采用混合血清筛选献血员抗HCV可行性试验及其应用

本文采用混合血清检测抗HCV进行了可行性试验,献血员5人混合血清检测抗HCV未发现假阳性。4份已知阳性标本和稀释5X、10X阳性标本,分别加入混合血清检测抗HCV均呈阳性。试验证明混合血清捡测抗HCV不会发生漏检,其敏感性和特异性不受影响。通过249份献血员血清标本的检测,筛选出抗HCV阳性标本5份,阳性率为2.17％。     

胶体金法检测尿液HCV抗体的临床应用研究

目的:为寻找取样方便、操作简便、成本较低、特异度和灵敏度高的HCV抗体检测方法.方法:分别收集186人份血清、尿液标本,其中HCV感染研究组33人份,非HCV感染五个对照组共153人份,分别采用三种试剂(胶体金法)对其进行血清、尿液HCV抗体检测.采用PEMS3.1软件进行比对分析.结果:HCV感染人群尿液标本中检出HCV抗体.经不同试剂对各组检测比对分析,中新科炬生产的丙型肝炎病毒抗体试剂盒(胶体金法)对尿液HCV抗体检测,其特异度100%、灵敏度较高87.9%,血清诊断符合率达87.9%.结论:认为HCV感染者或患者尿液标本存在HCV抗体,可作为检测HCV抗体的参考标本.     

4种试剂检测混合血清中抗—HCV的比较

目的研究不同试剂对混合血清法检测抗－ＨＣＶ的影响。方法 每５个血清标本构成一个混合标本并保护混合血清中每个标本的稀释度与单个血清检验法相同，采用酶标免疫法检测抗－ＨＣＶ。结果 以末混合血清为对照，加拿磊试剂检测的阳性，阴性标本均与对照无差别（Ｐ〈０．０１）；亚利、科华试剂检测阳性混合血清与对照组无差别（Ｐ〉０．１０），检测阴性混合血清Ａ（ＯＤ）值虽有增高（Ｐ〈０．０１），但距ｃｕｔ ｏｆｆ值较远     

丙型肝炎病毒标志物测定的临床应用

目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染者血清及初乳中该病毒标志物存在状况。　方法 :对 2 44份 HCV感染者、33份对照血清和 35份 HCV特异性 Ig G抗体阳性的产妇、41份健康产妇的初乳进行 HCV四种标志物测定。抗HCV- Ig G、Ig M和 GOR抗体采用间接 EL ISA法 ,HCV C33抗原采用双抗体夹心 EL ISA法。　结果 :抗 HCV- Ig G、抗 HCV- Ig M、HCV C33和抗 GOR抗体四种标志物在慢性活动性丙型肝炎组检出率最高 ,分别为 10 0 .0 %、85 .7%、46 .4%和 6 4.3% ;急性输血后丙型肝炎组检出率为 6 6 .7%、10 0 .0 %、2 2 .9%和 42 .9% ;慢性稳定性丙型肝炎组为 94.1%、2 6 .5 %、17.6 %和 5 2 .9% ;血透患者组为 6 2 .6 %、31.3%、4.8%和 45 .6 %。血清抗 HCV Ig G阳性组初乳为 17.1%、2 .9%、8.5 %和 37.1%。血清和初乳对照组除 1例献血员血清抗 HCV- Ig G阳性外 ,其余均为阴性结果。　结论 :除抗 HCV- Ig G外 ,抗 HCV- Ig M、HCV C33和 GOR抗体三种标志物在 HCV感染的相关疾病组中 ,有一定的阳性检出率 ,均可作为 HCV感染的标志 ,可用于 HCV感染后的实验室诊断。     

胶体金ELISA及PCR检测丙型肝炎病毒结果分析

目的 比较胶体金法和酶联免疫吸附试验法(ELISA)对丙型肝炎抗体的检测结果,分析丙肝抗体阳性患者HCV-RNA检测结果.方法 采用ELISA法和胶体金试纸条检测1000例患者血清中丙肝抗体;用FQ-PCR检测抗体阳性者血清HCV-RNA.结果 1000例患者ELISA检测抗HCV阳性15例,胶体金检测抗HCV阳性13例,对ELISA抗HCV阳性者HCV-RNA阳性5例,胶体金抗HCV阳性者HCV-RNA阳性5例,胶体金法检测的阴性和阳性结果与ELISA法总的一致性分别为100%和86.7%.阳性标本的S/C在1以下时,试纸条的检测结果与ELISA一致性为0.0%;阳性标本的S/C在1以上时,阳性标本的检测结果一致性为100.0%.结论 胶体金法和ELISA法对HCV感染强阳性者一致性较高,对弱阳性者一致性差,对前两者阳性结果时,应进一步检查HCV-RNA,以确定进一步的治疗方案.     

