CD34+细胞体外定向诱导分化的实验研究

目的:探讨造血生长因子不同组合方式对CD34+细胞体外定向诱导分化作用.方法:应用阴性分选策略,以StemsepTM系统从正常人骨髓细胞中分离CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC),在液体培养体系加入不同组合细胞因子对CD34+细胞进行诱导,检测细胞总数、CD71+细胞和CD15+细胞比例及粒单系祖细胞和红系祖细胞扩增数量.结果:液体培养体系中,以FL+Tpo+SCF+IL-3+Epo细胞因子组合对CD34+细胞向红系细胞的诱导分化能力最强,2w后CD71+细胞比例为61.20%±5.31%,BFU-E、CFU-E分别扩增27.12±3.95和30.65±40.26倍.以FL+Tpo+SCF+IL-3+GM-CSF+G-CSF细胞因子组合对CD34+细胞向粒系细胞的诱导分化能力最强,2w后CD15+细胞比例为56.18%±6.57%,CFU-GM扩增29.87±10.52倍.结论:合理组合生长因子,可定向诱导CD34+细胞生成大量血细胞,将有助于满足临床应用的需要.     

外周血造血干细胞最佳采集时机的快速判断方法

目的：探讨一种快速、简捷判断外周血造血干/祖细胞最佳采集时机的方法。方法:使用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪上的未成熟细胞信息(IMI)通道，对5例异基因外周血造血干细胞移植(Allo-PBSCT)的健康供者,在动员过程中采集外周血进行外周血造血祖细胞（HPC）检测。同时应用流式细胞术(FCM)和集落培养法分别对上述外周血中的CD34+ 细胞、粒-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）进行分析，动态监测外周血造血干/祖细胞(HSC/HPC)的变化。结果：HPC与CD34+ 细胞及CFU-GM呈良好的正相关，相关系数分别为0.82和0.85。动员后第4天HPC与CD34+ 细胞和CFU-GM同时明显上升，于动员后第5天同时达到高峰，但HPC较CD34+ 细胞和CFU-GM变化幅度大（5~20倍）。结论：Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪能快速简便地动态监测外周造血干/祖细胞的变化，为外周血造血干/祖细胞最佳采集时机的判断提供了一种快捷经济的参考方法。     

人参总皂甙和西洋参茎叶总皂甙对贫血小鼠造血影响的比较

目的观察人参总皂甙(Total saponin of Panax Ginseng, TSPG)和西洋参茎叶总皂甙(Panaxquinquefoliuml saponin, PNS)对贫血小鼠造血恢复的影响,并比较二者作用的异同.方法采用Co60照射﹑注射环磷酰胺、氯霉素复合造模建立贫血小鼠模型,应用全自动血球分析仪和造血祖细胞体外培养技术,检测外周血和三系造血祖细胞集落.结果 TSPG与PNS都可以促进贫血小鼠骨髓有核细胞(BMC)和红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HB)、血小板(PLT)的回升(P＜0.01或P＜0.05),;对白细胞总数(WBC),TSPG与PNS显示相反的作用,TSPG有较弱的提升WBC的作用(P＞0.05),PNS则抑制 WBC的回升(P＜0.05).在造血祖细胞体外给药培养中,TSPG在25～100μg/mL范围内对三系祖细胞增殖都有促进作用,对红系、巨核系最适刺激浓度是25μg/mL,对粒系的最适刺激浓度是50ug/mL.PNS浓度为50～100μg/mL时对红系、巨核系有促进作用,其中巨核系作用冒险(P＜0.01);25～50μg/mL时对粒系增殖没有明显影响,100μg/mL时则表现抑制作用(P＜0.05). 结论人参总皂甙和西洋参茎叶总皂甙都可以促进贫血小鼠造血功能的恢复,但其作用各有特点.     

人参总皂甙诱导人骨髓基质细胞表达GM-CSF的实验研究

目的：研究人参总皂甙(TSPG)对人骨髓基质细胞表达GM—CSF的影响及其与人粒单系血细胞发生的关系。方法：采用造血祖细胞与骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果：TSPG能显著刺激粒单系造血祖细胞(CFU—GM)增殖；经TSPG诱导制备的骨髓基质细胞条件培养液富含GM—CSF样活性；TSPG能显著促进骨髓基质细胞的GM—CSF蛋白和mRNA表达。结论：TSPG可能通过直接和/或间接途径促进造血诱导微环境中的骨髓基质细胞合成和分泌GM—CSF，进而促进CFU—GM的增殖分化。     

