巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞抗氧化能力的影响

越来越多的实验结果证实巨噬细胞集落刺激因子在动脉粥样硬化发生过程中的重要作用，为了探讨巨噬细胞集落刺激因子和活性氧与动脉粥样硬化之间的相互关系，观察了巨噬细胞集落刺激因子对培养的小鼠腹巨噬细胞抗氧化酶活性的影响。结果发现巨噬细胞集落刺激因子能使小鼠腔巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性提高３２％，超氧化歧化酶的活性提高１２０％，并减轻叔丁基氢过氧化物促巨噬细胞源性泡沫细胞形成，以及提高巨噬细胞的生存数。     

巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体途径和细胞内胆固醇酯积聚的影响

为探索巨噬细胞集落刺激因子、清道夫受体、氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的关系，观察了重组人巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体途径的影响以及重组人巨噬细胞集落刺激因子对氧化型低密度脂蛋白所致细胞内胆固醇酯积聚的影响．结果发现重组人巨噬细胞集落刺激因子能增加培养的小鼠腹腔巨噬细胞表面的清道夫受体数目，使之对氧化型低密度脂蛋白的结合和降解呈现剂量和时间依赖性增加，并使细胞内胆固醇酯积聚增多．表明巨噬细胞集落刺激因子可通过增加清道夫受体数目使小鼠腹腔巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白的结合和降解增多，从而增加细胞内胆固醇酯含量，促进动脉壁内泡沫细胞形成．     

巨噬细胞集落刺激因子对RAW264.7细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性及其基因表达的影响

为探讨巨噬细胞集落刺激因子抗单核巨噬细胞过氧化损伤的机理 ,以富含巨噬细胞集落刺激因子的L92 9细胞条件培养基作为细胞因子来源 ,采用酶活性测定、反转录聚合酶链反应等技术 ,研究了巨噬细胞集落刺激因子对小鼠巨噬细胞系RAW2 6 4.7细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性及mRNA表达的影响。结果发现 ,巨噬细胞集落刺激因子可以提高RAW2 6 4.7细胞硒谷胱甘肽过氧化物酶及非硒谷胱甘肽过氧化物酶活性 ,并增强RAW2 6 4.7细胞血浆谷胱甘肽过氧化物酶mRNA的表达 ,而对RAW2 6 4.7细胞磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶的表达无诱导作用     

巨噬细胞集落刺激因子对RAW264.7细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性及其基因表达的影响

为探讨巨噬细胞集落刺激因子抗单核巨噬细胞过氧化损伤的机理,以富含巨噬细胞集落刺激因子的Ｌ９２９细胞条件培养基作为细胞因子来源,采用酶活性测定、反转灵聚合酶链反应等技术,研究了巨噬细胞集落刺激因子对小鼠巨噬细胞系ＲＡＷ２６４．７细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性及ｍＲＮＡ表达的影响。结果发现,巨噬细胞集落刺激因子可以提高ＲＡＷ２６４．７细胞硒谷胱革肽过氧化物酶及非硒谷胱甘肽过氧化物酶活性,并增强ＲＡＷ２６４     

巨噬细胞集落刺激因子在动脉粥样硬化发生中的作用

动脉粥样硬化斑块损伤处可见巨噬细胞集落刺激因子表达增强，巨噬细胞集落刺激因子能通过调节核－巨噬细胞的一系列功能，影响胆固醇代谢，抑制高胆固醇血症家兔泡沫细胞形成及减少主动脉斑块面积。巨噬细胞集落刺激因子与氧化修饰低密度脂蛋白关系密切，二者可以相互作用，共同影响着动脉粥样硬化的进程。     

巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体途径和细胞内胆固醇酯积聚的影响

为探索巨噬细胞集落刺激因子，清道夫受体、氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的关系，观察了重组人巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体途径的影响以及重组人巨细胞内胆固醇酯积聚的影响。结果发现重组人巨噬细胞集落刺激因子能增加培养小鼠的腹腔巨噬细胞表面的清道夫受体数目，使之对氧化型低密度脂蛋白的结合和降解呈现剂量和时间依赖性增加，并使细胞内胆固醇酯积聚增多。     

