类风湿关节炎中白三烯B4间接分化破骨细胞的实验研究

目的探讨在类风湿关节炎（RA）中,白三烯B4（LTB4）能否通过促进核因子Kappa B受体激活剂配体（RANKL）的表达,起到间接分化破骨细胞的作用.方法利用RA滑膜成纤维细胞（RAFLs）和人外周血单核细胞的共培养体系,对照组2.5 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）刺激、实验a组2.5 ng/ml M-CSF＋10-8mol/L LTB4刺激、实验b组2.5 ng/ml M-CSF＋10-8 mol/L LTB4＋100 ng/ml骨保护素（OPG）刺激,培养3周后行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）细胞化学染色,通过计数多核性TRAP酶染色阳性的破骨细胞样细胞,比较各组的分化破骨细胞作用.结果对照组几乎没有破骨细胞样细胞,而实验a组则出现较多的破骨细胞样细胞,实验b组则与对照组相似,几乎没有破骨细胞样细胞.结论在RA中,LTB4能够通过促进RAFLs细胞RANKL的表达来间接分化破骨细胞.     

Adipose‐derived stem cells: A candidate for liver regeneration

The scarcity of donor livers and the impracticality of hepatocyte transplantation represent the biggest obstacles for the treatment of liver failure. Adipose‐derived stem cells, with their ability to differentiate into the hepatic lineage, provide a reliable alternative cell source with clear ethical and practical advantages. Moreover, adipose‐derived stem cells can effectively repair liver damage by the dominant indirect pattern and increase the number of hepatocytes by the secondary direct pattern. In recent years, the development of the indirect pattern, which mainly includes immunomodulatory and trophic effects, has become a hot topic in the field of cell engineering. Therefore, adipose‐derived stem cells are considered to be ideal therapeutic stem cells for human liver regeneration. In this article, we reviewed the advantages of adipose‐derived stem cells in liver regeneration, and explore their underlying mechanisms.     

破骨细胞的研究进展

健康成人的骨骼在不断地重建，旧骨吸收和新骨形成处于动态平衡状态，破骨细胞在骨骼的形成和骨量的调节方面起着关键作用。近年来，破骨细胞的研究取得了相当大的进展。在破骨细胞增殖和分化过程中RANKL和M—CSF起到了重要的作用。骨吸收过程中破骨细胞与骨基质接触，在它自身与骨表面之间形成一个独立的微环境。破骨细胞对于骨的识别受到整合素的调控。PU．1基因、转录因子c-Fos、Fra-1、c-Jun可以通过调节破骨细胞前体的分化和成熟发挥吸收骨的作用。通过来源于脾干细胞的破骨细胞样细胞的诱导生成及其培养，可以获得大量的破骨细胞，从而用于实验室内分子生物学研究。     

小鼠脾脏内皮祖细胞的分离和培养

目的探讨小鼠脾脏内皮祖细胞（endothelial progen itor cell,EPC）的体外分离,定向分化和培养方法。方法梯度密度离心法从小鼠脾脏中分离单个核细胞,用含血管内皮生长因子的M199培养液培养,每4 d更换培养基去除非贴壁细胞,观察经过不同时间培养后的细胞形态、结构和功能变化。结果培养4 d可发现梭形贴壁细胞,7d后细胞成集落状,14 d左右可观察到条索状、网状血管样结构,原代细胞培养21 d左右接近融合并呈典型的鹅卵石样排列。培养7 d透射电镜可见特征性的W e ib le-Palade小体存在,细胞CD31表达阳性,细胞D iI-LDL摄取试验阳性,FITC-UEA-I染色阳性;流式细胞仪检测细胞Sca-1及VEGFR-2的总阳性率分别为（34.6±3.8）%和（50.5±4.9）%,且该细胞具有体外成血管能力。结论通过密度梯度离心联合贴壁筛选可以获得脾脏EPC。     

间充质干细胞来源微粒及其在肺脏疾病中的研究进展

间充质干细胞来源的微粒是间充质干细胞在静息或活化状态下释放到细胞外基质中直径30～1 000 nm的膜性小囊泡.最近的研究发现干细胞来源的微粒可以有效地转运mRNA、miRNA和蛋白质等生物活性物质,在调控组织再生修复方面发挥重要作用.本文综述干细胞微粒的形成机制、生物学特性及在肺脏疾病中主要作用的研究进展,为干细胞肺组织修复机制研究提供新的思路.     

