皮质醇对整合素家族细胞粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18在大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤白细胞表面表达的影响

我们应用流式细胞术检测了整合素家族细胞粘附分子CD11a/CD18和CD11b/CD18在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)合并多器官损伤的模型血中白细胞表面的表达,探讨皮质醇在ANP合并多器官损伤中的作用及其机制。 一、材料与方法 1.动物模型制作方法:SD大鼠雌雄不拘,体重300～350g。随机分成ANP     

甘氨酸对急性坏死性胰腺炎大鼠早期外周血中性粒细胞CD11b/CD18表达的影响

目的探讨急性坏死性胰腺炎早期外周血中性粒细胞（PMN）膜上CD11b／CD18及血中IL-6、LPS的动态变化及甘氨酸对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠的保护作用。方法采用5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠ANP肝损害模型，90只大鼠，随机分成三组。30只大鼠作为对照组，甘氨酸腹腔注射治疗30只，急性坏死性胰腺炎组30只，于不同时间取血作流式细胞仪分析，测定血IL-6、LPS含量变化。结果建立ANP模型后6、12、24h，外周血中性粒细胞（PMN）膜上CD11b／CD18及血中IL-6、LPS明显升高。甘氨酸治疗后，PMN CD11b／CD18表达及IL-6、LPS水平降低。结论CD11b／CD18表达和IL-6、LPS参与急性坏死性胰腺炎的病理机制。急性坏死性胰腺炎外周血中性粒细胞（PMN）膜上CD11b／CD18的变化可能与炎性介质的变化密切相关。甘氨酸可降低CD11b／CD18表达和IL-6、LPS的水平。     

攻下药物对重型急性胰腺炎急性肺损伤模型大鼠的治？…

目的：观察急性重型胰腺炎急性肺损伤动物模型肺泡巨噬细胞计数,活性,分泌炎性细胞因子功能变化及药物对其影响。方法：制备大鼠重型胰腺炎模型,采取肺泡巨噬细胞做各项指标检测及病理学检查。结果;模型组病理表现为明显的肺损伤,大承气汤治疗效果最显著,模型组肺泡巨噬细胞计数,活性,分泌炎性细胞因子显著高于对照组（Ｐ〈０．０１）,各治疗组显著低于模型组（Ｐ〈０．０１）,善得定抑制巨噬细胞分泌炎性细胞因子作用最强     

攻下药物对重型急性胰腺炎急性肺损伤模型大鼠的治疗作用观察

目的:观察急性重型胰腺炎急性肺损伤动物模型肺泡巨噬细胞计数、活性、分泌炎性细胞因子功能变化及药物对其影响。方法:制备大鼠重型胰腺炎模型,采取肺泡巨噬细胞做各项指标检测及病理学检查。结果:模型组病理表现为明显的肺损伤,大承气汤治疗效果最显著。模型组肺泡巨噬细胞计数、活性、分泌炎性细胞因子显著高于对照组(P<0-01) ,各治疗组显著低于模型组( P< 0-01) ,善得定抑制巨噬细胞分泌炎性细胞因子作用最强,大承气汤抑制巨噬细胞数量较显著。结论:肺泡巨噬细胞过度活化,过度分泌炎性细胞因子是重型急性胰腺炎急性肺损伤发病的重要原因之一。中药能控制过度的炎性反应状态,对受损伤的肺组织细胞具有保护作用     

大承气汤和活血清胰汤对重型急性胰腺炎大鼠早期炎症过程的影响

目的:探讨中药治疗重型急性胰腺炎(SAP)的分子生物学机制.方法:检测大承气汤(DT)、活血清胰汤(HQ)对SAP模型大鼠外周血单个核细胞(PMN)分泌的肿瘤细胞坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)水平,T淋巴细胞亚群和多形核粒细胞表面粘附α分子表达水平的作用.结果:各治疗组细胞因子及粘附分子表达水平显著低于SAP模型组(P＜0.05);各治疗组CD3均恢复正常.结论:DT、HQ能抑制SAP早期外周血多形核粒细胞表面粘附分子的表达,减少多形核粒细胞粘附和穿越血管内皮细胞而对组织器官起保护作用.     

