胶体金免疫层析法检测结核杆菌抗体的研究

目的：应用S3800作为标记源建立结核杆菌抗体的胶体金免疫层析检测方法。方法：用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，免疫层析检测抗体，ELISA法进行符合率检测。结果：建立的胶体金免疫层析检测方法灵敏度达2mg/L，特异性好．无交叉反应，与ELISA法相比阳性符合率达93．8％，试剂稳定性达6个月。结论：建立的胶体金免疫层析检测方法灵敏度高．特异性好，有广泛的应用价值。     

全血胶体金免疫层析法检测HBsAg的临床应用评价

目的 :对全血胶体金免疫层析试纸法检测乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)的临床应用进行评价。方法 :用全血胶体金免疫层析试纸法和ELISA法对定值HBsAg血清和 2 0 0份临床标本同时测定并观察全血胶体金免疫层析试纸法检测HBsAg的灵敏度、重复性、测定范围和稳定性。结果 :全血胶体金免疫层析试纸法检测HBsAg的下限为 1ng/ml,但对 <10ng/ml的HBsAg重复性不够 ,检测上限至少达 1万ng/ml。与ELISA比较 ,一般不出现假阳性。对抗原量过大的标本 ,金标法结果准确 ,但对抗原含量低的标本 ,可出现假阴性。结论 :全血胶体金免疫层析试纸法适用于急诊、现场采血前献血员的筛查和婴幼儿 ,但单独用于HBsAg检测 ,可出现低浓度的漏检。     

胶体金免疫层析法检测Der f1变应原的研究

目的 开发一种灵敏度高且简单快速的胶体金免疫层析检测分析系统,为人居环境中Der fl变应原的检测提供检测基础.方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒.用胶体金标记的单克隆抗体建立免疫层析分析系统,用以检测Der fl.其检测效果与ELISA法相对照.结果 建立的胶体金免疫层析检测方法灵敏度达50 μg/L以上,特异...     

胶体金免疫层析法在鼠疫监测应用

目的了解胶体金免疫层析法（GICA）快速诊断鼠疫试剂的应用效果。方法在鼠疫监测中用间接血凝（IHA）微量法和胶体金免疫层析法检测鼠型动物血清中鼠疫F1抗体;选IHA微量法初筛时发生凝集的鼠型动物血清,用GICA检测鼠疫F1抗体,设立IHA微量法抑制试验对照;在溶血血清中加入鼠疫阳性参考血清,用GICA检测鼠疫F1抗体,设立IHA对照;用鼠疫菌EV76株免疫鼠类建立动物模型,用GICA检测鼠疫F1抗体和F1抗原,分别设立IHA和反向间接血凝（RIHA）对照。结果 IHA微量法和GICA检测鼠型动物血清237份,两种方法检测结果一致,全部阴性;GICA及IHA微量法抑制试验检测IHA微量法初筛时发生凝集的鼠型动物血清57份,两种方法结果一致,均为阴性,证实初筛结果为非特异性凝聚;GICA检测含鼠疫鼠疫阳性参考血清的鼠型动物溶血血清45份,结果全部阳性,而IHA对照结果无法判断;用GICA检测动物模型中鼠类血清25份和鼠类脏器18份,结果分别与IHA和RIHA对照一致。结论鼠疫胶体金试剂使用简便、快速、特异、敏感、便于鼠疫监测现场和鼠疫应急应用。     

免疫层析法用于表面抗原检测

目的：建立一种更方便，快速，安全的检验血清ＨＢｓＡｇ的手段。方法：采用胶体免疫层析分析方法，结果：检测临床及血库血清样品１８９例，与酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对照比较，二者检测符合率为９８．９％，检测灵敏度可达５μｇ／Ｌ以下。结论：该方法检测灵敏度，特异性等指标已接近ＥＬＩＳＡ水平，并且检测操作更方便，快速，有希望发展成为一种新的临床检测方法。     

胶体金免疫层析法快速检测霍乱弧菌的初步应用

目的 为检验胶体金免疫层析法(GICA)试纸条检测霍乱弧菌(VC)的灵敏性及其实际应用意义。方法 以VC菌株模拟标本检验GICA的检测灵敏度,并与培养法平行检测流行期间的霍乱标本进行比较。结果 GICA检测纸条检出VC的下限为10^5cfu/ml,比培养法灵敏度低,但已达到检测条原定技术指标;实际应用检出率比培养法稍低,其差异无显性意义。结论 应用GICA试纸条检测VC的方法具有快速、简便、特异和适合基层单位使用的优点。     

免疫层析法用于HCG快速检测的研究

目的：研制用于尿液HCG快速检验试纸条。方法：采用胶体金免疫层析分析方法。结果：检测灵敏度可达50IU／L，与高含量的LH、FSH、TSH均无交叉反应，检测214例临床样品，准确率为100％。结论：该方法简单、快速、特异性强，是检测尿液HCG较好的免疫学方法。     

