ＡＴ与ＲＩＡ法的一致率为８９．２％，结果表明ＡＴ可以作为早期糖尿病肾病尿微量白蛋白监测的简便迅速的方法。     

氯胺酮对老年大鼠空间学习记忆功能和海马胆碱乙酰转移酶的影响

目的:观察临床剂量的氯胺酮麻醉对老年大鼠1周和3周时空间学习记忆功能和海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)的影响。方法:♂老年SD大鼠48只,随机分为4组(n=12)。对照1周组(C1)、氯胺酮1周组(K1)、对照3周组(C3)、氯胺酮3周组(K3)。K1、K3组腹腔首次注射氯胺酮80mg/kg,随后每隔15min追加1/2首剂量,共追加3次;C1、C3组腹腔注射等量生理盐水。处理后第1周,C1、K1组大鼠进行Morris水迷宫试验,测试各组大鼠寻找隐匿台的逃避潜伏期和空间搜索能力,每日4次,连续6d;处理后第3周,C3、K3组大鼠进行同样的测试。水迷宫测试结束后,将大鼠麻醉后灌注取脑,分别应用HE染色观察组织细胞及免疫组化方法检测ChAT阳性细胞数的改变。结果:①水迷宫结果,K1组第1~4d,大鼠寻找隐匿台的潜伏期明显长于C1组(P<0.05或0.01),但第5、6d时,二者之间无明显区别(P>0.05);对隐匿台空间位置的记忆能力K1组低于C1组(P<0.05)。K3组与C3组之间水迷宫结果比较,无明显统计学意义(P>0.05)。②免疫组化结果,K1组大鼠海马部位ChAT阳性细胞数小于C1组,差异有统计学意义(P<0.05);但K3组与C3组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。③HE染色结果:电镜下各组大鼠海马神经元结构未见明显异常。结论:临床相关剂量的氯胺酮麻醉可导致老年大鼠短期空间学习记忆功能障碍,随时间推移,功能渐恢复,其机制可能与中枢胆碱能系统功能损害有关。     

NIDDM患者肺通气功能和气道阻力的研究

采用体积描记仪法，对76例Ⅱ型糖尿病患者进行了肺通气功能及气道阻力测定。结果示患者在通气功能测定时有FVC．FEV1.0、MVV、FEF25～75％、V50等降低，气道阻力测定时有Raw、SRaw增高，SGaw降低。提示糖尿病患者随病程延长，病变加剧，在其他脏器发生病变的同时，肺脏也受到损害，出现肺功能减退。主要表现为限制性通气功能阻碍及小气道阻塞。同时吸烟可加速糖尿病患者的肺通气功能损害及呼吸动力异常。     

实验性2型糖尿病动物模型研究进展

糖尿病(DM)是一种重要的内分泌代谢性疾病,主要有1型糖尿病(T1DM)和2型糖尿病(T2DM)两种类型,其中尤其是T2DM由于其患病人数多,病程及进展缓慢,严重影响患者的劳动能力和生活质量。为此国内外学者对T2DM的发病机制进行了大量的研究工作。但到目前为止,T2DM的各项研究进展仍十分缓慢,其中主要原因是T2DM病因多,发病机制复杂。本文旨在将国内外有关T2DM的实验动物模型的研究进展进行一次总结。