大承气汤对急性出血坏死性胰腺炎急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞的影响

目的观察大承气汤对急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）并发急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡巨噬细胞的影响。方法SD大鼠经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠（1ml／kg,0．1ml／min）诱发AHNP,AHNP＋DT组在造模后30min用大承气汤（10ml／kg）灌胃;AHNP＋DEX组在造模后30min经尾静脉地塞米松（O．5ms／100g）注射;AHNP＋DT＋DEX组则于造模后30min同时给予大承气汤（10ml／kg）灌胃和地塞米松（0．5mg／100g）尾静脉注射,比较3、6、12、24h各个时间段不同治疗方法支气管灌洗液肺泡巨噬细胞数量、吞噬功能和肺干湿比变化。结果AHNP＋DT组和AHNP＋DT＋DEX组两组肺泡巨噬细胞的数量明显减少、吞噬功能减弱,与模型组和AHNP＋DEX组比较,P〈0．05,差异有显著性。结论大承气汤能抑制肺泡巨噬细胞的吞噬活性、改善急性肺损伤。     

急性下肢深静脉血栓形成患者中性粒细胞CD11b/CD18及CD62L表达的研究

本实验旨在于研究外周血中性粒细胞CD11b／CD18及CD62L在急性下肢深静脉血栓形成（deep venous thrombosis，DVT）中的表达。     

CO_2气腹对大鼠重症急性胰腺炎胰腺病理及IL-1、IL-6、CD11a/CD18和CD11b/CD18的影响

目的研究腹腔镜手术时CO2气腹对Sprague-Dawley(SD)大鼠重症急性胰腺炎(SAP)胰腺组织病理学改变、血淀粉酶、炎症细胞因子(IL-1和IL-6)和可溶性黏附分子(CD11a/CD18和CD11b/CD18)的影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为3组:CO2气腹组(n=20),5%牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射方法制备SAP动物模型后,以气腹机向大鼠腹腔内注入CO2〔压力12mmHg(1mmHg=0.133kPa),维持30min〕;SAP组(n=20):建立SAP模型后关腹,不充入CO2;单纯手术组(n=10):仅开腹翻动胰腺后关腹。各组均于术后2.5h处死动物,取静脉血测定血淀粉酶、IL-1和IL-6水平及CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达阳性率,并进行胰腺组织病理学检查。结果与单纯手术组相比,CO2气腹组和SAP组胰腺组织病理学评分、血清淀粉酶、IL-1和IL-6水平及CD11a/CD18和CD11b/CD18表达阳性率均明显升高,差异有统计学意义(P=0.000)。与SAP组相比,CO2气腹组血IL-1和IL-6水平明显降低,差异有统计学意义(P=0.000);而胰腺组织病理学评分(P=0.294)、血清淀粉酶水平(P=0.073)、CD11a/CD18(P=0.155)和CD11b/CD18(P=0.201)表达阳性率的差异无统计学意义。结论对于SAP大鼠,CO2气腹对IL-1和IL-6水平有一定的抑制作用;而对胰腺病理变化及CD11a/CD18和CD11b/CD18表达阳性率无明显影响。     

明胶、羟乙基淀粉和复方乳酸钠对人体内白细胞CD11b、CD18表达的影响

白细胞粘附是发挥其功能的至关重要的步骤,具有白细胞属性的β2整合素（CD11、CD18）是最为重要的粘附分子之一。人工液体通常作为较大量输注的外源性物质,可能成为一种应激因素而影响白细胞粘附分子表达及改变其功能。本研究拟采用免疫荧光流式细胞仪技术观察羟乙基淀粉、改良液体明胶和复方乳酸钠输入人体内后,白细胞膜表面粘附分子β2整合素族的CD11b、CD18的表达变化,以期初步探讨其临床意义。     

中药复方TCMP-1对急性胰腺炎血小板内皮细胞粘附分子-1表达变化的研究

目的 探讨急性水肿性胰腺炎(AEP)血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)表达的变化规律及中药复方TCMP-1对AEP的治疗作用。方法 Wistar大鼠54只,诱发AEP动物模型,并给予TCMP-1干预,用流式细胞仪分析脾静脉血中多形核白细胞(PMN)PECAM-1的表达。结果 (1)在AEP自然病程组中,外周循环和胰腺微循环PMN PECAM-1的表达水平在AEP 2、4 h组相近,自AEP 4 h组开始,外周循环PECAM-1的表达上调直至AEP 8 h组;胰腺微循环PECAM-1的表达下调直至AEP 8 h组;在AEP 8 h组,PMN PECAM-1的表达有显著性差异(P<0.05)。(2)在AEP 8 h治疗组与AEP 8 h自然病程组中,体循环PMN PECAM-1的表达有显著性差异(P<0.05)。结论 (1)下调体循环PMN PECAM-1的表达水平或抑制PMN PECAM-1的过度表达,可以阻止胰腺微循环中PMN与内皮细胞的粘附。(2)抑制PMN PECAM-1的过度表达是中药复方TCMP-1实现其疗效作用的主要机制之一。     

