通塞脉微丸和丁基苯酞对PC12细胞缺氧缺糖损伤模型的保护作用

目的探讨通塞脉微丸和丁基苯酞对PC12细胞缺氧缺糖损伤模型的保护作用。方法以肾上腺嗜铬瘤克隆化细胞株PC12细胞为材料，制备缺氧、缺糖损伤模型：MTT法测定PC12细胞存活数及乳酸脱清酶法测定细胞损伤程度。结果形态学检查发现，通塞脉微丸和丁基苯酞对两种损伤模型中的PC12细胞具有明显保护作用，MTT染色和乳酸脱氢酶活性测定显示，通塞脉微丸和丁基苯酞可显著提高损伤模型中PC12细胞的存活数，降低细胞损伤程度，其中以对缺氧损伤保护作用尤为显著。结论通塞脉微丸和丁基苯酞对PC12细胞缺氧和缺糖损伤模型均有显著保护作用。     

川芎嗪对缺氧缺糖培养心肌细胞蛋白质、RNA合成及一氧化氮合酶基因表达的影响

目的：观察川芎嗪对心肌细胞缺氧缺糖损伤的保护作用。方法：本实验利用心肌细胞缺氧缺糖损伤模型，采用同位素掺入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析方法，观察川芎嗪注射液对心肌细胞缺氧缺糖时蛋白质、ＲＮＡ合成及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达的影响。结果：川芎嗪注射液可提高培养心肌细胞缺氧缺糖时３Ｈ亮氨酸（Ｌｅｕ）和３Ｈ尿嘧啶核苷（ＵＲ）的掺入率，促进蛋白质、ＲＮＡ合成，诱导ＮＯＳｍＲＮＡ在缺氧缺糖心肌细胞的表达。结论：川芎嗪对心肌细胞缺氧缺糖损伤有较好的保护作用     

丹参酮对培养PC12细胞损伤模型的保护作用

目的 :探讨丹参酮对PC12细胞缺血样损伤模型的保护作用。方法 :采用组织培养法 ,以肾上腺嗜铬瘤克隆化细胞株PC12细胞为材料 ,制备缺糖损伤、缺氧损伤、自由基损伤、咖啡因损伤、一氧化氮损伤及谷氨酸毒性损伤模型。结果 :形态学检查发现丹参酮对六种脑缺血样损伤模型中的PC12细胞具有明显保护作用 ,MTT染色和LDH活性测定提示丹参酮可显著提高损伤模型中PC12细胞的存活数 ,降低细胞损伤程度。其中以对缺氧损伤、咖啡因损伤的保护作用尤为显著。结论 :丹参酮对上述六种PC12细胞缺血损伤均有显著的保护作用 ,但其保护作用可能主要与抑制细胞损伤初期病变进程及咖啡因所致细胞钙超载有关。     

舒络粉针剂对PC12细胞缺氧、缺糖损伤的保护作用

目的探讨舒络粉针剂对PC12细胞缺糖、缺氧损伤模型的影响.方法用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)、无糖Earle′s液复制PC12细胞缺氧、缺糖模型,通过MTT染色和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定研究舒络粉针剂对PC12细胞的保护作用.结果含舒络血清不同程度的抑制Na2S2O4、无糖Earle′s液造成的缺氧、缺糖样损伤,降低LDH的漏出.结论舒络粉针剂对缺氧、缺糖引起PC12细胞损伤具有保护作用.     

