大鼠实验性肺鳞癌癌变各阶段环氧化酶-2表达及微血管密度的动态研究

背景与目的:近期研究表明,环氧化酶-2(COX-2)参与了肿瘤的发生与发展,在多种肿瘤组织中已检测到COX-2高表达,但它在癌前病变、转移癌中的表达报道较少,在体内它与肿瘤血管生成的关系也尚待证实。本研究检测COX-2在大鼠肺鳞癌癌变进展各阶段病变组织中的表达,探讨COX-2表达与微血管密度(MVD)的关系及应用抑制COX-2表达的非甾体类抗炎药防治肺鳞癌的可能性。方法:Wistar大鼠90只,实验组80只左肺叶支气管灌注致癌质碘油,分批处死获取肺鳞癌癌变及进展各阶段病变标本,对照组10只左肺叶支气管灌注碘油。应用免疫组化检测癌变及进展各阶段病变组织中及10例正常对照组织中COX-2表达,结合COX-2阳性细胞百分比及阳性细胞染色强弱两个方面计算COX-2免疫组化染色评分。在VonWillebrandfactor免疫组化染色切片上计数MVD。结果:共获取肺鳞癌癌变及进展各阶段病变标本147例:支气管粘膜增生14例,鳞状化生25例,不典型增生33例,原位癌12例,浸润癌54例,转移癌9例。不典型增生COX-2表达评分(2.1±1.9)与鳞状化生(0.6±0.9)相比,原位癌(3.7±2.4)与不典型增生相比,转移癌(5.6±3.6)与浸润癌(3.9±2.7)相比,评分增高,差异有显著性意义(P值依次为<0.01,<0.05,<0.05)。原位癌MVD值(31.7±13.3)与不典型增生(6.2±4.0)相比,浸润     

大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组甲基化水平动态研究

背景与目的:研究大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平动态变化趋势.材料与方法:支气管灌注3-甲基胆蒽(MCA)及二乙基亚硝胺(DEN)碘油溶液诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型.采用免疫组化法检测大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平,利用图像分析系统测量其平均光密度值和积分光密度值.结果:经支气管灌注MCA及DEN碘油溶液,诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型,共获取癌变各阶段标本154例,其中增生25例,鳞状化生组织27例,不典型增生组织37例,原位癌组织30例,浸润癌组织25例.大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平按上述顺序呈递减的趋势,癌变各阶段甲基化水平与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.01),正常和癌变支气管上皮基底层甲基化水平高于腔细胞层,差异亦具有统计学意义(P＜0.01).结论:大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组DNA甲基化水平的降低,可能是介导其癌变的重要表遗传学机制.     

LncRNA FENDRR通过调控ERK/MAPK影响肺鳞癌H226细胞增殖、迁移和凋亡

目的 探讨lncRNA FENDRR对肺鳞癌细胞H226的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。方法 qRT-PCR检测肺正常上皮细胞BEAS、肺腺癌细胞A549、H1299和肺鳞癌细胞H226中FENDRR的表达水平。将H226细胞分为FENDRR-siRNA组和FENDRR-siNC阴性对照组;CCK-8法检测细胞增殖活力,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达。结果 与肺正常上皮细胞相比,肺鳞癌细胞H226中FENDRR水平明显下降。下调肺鳞癌细胞H226中FENDRR的表达后,p-MEK和p-ERK蛋白表达水平显著增多,H226细胞增殖活力、迁移及侵袭能力显著增加,细胞凋亡率明显降低。加入ERK抑制剂U0126能逆转FENDRR表达下调对H226细胞的作用。结论 低表达FENDRR后,可以通过ERK/MAPK信号通路,促进H226细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡。     

