Th1/Th2细胞因子对器官移植排斥反应的影响

目的:研究Th1/Th2细胞因子对同种异系小鼠心脏移植存活时间的影响.方法:使用野生型BALB/c小鼠作为供体,野生型B6小鼠、IL-4基因去除B6小鼠及IFN-γ基因去除B6小鼠作为受体,行腹部异位小鼠心脏移植.部分IL-4基因去除小鼠、IFN-γ基因去除小鼠联合应用α-半乳糖神经酰胺(α-galactosylceramide,α-GalCer),以获得更强的Th1/Th2偏移.比较移植物存活时间.向野生型、IL-4基因去除及IFN-γ基因去除B6小鼠腹腔内注射供体小鼠脾细胞,提取受体小鼠脾脏CD8<'8>T细胞行淋巴细胞毒试验.结果:IFN-γ基因去除组小鼠的移植物存活时间为(6.40±0.55)d,联合应用α-GalCer组移植物存活时间为(8.00±1.15)d.IL-4基因去除组小鼠的移植物存活时间为(8.00±1.00)d,联合应用α-GalCer组移植物存活时间为(8.60±1.34)d.淋巴细胞毒试验显示IFN-γ基因去除小鼠的CD8+T细胞毒性明显增强.结论:Th1/Th2细胞因子与排斥反应之间并不存在简单的对应关系.     

抗原特异性CD4+CD25+T细胞对同种异体胰岛移植影响及作用机制研究

目的:探讨抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫对同种异体胰岛急性移植排斥反应的影响和机制。方法:用MACS分选供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫糖尿病BALB/cByJ受体小鼠，以ICR小鼠胰岛为供体行同种异体胰岛移植。观察移植后小鼠的存活时间、移植前后外周血CD4+和CD8+T细胞亚群的变化和移植物中Th1/Th2细胞因子mRNA表达水平的变化。结果:抗原特异性Treg细胞联合胰岛移植组(C组)胰岛移植物平均生存期为(34.57±17.15)d，显著长于单纯胰岛移植组(B组)的(10.6±1.82) d (P<0.01)；移植后第3天，C组外周血CD4+/CD8+的值显著低于B组(P<0.01)；C组移植物中IL-10,TGF-β mRNA表达比B组显著增强。B组移植物中IL-1β，IL-2及IFN-γ mRNA表达明显强于C组。结论:抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞可通过调节Th2/Th1之间的反应平衡而延长同种异体胰岛移植物的存活时间。     

RNA干扰阻断BT／CD28共刺激通路在小鼠心脏移植中的抗排斥作用

目的探讨RNA干扰（RNAi）技术阻断B7／CD28共刺激通路对小鼠异体心脏移植排斥反应的影响及其机制。方法经体外转录合成针对CD80 mRNA和CD86 mRNA序列特异性小片段干扰RNA（siRNA），转染供者骨髓来源的树突状细胞（DC），半定量逆转录聚合酶链反应、流式细胞仪检测DC转染CD80siRNA、CD86siRNA前后CD80 mRNA和CD86 mRNA的表达水平以及细胞表面CD80及CD86的表达情况。在小鼠异位心脏移植前7d，经静脉给受者输注经siRNA干扰后的DC（干扰DC组），同时设立同种异体对照组、环孢素A（CsA）治疗组（术后皮下注射CsA 5mg／d）、同系移植对照组和未干扰DC组（移植前输注未转染DC），观察各组移植心脏的存活时间，对移植物的排斥反应进行病理分级，并测定移植物组织中白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）及IL-10的mRNA表达水平。结果siRNA转染DC后，其CD80 mRNA及CD86 mRNA的表达受到明显抑制，CD80、CD86的阳性率分别由84％和67％下降至35％和30％。与同种异体对照组和未干扰DC组比较，干扰DC组移植心脏存活时间明显延长（P〈0．01），组织排斥反应病理分级显著降低（P〈0．01），移植心脏组织中IL-2 mRNA和IFN-γ mRNA的表达水平明显降低（P〈0．01），而IL-10 mRNA的表达水平明显升高（P〈0．01）。结论利用RNAi敲减供者骨髓来源的DC表面B7分子的表达，以阻断BT／CD28共刺激通路，具有抑制小鼠心脏移植排斥反应的作用，其机理可能是通过诱导T淋巴细胞无能并使T辅助细胞分化向Tn2型方向偏移。     