胶体金免疫层析法在早孕检测中的应用

目的:免疫层析法是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素膜一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品沿该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金染色可使该区域显色。胶体金标记稳定、易贮存,常用于定性或半定量的快速免疫检测方法中.在免疫层析快速诊断技术中常用于β-HCG的特异性免疫诊断早孕检测等,具有快速、准确和无污染等优点。     

基于荧光免疫层析法建立甲型流感病毒快速检测技术的研究

目的 基于荧光免疫层析技术平台,针对甲型流感病毒抗原,开发甲型流感病毒快速诊断试剂.方法 利用荧光微球标记甲型流感病毒单克隆抗体、生物素标记甲型流感病毒单克隆抗体以及包被亲和素和羊抗鼠IgG多克隆抗体的检测卡,构建甲型流感病毒检测体系.通过原料评价、校准曲线、空白限、准确度、线性范围、重复性、热稳定性及临床比对,验证试剂诊断性能.结果 本研究得到的荧光免疫层析试剂具有准确度高、检测范围宽、重复性和热稳定性好等优点,其正确率及敏感率均明显高于经典的胶体金试剂.结论 本研究应用将为国境口岸或医院的甲型流感病毒快速筛查提供方便、快捷、灵敏的技术手段.     

免疫层析法用于表面抗原检测

目的：建立一种更方便、快速、安全的检验血清HBsAg的手段。方法：采用胶体金免疫层析分析方法。结果：检测临床及血库血清样品189例，与酶联免疫吸附试验（ELISA）对照比较，二者检测符合率为98．9％，检测灵敏度可达5μg／L以下。结论：该方法检测灵敏度、特异性等指标已接近ELISA水平，并且检测操作更方便、快速，有希望发展成为一种新的临床检测方法。     

全血快速检测甲胎蛋白胶体金免疫层析方法的研制和应用

目的:建立一种简便、快速、准确的检测甲胎蛋白(AFP)的方法。方法：采用单克隆抗体胶体金标记技术,运用双抗体夹心法免疫层析原理,建立全血快速AFP胶体金层析法。结果：与ELISA法进行对比,AFP全血试纸条的阳性符合率98．31％,阴性符合率96．46％,总符合率97．09％。结论：AFP全血试纸条具有快速简便,结果易判,无需仪器设备,末梢全血可即采即测等优点,能满足急诊检验的需要,尤其为大面积的体检普查,广大基层门诊推广提供了便利条件。     

547例患者流感病毒胶体金法快速检测结果及临床分析

目的总结胶体金免疫层析法(GICA)快速检测流感样病例的结果并对其临床情况进行分析。方法对2013年1月11～31日547例流感样病例进行GICA快速病原学检测,分为阳性组与阴性组,对比分析两组患者一般情况、临床特点及疗效。60例同时进行GICA和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,评价两种检测方法的符合率。结果 547例患者GICA检测总阳性率为40.8%。阳性组的流行病学史、咳嗽、咽痛、全身酸痛、奥司他韦和抗菌药物使用情况与阴性组比较,差异有统计学意义(P﹤0.05);两组一般情况,临床症状中的咯痰、头痛、腹泻、鼻塞、流涕,白细胞检查结果的差异均无统计学意义(P﹥0.05)。RT-PCR与GICA快速检测流感结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对流感样病例的诊疗中除了重视临床表现、流行病学史外,结合GICA快速检测流感技术,可更有针对性地对患者进行临床诊治。     

胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的对比研究

目的 评估胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶。方法 收集西安交通大学第二附属医院血培养79株肠杆菌目细菌,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌57株和碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌22株,按照NG-Test CARBA 5试剂盒说明书检测待测菌株五种主要碳青霉烯酶[klebsiella pneumoniae carbapenemase(KPC)、new delhi metallo-β-lactamase(NDM)、verona integron-encoded metallo-β-lactamase(VIM)、imipenemase metallo-β-lactamase(IMP)、oxacillinase48(OXA)-48]。碳青霉烯酶基因经PCR测序确认。结果 57株血培养碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌,NG-Test Carba 5在15 min内检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP,其敏感度和特异度分别为100%和100%。金山川碳青霉烯酶耐药检测试剂检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP的敏感度和特异度分别为94.74%和1...     