鼻咽癌癌变过程中EBERs表达状况的研究

本文采用重组质粒ｐＳＰ６５（带有ＥＢＥＲｓ的基因）体外转录合成的地高辛标记的单链反义ＲＮＡ探针，用原位杂交方法检测处于癌变不同阶段的鼻咽活检组织中ＥＢＥＲｓ的表达状况。ＥＢＥＲｓ检出率为：鼻咽癌（２３／２４），正常鼻咽组织，慢性炎症增生及单纯性增生和化生（０／３０），异型增生和化生（５／８），头颈部其它肿瘤（０／５），鼻咽癌颈淋巴结转移灶（１／１），进一步证明：（１）ＥＢＶ与ＮＰＣ密切相关；（２）     

检测鳞癌相关抗原对肺鳞癌的临床意义

鳞癌相关抗原（ＳＣＣ－Ａｇ）是肿瘤相关抗原（ＴＡ－４）的提纯成分。本文对１４０例肺癌（鳞癌９６例、腺癌２５例、小细胞癌１１例及大细胞癌８例）和４２例良性病变（对照组）进行ＳＣＣ－Ａｇ检测。肺鳞癌阳性率为６６．７％、肺腺癌为１６％，小细胞肺癌为１８．２％、大细胞肺癌为１２．５％，良性病变仅２．４％。ＳＣＣ－Ａｇ阳性率与肺鳞癌分期呈正相关，Ⅰ期为２２．２％、Ⅱ期为５５．６％、Ⅲ期为７４．６％、Ⅳ期为８３．３％。因此ＳＣＣ－Ａｇ是肺鳞癌较特异的标记物。通过手术前后动态观察发现，根治性切除术后ＳＣＣ－Ａｇ在７２小时内转阴，有极显著性差异（Ｐ＜０．０１），而姑息性切除术或探查术者，术后仍高于正常值，因此可早期预测手术效果。术后复发或转移时该抗原复又回升，且早于临床表现，在无转移或复发时，该抗原持续稳定在低于正常水平。     

增殖细胞核抗原和细胞凋亡表达在中晚期食管鳞癌的预后意义

探讨增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）和细胞凋亡表达中晚期食管鳞状上皮细胞癌的预后意义。方法应用微波炉加热修复抗原方法和链霉菌素－生物素免疫亲和酶技术行ＰＣＮＡ抗原染色，用末端脱氧核苷酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法进行原位凋亡染色。     

大鼠肺鳞癌caspase-3基因表达水平与其细胞增殖关系的研究

目的　探讨caspase 3在大鼠肺鳞癌癌变转化过程中的表达及其与细胞增殖的关系。方法　Wistar大鼠 60只 ,其中 5 0只用化学致癌物 3 甲基胆蒽 (MCA)及二乙基亚硝胺 (DEN)碘油溶液于左肺叶支气管灌注诱发大鼠肺鳞状细胞癌 ,10只作为对照。应用免疫组织化学S P法检测促凋亡基因caspase 3和增殖细胞核抗原 (PCNA)在癌变过程中的表达。结果　 3 4例大鼠肺鳞癌中 15例 (4 4 .12 % )有caspase 3的阳性表达 ,阳性系数为 1.3 8± 0 .95 ,均显著低于对照组大鼠支气管粘膜上皮细胞 (P =0 .0 0 7,P <0 .0 1)和癌前病变 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。对照组大鼠支气管粘膜上皮区、实验组大鼠癌前病变区与肺癌区PCNA的平均增殖指数 (PC NA LI)分别为 :14 .10± 5 .0 2、2 8.13± 8.72、41.88± 14 .2 4,两两比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。Caspase 3与PCNA LI呈显著负相关 (r =-0 .73 0 6,P <0 .0 1)。结论　Caspase 3失表达促进了肿瘤细胞的生长 ,可能在大鼠肺鳞癌的发生发展中起着重要的作用。联合检测caspase 3和PCNA蛋白可作为肺鳞癌癌变的主要参考指标。     