丙肝蛋白芯片用于病毒性肝炎血清流行病学调查

目的 用蛋白芯片技术确证ELISA法初筛抗-HCV阳性结果,观察HCV不同功能区抗体在不同地区低危人群中的检出率差异.方法 将HCV混合抗原,核心区抗原,NS3,NS4,NS5区抗原分别固定于同一玻片载体上制作蛋白芯片,选取48例2001年浙江省病毒性肝炎血清流行病学调查丙肝抗体ELISA法初筛阳性血清,用芯片检测不同功能区抗体.结果 48例初筛阳性血清用蛋白芯片检测有15例不同功能区抗体均为阴性,33例均有1～4种抗体阳性,抗C、抗NS3、抗NS4、抗NS5总检出率分别为51.5%、51.5%、48.5%和57.6%.其中舟山、衢州、温州、绍兴地区抗C检出率分别为53.3%、33.3%、44.4%、66.7%,抗NS3检出率分别为33.3%、100%、55.6%、66.7%,抗NS4检出率分别为60.O%、0%、33.3%、66.7%,抗NS5检出率分别为66.7%、0%、44.4%、83.3%.结论 HCV不同功能区抗体在不同地区低危人群中的分布存在差异,使用蛋白芯片检测低危人群中的HCV抗体,具有较高的特异性.     

混合血清法在HFRS血清流行病学调查中的应用

目的：建立一种简单，经济可行的肾综合征出血热（HFRS）血清流行病学调查方法。方法：采用捕获ELISA技术，应用单盲随机控制的流行病学方法研究。对照组：随机抽取HFRS抗体阴性标本280份；实验组：将280份阴性血清按完全随机化原则分为9－10人一组，同时将20份阳性标本随机混入某组，包被抗体为羊抗人IgM和羊抗人IgG酶标记物为HRP－抗HFRS.McAb(IF4)。结果：以逐个检验法为对照，混合血清法约登指数不低于0.98,kappa值为0．97（P＜0．05）。结论：本次实验在大规模HFRS流行病学调查中，采用混合血清法筛选优点是准确性高，简便特异性强，费用低廉。     

酶联免疫反应加速仪在检测丙肝抗体中的应用

目的探讨酶联免疫反应加速仪在酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎抗体中的应用。方法用酶联免疫反应加速仪和常规温育方法同步检测4种不同S／CO的混合血清,同时用实时荧光定量聚合酶链反应法检测临界值水平血清／灰区标本的HCV．RNA,并对结果进行比较分析。结果4种混合血清用两种方法检测的抗-HCV吸光度值（OD值）比较,差异有显著性（P〈0．05）。有3种混合血清定性结果相一致,S／CO为0．9的混合血清用常规温育法检测结果为阴性,用酶联免舨应加速仪检测结果为阳性,而检测20份S／CO为0．9的血清的HCV—RNA含量,其中14份大于1×10^3拷贝／mL。4种混合血清,酶联免疫反应加速仪的OD值CV％分别为2．5、2．0、2．1、2．3,常规温育方法的OD值CV％分别为3．5,4．1、4．0、4．2。结论酶联免疫反应加速仪在确定最佳反应时间条件下,具有加速抗原抗体反应的作用,可以提高ELISA检测的灵敏度,为临床判读“灰区”标本的结果提供可靠依据,避免漏诊。     

丙型肝炎疾病人群中RIBA不确定结果的片段类型和出现概率

目的:调查丙型肝炎疾病人群中RIBA不确定结果的片段类型和出现概率。方法:检测对象为HCV感染者,选择486个HCV感染者标本,其血清标本分别用国内5种和国外2种抗-HCV EIA试剂进行筛查、复测,挑选出各厂家检测不一致或低值弱阳性样本,重新抽取新鲜标本进行抗-HCV确认试剂CHIRON?RIBA?HCV 3.0 SIA、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和HCV RNA PCR试剂检测,最后进行统计和分析。结果:共挑出29份不同厂家检测不一致或低值弱阳性样本,其HCV RNA和ALT均为阳性,抗-HCV确认试剂确认抗-Core、Ns3、Ns4、Ns5区抗体阳性检出率分别为86.21%、48.28%、44.83%、24.14%;仅出现单独抗-Core区阳性的标本有8份,还出现3份抗体确认结果为阴性RNA阳性的标本,没有出现单独抗-Ns3、Ns4和Ns5抗体阳性的样本。结论:标本经过CHIRON?RIBA?HCV 3.0 SIA确认试剂确认,单独抗-Core区阳性的标本有8份,所占比例为1.65%;出现3份抗体确认结果为阴性RNA阳性标本,没有出现抗-Ns3、抗-Ns4和抗-Ns5单独阳性的样本;经RIBA确认的29份样本其抗-Core、Ns3、Ns4、Ns5区抗体阳性检出率分别为86.21%、48.28%、44.83%、24.14%。     