体外循环围术期细胞黏附分子CD11b/CD18,P选择素的表达及其意义

目的观察体外循环(CPB)心内直视手术围术期细胞黏附分子CD11b/CD18及可溶性P选择素(sP-selectin)的表达变化,探讨二者在CPB诱发的全身炎症反应(SIRS)中的作用。方法选择我院2008年1～8月在CPB下行风湿性心脏病瓣膜置换手术患者30例纳入研究,其中男18例,女12例;年龄29～55岁(45.3±8.1岁);分别于麻醉诱导后切开皮肤前(CPB前)、CPB后30min、1h、6h、12h和24h6个时点取桡动脉血,采用流式细胞技术检测外周血中性粒细胞CD11b/CD18分子的表达变化;酶联免疫吸附法测定血浆中内皮细胞sP-selectin的浓度。结果 30例患者外周血中性粒细胞CD11b/CD18于CPB后30min即开始升高,且在CPB后6h达峰值(581.44±215.26),与CPB前比较差异有统计学意义(P0.05);于CPB后12h开始下降,但仍高于CPB前水平,至CPB后24h时其表达低于CPB前水平,差异无统计学意义(P0.05);外周血sP-selectin的表达于CPB后30min明显升高并达峰值(51.44±10.06ng/ml),与CPB前比较差异有统计学意义(P0.05),自CPB后12h开始其活性表达下降,并低于CPB前水平,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 CPB可促发外周血中性粒细胞CD11b/CD18及内皮细胞sP-selectin分子表达水平增高,在CPB导致的全身炎症反应中可能发挥重要作用。     

严重烧伤大鼠早期外周血中性粒细胞CD11b/CD18分子的动态变化

为探讨烧伤后早期外周血中性粒细胞（ＰＭＮ）膜上ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８分子的动态变化，采用大鼠３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型，伤后随机分为立即复苏组和延迟复苏组，于伤前及伤后１２小时内的不同时间取血作流式细胞仪分析。结果表明：两组大鼠于伤后３０分钟起ＰＭＮＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８表达就明显增加；立即复苏组于伤后４小时达到峰值；延迟复苏组在伤后１小时和８小时各有一个峰值，并比立即复苏组增高。认为烧伤后粘附分子ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８的变化可能与炎性介质、细胞因子、血流动力学改变引起的ＰＭＮ切应力的变化及缺血再灌注等密切相关。     

CD11/CD18在烧伤早期中性粒细胞对内皮细胞粘附中的作用及变化

为了解烧伤早期病人中性粒细胞(PMN)膜表面 CD11a/CD18和 CD11b/CD18变化规律及其在烧伤早期 PMN 对内皮细胞(EC)粘附及损伤中的作用,为临床抗白细胞粘附治疗提供依据。将烧伤早期 PMN 与体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孵育24小时后,观察烧伤早期 PMN 与 EC 粘附百分率和烧伤早期 PMN 引起内皮细胞单层流出液生成速度(Jv)和滤过系数(kf)变化,CD11/CD18单抗(mAb)对烧伤早期 PMN-EC 粘附和内皮单层 kf、Jv 值影响。并应用流式细胞术检测烧伤病人伤后1周内 PMN 膜表面 CD11a/CD18和 CD11b/CD18的数量变化。结果显示严重烧伤病人伤后第1天 PMN细胞膜表面 CD11a/CD18和 CD11b/CD18明显升高达峰值,并在1周内仍维持于高水平。烧伤早期PMN 与 EC 粘附增加并可致内皮单层 kf、Jv 值明显升高,CD11a/CD18mAb 和 CD11b/CD18mAb 可降低粘附百分率70%～80%,并降低烧伤早期 PMN 诱导增高的内皮单层 kf、Jv 值(P<0.01)。提示烧伤后 PMN 迅速表达 CD11a/CD18和 CD11b/CD18,加强与 EC 间粘附,并可使内皮单层通透性增高,CD11a/CD18mAb 和 CD11b/CD18mAb 降低烧伤早期 PMN 与 EC 粘附,减轻烧伤早期 PMN 所导致的内皮单层通透性增高,从而保护内皮细胞。     

Intracellular acidification enhances neutrophil phagocytosis in chronic haemodialysis patients: possible role of CD11b/CD18.