大鼠肺鳞癌发生发展过程中肿瘤血管生成及血液供应研究

目的　探讨肺癌发生发展过程中肿瘤血管生成和血液供应 ,以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体Flk 1与肿瘤血管生成的关系。方法　 10 0只Wistar大鼠左肺下叶支气管灌注致癌质碘油 ,分批处死获取肺鳞癌癌变及进展期病变标本 ,使用油画颜料染成黄、绿两种颜色的液态硅橡胶分别灌注支气管动脉与肺动脉 ,免疫组化检测病变组织中VEGF、Flk 1的表达及vWF染色切片上的微血管密度 (MVD)。结果　经支气管动脉灌注黄色液态硅橡胶显示 ,肿瘤病灶呈黄色的新生血管团与曲张的支气管动脉相连通 ,镜下见癌巢间质肿瘤微血管腔充盈硅橡胶颗粒 ;经肺动脉灌注绿色液态硅橡胶 ,肿瘤区绿色的血管呈不连续的枯树枝、断枝、残枝状 ,与肿瘤血管不连续 ,镜下肿瘤微血管腔无硅橡胶颗粒。原位癌的MVD计数 ( 3 9.5 0± 12 .60 )与不典型增生 ( 8.92± 3 .80 )及侵袭癌 ( 61.0 5± 19.92 )比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。从支气管粘膜上皮增生→鳞状化生→不典型增生→原位癌→侵袭癌 ,VEGF和Flk 1阳性系数逐渐升高。MVD与VEGF和Flk 1表达均呈正相关 (r分别为 0 .9798和 0 .90 78,P <0 .0 0 5 )。结论　肺癌新生血管形成是大鼠肺鳞癌发生发展的重要现象 ,新生的肿瘤血管与支气管动脉相连通 ,与肺动脉不相连通 ,证明肺鳞癌发生     

肺鳞癌患者淋巴转移相关基因的筛选

背景与目的筛选肺鳞癌患者淋巴转移差异表达基因群。方法原发癌组织及区域淋巴结取自10例接受根治性手术的肺鳞癌患者。根据组织来源将标本分为三组:不伴     

食管癌细胞凋亡和增殖细胞核抗原的表达及其意义

目的 探讨食管癌细胞凋亡和增殖细胞核抗原的表达及其临床意义。方法 采用原位ＤＮＡ末端标记法和免疫组化法分别检测７０例食管鳞癌的细胞凋亡和增殖细胞核抗原的表达情况,计算出凋亡指数和增殖指数。结果 凋亡指数及其与增殖指数的比值与肿瘤的病理分级和淋巴垄转移密切相关（Ｐ〈０．０５）。结论 食管癌的发生发展与细胞凋亡的增殖失控有关。     

胃粘膜上皮异型增生细胞增殖活性及凋亡与幽门螺杆菌感染的关系

背景与目的:异型增生是胃癌的癌前病变,但其癌变机制目前仍不清楚,本文通过对异型增生自然转归过程中细胞增殖活性和凋亡变化及幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染状态的研究,探讨二者之间的关系及其对异型增生癌变的影响。方法:取12例正常胃粘膜(对照组)和105例有随访结果的胃粘膜异型增生胃镜活检标本〔其中高度异型增生35例(癌变30例、未癌变5例);低度异型增生70例(癌变18例、未癌变52例)〕。全部标本均采用TUNEL(terminaldeoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling)法检测凋亡情况;采用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)表达情况;采用多聚酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)检测HP及其CagA(+)株感染状况。结果:异型增生的HP感染率为84.76%,与对照组的83.33%相比差异无统计学意义,但CagA(+)株感染率为85.39%,高于对照组的60.00%。HP(+)和CagA(+)病例的增殖指数分别较HP(-)和CagA(-)为高(P<0.05),异型增生中PCNA的异常与HP及CagA(+)株感染有关(P<0.05)。凋亡/增殖比的变化与Hp的CagA(+)株感染有关(P<0.05)。结论:胃粘膜异型增生的形成及其自然转归过程中,异型增生的细胞动力学异常与HP、CagA(+)株感染有关。     