脐血CD34+细胞的体外扩增研究

目的:探讨造血生长因子不同组合方式对脐血CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC)的扩增作用.方法:应用StemsepTM阴性分选系统分离纯化CD34+细胞,在体外液体培养体系中经不同组合细胞因子进行扩增1～3w.结果:FL+Tpo+SCF+IL-3+GM-CSF+G-CSF+Epo组合的扩增效果最佳,可分别扩增细胞总数、造血祖细胞集落总数(CFCs)、CD34+细胞达1627.57±52.93、56.78±8.13、41.09±4.11倍.FL和Tpo具有明显的协同扩增早期祖细胞的作用,CFCs和CD34+细胞在1～2w维持在较高水平,以后逐渐衰退.结论:合理的细胞因子组合在大量扩增造血细胞的同时也有助于早期造血祖细胞的自我更新,把握适宜的扩增时机,将有助于扩增细胞在质和量上满足移植和基因治疗等的要求.     

昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响

目的 研究昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响.方法 制备并体外培养大鼠骨髓造血干/祖细胞、巨噬细胞;制备昆布多糖作用后的骨髓巨噬细胞条件培养液,测定培养液中造血生长因子促红细胞生成素(EPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)表达及活性;测定昆布多糖条件培养液作用后造血祖细胞的集落产率.结果 经昆布多糖诱导的骨髓巨噬细胞培养上清液可显著提高骨髓造血祖细胞的集落产率;经昆布多糖诱导后,骨髓巨噬细胞的EPO、GM-CSF和IL-3的表达增高.结论 昆布多糖可刺激骨髓巨噬细胞造血因子表达增高,从而促进髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)、红系祖细胞(CFU-E)、粒一单系造血祖细胞(CFU-GM)的增殖分化.     

外周血造血干细胞动员后采集时机的快速动态监测

目的 探讨一种简单、快速判断外周血造血干/祖细胞最佳采集时机的方法.方法 利用Sysmex XT 2000I多通道血细胞分析仪的VCS和化学染色技术,对9例异基因外周血造血干细胞(Allo-PBSCT)的健康供者和5例自体外周血造血干细胞(auto-PBSCT)患者,在动员过程中采集外周血进行外周血循环幼稚细胞(PBCIC)检测.同时应用流式细胞术(FCM)和集落培养法分别对上述外周血中的CD34 细胞、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)进行检测,观察三者之间的相关性.结果 PBCIC与CD34 细胞及CFU-GM呈良好的正相关,相关系数分别为0.789和0.877.健康供者干细胞动员后PBCIC的峰值出现于使用G-CSF后的第5～6天,PBCIC的变化幅度较CD34 和CFU-GM的变化幅度大.结论 利用Sysmex XT 2000I多通道血细胞分析仪检测PBCIC数能快速简便地监测外周血造血干/祖细胞的变化,为判断最佳采集时机提供了一种快捷简便的参考方法.     

体外诱导脐血造血细胞定向分化的研究

目的　探讨造血生长因子体外诱导脐血造血细胞向粒系细胞分化的能力。方法　从新鲜的脐血标本中分离的单个核细胞接种于含脐血血清和造血生长因子的IMDM培养液中悬浮培养 5周 ,采用有核细胞计数、免疫荧光染色计数和祖细胞集落测定对有核细胞总数、CD3 4+ 细胞和粒单系祖细胞进行动态检测。结果　用粒系集落刺激因子、粒单系集落刺激因子、干细胞因子、白介素 3和白介素 6培养脐血单个核细胞 3周 ,可以显著扩增有核细胞总数和CFU GM ,扩增倍数分别为培养前的 5 8 3倍和 12 2倍 ,且培养后的细胞以中性粒细胞为主。而CD3 4+ 细胞占细胞总数的比例则从 0 97%下降到 0 0 5 %。按照此培养条件 ,可以使单份新鲜脐血样本中有核细胞总数增加 ( 5 1± 2 3 )倍 ,CFU GM增加 ( 2 2± 0 95 )倍。结论　本培养体系在体外可以诱导脐血造血细胞向粒系定向诱导分化 ,从而增加单份脐血中粒单系祖细胞和粒细胞数量     