巨噬细胞集落刺激因子对RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9分泌的影响

目的探讨巨噬细胞集落刺激因子致动脉粥样硬化作用是否与其影响基质金属蛋白酶表达和活性有关。方法应用酶谱法观察巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9活性的影响;逆转录聚合酶链反应检测巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9 mRNA表达的影响。结果与对照组相比,不同浓度(100、250和500μg/L)巨噬细胞集落刺激因子能增强RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9的活性,并呈一定的剂量依赖性;同时,250μg/L巨噬细胞集落刺激因子可增强RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9 mRNA表达。结论巨噬细胞集落刺激因子可诱导RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9的表达,并可能通过这一机制影响动脉粥样硬化斑块的稳定性。     

粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子对人内皮细胞基质金属蛋白酶分泌及活性的影响

为探讨粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子对人内皮细胞基质金属蛋白酶分泌及活性的影响，体外培养人脐静脉内皮细胞，分别应用蛋白印迹法和酶谱法检测基质金属蛋白酶2的含量和活性。结果发现，与对照组相比，不同浓度(5、25和50μg/L)粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子可使人内皮细胞基质金属蛋白酶2的蛋白表达和活性增强，且随粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子剂量增加而增强。提示粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子可通过刺激人内皮细胞基质金属蛋白酶2蛋白的表达，并增强其活性，促进内皮细胞对细胞外基质的降解，从而易于动脉粥样硬化斑块内炎性细胞的渗入，内皮细胞的迁移及新血管的形成，从而对斑块的稳定性产生影响。     

芥菜籽提取物抗氧化及下调巨噬细胞清道夫受体CD36

目的 探讨芥菜籽提取物抗氧化、调节CD36的表达及预防动脉粥样硬化的作用.方法 将C57/BL6小鼠随机分为对照组和芥菜籽组,分别经腹腔给予1.5％的生理盐水、1.5％芥菜籽提取物溶液,连续3天,第4天停止注射,第5天经眼眶取血并处死老鼠,取腹腔巨噬细胞培养.将培养的巨噬细胞给予氧化型低密度脂蛋白刺激,观察腹腔巨噬细胞氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞呼吸爆发和脂质过氧化物含量,清道夫受体CD36表达水平以及中性脂肪蓄积情况,并观察血浆超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量.雄性载脂蛋白E-/-小鼠30例,随机分为对照组、高脂组和高脂+7.5％芥菜籽组进行饲养,25周后处死,分离并观察主动脉脂质斑块面积.结果 芥菜籽提取物明显增加机体血浆超氧化物歧化酶水平和降低脂质过氧化物水平;降低氧化型低密度脂蛋白诱导的呼吸爆发;降低氧化型低密度脂蛋白诱导的脂质过氧化物升高及CD36的表达水平,减少细胞中性脂肪蓄积泡沫细胞形成;降低高脂引起的脂质斑块面积.结论 芥菜籽提取物可有效地提高机体的抗氧化能力,提高巨噬细胞的抗氧化性,减少脂质的摄取,预防动脉粥样硬化早期病变.     

云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞锰超氧化物歧化酶基因表达的调控

为揭示云芝多糖抗动脉粥样硬化的作用与细胞抗氧化酶的关系,采用酶活性测定、斑点杂交等方法,探讨了云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞锰超氧化物歧化酶基因表达的影响。结果发现,腹腔注射云芝多糖可以提高小鼠腹腔巨噬细胞的总超氧化物歧化酶活性,从２２３．７±２９．１提高至３５６．１±９．３ｋｕ／ｇ,并使其锰超氧化物歧化酶ｍＲＮＡ含量增加;应用ＡｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎＤ、Ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ和Ａｃｅｔｏｖａｎｉｌｏｎｅ等阻断剂的研究发现,云芝多糖对巨噬细胞锰超氧化物歧化酶表达的影响发生在转录水平,而且某种新蛋白的合成可能参与了诱导过程。此结果提示,云芝多糖提高抗氧化酶活性,增强细胞抗氧化损伤的能力,可能是云芝多糖抗动脉粥样硬化作用机制之一。     