阻断共刺激信号抑制小鼠小肠移植排斥反应机制的研究

目的证实细胞毒T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白（CTLA4-Ig）能抑制小鼠小肠移植排斥反应，并研究其作用机理。方法采用显微外科技术建立小鼠异位小肠移植模型，实验分为3组。A组：为同系移植组（供、受者均为BALB／c小鼠）；B组：为同种移植未治疗组（供者为C57BL／6小鼠，受者为BALB／c小鼠），移植后未给予任何治疗；C组：为同种移植共刺激信号阻断组（供者为C57BL／6小鼠，受者为BALB／c小鼠），移植后第2d开始腹腔注射CTLA4-Ig 1mg·kg^-1·d^-1，连用3d。术后观察各组受者的存活时间；移植第6d处死部分受者获取移植物标本，进行组织病理学检查；半定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素2（IL2）、白细胞介素10（IL-10）、7干扰素（IFN-7）、吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）的mRNA水平；蛋白质印迹法检测移植物中IDO蛋白表达水平。结果A组和C组的中位存活时间均为30d，B组的中位存活时间为6d。A、C组与B组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。病理结果显示，B组排斥反应明显，C组呈轻度排斥反应。IL-2、IFN-γ的mRNA表达水平在A组、C组均较低，而B组则显著增加；IL-10的mRNA转录水平在A、B组较低，C组明显增高。IDO分子mRNA和蛋白的表达检测显示，A、B组的1130分子mRNA和蛋白表达低，c组增高显著。结论应用CTLA4-Ig能抑制小鼠小肠移植排斥反应。IL-2、IFN-γ分子mRNA的高水平表达和排斥反应的程度呈正相关，IL-10分子mRNA表达与排斥反应强度呈负相关。CTLA4-Ig阻断共刺激信号导致T细胞的无能与IDO表达明显相关，说明了IDO所致的“色氨酸饥饿”可能是共刺激信号被阻断后导致活化T细胞无能的机制之一。     

Th1/Th2细胞因子mRNA的表达与心脏移植免疫耐受的关系

目的探讨Th1/Th2细胞因子信使核糖核酸(mRNA)表达改变与心脏移植免疫耐受的关系. 方法采用大鼠腹部心脏移植模型,将30只大鼠随机分成对照组、排斥反应组、免疫耐受组,每组10只.观察移植心脏存活时间,供心病理学改变,受者脾和心脏中Th1/Th2细胞因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10) mRNA表达水平. 结果免疫耐受组供心存活时间为85.28±7.48天,较排斥反应组的7.33±1.03天显著延长(P＜0.01);排斥反应组供心见大量炎性细胞浸润,免疫耐受组供心仅见少量炎性细胞浸润;排斥反应组Th1细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA表达较对照组增强,免疫耐受组减弱;排斥反应组Th2细胞因子IL-4、IL-10 mRNA表达较对照组减弱,免疫耐受组增强. 结论 Th1/Th2细胞因子的动态平衡在移植耐受中起重要作用,Th1向Th2偏离是移植耐受的机制之一.     