海风藤对犬脑干缺血兴奋性氨基酸含量的影响及对其缺血损伤的保护作用

目的：观察海风藤对犬脑干缺血兴奋性氨基酸含量的影响及对其缺血损伤的保护作用。方法：建立犬脑干缺血模型，观察并比较生理盐水（ＮＳ）对照组及海风藤用药组脑干缺血后各时点兴奋性氨基酸（ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ＥＡＡｓ）含量及神经元病理学损伤的差异。结果：ＮＳ组缺血０．５ｈ，ＥＡＡｓ含量轻度升高（Ｐ＞０．０５），神经元呈现轻度缺血改变。缺血３ｈ，ＥＡＡｓ含量显著升高（Ｐ＜０．０５），神经元呈现中度缺血改变。缺血６～１２ｈ，ＥＥＡｓ含量进一步增加（Ｐ＜０．０１），神经元严重受损，并出现坏死。在缺血前应用海风藤后，与ＮＳ组相比，缺血０．５ｈ时，缺血脑干ＥＡＡｓ含量轻度下降（Ｐ＞０．０５），神经元光电镜下无缺血性损伤表现。缺血３～６ｈ，ＥＡＡｓ含量明显下降（Ｐ＜０．０５），神经元呈现中度缺血改变。在缺血１２ｈ，ＥＡＡｓ含量降低仍显著（Ｐ＜０．０５），神经元病理学表现为重度缺血损伤。结论：海风藤对脑干缺血损伤具有明显保护作用，这种保护作用与海风藤可降低脑干缺血区ＥＡＡｓ含量有关。     

黄芪与川芎有效成分配伍对乳鼠海马神经元细胞缺氧缺糖损伤的保护作用

目的 研究黄芪与川芎有效成分(黄芪甲苷、藁本内酯、川芎嗪、阿魏酸)配伍对乳鼠海马神经元细胞缺氧缺糖损伤的保护作用.方法 原代培养海马神经元细胞,以免疫组化染色法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE),建立缺氧缺糖损伤模型,MTT法确定药物安全浓度.细胞随机分为正常组、模型组、阳性对照组、配伍组,比色法检测细胞中半胱氨酸蛋白...     

注射用血塞通对SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型Lingo-1表达的影响

目的建立SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型,考察注射用血塞通对缺糖缺氧损伤SH-SY5Y细胞存活、凋亡及Lingo-1 mRNA及蛋白表达的影响。方法采用RPMI 1640无糖培养基和三气培养箱缺氧法制备SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型,CCK8法测定细胞存活率,确定最佳缺氧时间及最适注射用血塞通质量浓度,Annexin V-FITC/PI双染法检测SH-SY5Y细胞凋亡率,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法测定Lingo-1 mRNA表达情况,Western blotting法测定Lingo-1蛋白表达情况。结果 SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型的最佳缺氧时间为16 h,注射用血塞通最适质量浓度为640 mg/L,在该质量浓度条件作用下,血塞通组与模型组相比,SH-SY5Y细胞的凋亡率显著降低,Lingo-1的m RNA表达水平及蛋白表达水平均显著降低。结论当SH-SY5Y细胞受到缺糖缺氧损伤后,细胞凋亡率显著升高,Lingo-1呈高表达状态,血塞通可以明显减少缺糖缺氧损伤SH-SY5Y细胞的凋亡,同时抑制Lingo-1的高表达,具有抑制凋亡和显著的神经保护作用。     

银杏内酯N对PC12细胞缺血性损伤的保护作用

目的:探讨银杏内酯N对PC12细胞缺血样损伤模型的保护作用及其机制。方法:采用组织培养法,以肾上腺嗜铬瘤克隆化细胞株(PC12)细胞为材料,制备缺糖损伤、缺氧损伤、自由基损伤、咖啡因损伤、一氧化氮(NO)损伤及谷氨酸毒性损伤模型,通过细胞形态学、细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)为指标观察银杏内酯N对细胞损伤的保护作用。结果:形态学检查发现银杏内酯N对6种脑缺血样损伤模型中的PC12细胞具有明显保护作用,MTT染色提示银杏内酯N可显著提高损伤模型中PC12细胞的存活数,LDH水平表明银杏内酯N能够明显减少细胞内LDH的释放。结论:银杏内酯N对上述6种PC12细胞缺血损伤均有显著的保护作用,其作用机制可能主要针对损伤后期出现NO毒性损伤及胞内钙超载等环节。     

黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用

目的观察黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用,在细胞水平阐明黄芩苷治疗脑缺血-再灌注损伤的作用机制。方法选用SH-SY5Y神经细胞,采用缺氧-复氧结合缺糖-复糖的方法,对其进行攻击,模拟人体神经细胞的缺血-再灌注损伤,观察黄芩苷对此损伤的治疗作用。结果缺氧、缺糖8h结合复氧、复糖12h对神经细胞可造成明显损伤,导致SH-SY5Y细胞线粒体的活性下降,凋亡率明显上升;而黄芩苷可以显著减轻上述损伤。结论黄芩苷对缺氧、缺糖-再灌注损伤的神经细胞有保护作用。     

黄芩苷、栀子苷对神经细胞缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用

 目的 观察黄芩苷、栀子苷对神经细胞缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用,在细胞水平阐明黄芩苷、栀子苷治疗脑缺血/再灌注损伤的作用机制。方法 选用SH-SY5Y细胞,采用缺氧、复氧结合缺糖、复糖的方法,对其进行攻击,模拟人体神经细胞的缺血再灌注损伤,观察黄芩苷、栀子苷对此损伤的治疗作用。结果 缺氧、缺糖8 h结合复氧、复糖12 h对神经细胞可造成明显损伤,导致SH-SY5Y细胞突起皱缩、变圆,可见有部分细胞漂起,细胞轮廓不清,凋亡率明显上升,线粒体的活性下降;而黄芩苷、栀子苷可以显著减轻上述损伤。结论 黄芩苷、栀子苷对缺氧缺糖/再灌注损伤的神经细胞有保护作用。     

白术内酯Ⅲ对神经细胞损伤的影响

目的观察白术内酯Ⅲ对神经细胞损伤的影响。方法选用PC12细胞株,建立缺氧损伤,兴奋性氨基酸损伤,高钙损伤3种损伤模型,采用噻唑蓝(MTT)法观察白术内酯Ⅲ对PC12细胞存活力的影响。结果与各模型组比较,白术内酯Ⅲ在一定浓度范围内可显著升高PC12细胞A570值(P<0.05或P<0.01)。结论白术内酯Ⅲ对PC12细胞缺氧损伤、兴奋性氨基酸损伤、高钙损伤均有不同程度的保护作用。     

丹酚酸B对PC12细胞缺糖损伤的保护作用及机制

目的观察丹酚酸B(SAB)对PC12细胞缺糖损伤的作用并探讨其作用的机制。方法以PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)的无糖培养建立细胞缺糖损伤模型,MTT法检测细胞的存活率;应用流式细胞仪检测亚二倍体细胞的比率及线粒体跨膜电位的改变;应用免疫细胞化学、RT-PCR法研究细胞内应激蛋白grp75的表达变化,激光共聚焦显微镜(Confocal)观察SAB作用下Ca2 的变化。结果无糖培养24h细胞存活率降低,凋亡率高达26.10%,大部分细胞线粒体跨膜电位去极化。在无糖培养液中加入丹酚酸B成分后,细胞无糖损伤有明显的改善,存活率上升,凋亡率显著下降,线粒体跨膜电位去极化状态明显改善。免疫细胞化学法和RT-PCR结果均显示丹酚酸对grp75表达没有影响;但经SAB作用后,细胞内Ca2 浓度明显降低。结论SAB对细胞缺糖损伤有明显的保护作用,其作用机制与抑制钙离子内流有关。     

芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究芍药苷对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:用Aβ25-35造成PC12细胞损伤模型,采用MTT比色法检测细胞存活率,Annexin-V/PI双染流式细胞计量法检测细胞凋亡,JC-1和Fluo-3荧光探针法分别观察线粒体膜电位和细胞内钙离子变化,Western印迹法检测Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,观察芍药苷对PC12细胞损伤的保护作用。结果:芍药苷可抑制Aβ25-35所诱导的PC12细胞毒性和凋亡,并呈剂量相关性,其保护作用可能是通过提高线粒体膜电位、降低Ca2+浓度;增加Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达、抑制凋亡相关蛋白Caspase-3的激活而实现的。结论:芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤具有保护作用。     