巨噬细胞集落刺激因子对DEL细胞增殖作用的研究

目的 研究巨噬细胞集落刺激因子对动脉粥样硬化病变处伴随血管平滑肌细胞共同积聚的巨噬细胞的增殖作用及机制。方法 以能分化为巨噬细胞表型的ＤＥＬ细胞为离体细胞实验模型。将富含巨噬细胞集落刺激因子的１９２９细胞条件培养液或重组的人巨噬细胞集落刺激因子加入体外培养的处于静止期的ＤＥＬ细胞,以氚标胸腺嘧啶核苷或５－溴－悄嘧啶 核苷掺入法分别检测ＤＥＬ细胞ＤＮＡ的合成,另以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测ＤＥ     

巨噬细胞集落刺激因子与脑缺血

在中枢神经系统内，巨噬细胞集落刺激因子主要由星形细胞产生，发育期的大脑皮质神经元和小脑质细胞表达巨噬细胞集落刺激因子的受体，在脑缺血时，中枢神经系统的巨噬细胞集落刺激因子及其受体的表达均上调，补充外源性巨噬细胞集落刺激因子可明显减轻缺血性脑损伤，推测这种缺血保护作用是通过巨噬细胞集落刺激因子与受体介导的信号传导途径以及与其他因子的相互作用实现的。     

溶血卵磷脂对载脂蛋白E基因缺陷小鼠腹腔巨噬细胞源泡沫细胞胆固醇外流的影响

以载脂蛋白E基因缺陷小鼠腹腔巨噬细胞源泡沫细胞为研究对象，观察溶血卵磷脂对泡沫细胞胆固醇外流的影响以及初步探讨其机制。分离正常及载脂蛋白E基因缺陷小鼠腹腔巨噬细胞，以乙酰化低密度脂蛋白负载形成巨噬细胞源泡沫细胞，分别以溶血卵磷脂及载脂蛋白AI作为诱导物，观察其胆固醇外流情况。结果发现，溶血卵磷脂能引起正常组小鼠腹腔巨噬细胞源泡沫细胞胆固醇外流，且呈剂量效应关系，但载脂蛋白E基因缺陷小鼠组未明显胆固醇外流；载脂蛋白AI能引起两组胆固醇外流，且外流量显著高于溶血卵磷脂。结果提示，溶血卵磷脂能促进巨噬细胞源泡沫细胞胆固醇外流，可能主要是通过载脂蛋白E途径来进行。     

低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和一氧化氮释放的影响

目的 探讨低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和一氧化氮释放的影响。方法 密度梯度超速离心从新鲜人血浆分离天然低密度脂蛋白，与抗低密度脂蛋白抗血清IgG组分制备低密度脂蛋白免疫复合物，低密度脂蛋白免疫复合物与小鼠腹腔巨噬细胞孵育后采用酶荧光法检测细胞胆固醇酯含量，进行细胞形态学观察和组织化学分析．并用硝酸还原酶法测定细胞释放至培养基中的一氧化氮量。结果 低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地诱导巨噬细胞内胆固醇酯的大量堆积，其效应显著强于氧化型低密度脂蛋白（P〈0．01）。经低密度脂蛋白免疫复合物处理的巨噬细胞呈典型泡沫细胞状，与猩红强染色，而天然低密度脂蛋白、抗低密度脂蛋白IgG处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的蓄积。此外，低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地抑制巨噬细胞一氧化氮的分泌。结论 低密度脂蛋白免疫复合物不仅通过致小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化，也通过损伤巨噬细胞分泌一氧化氮的功能参与致动脉粥样硬化作用。     

巨噬细胞与动脉粥样硬化

巨噬细胞能吞噬病原体和激活白细胞,保护机体抵御感染,同时巨噬细胞能摄取脂蛋白,在细胞内聚积脂质,形成泡沫细胞,释放不同的酶、催化剂、抑制剂和生物活性介质,在动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有重要作用。抑制巨噬细胞源泡沫细胞中脂质聚积、减轻炎症反应可能有动脉粥样硬化预防、治疗价值。     

巨噬细胞集落刺激因子与脑缺血

在中枢神经系统内 ,巨噬细胞集落刺激因子主要由星形细胞产生。发育期的大脑皮质神经元和小胶质细胞表达巨噬细胞集落刺激因子的受体。在脑缺血时 ,中枢神经系统的巨噬细胞集落刺激因子及其受体的表达均上调 ,补充外源性巨噬细胞集落刺激因子可明显减轻缺血性脑损伤 ,推测这种缺血保护作用是通过巨噬细胞集落刺激因子与受体介导的信号传导途径以及与其他因子的相互作用实现的。     