纳米脂质体槲皮素诱导人食管癌癌干样细胞凋亡的研究

目的检测纳米脂质体槲皮素对人食管癌癌干样细胞凋亡的诱导作用,并探讨其机制。方法以氯仿-DMSO预溶的脂质体槲皮素经负压旋转蒸发、超声破碎及80nm过滤制备纳米脂质体槲皮素。将其作用于人食管癌细胞系Eca109／9706细胞的生长抑制率（MTT法）,及作用后食管癌细胞中羟自由基（OH^-）、NO、PTEN、NF-κB及Caspase-3的表达（免疫组化法）及凋亡率（采用TUNEL法）。检测Eca109／9706细胞中CD133、MDR1的髟双免疫酶标及单、双荧光标记的复合率。结果纳米脂质体槲皮素处理的Eca109／9706细胞的生长抑制率、OH^-、NO、PTEN、NF-KB及Caspase-3表达和凋亡率均显著高于对照组（P〈0.01）。Eca109／9706细胞的的单免疫荧光／单免疫酶标率各为80％及70％,双免疫荧光／双免疫酶标的复合率为30％-43％。结论纳米脂质体槲皮素可诱导Eca109／9706细胞产生氧化应激反应并激活PTEN、NF-κB的转导途径,最终通过Caspase-3诱导细胞凋亡;CD^＋133、MDR1^＋可作为癌干样细胞的标志。     

人脂肪源性间充质干细胞的分离培养与鉴定

目的探索人脂肪间充质干细胞(ADMSCs)分离、培养的方法,以证明人脂肪组织中含有多向分化潜能的ADMSCs,为临床应用提供实验基础。方法采用Ⅰ型胶原酶消化法及贴壁法分离培养腹部手术患者皮下脂肪组织,取第3代细胞,以磷酸盐缓冲生理盐水为空白对照,进行CD13、CD34、CD44、CD45、CD105、HLA-DR、Ⅷ因子表面抗原的免疫细胞化学鉴定。结果人脂肪中含有大量长梭形细胞,免疫化学鉴定显示与空白对照相比较CD44、CD13、CD105抗原呈阳性反应,其余标志物CD45、CD34、HLA-DR、Ⅷ因子抗原均为阴性反应。结论初步证明了人脂肪组织中含有间充质干细胞,为今后ADMSCs的分离培养提供了更简单有效的方法。     

急性心肌梗死患者外周血干细胞及干细胞因子的变化

目的观察急性心肌梗死(AMI)患者外周血干细胞和干细胞因子(stem cell factor,SCF)的变化及两者的相关性。方法AMI患者共25例,收集患者入院即刻,第13、、71、4和28天的抗凝血各2 ml,用流式细胞仪检测如下细胞表面标记物:CD34+、血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR-2+)、CD31+、CD144+、CD133+、CD45+,比较各时间点的差异。同时用酶联免疫吸附法检测血清SCF水平。结果AMI后CD34+细胞逐渐升高,到第7天时达到峰值,而VEGFR-2+、CD31+、CD144+、CD133+细胞则出现下降趋势,并且于第7天时达到谷值(P<0.05)。AMI患者外周血清SCF浓度随时间推移呈下降趋势(P<0.01),但AMI后第1天时SCF浓度与外周血CD34+细胞数呈直线相关(P<0.01)。结论AMI可引起外周血干细胞数量增多以及血清SCF浓度升高,但也许会消耗循环中有内皮功能或向内皮分化的细胞。这些干细胞数量的增多可能受SCF浓度的调节。     

间充质干细胞与肺疾病的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一类具有自我复制和多向分化潜能的成体干细胞,广泛分布于人及动物多种组织和器官中.文献报道MSC在体内能分化为气道及肺组织上皮细胞.本文着重阐述了MSC对肺疾病损伤的修复及其在肺疾病治疗中的应用前景和存在的问题.