Th1/Th2平衡在高容量血液滤过防治多脏器功能衰竭中的变化及意义

目的探讨多脏器功能衰竭（MODS）发病机制及高容量血液滤过（HVHF）防治MODS的依据。方法采用2次打击法建立猪MODS模型，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4含量变化；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定脾脏IFN-γ、IL-4mRNA水平及辅助T细胞特异性转录因子T-bet和GATA-3mRNA的含量变化。结果HVHF组MODS发生率为20％，显著低于MODS组88．9％（P〈0．01）；血清IFN-γ和IL-4浓度显著低于MODS组（P〈0．05），处死前IFN-γ／IL-4比值明显高于MODS组（P〈0．01）；脾脏IFN-γ和IL-4 mRNA表达量较MODS组明显下降（P〈0．05），IFN-γ/IL-4 mRNA比值明显高于MODS组（P〈0．05）；脾脏GATA3mRNA表达量低于MODS组（P〈0．01），T—bet mRNA表达量下降，差异无统计学意义（P〉0．05），T-bet／GATA3比值显著高于MODS组（P〈0．01）。结论Th1向Th2漂移可能是MODS发生的本质原因之一，HVHF能够在一定程度上遏止Th1向Th2漂移的发生。     

RNA干扰阻断B7/CD28共刺激通路在小鼠心脏移植中的抗排斥作用

目的探讨RNA干扰(RNAi)技术阻断B7/CD28共刺激通路对小鼠异体心脏移植排斥反应的影响及其机制。方法经体外转录合成针对CD80 mRNA和CD86 mRNA序列特异性小片段干扰RNA(siRNA),转染供者骨髓来源的树突状细胞(DC),半定量逆转录聚合酶链反应、流式细胞仪检测DC转染CD80siRNA、CD86siRNA前后CD80 mRNA和CD86 mRNA的表达水平以及细胞表面CD80及CD86的表达情况。在小鼠异位心脏移植前7d．经静脉给受者输注经siRNA干扰后的DC(干扰DC组),同时设立同种异体对照组、环孢素A(CsA)治疗组(术后皮下注射CsA 5 mg/d)、同系移植对照组和未干扰DC组(移植前输注未转染DC),观察各组移植心脏的存活时间,对移植物的排斥反应进行病理分级,并测定移植物组织中白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)及IL-10的mRNA表达水平。结果siRNA转染DC后,其CD80 mRNA及CD86 mRNA的表达受到明显抑制,CD80、CD86的阳性率分别由84%和67%下降至35%和30%。与同种异体对照组和未干扰DC组比较,干扰DC组移植心脏存活时间明显延长(P＜0．01),组织排斥反应病理分级显著降低(P <0．01),移植心脏组织中IL-2 mRNA和IFN-γmRNA的表达水平明显降低(P＜0．01),而IL-10 mRNA的表达水平明显升高(P＜0．01)。结论利用RNAi敲减供者骨髓来源的DC表面B7分子的表达,以阻断B7/CD28共刺激通路,具有抑制小鼠心脏移植排斥反应的作用,其机理可能是通过诱导T淋巴细胞无能并使T辅助细胞分化向T_H2型方向偏移。     

联合免疫治疗对肝移植大鼠移植肝组织学和外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的用抗CD-40L单抗加小剂量CsA联合免疫治疗肝移植大鼠受体,观察其生存时间?移植肝组织学和Th1/Th2细胞因子谱的变化。方法建立大鼠肝移植模型后,将动物随机分为4组。A组为同基因移植组,SD→SD;B组为同种异体移植组,SD→Wistar,不用任何免疫抑制治疗措施;C组,SD→Wistar,采用CsA处理;D组,SD→Wistar,采用CsA加抗CD-40L(CD-154)单抗处理。观察各组肝移植受体生存期和移植肝病理变化;用ELISA法检测外周血细胞因子水平。结果A,D组均可长期存活,B,C组生存时间分别为(13.8±2.4)d,(29.8±4.1)d;B,C组病理组织切片见中/重度急性排斥反应,D组移植肝组织损伤程度显著减轻,A组基本无排斥反应。B组血清IL-2和IFN-γ高于其余各组(P<0.05),C,D组IL-4,IL-10水平较B组有所升高(但P>0.05),尤其D组IL-10表达水平显著高于B组(P<0.05)。结论联合免疫治疗可有效抑制其急性排斥反应,延长大鼠肝移植受体的生存时间。Th2类细胞因子IL-4和IL-10的高水平表达与诱导移植耐受、抑制排斥反应有重要关系,它有助于大鼠肝移植受体和移植肝的长期存活。     