BACKGROUND: We have demonstrated that uraemic neutrophils that exhibit a low intracellular pH (pHi) display enhanced phagocytosis. However, the underlying cellular mechanism is unclear. METHODS: We used neutrophils from three groups of haemodialysis (HD) patients before dialysis (Groups A, B and C) and also from age- and sex-matched healthy individuals to determine pHi, phagocytosis and expression of CD11b, CD18, CD14 and toll-like receptors (TLR)-2 and TLR-4. The patients were categorized based on three consecutive monthly pre-dialysis plasma bicarbonate concentrations(P(HCO3)) and pH values; Groups A, B and C had a constant pre-dialysis P(HCO3) of /=26 mmol/L (mEq/L), respectively. We also studied the effects induced by the correction of metabolic acidosis and monoclonal antibodies (mAbs) against CD11b/CD18 on neutrophils in Group A. Furthermore, we investigated the effect of intracellular acidification on uraemic neutrophils ex vivo. RESULTS: We observed that the neutrophils in Group A exhibited significantly increased phagocytosis and expression of CD11b/CD18 compared with those in Groups B and C. Additionally, our ex vivo studies demonstrated that the mAbs against CD11b/CD18 partially blocked the enhancement of neutrophil phagocytosis in Group A. Moreover, the pHi of uraemic neutrophils is inversely correlated with phagocytosis and expression of CD11b/CD18. CONCLUSIONS: HD patients with a low P(HCO3) exhibited low neutrophil pHi that in turn increased the expression of CD11b/CD18 compared with neutrophils with a normal or high pHi. This increased expression of CD11b/CD18 on the uraemic neutrophils may contribute to the pHi-mediated phagocytosis.     

Molecular and functional characterization of porcine LFA-1 using monoclonal antibodies to CD11a and CD18

Abstract: We describe in this report the production and characterization of monoclonal antibodies (mAb) to the swine homologues of CD11a and CD18 antigens, and their use for phenotypic and functional analysis of porcine leukocytes. Monoclonal antibodies BL1H8 and BL2F1 precipitated two bands of approximately 170 and 95 kDa, whereas mAb BA3H2 brought down three bands of 170, 155 and 95 kDa, from alveolar macrophage lysates. Clearance of macrophage lysates with mAbs BL1H8 and BL2F1 resulted in complete removal of the 170-kDa band. The cell distribution of the molecules recognized by these mAbs was similar to that of human LFA-1. It was found on all leukocytes, although its expression varied among the different leukocyte subpopulations, with monocytes, granulocytes and a subset of CD8⁺ cells expressing the highest levels. Cross-blocking studies showed that these antibodies recognize different epitopes on porcine LFA-1. Both anti-LFA-1 mAbs strongly inhibited the mitogenic response of PBMC to ConA, whereas the anti-CD18 mAb had no effect. These anti-LFA-1 mAbs also inhibited the mixed lymphocyte reaction (MLR) and the NK cell-mediated lysis of K-562 cells.     

烧伤血清刺激下中性粒细胞与内皮细胞粘附力的变化及CD11/CD18单抗的阻断作用

为探讨烧伤血清作用下 PMN-EC 粘附力的改变和 CD11/CD18单抗(mAb)对 PMN 与内皮细胞(EC)粘附力的影响,将烧伤血清与人 PMN 或人脐静脉内细胞(HUVEC)一同孵育,在孵育1,3,6,12,24小时分别应用细胞微管吸吮技术系统测定 PMN-HUVEC 粘附力,并用健康人血清刺激作对照。同时,将与烧伤血清孵育1,6,24小时的 PMN,应用 CD11a/CD18mAb 和 CD11b/CD18mAb 处理后,再测其与HUVEC 粘附力。结果表明:PMN 在烧伤血清刺激后与正常 HUVEC 粘附力迅速升高,1小时达到最高峰,并在24小时内维持此水平。烧伤血清激活的 PMN 与 HUVEC 粘附力可被 CD11a/CD18单抗和CD11b/CD18单抗降低70%～80%。HUVEC 在烧伤血清刺激后与 PMN 粘附力呈持续升高趋势,12小时后达最大值,并在以后12小时内无明显变化。提示:烧伤血清具有促进 PMN-EC 粘附,并在烧伤后PMN-EC 粘附中起重要作用,而且刺激 PMN 后所引起的 PMN-EC 粘附力变化与刺激 EC 后所引起的变化不同。CD11/CD18可部分降低 PMN-EC 粘附力,从而可能减轻 PMN 对 EC 的损害。