细胞增殖和凋亡在宫颈癌放疗中的预后价值

目的　研究增殖和凋亡在放射治疗宫颈癌中的预后价值。方法　回顾性分析了４０ 例放疗未控和根据临床病理因素与之配对的４０ 例放疗治愈的ⅡＢ～ⅢＢ 期宫颈鳞癌患者的细胞增殖和凋亡情况。以免疫组化ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ） ,凋亡细胞用末端转移酶（ＴｄＴ） 介导的脱氧核苷酸切口及末端标记法（ＴｄＴｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｉｏｔｉｎｄＵＴＰｎｉｃｋ ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ,ＴＵＮＥＬ）进行检测。结果　放疗治愈组的ＰＣＮＡ为５．３８ ±３．２１ ,未控组为７ ．５０ ±３．１６（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;治愈组每１０ 个高倍视野下的有丝分裂细胞数为６．３３±５．１５,未控组为１１ ．３３ ±７．５０（ Ｐ＜ ０ ．００１） ;治愈组每１０ 个高倍视野下的凋亡细胞数为２０．９０±８．１９,未控组为２７ ．１３±１７ ．２８（ Ｐ＜ ０．０５）;凋亡细胞数与分裂细胞数之比值（Ａ／Ｍ） 治愈组为４ ．９７ ±３．３１,未控组为３．３６±２．８３（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论　ＰＣＮＡ、凋亡细胞数以及Ａ／Ｍ 可作为预测放射治疗宫颈癌预后的新指标     

细胞周期蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系

背景与目的:细胞周期蛋白(Cyclins)在许多肿瘤中过度表达,但其在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的表达情况及与细胞增殖和凋亡的关系研究甚少,本研究旨在通过检测原发性HCC中细胞周期蛋白、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达和细胞凋亡的情形,探讨它们之间的相互关系。方法:应用组织芯片技术,采用SP免疫组织化学方法检测122例HCC组织中CyclinsA、B1、D1、E和PCNA表达,应用原位脱氧核糖核酸末端转移酶(in situterminal deoxyribonucleotide transferase,ISTdT)标记技术检测细胞凋亡的情况。结果:122例HCC组织中,CyclinA的阳性率为50.0%,CyclinB1为47.5%,CyclinD1为42.6%,CyclinE为35.2%;组织学分级为Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的HCC组织Cyclins表达高于Ⅰ级(P﹤0.05);HCC组织中组织学分级为Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的凋亡细胞密度均低于Ⅰ级(P﹤0.05),分化愈差,凋亡细胞密度愈低;HCC组织中组织学分级为Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的PCNA评分高于Ⅰ级(P﹤0.01),分化愈差,PCNA评分愈高;HCC组织中Cyclins蛋白表达与凋亡细胞密度呈负相关(r=-0.686,P<0.01),与PCNA评分呈正相关(r=0.599,P<0.01),HCC组织中凋亡细胞密度与PCNA评分呈负相关(r=-0.701,P<0.01)。结论:Cyclins在肝细胞癌组织中呈不同程度     

口腔鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的相关性研究

目的：通过观察口腔鳞癌中细胞增殖和细胞凋亡之间的关系,探讨细胞凋亡在口腔鳞癌发生中的作用。方法：利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术及增殖细胞核抗原（PC—NA）免疫组织化学染色,对69例（维族36例、汉族33例）口腔鳞癌中的凋亡细胞和增殖细胞进行原位观察和比较。结果：口腔鳞癌不同组织学分级比较,高分化口腔鳞癌与中低分化口腔鳞癌之间增殖指数及凋亡指数均有显著性差异（P〈0．05）,不同部位的口腔鳞癌其增殖指数无显著差异,而舌癌组凋亡指数低于唇癌组和牙龈癌组（P〈0．05）,增殖指数与凋亡指数在口腔鳞癌中呈负相关关系（r=-0．663,P〈0．05）。结论：口腔鳞癌癌变过程不仅存在活跃的细胞增殖,而且存在细胞凋亡之异常,细胞增殖和细胞凋亡平衡失调在舌癌发病中可能起重要作用。     