核因子κB诱骗剂处理的树突状细胞延长小鼠移植心脏存活时间

目的探讨核因子κB（NF-κB）诱骗剂处理供者树突状细胞（DC）对同种异体小鼠移植心脏存活时间的影响。方法在体外以NF-κB诱骗剂处理供者骨髓来源的DC，并于心脏移植术前7d经门静脉输注2×10^6个DC给受者，术后1～7d受者接受亚治疗量的环孢素A（10mg·kg^-1·d^-1）腹腔注射（联合方案组），并设不作任何处理（对照组）、单用环孢素A（CsA组）、单纯输注未经处理DC（DC对照组）和单纯输注经处理DC（DC实验组）的对照组，另设接受来自第三方供者的对照组（第三供者组，受者的处理同联合方案组），所有受者均接受腹腔心脏移植。观察各组移植心脏的存活时间；采用酶联免疫吸附法检测术后第7天受者血清白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-10和γ干扰素（IFN-γ）的含量。结果移植心脏平均存活时间（MST），对照组为7d，CsA组为10．3d，DC对照组为7．6d，DC实验组为21．4d，联合方案组为53．6d，第三供者组为9d，DC实验组移植心脏MST明显长于对照组和DC对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；联合方案组移植心脏MST明显长于CsA组、DC实验组及第三供者组，差异有统计学意义（P〈0．01）。联合方案组IL-2和IFN-γ的含量最低，而IL-4和IL-10的含量最高，与其它各组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与对照组、DC对照组及CsA组相比，DC实验组IL-2及IFN-γ的含量也显著降低（P〈0．05），而IL-4和IL-10则升高（P〈0．05）。结论术前输注经NF-κB诱骗剂处理的供者DC可延长同种小鼠移植心脏的存活时间，若术后加用短程亚治疗量CsA，则移植心脏的存活时间得到进一步延长。     

SOCS3基因转染对小鼠同种异体移植心脏存活时间的影响

目的研究腺病毒载体介导的细胞因子信号抑制因子3(suppressors of cytokine sig-naling3,SOCS3)基因转染对小鼠同种异体移植心脏存活时间的影响。方法以Balb/c小鼠为供体,以C57BL/6小鼠为受体,行同种异体心脏移植。C57BL/6同种异体小鼠心脏移植受体分为3组(21只/组):(1)对照组,单纯同种异体心脏移植;(2)Ad-SOCS3组,供体术前24h转染2×109pfu编码SOCS3基因的腺病毒载体;(3)Ad-GFP组,供体术前24h转染2×109pfu空病毒载体。每组10只受体用于观察生存期;每组5只受体分别于术后第1、3、5、7、9日处死,获取移植物,采用实时定量逆转录酶聚合酶链反应检测SOCS3mRNA表达的变化;每组6只受体于术后第6日处死,获取移植物和脾脏用于组织学检查及Foxp3mRNA、白介素(IL)-17mRNA表达的检测,同时检测脾脏的混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)强度,采用流式细胞仪分析调节性T细胞(Treg)及Th17细胞的比例。结果供体术前SOCS3基因转染可明显增加术后移植物内SOCS3 mRNA表达;Ad-SOCS3组的移植心脏存活时间明显长于对照组、Ad-GFP组(P0.05)。术后第6日,Ad-SOCS3组移植物淋巴细胞浸润程度较轻、排斥反应强度级别较低、MLR较弱;该组移植物内Foxp3 mRNA水平及脾脏内CD4+CD25+Treg比例与其他两组比较差异无统计学意义(P0.05),但IL-17 mRNA水平及脾脏内CD4+IL-17+Th17比例较其他两组明显降低(均为P0.05)。结论腺病毒载体介导的供体SOCS3基因转染能够延长移植心脏存活时间,其机制可能与抑制淋巴细胞浸润、抑制T淋巴细胞同种抗原反应性以及抑制Th17免疫反应等有关,与Treg的产生及功能无关。     