神经生长因子对正常和放化疗复合损伤小鼠粒-巨噬系血发生的影响

目的 探讨神经生长因子(NGF)对小鼠粒-巨噬系血细胞发生的影响.方法 采用流式细胞术、祖细胞集落分析、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测注射NGF对正常和经60Coγ射线照射 腹腔注射环磷酰胺(放化疗复合损伤)小鼠骨髓细胞(BMC)增殖周期、粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)产率、外周白细胞总数、骨髓细胞粒-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)mRNA的表达及血清中GM-CSF和IL-3浓度的影响.并观察在体外培养体系中加入不同浓度的NGF时CFU-GM集落产率的变化及与GM-CSF的关系.结果 在体外CFU-GM培养中,加入重组小鼠GM-CSF (rmGM-CSF)时,NGF剂量依赖性地提高集落产率.注射NGF[7.5 μg/(kg·d)或10 μg/(kg·d)]持续7 d,正常和放化疗复合损伤小鼠外周血白细胞总数、小鼠骨髓细胞中S G2/M期细胞比例、CFU-GM集落产率显著高于注射生理盐水的对照组;放化疗复合伤小鼠血清中的GM-CSF和IL-3也显著升高.结论 NGF可与体外培养体系中的造血刺激因子协同作用,促进正常和放化疗复合损伤小鼠CFU-GM的形成.NGF在体内可促进正常和放化复合损伤小鼠骨髓细胞进入有丝分裂,促进造血干细胞向粒-巨噬系方向分化,促进CFU-GM的形成,提高外周血白细胞数;NGF还可刺激放化疗复合损伤小鼠体内GM-CSF和IL-3的分泌,这可能是NGF促进放化疗复合损伤后粒-巨噬系造血恢复的途径之一.     

人参皂甙对K562细胞表面分化抗原及造血生长因子受体表达的影响

目的：进一步探讨人参皂甙(TSPG)诱导K562细胞分化的作用机制及了解K562细胞的生物学特点，为开发TSPG临床应用提供理论与实验依据。方法：采用形态学观察和流式细胞术等方法，研究TSPG在诱导K562细胞向较为成熟细胞分化过程中，对其表面分化抗原及造血生长因子受体表达的影响。结果：TSPG可诱导K562细胞向较成熟的红系、粒系细胞分化，作用后细胞表CDl5、HIR2、EPO-R和GM—CSF—R的阳性细胞率均有所升高。结论：K562细胞为分化受阻滞的异常造血祖细胞，其生物学特点与正常人多向造血祖细胞(CFU—Mix)相似；TSPG诱导K562细胞成熟分化的作用机理可能与TSPG促进K562细胞EPO-R、GM—CSF—R表达升高有关。     

中西医结合治疗难治性心衰34例——附西药对照组30例

在西药治疗的基础上,加用黄芪注射液和川芎嗪注射液、静脉滴注,治疗难治性心衰３４例,并与西药治疗的３０例相对照。结果表明：治疗组显效１１例,有效１９例,无效４例;对照组显效３例,有效１７例,无效１０例。治疗后在血液动力学、流变学方面,治疗组绝大多数指标均得到显著或极显著改善（Ｐ＜０．０５～０．０１）,对照组各项指标几无明显改善（Ｐ＞０．０５）。     

湖北产四种商品细辛的鉴别

对湖北产四种商品细辛的性状及显微特征进行了比较研究。并将其主要区别点列表说明。为湖北地区细辛的生产，销售及临床应用提供参考。     

阻抗心动图在临床及麻醉中的应用

阻抗心动图具有无创伤、简单、安全、重复性好、能连续观察等特点,为临床提供了新的心功能监测方法。本文简述了它的基本原理、波形的意义及在临床和麻醉中的应用。     

荞麦花叶总黄酮抗应激反应的实验研究

①目的研究荞麦花叶总黄酮（TFBFL）对小鼠抗急性应激反应的能力。②方法将小鼠随机分为正常对照组及TFBFL高、低剂量组。TFBFL组按40mg／（kg·d）和20mg／kg·d），灌胃给药7天，正常对照组灌胃等容量的去离子水。未次给药2小时，采用负重游泳法，观察游泳时间；常压耐缺氧和耐低温法，观察小鼠存活时间。③结果TFBFL能延长小鼠负重游泳时间，缺氧存活时闾及提高耐寒能力，TFBFL高剂量作用更为显著。④结论TFBFL具有明显的抗疲劳、耐缺氧、耐低温作用，可增加小鼠应激反应的能力。     

氯沙坦对大鼠动脉损伤后平滑肌细胞凋亡及Fas抗原及其配体的影响

①目的探讨氯沙坦对大鼠颈动脉损伤后平滑肌细胞凋亡和相关基因Fas抗原与Fas配体的影响及其对临床预防经皮冠状动脉成形术后再狭窄的可行性。②方法将42只雄性W istar大鼠,随机分为氯沙坦实验组(n=21)及对照组(n=21),实验动物均行左侧颈总动脉球囊剥脱损伤内皮模型,术后于不同时间段取损伤段血管,均进行苏木精-伊红染色及计算机图像分析;Tunnel标记法检测平滑肌细胞凋亡率;免疫组化法测定Fas抗原及其配体在血管壁中的表达。③结果对照组于术后第7、14天损伤血管壁面积增加,相同时间段内两组比较,结果氯沙坦实验组管壁增生程度较对照组显著降低(P(0.05);术后第7、14天氯沙坦实验组的细胞凋亡率显著高于对照组(P(0.05);管壁中Fas抗原、Fas配体的表达较对照组明显增加。④结论血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦可以通过Fas系统调节损伤段血管平滑肌细胞的凋亡而抑制新生内膜的形成。     