122例艾滋病患者合并乙肝病毒 丙肝病毒感染的临床流行病学研究

目的 研究在抗逆转录病毒药物治疗(HAART)状态下HIV/AIDS患者合并乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)的流行状况以及相关血清生化和病毒学特征.方法 对122例正在接受HAART治疗的HIV/AIDS患者采集血标本,使用酶免法(ME-IA)检测乙肝五项指标(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)、肝功能,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体,运用RT-PCR法对丙肝病毒抗体阳性标本以及表面抗原和/或核心抗体阳性标本分别进行HCV-RNA以及HBV-DNA测定.以43名单纯HCV感染者作为对照组进行研究.结果 122名 HIV/AIDS患者,乙肝五项指标全阴性97例(78.86％),表面抗原阳性3例(2.46％),表面抗体阳性者总计19例(15.57％),单纯核心抗体阳性者3例(2.46％).HCV 抗体阳性84例(68.85％),84例HCV抗体阳性标本中HCV-RNA 阳性58例(69.05％),HIV/HCV/HBV合并感染者为0.HIV/HCV合并感染组 HCV-RNA 水平与感染者性别,CD4 +细胞数水平无明显差异(P＞0.05);HIV/HCV合并感染组与单纯HCV感染组 HCV-RNA水平、肝功能异常率无明显差异(P＞0.05).结论 HIV感染者HBsAg阳性率低于普通人群,HIV/HCV合并感染的比例显著高于普通人群.HIV/HCV合并感染与单纯HCV感染者血清生化及病毒学改变相似.     

化学发光免疫分析法检测献血者HCV抗体的应用评价

目的应用化学发光免疫法（CLIA）检测无偿献血者丙型肝炎病毒（HCV）抗体。并与常规抗-HCV ELISA法和HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测法进行比较。方法对2009年1月-2010年8月的5 985例献血者血清标本,先应用HCV-CLIA法和试剂①、试剂②两种抗-HCV ELISA试剂进行常规初检、复检检测。对HCV-CLIA法和试剂①、试剂②检出的阳性标本,再进行HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测。结果在被检测的5 985份标本中,HCV-CLIA法HCV阳性14份;抗-HCV ELISA法初检阳性15份和复检阳性为16份（其中初检、复检均阳性的14份）;HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测阳性的13份。结论本组HCV-CLIA法与HCV ELISA法初检、复检结果比较符合率分别为93.33%和87.50%;与HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测比较符合率为92.86%。HCV-CLIA法具有操作简便、快速、重复性好等优点,适合献血者抗-HCV的筛查。     

血库献血员中抗-HCV抗体水平的调查

为确保血液质量 ,避免输血后肝炎的发生 ,我们按照国家规定 ,对血库献血员筛选 HBs Ag和 AL T,可是输血后肝炎的发病率仍然很高。其主要原因是很少检测抗 - HCV抗体。因此 ,抗 - HCV抗体的检测是避免输血后丙型肝炎病毒 ( HCV)发生的重要手段。于是 ,我们采用酶联免疫吸附试验 ( EL ISA)法对 2 86例献血员进行抗 - HCV抗体的检测 ,开展献血员中HCV流行水平的调查 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　标本　血清标本取自 1997年 4月间 18～ 4 0岁青壮年血库献血员。其中男 182例 ,女 10 4例。HBs Ag阴性 ,ALT在 2 5U/ L以下 ,其它…     