酶联免疫斑点技术在心脏移植术后早期诊断急性排斥反应中的作用

目的 探讨酶联免疫斑点技术(ELISPOT)在心脏移植术后早期诊断急性排斥反应中的作用及在供者评估方面的应用价值.方法 采用小鼠腹部心脏移植模型,将实验小鼠分为3组,每组25对.(1)移植排斥组:供者为C57BL/6小鼠,受者为BALB/c小鼠,移植后无特殊处理;(2)实验处理组:供者为C57BL/6小鼠,受者为BALB/c小鼠,受者在移植术前1天经尾静脉输注特异性供者脾细胞,术前1 d及术后1周按每克体重应用环孢素A 5 μg;(3)同系移植组:供、受者均为BALB/c小鼠,移植术后无特殊处理.术后观察移植心存活时间及病理改变;应用ELISPOT技术检测受者脾细胞悬液中供者γ干扰素(IFN-γ)活性分泌细胞频数.结果 移植排斥组和实验处理组移植心平均存活时间分别为(7.8±0.77)d和(14.80±1.01)d,同系移植组存活时间均超过28 d,各组之间的差异有统计学意义(P＜0.05).移植排斥组与实验处理组和同系移植组相比较,移植心的心肌细胞变性坏死严重,并有大量炎性细胞浸润.移植术后第4天,移植排斥组、实验处理组和同系移植组受者脾细胞悬液中供者特异性IFN-γ活性分泌细胞频数分别为(288±16)个/2×105、(32±10)个/2×105和(6±2)个/2x105;第7天为(416±19)个/2×105、(44±8)个/2×105和(7±2)个/2×105;其与相应的移植心存活时间存在明显负相关,而与术后第7天病理分级存在明显正相关.结论 应用ELISPOT技术检测受者术后早期供者特异性IFN-γ活性分泌细胞频数可作为急性排斥反应的一个早期诊断指标.此技术具有较高的灵敏性与特异性,可用于术前供者配型.     

Mechanisms of survival prolongation of murine cardiac allografts using the treatment of CTLA4-Ig and MR1

BACKGROUND: [corrected] The present study was undertaken to determine the role of costimulatory blockade in a murine cardiac transplant model. MATERIALS AND METHODS: We blocked the CD28/B7 and CD154/CD40 costimulatory pathways by transient administration of CTLA4-Ig and MR1 antibody to study the effects on allograft survival time, deviation of Th1 and Th2 cytokine secretion, and other mechanisms related to prolonged survival. RESULTS: Costimulatory blockade prolonged the mean survival time (MST) of cardiac allografts to 43 days for the treated group vs 8 days for the untreated group (P < .01). The costimulatory blockade down-regulated the expression of 2 Th1 cytokines (interferon-gamma [IFN-gamma] and interleukin-2 [IL-2]) and 2 Th2 cytokines (IL-4 and IL-10), reduced the numbers of graft-infiltrating CD4+ and CD8+ lymphocytes, and inhibited the expression of both perforin/GrB and FasL in allografts. CONCLUSIONS: Combined administration of CTLA4-Ig/MR1 inhibited acute rejection reactions in murine cardiac allografts, prolonging the survival of cardiac grafts through several mechanisms, including inhibition of Th1 and Th2 cytokine expression, graft infiltration by CD4+ and CD8+ T lymphocytes, and reduced both perforin/GrB and Fas-FasL.     