喉鳞癌组织中FHIT表达与细胞增殖、转移的关系

背景与目的:脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)基因定位于染色体3pl4.2,跨越大多数人类基因组的共同脆性部位FRA3B,为一候选的抑癌基因,在包括头颈部鳞状细胞癌在内的许多人类恶性肿瘤中都存在FHIT基因的异常。本研究的目的为探讨喉鳞癌(laryngealsquamouscellcarcinoma,LSCC)组织中FHIT基因蛋白的表达及其与肿瘤细胞增殖与转移的关系。方法:采用免疫组化S法,检测41例喉鳞癌组织及其相对应的喉切缘非癌组织中FHIT、PCNA的表达。结果:非癌组织和喉鳞癌组织中,FHIT阳性率分别为100%(41/41)和46.3%(1941)(P<0.01)。喉鳞癌中,在TNM分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期组,FHIT阳性率分别为69.6%和16.7%;淋巴结转移阳性和阴性组分别为20.0%和61.5%。以上两组比较均有显著性差异(P<0.05)。非癌和喉鳞癌组织中,PCNA标记指数分别为(9.98±2.34)%和(50.71±13.64)%,两者有极显著性差异(P<0.01)。喉鳞癌中,FHIT与PCNA表达有明显的负相关关系(P<0.05)。结论:FHIT低表达与喉鳞癌细胞增殖及淋巴结转移有关。     

大肠癌组织中PCNA表达和细胞凋亡检测的临床意义

目的：探讨大肠癌组织中细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）表达的临床意义。方法：应用免疫组化S－P法及TUNEL法对10例正常大肠黏膜和62例大肠癌组织中细胞增殖指数（PI）及凋亡指数（AI）进行检测，分析其与临床病理因素的关系。结果：在正常大肠黏膜和大肠癌组织中，PI逐渐增加，AI逐渐下降，两者比较有非常显著性差异（P＜0．01），随着大肠癌Dukes分期升高，PI逐渐增加，AI逐渐下降；与癌组织分化程度和淋巴结转移有关（P＜0．01），对这2种指标进行综合分析显示，PI增高而AI降低组，较其它异常结合模式组更易发生淋巴结转移。结论：细胞增殖与凋亡平衡失调的程度与大肠癌恶性程度密切相关，PI增高同时有AI降低者更易发生淋巴结转移，两者联合检测对大肠癌的临床分析及预后评价有重要意义。     

成人型喉乳头状瘤中PCNA的表达及意义

目的探讨细胞增殖活性与成人型喉乳头状瘤生物学行为的关系。方法４２例手术及活检标本，分为四组：正常喉粘膜组（ｎ＝５）、喉乳头状瘤组（ｎ＝２１）、喉乳头状瘤伴不典型增生组（ｎ＝９）及喉乳头状瘤癌变组（ｎ＝７），应用抗增殖细胞核抗原（抗ＰＣＮＡ）单克隆抗体ＰＣ１０，采用ＡＢＣ免疫组织化学染色技术，评价其细胞增殖活性。结果经ＰＣＮＡ阳性反应计算出的ＰＣＮＡ增殖指数分别为３．８５０±０．６３６％、８．５８８±１．４０９％、１１．２２０±１．６０２％、１６．８１７±２．８９９％，各组间经统计学分析有差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＰＣＮＡ表达可作为喉部良、恶性病变的鉴别，检测癌前病变及观察肿瘤生物学行为较好的参考指标。     

消化道平滑肌肿瘤增值细胞核抗原表达及其诊断价值

应用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学方法，研究了其在消化道平滑肌肿瘤中的表达。结果良性肿瘤的ＰＣＮＡ平均指数为６．７％，交界性肿瘤为１２．１２％，恶性肿瘤为３２．１９％。良性肿瘤与交界性肿瘤比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５），交界性肿瘤与恶性肿瘤比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。核分裂相与ＰＣＮＡ表达是相关性（ｒ＝０．７８５，Ｐ＜０．０００５），肿瘤大小与ＰＣＮＡ表达是相关性（ｒ＝０．４９６，Ｐ＜０．００２５）。结果提示ＰＣＮＡ染色有助于消化道平滑肌瘤的正确诊断。