丙型肝炎病毒感染者自身抗体检测及意义

①目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染与自身抗体之间的关系。②方法　对 4 4例抗HCV IgG阳性病人血清进行抗核抗体 (ANA)、类风湿因子 (RF)及抗可提取性核抗原 (ENA)抗体检测 ,并同时检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶 (AST)。③结果　抗HCV阳性病人ANA ,RF和抗ENA抗体的阳性率分别为 2 7.3% ,2 5 .0 %和 31.0 % ,总的自身抗体检出率为 4 5 .0 % ,与对照组比较差异有显著性 (χ2 =4 .2 0～ 15 .18,P <0 .0 5 ) ;HCV感染病人ANA和RF阳性与阴性者之间AST含量比较差异无显著性 (t =1.4 5 ,t′ =1.2 1,P >0 .0 5 ) ,ANA阳性者与ANA阴性者之间ALT含量比较差异亦无显著性 (t=1.18,P >0 .0 5 ) ,RF阳性和阴性者ALT含量比较差异有显著性 (t′ =4 .75 ,P <0 .0 1)。④结论　HCV感染可触发机体自身免疫反应 ,HCV感染者定期检测RF有助于监测病情的活动性。     

淮南市乙肝患者血清抗HCV-IgM检测结果分析

目的　调查淮南地区乙肝患者重叠感染丙肝的现状 ,并评价重叠感染丙肝对乙肝患者肝功影响。方法　ELISA法检测不同性别、年龄、类型的乙肝患者血清抗HCV -IgM和ALT、AST、AST/ALT及A/G比值。 结果　共检查乙肝患者血清标本 5 84份 ,抗HCV -IgM阳性率 7 5 3%(4 4/ 5 84)。其中男 7 19%(2 4/ 34 4) ;女8 33%(2 0 / 2 40 ) (X2 =0 . 2 0 ,P >0 . 0 5 )。各年龄组阳性率为 5 17%～ 10 %不等 ,统计学处理无差异。不同型乙肝血清抗HCV -IgM阳性率分别为 :急性黄疸型乙肝 5 5 3%、慢性肝炎 9 6 2 %、肝硬化 10 87%、慢性重症型乙肝 2 5 0 0 %。重叠感染丙肝的乙肝患者血清AST、ALT、AST/ALT、A/G依次为 96± 12、 6 6± 2 7、 1 3±0 5、 1 4 9± 0 36 ,与单纯乙肝患者相比差异显著 (P <0 . 0 1,P <0 . 0 5 )。结论　乙肝患者血清抗HCV—IgM阳性率较高 ,且与年龄、性别无关 ,似有随病程迁延阳性率增高趋势。机体重叠感染HCV可影响体内氨基酸代谢和蛋白质合成 ,影响肝脏损伤病灶的修复和肝细胞再生 ,临床表现为患者肝功能恢复时间延长。提示临床治疗乙肝患者 ,定期检测其血清抗HCV -IgM ,重视重叠感染的发生。     

胶体金法与酶联免疫法检测HCV抗体的效果比较

目的:观察胶体金法用于丙型肝炎患者HCV抗体检测的实际效果,评价其用于HCV感染的诊断价值。方法:选择200例丙型肝炎患者,均抽取等量血液,随机分为观察组100例,采用胶体金法检测血清HCV抗体,对照组100例,采用酶联免疫法检测血清HCV抗体,记录两组患者检出率并进行统计学比较分析。结果:本次研究中,观察组检出率为89.00%(89/100);对照组检出率为78.00%(78/100),检出率组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胶体金法用于丙型肝炎患者血清HCV抗体的检测效率高于酶联免疫法,且对设备及操作条件的要求较低,值得临床推广应用。     

丙型肝炎病毒1b型慢性感染者IgG亚类检测及其意义的初步研究

目的：研究慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染抗HCVIgG亚类的出现规律及其意义。方法：以第3代抗－HCV检测抗原ELISA法检测不同HCV感染状态患者血清中IgG亚类及滴度。结果：HCV－b慢性肝炎患者标本中IgG1、IgG2、IgG4检出率分别为87．5％、7．5％、52．5％，其几何平均滴度分别为1：549．5、1：1．6、1：21．9。未检测到IgG3。慢性肝炎组抗体滴度明显于高于单纯抗体阳性组。结论：HCV－1b慢性肝炎特异性体液免疫有一定的缺陷，主要表现为抗体的滴度较低和抗体亚类的限制性。本文认为，这种缺陷可能与HCV－1b感染的慢性化存在一定的关系。     

静脉吸毒人群HIV、HCV、HBV和梅毒螺旋体感染的血清学检测结果分析

目的:了解静脉吸毒人群HIV、HCV、HBV及梅毒螺旋体的感染现状.方法:收集362名静脉吸毒人员血液标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗HIV抗体、抗HCV抗体、HBsAg;采用TRUST试验检测梅毒螺旋体非特异性抗体.结果:362名静脉吸毒人群HIV感染率为4.14%,抗HCV抗体检出率为80.39%...     