Graft survival and cytokine production profile after limbal transplantation in the experimental mouse model

Limbal transplantation or limbal stem cell (LSC) transfer represents the only way to treat severe ocular surface damage or LSC deficiency. However, limbal allografts are promptly rejected in spite of extensive immunosuppressive therapy. To characterize immune response after limbal transplantation, we established an experimental model of limbal transplantation in the mouse. Syngeneic, allogeneic and xenogeneic (rat) limbal grafts were grafted orthotopically in BALB/c mice and graft survival was evaluated. The presence of graft donor cells and the expression of IL-2, IL-4, IL-10, IFN-γ and inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA in the grafts were detected by real-time PCR. While syngeneic grafts survived permanently, allografts were rejected in 9.0±1.8 days and xenografts in 6.5±1.1 days. The manifestation of clinical symptoms of rejection correlated with the disappearance of donor cells in the graft and in the recipient cornea. Intragraft expression of iNOS mRNA and distinct expression patterns of Th1 (IL-2, IFN-γ) and Th2 (IL-4, IL-10) cytokines were detected during rejection of limbal allografts and xenografts. The limbal graft rejection was prevented with anti-CD4, but not anti-CD8 monoclonal antibody therapy. The results indicate that limbal grafts do not enjoy immune privilege of the eye and are promptly rejected by Th1 (allografts) or by a combined Th1 and Th2 (xenografts) type of immune response involving CD4+ cells and iNOS expression. Targeting this pathway may be an effective way to prevent and treat limbal graft rejection.     

重组pEGFP-N1-H2Bl质粒载体诱导心脏移植免疫耐受

目的 探讨H2-Bl基因诱导小鼠心脏移植免疫耐受的机制和效果.方法 建立小鼠颈部心脏异位移植模型,供体心脏经主动脉根部灌注H2-Bl质粒真核表达载体后进行心脏移植.实验分4组:对照组、环孢素A(CsA)组、H2-Bl质粒转染组、H2-Bl质粒转染+CsA组.各组于术后1、3和7天各动态枪测供心病理改变,免疫组织化学方法测供心CD40表达情况,流式细胞仪检测供心血清中Th1/Th2细胞因子变化,记录移植心脏存活时间.结果 对照组移植后排斥反应最重,其余组与之比较均有所减轻,以H2-Bl质粒转染+CsA组排斥反应最轻.免疫组化显示术后7天时H2-Bl质粒转染组CD40与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),CsA组、H2-Bl+CsA组CD40与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).H2-Bl+CsA组Th2细胞因子表达较其余组增加而Th1细胞因子则减少,到术后7天时各组Th细胞因子与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,其余各组小鼠供心存活天数均延长(P＜0.05).结论 H2-Bl基因干预可一定程度诱导移植心脏免疫耐受,延长同种异体小鼠颈部移植心脏存活时间.     

Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice

Alloreactive memory T cells are major barriers to transplantation acceptance due to their capacity to accelerate rejection. Here, we investigated the effects of combined treatment with arsenic trioxide (As(2)O(3)) and blocking monoclonal antibodies (mAb) against CD154 and LFA-1 (anti-CD154/LFA-1) on graft survival as well as changes in pathology and immunological responses in mice with adoptively transferred allo-primed T cells. The mean survival time (MST) for the cardiac allografts in recipient mice receiving the combination of As(2)O(3) and anti-CD154/LFA-1 was significantly longer (>113.7days) compared to those receiving anti-CD154/LFA-1 (23.2days), As(2)O(3) (12.5days) alone or no treatment (5.5days). This combined strategy distinctly inhibited lymphocyte infiltration in grafts, proliferation of splenic T cells and the generation of memory T cells in spleens. Moreover, the combined treatment caused the significant down-regulation of IL-2 and IFN-γ accompanied by increased expression of TGF-β and regulatory T cells (Tregs) in spleens, which led to long-term cardiac allograft survival in recipient mice. These results highlight the potential application of As(2)O(3) and its contribution in combination therapy with antibody blockade to delay rejection by memory T cells.     