云芝多糖对受氧化型低密度脂蛋白攻击的小鼠腹腔巨噬细胞泡沫样变性及衰减的影响

以氧化修饰低密度脂蛋白攻击小鼠腹腔巨噬细胞为损伤模型，观察了云芝多糖对巨噬细胞泡沫样变性及衰减的影响的时效和量效关系。腹腔注射云芝多糖的小鼠腹腔巨噬细胞在体外与１０、５０、１００ｍｇ·Ｌ－１等三种浓度的氧化型低密度脂蛋白共同培养２４、４８和７２ｈ后，细胞形态未有较大改变，用ＭＴＴ比色法计数各时间点细胞存活数，受云芝多糖保护的巨噬细胞存活数较高。结果表明，云芝多糖能抑制巨噬细胞泡沫样变性，以及巨噬细胞泡沫样变性后，云芝多糖能延长其生存时间，防止其死亡，这对抑制动脉粥样硬化的进程有益处。     

巨噬细胞在泡沫细胞化过程中的Ca2+变化

我室曾用Ｃ＿（５７）ＢＬ／６Ｊ品系小鼠腹膜巨噬细胞与１０ｍｇ·Ｌ￣（－１）氧化低密度脂蛋白孵育４天，建立了出现在早期动脉粥样硬化损伤中的巨噬细胞源性泡沫细胞的病理细胞模型，本文报道应用Ｃａ￣（２＋）荧光指示剂技术及ＮＡＤＨ氧化偶联差光谱变化的分析方法，检测了前述培养的泡沫样细胞的胞浆Ｃａ￣（２＋）水平及膜上Ｃａ￣（２＋）依赖性ＡＴＰ酶活性。发现泡沫样细胞内的Ｃａ￣（２＋）水平为对照组细胞的２．７倍，膜上Ｃａ￣（２＋）依赖性ＡＴＰ酶活性为后者的２４％。实验结果提示，在巨噬细胞源性泡沫细胞的形成过程中，伴随着缓慢的Ｃａ￣（２＋）内流或释放，这可能与膜上Ｃａ￣（２＋）通道的持续开放及后期Ｃａ￣（２＋）依赖性ＡＴＰ酶的钝化有关。     

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮合酶活性和还原型谷胱甘肽的影响

目的　研究香菇多糖 (LTN)对巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)活性和细胞内还原型谷胱甘肽 (GSH)水平的影响及其关系 ,探讨 L TN的免疫调节作用机制。方法　 1观察 LTN诱导小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS活性和细胞内 (GSH)水平的影响 ;2观察 m RNA转录抑制剂、蛋白质合成抑制剂和 NOS抑制剂对巨噬细胞 i NOS活性和细胞内 GSH水平的影响 ;3观察 GSH去除剂对巨噬细胞 i NOS活性的影响。结果　 1 LTN诱导小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS活性增加和细胞内 GSH减少 ;2 3种抑制剂抑制 L TN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS活性增加和细胞内 GSH减少 ;3GSH去除剂抑制 LTN诱导的巨噬细胞 i NOS活性。结论　 LTN能增加小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS的活性 ,并同时消耗细胞内的 GSH,提示细胞内GSH可能起到调节巨噬细胞 i NOS活性和保护宿主细胞免受 NO介导的细胞毒作用。     

过氧化物酶体增殖体激活受体和肝X受体对巨噬细胞作用的研究进展

巨噬细胞作为体内的高级清道夫,吞噬微生物和凋亡坏死的细胞,吸收修饰的脂蛋白微粒。生理情况下巨噬细胞的这些功能受严密的调控。病理条件下,动脉管壁巨噬细胞聚集大量胆固醇而成为泡沫细胞,从而促进动脉粥样硬化的发展。过氧化物酶体增殖体激活受体和肝X受体作为核受体超家族的转录因子,是巨噬细胞平衡的关键调控者。本综述旨在通过讨论过氧化物酶体增殖体激活受体和肝X受体对巨噬细胞作用的研究,从而加深对动脉粥样硬化发病的病理生理机制的理解,为研发新药提供新思路。