化学发光法检测丙型肝炎病毒抗体灰区标本的假阳性

目的探讨化学发光法(CLIA)检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性灰区标本的假阳性情况,为临床诊疗提供应用参考。方法收集本院Architect i2000检测抗HCV抗体阳性灰区结果(1≤S/CO≤5)的标本161例。全部标本均进行HISCL 5000检测。以高敏HCV核酸(RNA)定量和重组免疫印迹试验(RIBA)的结果为标准确定真、假阳性。结果 HISCL检测抗HCV抗体结果阳性的标本有23例,阴性的有138例。所有标本的HCV RNA定量检测结果均阴性。RIBA检测13例结果阳性,45例不确定,103例阴性。Architect和HISCL与RIBA的假阳性率分别为92.0%(148/161)和52.2%(12/23)。Architect方法检测的标本RIBA阳性组、不确定组和阴性组的平均COI值分别2.8、2.2和2.0,三组间的S/CO值差异有统计学意义(P0.05);HISCL方法检测的标本RIBA阳性组、不确定组和阴性组的平均COI值分别为3.0、1.0和0.2,三组间的COI值差异有统计学意义(P0.05)。结论 Architect i2000和HISCL 5000检测抗HCV抗体的灰区标本均出现较高假阳性,假阳性原因还需进一步深入研究,迫切需要研发敏感度和特异性更高的抗HCV抗体的实验室筛查方法。     

抗ds-DNA、抗ENA抗体联合检测在SLE病人诊断中的应用

目的　探讨用抗双链DNA(ds-DNA)和抗可提取核抗原 (ENA)抗体联合检测在诊断SLE病人中的应用 ,找出能及时为临床提供快捷可靠检验数据的检测手段。方法　运用免疫印迹法 (IBT)和金标法对 4 0例SLE患者的抗ds-DNA抗体和抗ENA多肽抗体谱进行联合检测 ,以确定两种方法联合检测的临床应用价值。结果　检测各种抗体的阳性率分别为抗ds-DNA 72 .5 % ,抗Sm 6 0 % ,抗ulRNP 32 .5 % ,抗SSA 75 % ,抗SSB 7.5 % ,抗Jo- 12 .5 % ,抗rRNP 5 .0 %。联合检测的阳性率为 87.5 % ,其检测阳性率比单独检测分别提高了 15 %和 2 7.5 %。结论　在SLE患者血清中存在多种自身抗体 ,尤以抗ds -DNA抗体和抗Sm、抗ulRNP抗体为主。用两种方法联合检测 ,在SLE疾病的诊断中互补 ,不但提高了检出率 ,而且操作方法简便 ,重复性好 ,便于在各级医院推广应用。     

Non-invasive immunodiagnosis of Schistosomiasis japonica: the detection of specific antibodies in saliva

研究唾液作为日本血吸虫病诊断与筛查标本的可行性。方法　建立日本血吸虫兔感染模型 ,收集兔和慢性血吸虫病人成对的唾液与血清标本 ,以间接ELISA检测唾液、血清标本中的抗血吸虫特异性抗体。结果　①兔唾液与血清样本抗体检测的特异性分别为 93 3 3 % ( 2 8/ 3 0 )和 96 67% ( 2 9/ 3 0 ) ,感染兔血清与唾液样本的抗体检测敏感性分别为 1 0 0 % ( 2 4/ 2 4)和 87 5% ( 2 1 / 2 4)。血清与唾液中的抗SEA (可溶性虫卵抗原 )IgG水平具显著相关性 (r=0 53 0 7,P =0 0 0 3 8<0 0 5) ,与血清标本相同 ,唾液中抗SEAIgG水平可反映兔感染和治疗状况。②病人唾液抗体检测的敏感性为 90 62 % ( 2 9/ 3 2 ) ,血清抗体检测的敏感性为 1 0 0 % ( 3 2 / 3 2 )。正常人唾液1 4 0份 ,阳性 8份 (即假阳性率 5 75% ) ,正常人血清 1 56份 ,阳性 6份 (假阳性率 3 84% )。病人唾液与血清中的特异性抗体含量具显著相关性 (r=0 42 2 7,P =0 0 0 8<0 0 5)。结论　唾液中的抗日本血吸虫特异性抗体的检测可作为非损伤性的血吸虫病免疫诊断和筛查方法