脾动脉缩窄对门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达及Th1/Th2平衡的影响

目的 观察脾动脉缩窄对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏iNOS、Th1/Th2型细胞因子表达的影响,并探讨机制.方法 肝硬化门静脉高压大鼠随机分3组(n=10):假手术组(SOG)、脾动脉缩窄术组(SAC)和脾动脉结扎术组(SAL);正常大鼠10只行假手术作为对照组(NCG).免疫组化法测脾脏iNOS表达,RT-PCR法测脾脏IFN-γ、IL-4mRNA表达,对iNOS与IFN-γ、IL-4表达量作相关分析.结果 SOG脾脏iNOS明显高于NCG(P＜0.01),SAC和SAL明显低于SOG(P＜0.01).SOG脾脏IFN-γmRNA和IFN-γ/IL-4明显低于NCG(P＜0.01),IL-4mRNA明显高于NCG(P＜0.01);SAC脾脏IFN-γmRNA高于SOG(P＜0.05),SAC和SAL脾脏IL-4mRNA低于SOG(P＜0.05),而IFN-γ/IL-4高于SOG(P＜0.05).iNOS与IFN-γ负相关(r=-0.672,P＜0.01),与IL-4正相关(r=0.634,P＜0.01).结论 脾动脉缩窄术后门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达降低,IFN-γ/IL-4升高,脾脏Th1/Th2失衡改善可能与术后iNOS表达降低有关.     

Th1/Th2细胞因子变化在大鼠肝移植免疫耐受中的作用

目的:研究大鼠肝移植术后移植肝和外周血中细胞因子的表达,并分析其在急性排异反应和耐受诱导中的作用。方法:Kamada法建立大鼠肝移植模型,并随机分为4组,每组8只。A组:同品系组;B组:免疫排异组;C组:B组+免疫抑制剂;D组:C组+骨髓输注。RT-PCR和ELISA技术分别检测移植肝和外周血中细胞因子IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10、TGF-β1的表达,并观察受体存活率。结果:在B组中Th1型细胞因子(IL-2、INF-γ)表达高于A、C和D组(P<0.05);而Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)和TGF-β1表达低于C和D组(P<0.05);细胞因子在C组与D组大鼠中的表达无统计学差异。A、C、D组大鼠术后近、远期存活率明显优于B组。结论:Th1型细胞因子(IL-2、INF-γ)参与肝移植急性排异反应的发生,Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)和TGF-β1可能参与移植物免疫耐受的诱导,延长移植物存活。     

Inducible nitric oxide synthase promotes cytokine expression in cardiac allografts but is not required for efficient rejection.

BACKGROUND: Inducible nitric oxide synthase (iNOS) is enhanced during acute rejection. Pharmacologic inhibition of nitric oxide synthase (NOS) activity has had variable effects on graft survival in a number of animal models. To further characterize the requirement and effects of iNOS during acute allograft rejection, we examined rejection responses of mice completely deficient of iNOS. METHODS: Heterotopic cardiac allografts were performed using wild-type and iNOS deficient mice (iNOS[-/-]) as recipients. Graft survival was determined by abdominal palpation. At days 3 and 7 following transplantation, grafts were harvested and analyzed histologically. Cytokine messenger RNA (mRNA) expression was measured by ribonuclease protection assay. RESULTS: Mean survival time of cardiac allografts did not differ between wild-type (18 +/- 3 days) and iNOS(-/-) recipients (16 +/- 2 days). At 3 days, findings of moderate acute rejection were seen in both recipients groups, although modestly reduced in iNOS(-/ -) mice. By 7 days, allografts in both groups demonstrated severe rejection. Within grafts at day 3, there was a 3-fold reduction in IL-1beta expression and a 4-fold reduction in IL-1RA in iNOS(-/-) recipients (p = 0.03 andp = 0.04, respectively) compared to wild-type recipients. Expression of other proinflammatory cytokines was detected in the grafts from both recipients, but was not significantly different. Finally, rejection responses to iNOS(-/-) cardiac allografts were nearly identical to wild-type allografts. CONCLUSIONS: Rejection of cardiac allografts by iNOS(-/-) mice occurs in a similar fashion to wild-type recipients, with extensive inflammation and proinflammatory cytokine production. While iNOS may play a role in cytokine induction by macrophages, these studies suggest that iNOS is not required for efficient cardiac graft rejection.