钙调素拮抗剂E6对缺血性损伤神经细胞的保护作用

 目的:观察具有较强钙调素拮抗活性的双苄基异喹啉类化合物E6对缺血性神经细胞损伤的保护作用?方法:采用NaCN加缺糖引起肾上腺髓质瘤细胞(PC12细胞株)损伤和谷氨酸(glutamate,Glu)引起乳大鼠脑皮质神经细胞损伤模型?结果:E6对NaCN加缺糖损伤的PC12细胞保护作用较弱,而对Glu损伤的原代皮质细胞有较强的保护作用,并降低培养液中一氧化氮(NO)的含量?NO合成前体L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)可减弱E6的保护作用?E6对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)损伤的原代神经细胞无保护作用?结论:E6可能是作用于Glu引起神经元损伤途径中NO生成之前的环节,从而表现出对缺血样损伤神经细胞的保护作用?     

培补肝肾复方中药对PC12细胞损伤模型的保护作用

目的探讨培补肝肾复方对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP )所致PC12细胞损伤模型的保护作用.方法采用血清药理学方法,制备中药含药血清,以肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞为材料,利用MPP 建立经神经生长因子(NGF)诱导前后的PC12细胞的损伤模型,观察不同给药剂量的培补肝肾中药血清对PC12细胞的作用.结果形态学检查发现等效剂量培补肝肾中药复方血清可显著提高PC12细胞的存活数,减低细胞损伤程度.结论培补肝肾复方中药血清可对抗MPP 引起的细胞损伤,对体外培养的PC12细胞具有保护作用.     

丹酚酸B对谷氨酸诱导的 PC12 细胞兴奋毒保护作用的研究

目的:研究丹酚酸B对谷氨酸诱导PC12细胞兴奋毒的保护及作用机制。方法:以谷氨酸损伤PC12细胞24 h为模型,采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率;LDH法检测乳酸脱氢酶的漏出率;AO/EB双染法荧光显微镜和PI单染流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞内活性氧的含量;Western blotting法检测细胞内Caspase-3蛋白的表达。结果:丹酚酸B可明显抑制谷氨酸诱导的PC12细胞的损伤,阻止细胞LDH的释放,在50～200μmol.L-1剂量呈一定的量效关系;同时,丹酚酸B明显降低谷氨酸诱导的活性Caspase-3蛋白的表达,抑制谷氨酸引起的ROS的累积,降低PC12细胞的凋亡率,在50～200μmol.L-1剂量呈量效相关性。结论:在一定剂量范围内,丹酚酸B对谷氨酸损伤的PC12细胞有保护作用,其保护的机制可能与丹酚酸B减少ROS的生成,阻止氧化损伤的发生,抑制Caspase-3途径依赖的凋亡相关。     

金丝桃苷对氯化钴所致的PC12细胞损伤模型的保护作用和机制研究

目的:研究金丝桃苷对氯化钴( CoCl2)所致的缺氧/缺血性PC12细胞损伤模型的保护作用和潜在机制.方法:使用氯化钴诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12细胞损伤模型,并在此基础上考察不同浓度的金丝桃苷对PC12细胞的保护作用.结果:金丝桃苷可以显著的抑制氯化钴所诱导的PC12细胞毒性和凋亡,且具有剂量依赖关系,其保护机制可能是通过抑制活性氧自由基的生成,提高线粒体膜电位以及抑制凋亡相关蛋白Caspase-3和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)的激活来实现的.结论:金丝桃苷可以抑制氯化钴所致的PC12细胞毒性和凋亡,对缺氧/缺血性神经损伤具有保护作用.     

具有拮抗谷氨酸神经毒作用的中药集群筛选

目的从治疗缺血性脑中风中药中筛选具有拮抗谷氨酸神经毒作用的活性中药。方法以PC12细胞为对象,用200 mmol.L-1谷氨酸(G lu)造成细胞损伤模型,MTT法检测细胞活力。结果毛冬青、苏木、茜草、虎杖4种中药可明显提高谷氨酸诱导的PCI2细胞还原M IT的能力(P<0.05)。结论毛冬青、苏木、茜草、虎杖4种中药对谷氨酸所致的细胞损伤具有较好的保护作用。