某化工总厂铅作业职业危害调查

本文通过对某化工总厂的劳动卫生学调查,探讨了铅对工人健康的危害及其浓度与危害之间的关系。发现作业场所铅尘浓度最高达44.37mg/m~3。超过国家规定的卫生标准886.4倍。平均超标率为84.21％。34名工人尿铅均值为0.116mg/L,超标率为61.76％。铅中毒检出率为22.22％。铅吸收检出率为8.33％。结果表明:(1)尿铅含量与接触空气铅浓度高低有关。铅作业工令越长,铅中毒检出率越高。(2)慢性铅吸入对血压影响不明显。(3)该厂铅危害是比较严重的,在县以下工厂企业中具有一定的代表性,应引起足够的重视。     

急性肾功能衰竭344例的病因及死因分析

本文将我院1963年至1983年所收治的344例急性肾功能衰竭患者的病因及死因进行分析。病例选择系按全国危重病急救医学学术会议拟定的标准进行。但本组包括肾前及肾后病因在内。344例中肾前性7例(2%),死亡5例,病死率为71.43%;肾性331例(96.2%),死亡60例,病死率为18.1%;肾后性5例(1.5％),原因不明者1例(0.3%),后二者无死亡。引起急性肾功能衰竭的原发病以流行性出血热居首位(占68.9%),与全国危重病急救医学学术会议报告一致,但百分率却高于前者,此与嘉陵江流域系黑线姬鼠的自然分布区有关。鱼苦胆中毒居次位,共53例(15.4%)。败血症等感染居第三位共23例(6.7%),但为本组的主要死因之一。本文着重讨论了败血症等感染性休克时引致急性肾功能衰竭的发生机理和近代观点,并总结经验教训。本组结果显示死亡病例中大多数死于少尿期,故强调早期透析和预防性透析对改善预后和降低死亡率的重要意义。如无血透条件则腹膜透析操作易于掌握、安全有效,无绝对禁忌症,值得推广。     

广东省揭阳县胃癌流行病学调查

揭阳县1981-1990年死于胃癌共3991人，累计人口数13233148人，年平均死亡率30.15/10万，中国人口标化死亡率29.55/10万；世界人口标化死亡率39.82/10万。10年中男性死亡数2894人，年平均死亡率42.15/10万，中国人口标化死亡率49.74/10万，世界人口标化死亡率67.32/10万。女性年平均死亡率17.22/10万，中国人口标化死亡率14.17/10万，世界人口标化死亡率19.32/10万，男多于女，比例2.4:1，死亡率随年龄增长而升高；死亡多为农民，占91.0%；死亡的地区分布，平原高于丘陵地带。     

羊心室肌细胞的聚类分析

光学显微镜下观测了常规制作的羊心室组织标本中,33个心室肌细胞的各种形态学参量。应用模糊聚类分析对所观察的心肌细胞进行了软分类。作者认为,目前将心室肌分为:束细胞、兼性心肌,准工作心肌和终末工作心肌细胞四类更为适宜。对形态学观察及数学分析结果的生理学意义作了简要的讨论。     

孕妇巨细胞病毒不同感染形式对母婴免疫状态的影响

①目的 探讨孕妇巨细胞病毒（CMV）不同感染形式对母婴免疫状态的影响.②方法 对门诊产前检查的孕妇行CMV血清IgG和IgM筛查,对IgG（＋）和/或IgM（＋）者分娩前采集孕妇静脉血,检测CMV IgM抗体.根据检测结果分为原发感染组、复发感染组和对照组.各组新生儿出生后采集脐静脉血,检测CMV IgM抗体.各组孕妇及新生儿检测免疫学指标IL-2、IFN-γ和IL-4.③结果 原发感染组孕妇与对照组相比IL-2、IL-4显著降低（P＜0.05）;原发感染组新生儿与对照组相比IL-2水平显著降低;垂直传播组新生儿IL-2、IFN-γ和IL-4水平均显著低于对照组（P＜0.05）.④结论 孕妇CMV原发感染可降低其机体的免疫力;新生儿先天感染及其母亲原发感染CMV可使其免疫状态受到抑制.