免疫渗滤与胶体金快速检测在筛查甲型流感中诊断效率分析

目的 评价胶体金和免疫渗滤法在筛查临床甲型流感病毒感染中的诊断效率.方法 收集2009.6～2009.10我院发热门诊流感样病例咽拭子标本297例,分别用免疫渗滤法和胶体金法进行快速检测,同时采用实时荧光定量PCR和测序进行验证,以评价两种方法的诊断效率.结果 在实时荧光定量PCR法及测序证实为甲型流感166份,其中免疫渗滤法灵敏度为54.82%(91/166),与PCR法符合率为66.67%,Kappa值为0.35;胶体金法灵敏度为4.22%(7/166),符合率为45.79%,Kappa值为0.02;在131份甲型流感病毒阴性的标本中,免疫渗滤法特异性为81.68%(107/131),胶体金法特异性为98.47%(129/131);在实时荧光定量PCR检测为甲型H1N1阳性的99份标本中,免疫渗滤法检出率为67.3%,胶体金检出率为5.1%;在两种方法结果不符合108份标本中,免疫渗滤法阳性而胶体金阴性的标本107份,实时荧光定量PCR法并序列测定显示其中84份为甲型流感病毒阳性,23份为阴性:免疫渗滤法阴性而胶体金阳性的1份标本,甲型流感病毒实时荧光PCR检测为阴性.免疫渗滤法在甲型流感病毒的检出率和与PCR方法的符合率方面明显高于胶体金法(P＜0.05).结论 免疫渗滤法在甲型流感病毒筛查中优于胶体金法,显示出良好的临床应用前景.     

斑点金免疫渗滤试验检测血清中抗-HAV抗体

0　引言　抗 - HAV是甲型肝炎既往感染的标志 ,抗 - HAV阳性率是甲型肝炎流行病学调查的主要指标 .目前检测抗 -HAV常用的方法有 RIA和 EL ISA法 ,两方法所需时间长 ,操作步骤多 ,且需特殊仪器设备 .斑点金免疫结合试验是 2 0世纪 80年代发展起来的一种简便快速的免疫检测新技术 ,已成功地用于检测抗人类免疫缺陷病毒抗体[1 ,2 ] .我们建立了检测抗 - HAV的快速斑点金免疫渗滤试验 ,经初步试验 ,效果满意 .1　材料和方法1.1　材料　 1抗人 Ig G抗体购于 Dako公司 ;2甲型肝炎病毒抗原为本室细胞培养抗原 ;3抗 - HAV单克隆抗体单克…     

胶体金免疫层析法和ELISA法在HBsAg检测中的方法学评价

目的：对胶体金免疫层析法（GICA）和ELISA两种方法检测HBsAg进行方法学比较。方法：用胶体金纸条和ELISA试剂同时检测HBsAg血清标本。结果：与ELISA相比,胶体金免疫层析法检测HBsAg的灵敏度为96%,特异性为100%。胶体金免疫层析法与ELISA相比特异性基本一致,但胶体金免疫层析法灵敏度稍差。结论：HBsAg胶体金纸条与ELISA试剂相比有较高的特异性,但灵敏度有待于进一步提高。     

应用分子线性探针技术快速筛查耐多药结核病的研究

目的应用分子线性探针(Geno Type MTBDRplus·GTplus)技术检测绵阳地区结核分枝杆菌的耐药性,了解耐多药结核病的状况,为制定地区结核病的预防控制策略提供科学依据。方法应用病例对照研究方法,对绵阳市9个县(市、区)送检的235株结核分枝杆菌同时运用GTplus和国际标准法-比例法检测利福平(RFP)和异烟肼(INH)的耐药性,分析GTplus诊断耐多药结核病的敏感性和特异性。结果 228株样本的结果有效,GTplus检测绵阳地区结核病耐多药率为14.04%(32/228),与比例法14.47%(33/228)相比,诊断耐多药结核病的结果差异无统计学意义(P0.05),敏感性和特异性分别为81.82%(27/33)和97.44%(190/195);结果报告时间1 d,明显快于比例法的42 d。结论 GTplus诊断耐多药结核菌特异、敏感、快速、方便,对控制结核病的传播具有重要意义。     

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体。     

非结核分枝杆菌耐药性特征及聚合酶链式反应检测方法的建立

目的建立一种快速鉴别非结核分枝杆菌的聚合酶链式反应方法,并与直接测序法比较,探讨该方法的可行性。方法根据分枝杆菌16~23srDNA间隔区序列设计引物,建立检测分枝杆菌的PCR分型方法,并利用该技术对5例临床分离株进行PCR扩增,借助凝胶电泳分析和直接测序分析进行临床分离株的分子分型。结果 5例分离株均耐利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、丁胺卡那、环丙沙星、左氧氟沙星、硫异烟胺、力克肺座和比嗪酰胺,为多重耐药菌株。PCR扩增结果和直接测序结果相吻合,均为脓肿分枝杆菌。结论分枝杆菌高度保守的16~23srDNA间隔区序列可做为分枝杆菌鉴定的靶基因,建立快速、特异、敏感的PCR扩增体系,且从基因水平上可对分枝杆菌进行分子分型,为临床治疗提供快速、准确的实验数据。